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镉离子对红鲫鱼血红细胞微核和核异常的影响研究
研究了镉离子对红鲫鱼血红细胞微核和核异常的影响.结果显示,镉对鲫鱼具有一定的遗传毒性,会对鲫鱼的血红细胞微核率、核异常率和总核异常率产生较大的影响.
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镉、铬离子对大型水蚤(Daphnia magna)毒性的协同作用
在单一毒性实验的基础上进行1:1和2:1浓度的配比实验,观察镉、铬离子对大型水蚤的毒性.结果表明,不同配比的浓度对大型水蚤的毒性均大于单一毒性,用相加指数法计算的AI值,均大于零,显示具有协同作用.
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镉离子和维生素C对果蝇寿命及抗氧化系统的影响
目的 研究镉离子(Cd~(2+))和维生素C(Vc) 对野生型果蝇寿命、生育力以及抗氧化系统的影响.方法 将果蝇随机分为5组,分别饲喂含不同浓度的Cd~(2+)的培养基,并加Vc处理,计算果蝇平均寿命、子代数量,测定超氧化物歧化酶 (SOD) 活性和丙二醛 (MDA)含量.结果 随着Cd~(2+)浓度的增加,雌雄果蝇的平均寿命逐渐缩短,子代减少,SOD活性下降和MDA含量上升,而Vc处理组显示对Cd~(2+)的毒害存在显著拮抗效应(P＜0.05或P＜0.01).结论 高Cd~(2+)浓度对果蝇有比较大的损伤,Vc可以缓解毒害,延长果蝇寿命.
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胶体金免疫层析法快速检测水样品中的镉离子
目的 研制检测水样品中镉离子残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条.方法 采用免疫竞争法,将抗Cd2+-EDTA单克隆抗体-胶体金复合物包被于胶体金结合垫上,并将人工合成的Cd-iEDTA-BSA检测抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面,作为检测线(T线),3～5 min后,根据颜色直观显示检测结果.对试纸条进行灵敏度、特异性和稳定性验证,并检测添标水样.结果 制备的试纸条对镉离子的低检测限为100 mg/ml;除了与Hg2+-EDTA有交叉反应外,与Fe3+、pb2+、Cu2+等类似物无交叉反应;试纸条在常温下放置8周稳定性良好;检测添标水样的结果与ICP-AES的检测结果一致.结论 胶体金免疫层析法操作便捷,稳定可靠,可作为水样中重金属镉离子残留现场检测和监控的有效手段.
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镉离子多克隆抗体ELISA竞争法的初步建立
目的 制备抗镉离子螯合物的多克隆抗体,初步建立检测镉离子的ELISA竞争法.方法 用双功能螯合剂iEDTA螯合Cd2+后,再与匙血蓝蛋白(KLH)偶联,合成完全抗原(Cd-iEDTA-KLH),免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体.ELISA法检测其抗血清效价、特异性和灵敏度.结果 多克隆抗体效价均大于1∶80 000;特异性检测结果显示均产生了抗Cd-iEDTA抗体,与OVA、BSA无交叉反应.抗体除与Hg2+有较强的交叉反应外,同等抑制情况下,Mg2+、Ca2+、Fe3+、Cu2+、Ni2+、Zn2+与Cd2+浓度相差约1 000倍,交叉反应率很低;ELISA竞争法对镉离子的检测限约为50 ng/ml.结论 初步建立了镉离子的ELISA竞争法,检测限达到无公害的国家卫生限量标准(100 ng/g).
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镉饱和法测定大鼠肝脏及血浆金属硫蛋白方法研究
金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量(分子质量约为6 000～7 000 u)、富含半胱氨酸、缺少环状氨基酸的金属结合蛋白,每摩尔MT可以结合6～12个锌、镉、铜、汞、银等重金属[1,6].结合了2价金属镉离子的MT在250 nm处有特殊的光吸收峰[2].
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镉离子与锰离子对血清与肝脏中肌肽酶活性的影响
目的探讨镉离子(Cd2+)与锰离子(Mn2+)对血清中肌肽酶(CAR)与肝脏中CAR活性的影响.方法探索2种离子对血清及肝中CAR的佳激活浓度,比较激活结果.结果 Cd2+能将血清中CAR活性提高16倍,而对肝脏中CAR无激活作用;Mn2+能将血清中CAR活性提高2倍,将肝脏中CAR活性提高2.7倍.血清中CAR与肝脏中CAR的[Mn2+/Cd2+]激活比值差异有显著性.结论血清中CAR与肝脏中CAR在化学性质上存在差异,很可能存在CAR同工酶.
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壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应的影响
目的:研究壬基酚和镉离子在体外对小鼠精子顶体反应(AR)的影响.方法:从小鼠的输精管获得精子,体外培养使精子获能,加30 μmol/L的A23187诱导精子顶体反应,然后使用不同浓度的壬基酚(10、20、30、60、100 μmol/L),或者镉离子(500、2500、5000 μmol/L)处理,对照组使用相应的载体溶剂处理.用FITC-PSA荧光染色法分析精子顶体反应.结果:当壬基酚浓度<30 μmol/L时,小鼠精子顶体反应率与对照组比较没有显著差异(P>0.05),而当壬基酚浓度>60 μmol/L时能够显著地抑制小鼠精子顶体反应发生率(P<0.01),并且观察到精子存活率随着壬基酚浓度增加而降低.与壬基酚作用不同,用镉离子对小鼠精子进行处理,在所选浓度内(500-5000 μmol/L)均对精子顶体反应无显著影响(P>0.05),且精子存活率与镉离子浓度变化无关.结论:壬基酚与镉离子对小鼠精子发生的作用是通过不同的途径来实现的,前者可以直接抑制顶体反应,而后者则与精子顶体反应无关.
