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血浆病毒灭活研究进展
随着医学科学的进步,血液的安全性愈来愈受到关注.为了提高血液的安全性,在血液检测项目逐渐增加的同时,血液检测技术也在不断改进.然而,由于病毒感染血液后"窗口期"的存在,血液输注仍无法达到"零风险".在临床输血中,血浆的输注占有较大的比例;而血浆中也是病毒含量较多的血液成分之一.近年来发展起来的血浆病毒灭活技术在提高血浆安全性方面具有一定的潜力.血浆病毒灭活的技术很多,目前比较成熟的技术有两种:溶剂/去污剂方法和亚甲基蓝联合可见光照射方法;此外,以病毒核酸为靶点的光化学技术倍受瞩目.
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病毒核酸定量测定方法及其存在的问题
随着科学技术的不断进步,人们不但能够对病毒核酸进行定性检测,如今发展到还能够定量检测病毒核酸分子.有关定量测定病毒核酸的方法已有学者作过总结和介绍[1],但病毒核酸定量测定过程中存在的问题,却很少有人总结报道.本文根据作者在实际工作中发现的问题和参考国外有关文献,着重在这方面进行总结.但为了更好的说明这个问题,首先对定量测定病毒核酸的方法作一简要介绍.
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病毒性脑炎脑脊液病毒核酸检测的研究进展
目的脑脊液病毒核酸检查是诊断病毒性脑炎的关键,而长期以来病毒学诊断技术敏感性和特异性很差,远远不能满足临床要求.随着分子生物学的迅速发展,以PCR技术为基础的各种分子生物学诊断技术,成为生物医学领域内有价值的研究手段和病毒学诊断的金标准,已经广泛的应用于临床标本的检测,为病毒性脑炎病原学的基因诊断带来了突破性的进展;方法本文就病毒性脑炎的脑脊液采集时间、预处理和保存以及PCR技术的应用研究进展进行了综述;结论套式、逆转录和荧光定量PCR已越来越多的应用于临床,预料原位PCR将在检测脑脊液病毒核酸检测等方面有着重要的意义.
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噬菌体Φ29DNA装配研究进展
噬菌体Φ29是研究双链DNA病毒核酸装配很好的模型.噬菌体Φ29装配机制的研究将对病毒防治以及大分子之间的相互作用提供理论帮助.本文对噬菌体Φ29DNA装配过程中的主要参与成分以及小分子pRNA与它们的相互作用,DNA装配机制的几种学说做一综述.
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139例临床诊断流行性腮腺炎突破病例实验室核实诊断结果分析
目的 对临床诊断流行性腮腺炎(流腮)突破病例进行核实诊断,评估其真实性和诊断方法可靠性.方法 分别用酶联免疫吸附试验法(ELISA)和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测2015-2017年浙江省宁波市鄞州区临床诊断流腮病例血清特异性IgM抗体和病原学标本病毒核酸,分析不同采样时间标本的阳性率,比较突破病例和无免疫史病例阳性率,比较不同类型标本阳性率等.结果 突破病例发病8~32d血清IgM抗体阳性率(95.00%,19/20)明显高于第1~7天(36.37%,36/99),差异有统计学意义(Fisher精确检验,P<0.001).突破病例病原学标本病毒核酸阳性率为6.47%(9/139),无免疫史病例阳性率为16.67%(6/36),二者差异无统计学意义(x2=3.79,P>0.05).突破病例阳性标本采样时间主要为发病第2~3天.突破病例含漱液阳性率(11.94%,8/67)明显高于咽拭子(1.39%,1/72),差异有统计学意义(Fisher精确检验,P<0.05).结论 从发病后期采样IgM检测结果分析临床诊断流腮突破病例大部分为真实病例.但发病第1~7天两种方法做核实诊断可靠性均不高,建议检测发病7d之后IgM抗体做核实诊断.
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广东首现人感染H5N6病例未出现人传人情况
广东省卫生计生委23日通报,省卫计委在进入冬春季节流感等呼吸道传染病高发季节后,加强了流感、重症肺炎等监测,在常规监测中,从1例重症肺炎病例中检测出H5N6禽流感病毒核酸阳性。12月22日,中国疾病预防控制中心进一步复核检测结果为甲型H5N6禽流感病毒核酸阳性。12月23日,国家卫生计生委组织专家进行会诊和研判,结合病例的临床表现、实验室检测结果以及流行病学史,诊断该病例为人感染H5N6禽流感病例。专家研判认为,本次出现的病例为偶发个案。病例所有密切接触者没有出现异常,没有出现人传人情况。
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甲型H1N1流感的药食干预
近年来,世界爆发了甲流、非典、霍乱、禽流感等传染病,我院在运用中药防治各种传染病中取得良好疗效.本人总结其治疗经验,期望对在今后的传染病防治工作中有一定帮助.现就甲流防治汇报如下:1 中医预防及调理本病具有流行病学史,具有流感一般症状,可检测出甲型HIN1流感病毒核酸或分离到甲型H1N1流感病毒.甲型HINI流感患者应多饮水、注意个人卫生、劳逸结合、加强体育锻炼、膳食平衡以提高抗病毒能力.