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镉离子对公牛精子功能损伤的机制
目的:重金属比如镉(Cd)作为工业污染物广泛分布在环境中,研究人员已经鉴定了这些污染物能影响男性生殖系统.本文研究的目的是测试Cd在10～1 000 μmol/L的浓度范围在体外对荷斯坦(Holstein)公牛精子膜和DNA完整性、活动率和精子顶体胞吐能力的影响.方法:用PBS处理公牛精液样本后进行精液分析.脂质过氧化试验评估精子膜完整性.明胶消化试验测定公牛精子顶体胞吐作用的能力.单细胞凝胶电泳(SCGE)检测单个细胞内DNA断裂和不耐碱的破坏.结果:脂质过氧化(LPO)显著增加,表明了Cd对精子膜完整性的破坏作用.这种影响在Cd浓度为1 000 μmol/L时特别明显.LPO与活动精子百分率之间呈负相关(r=-0.94, P＜0.001).明胶消化试验表明Cd引起公牛精子顶体胞吐作用的百分率下降.发现在LPO率和消化环百分率之间呈负相关(r=-0.97, P＜0.001).彗星试验获得的数据表明Cd能诱导精子核中的DNA断裂.接近93%的DNA损伤为双股断裂.LPO氧化率与DNA断裂百分率之间的相关性为0.95 (P＜0.001).结论: 总体上,Cd诱导公牛精子膜损伤、活动率降低、DNA断裂、以及顶体反应率降低而导致精子功能损伤.进入雄性性腺和精浆的Cd可能对动物精子产生了破坏作用.
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温度和浓度对镉离子与人血清白蛋白结合作用的影响
目的 运用荧光光谱法研究镉离子(Cd2+)与人血清白蛋白在不同温度、浓度下的相互作用.方法 温度为298 K、304 K、310 K、314 K时,在HSA中逐步加入Cd2+,分别测定各条件下HSA及混合样品的荧光光谱.结果 随着Cd2浓度的增大,HSA发射峰略有红移,荧光强度降低;随着温度增高,HSA猝灭程度加大;温度从298 K升至310 K时,Ksv逐步减小,结合常数、结合位点逐步增大,而当温度升高至314 K时,结合常数、结合位点数反而下降;反应中的焓变△H＞0、熵变△S ＞0且吉布斯自由能变△G ＜0.结论 Cd2+对HSA荧光猝灭机制可能为静态猝灭和动态猝灭同时存在.温度升高至310 K时,Cd2与HSA的作用增强,两者之间的作用力主要为疏水作用,而到314 K时则表现出动态猝灭的特征.
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镉离子介导急性肝损伤与抗损伤机制的研究进展
目的了解镉离子介导急性肝损伤与抗损伤机制的研究进展.方法复习国内外相关文献,综述镉离子的代谢途径,产生的病理变化以及机体的抗损伤机制.结果镉离子可由消化道进入机体,蓄积于肝脏,导致肝脏病理变化,产生急性或慢性的肝脏损伤.机体可以通过Kupffer 细胞,金属硫蛋白,补体及产生大量的炎症和细胞因子来对抗急性肝损伤.结论由镉离子引发的急性肝损伤,机体抗损伤作用是肝脏局部和全身免疫系统的联合反应,其可更深层的阐述整个发病过程,为治疗肝脏损害开拓更广阔的前景.
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镉离子单克隆抗体的鉴定及竞争ELISA的建立
目的 制备Cd2+单克隆抗体(McAbs,单抗),建立Cd2+ 间接竞争酶免疫学检测方法 (EHSA).方法 利用双功能螯合剂iEDTA将Cd2+分别与血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备免疫抗原和检测抗原.免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术制备抗Cd2+的单抗.鉴定单抗的效价、特异性、亚类及亲和力.以该抗体为基础建立检测镉离子的间接竞争ELISA方法 ,分析该方法 的灵敏度、检测限、工作范围.结果 成功制备出Cd-iEDTA-KLH和Cd-iEDTA-BSA偶联物;筛选出一株稳定分泌抗Cd-iEDTA单抗的杂交瘤细胞株C2G5该细胞株分泌的抗体亚类为IgG1,腹水抗体效价为1×106,相对亲和力结合常数Ka为1.6×109 L/mol.特异性结果 显示,除Hg2+外,该抗体与Ph2+、Fe3+、Mn2+、Mg2+、Zn2+、Al3+、Ni2+、Ca2+、Cu2+等金属离子的交叉反应低.建立了检测镉离子的间接竞争ELISA方法 ,该方法 的检测限为10 ng/mL,IC50为250 ng/mL.结论 建立了镉离子的竞争ELISA检测方法 ,检测限达到无公害水产品的国家标准(100 ng/g).
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维生素C的指示离子方波极谱法研究
目的:利用Cd2+对抗坏血酸(Vc)的指示作用,建立一种用方波极谱法测定Vc的新方法.方法:在NH3-NH4Cl缓冲溶液中,Cd2+在-0.856 V(vs.SCE)处出现一个还原峰,加入不同浓度的Vc此峰高与Vc浓度成反比.在NH3-NH4C1缓冲溶液中Vc不出峰,因而根据此还原峰峰高的变化可测定Vc的含量.结果:Vc在1.06μg·mL-1～0.18 mg·mL-1的范围内有良好的线形关系,检出限可达0.07μg·mL-1,r=0.9987,平均回收率为99.8%,RSD=0.8%(n=5).结论:利用此方法对活肤胶囊中的Vc的含量进行测定,效果理想.