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开展乙肝病毒核酸相关抗原(HBV-NRA)前相关临床分析
我国属于乙型肝炎病毒(HBV)感染高流行区,一般人群的HBsAg阳性率高达9.09%[1],隐匿型乙型肝炎和乙肝肝炎病毒变异的存在,要求检测乙肝病毒方法和手段也越来越高.乙型肝炎病毒载量(HBV-DNA)与乙肝病毒前S1蛋白(Pr-S1)以及乙肝病毒核心抗原(HBcAg)均是反映乙肝病毒复制的敏感指标[2].检测HBV-DNA由于对仪器、设备、实验室条件及人员素质有较高要求,一般中小型医院难于开展,而乙肝病毒前S1蛋白(Pre-S1)以及乙肝病毒核心抗原(HBcAg)与HBV-DNA具有相关性,因此又称乙肝病毒核酸相关抗原(HBV Nucleicacid Related Antigen.HBV-NRA),可联合检测,相对容易开展、普及.我科在开展乙肝病毒核酸相关抗原(HBV-NRA)前,与荧光定量PCR法检测HBV-DNA比对,来探讨开展HBV-NRA可行性及临床意义,现介绍如下:
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手足口病患儿EV71、CoxA16及EBV和CMV的检测与临床意义
手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)是一种全球性的急性传染病,病原体以肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus,CoxA 16)为主.轻者预后良好,重症多合并神经系统疾病.EBV(Epstein-Barr virus,EBV)和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是广泛分布的病原体,均属疱疹病毒,儿童免疫功能尚不成熟,容易感染EBV或CMV病原体,也可引发神经系统疾病[1-2].研究收集了临床确诊的HFMD患儿,分别检测患儿咽拭子EV71、CoxA16以及EBV和CMV病毒核酸.
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人乳头状瘤病毒标志物在宫颈疾病诊断中的研究进展
宫颈癌是女性常见的第3大肿瘤,在世界范围内约85%的病例发生在欠发达国家[1]。在过去的几十年里,发达国家应用肿瘤筛查方法,成功地降低了宫颈癌的发病率和死亡率[2]。然而,在一些对宫颈癌不筛查或低质量筛查和低覆盖筛查的国家,宫颈癌的发病率已经在稳定或成更高趋势的增长[3?4]。研究发现,宫颈癌的发病与人乳头状瘤病毒(HPV)感染有着非常密切的关系。一些生物标志物已可能大致确定HPV感染与宫颈癌进展自然史的特定阶段。这些生物标志包括病毒核酸、病毒蛋白或通过病毒癌基因诱导改变的因子。有效的生物标志物在临床应用于筛查HPV感染或细胞学异常女性的宫颈病变和分类中具有重要的意义。本文就HPV病毒检测在诊断宫颈上皮内瘤样病变和宫颈癌的研究进行综述。
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我国首个埃博拉病毒检测试剂获批临床应用
据《科技日报》报道,11月28日从军事医学科学院传出消息,继8月19日应急获得军队特需药品注册证书后,由该院放射与辐射医学研究所和深圳市普瑞康生物技术有限公司联合研制的我国首个埃博拉病毒核酸检测试剂,又获国家医疗器械注册证书,标志着该产品可以在有资质的医院等单位合法使用,为埃博拉病毒的早期诊断和防控提供了可靠的产品储备.
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不同类型样本对黄热病实验室检测的意义
目的 探讨不同类型的样本对黄热病实验室检测的意义.方法 采用实时荧光RT-PCR法检测5例黄热病病例不同时间采集的不同类型样本中黄热病毒的核酸.结果 5例病例中,1例患者在病程≤6d时采集的样本中,仅在血清中检测到病毒核酸;另外4例患者在病程≥6d时采集的样本中,仅在尿液中检测到病毒核酸.结论 黄热病感染早期,病毒核酸检测为快速灵敏的实验室检测方法,血清样本为病毒核酸检测的适宜临床样本,随着病程的推移,尿液样本逐渐成为病毒核酸检测的适宜临床样本.
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逆转录-聚合酶链反应检测蚊标本乙型脑炎病毒核酸片段
蚊子是乙脑病毒的传播媒介,蚊子带毒率的调查是监测自然界乙脑流行的主要手段之一.一般用常规的生物学方法分离病毒了解蚊带毒率情况,该方法工作量大,出结果慢,费时费力.本研究试图用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测蚊标本乙脑病毒核酸片段,并与常规分离病毒方法进行比较.1997年夏季从辽宁、沈阳、长春等地采集蚊标本约1 100余只,液氮保存.将蚊标本20~30只混合为一组,常规消毒、研磨、离心后,将上清分为两份,一份接种C6/36和BHK-21,连传3代,观察细胞病变,另一份作RT-PCR检测.
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乌鲁木齐市部分高危人群庚型肝炎病毒感染现状及5′ UTR区基因序列分析
新疆地处我国西部边陲,存在着各型肝炎散发流行的危险因素,庚型肝炎病毒在乌鲁木齐市的流行现状尚未见报道.在新疆医科大学第一附院收集了267份各类人群的血清,用酶标法检测血清中庚型肝炎病毒抗体(抗-HGV),再以庚型肝炎病毒NS3区为引物运用RT-PCR法对抗-HGV(阳性)血清进行庚型肝炎病毒核酸(HGV RNA)的扩增检测,阳性扩增产物为83bp.后,选择该病毒5′非编码区为引物对第一次RT-PCR扩增HGV RNA(阳性)血清,再次进行
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移植受者术后CMV感染的早期诊断
巨细胞病毒(Cytomegalovirus, CMV)感染是移植受者术后常见的并发症之一,建立早期、敏感的巨细胞病毒检测方法,对减少移植受者术后巨细胞病毒感染的发生有重要意义.本文通过检测血清中巨细胞病毒抗体(CMV-Ab),巨细胞病毒抗原(CMV-Ag)及巨细胞病毒核酸(CMV-DNA),研究移植受者术后巨细胞病毒感染状况,探讨早期诊断CMV的方法及意义.
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SARS病人尿液中是否存在PCR抑制因子的探讨
SARS为全身感染多脏器受累的疾病,尿中排毒应为较普遍现象.SARS肆虐期间,用PCR方法从SARS病人尿液中检测到SARS病毒核酸的报道虽相继出现,但检出率低的原因一直没有明确的解释.有些学者提出了尿中存在PCR抑制因子从而影响了该病毒检出率的观点,为证实SARS患者尿液中是否存在影响SARS病毒检测的PCR抑制因子,进行了以下试验.
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荧光定量聚合酶链反应直接检测血清中乙型肝炎病毒核酸方法的建立及评价
荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术灵敏度高,速度快[1,2],已被临床广泛应用.然而,尽管该方法采用尿嘧啶糖基酶(UNG)等防交叉污染措施,但由于进行核酸提取时,用的是非封闭式人工操作,很难实现真正意义上的零污染(避免假阳性).
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如何看待病毒性肝炎的基因诊断
基因诊断是以检测感染者体内病毒核酸的有无,或含量多少来进行病原学诊断的一种方法,它可用在各种感染性疾病的诊断中,尤其在病毒性肝炎的诊断方面得到广泛应用.病毒性肝炎基因诊断包括病毒基因种类、含量、基因分型、亚型和变异及准种等的诊断.由于甲型肝炎和戊型肝炎无慢性化,且有较好的血清学诊断指标,故一般不需进行基因诊断.至于庚型肝炎病毒和经输血感染的病毒(TTV),因至今尚未明确其对人类的致病性,这两种病的基因诊断在临床上也较少应用,目前主要用于基础和实验研究.为此,仅对基因诊断在慢性乙型肝炎和丙型肝炎中的应用加以切磋.
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造成血液筛查中病毒感染标志物漏检的主要原因有哪些?
问:造成血液筛查中病素毒感染标志物漏检的主要原因有哪些?答:国外研究表明,目前血液筛查病毒感染标志物漏检的主要原因为:病毒感染的窗口期、病毒变异、非典型血清转阳过程和人为差错.其中因病毒感染窗口期所造成的漏检占90%左右.其次为人为差错.如果采用检测病毒抗原和病毒核酸的方法,可以降低由感染窗口期造成的漏检.而防止由病毒变异、非典型血清转阳等因素造成的漏检,则主要依赖试剂和检测技术的提高.人为差错则主要依赖检测质量管理的提高来避免,如实施严格的样本登记和报告制度,进行室内质控和室间质评.
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乙型和丙型肝炎病毒核酸检测技术及进展
近年来,病毒性肝炎的实验室诊断领域取得了飞速的进展,新方法、新技术的出现提高了对病毒检测的灵敏度和准确度,使病毒性肝炎的诊断和治疗水平上了一个新的台阶.病毒性肝炎NAT分为两大类,即病毒核酸载量的检测和病毒基因型/基因突变检测.鉴于甲型、丁型和戊型肝炎病毒的检测主要以血清学检测为主,本文主要介绍乙型肝炎与丙型肝炎NAT的主要技术及进展.