中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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高迁移率族蛋白B1及其中药抑制剂治疗心血管疾病的研究进展
高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1protein,HMGB1)是典型的核内非组蛋白,通过活化细胞的主动分泌和受损坏死细胞的被动释放2种方式进入胞外,介导炎性反应,是一种重要的炎性介质和促炎性细胞因子.HMGB1在动脉粥样硬化、心肌梗死、缺血再灌注损伤、心力衰竭等多种心血管疾病中表达上调,使其成为治疗心血管疾病的一个新靶点.中药具有低毒副作用、多靶点的特点,可对致病信号通路进行联合抑制.本文就HMGB1及其中药抑制剂治疗心血管疾病的研究进展进行概述.
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葫芦素类化合物含量测定方法的研究进展
葫芦素是四环三萜类化合物,具有抗肿瘤、保肝、提高机体免疫力等多种生物活性.近年来该类化合物的含量测定方法、相关的结构、药动学、疗效和超说明书用药等相关内容及含量测定方法学逐渐被学者广泛研究,其中葫芦素B、E研究相对较多.本文较为系统地综述了葫芦素B、E含量测定方法的研究进展,为其质量评价和体内药动学过程的研究提供依据,并为葫芦素类化合物含量测定方法的进一步研究提供文献依据和分析思路.
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衰老及抗衰老药物的研究进展
衰老是生命过程的必然规律,是指机体各组织、器官功能随年龄增长而发生退行性变化的过程.关于衰老机制的研究以寻找高效的抗衰老药物已成为当前衰老研究领域中的热点问题.近年来在衰老及抗衰老药物的研究方面取得了很大的进展.本综述首先简述了衰老研究及影响衰老的因素,然后分析了模式生物中与衰老相关的信号通路和机制,并着重讨论了近年来一些潜在的抗衰老药物,后展望了药物对衰老影响的未来研究.
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山茱萸主要有效成分的脑保护作用及其分子机制研究进展
缺血性脑血管病以其高发病率、高致残率和高病死率严重威胁着人们的健康和生活质量.缺血缺氧可破坏血脑屏障(blood brain barrier,BBB)结构和功能,并进一步触发脑组织损伤.山莱萸主要有效成分莫诺苷可通过保护神经元细胞、改善氧化应激状态、抑制炎症反应等多种途径缓解脑缺血.本文综述山莱萸及其主要有效成分脑缺血后发挥神经保护作用的分子机制,以探讨其治疗靶点及临床应用价值.
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红景天苷药理作用及其作用机理研究进展
红景天苷是红景天属植物中广泛存在的一种天然酚类次生代谢产物,具有多种药理作用,应用前景广泛,其药理作用及其作用机理方面的研究备受关注.本文从红景天苷对心脏、脑、神经、肝、肾、肺、皮肤的保护作用以及抗细胞凋亡、抗癌、抗炎、抗衰老、抗疲劳、抗缺氧、抗病毒、抗骨质疏松和糖尿病等方面综述了2009年以来国内外红景天苷药理作用及其作用机理的研究进展,旨在为红景天苷进一步开发和利用提供参考依据.
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Kex2蛋白酶在毕赤酵母中的表达、纯化和性质研究
目的 研究Kex2 (EC.3.4.21.61)蛋白酶在毕赤酵母中的重组表达、纯化和部分性质.方法 Kex2基因整合进pPIC9K质粒中,通过电转构建重组毕赤酵母GS115-Kex2,G418筛选多拷贝子,甲醇诱导得到目的蛋白.通过强阴离子交换层析Q-FF对重组蛋白进行纯化,对纯化后的蛋白进行酶学性质研究.结果 通过毕赤酵母表达可以得到具有活性的重组Kex2蛋白酶,以Boc-Gln-Arg-Arg-pNA(叔丁氧羰-谷氨酰胺-精氨酸-精氨酸-对硝基苯胺,Boc-QRR-pNA)为底物检测酶的活性,发酵外液活性达270U/L,SDS-PAGE检测目的蛋白的分子量为67kDa,经Q-FF纯化后,目的蛋白的活性回收率为84％.重组Kex2蛋白酶在pH5.0～6.0之间稳定,pH9.0时活性高.在25℃,pH5.0条件下放置12h活力可保持88.2％.以Boc-QRR-pNA为底物,测得重组Kex2蛋白酶的Km值为0.0167 mmol/L,Vmax值为333.3 μmol/min.结论 利用毕赤酵母可成功表达分泌Kex2蛋白,经Q-FF纯化后可得到较纯的Kex2蛋白酶.
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大蒜素对大鼠心肌缺血的保护作用及相关机制研究
目的 探究大蒜素对大鼠心肌缺血的保护作用及其相关机制.方法 将50只准性SD大鼠随机平均分成假手术组(SO组),缺血/再灌注组(I/R组),大蒜素处理组高剂量组(HA组)、中剂量组(MA组)、低剂量组(LA组),每组10只.大蒜素处理组分别灌胃给予100、50、25 mg/(kg·d)大蒜素,给药20 d后构建大鼠心肌缺血/再灌注模型.检测各组大鼠血清及缺血心肌组织肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB),丙二醛(malondialdehyde,MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;Tunel 法检测各组大鼠心肌组织细胞凋亡情况;免疫印迹法检测天冬氨酸蛋白水解酶-3(aspartic protease-3,caspase-3),磷酸化分裂原激活的蛋白激酶(phosphorylation of mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK)及分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)的表达情况.结果 HA组与MA组的CK-MB、MDA水平均比I/R组显著偏低(P＜0.05),HA组的SOD水平较I/R组显著偏高(P =0.015).HA组,MA组的心肌损伤范围及凋亡指数较I/R组显著偏低(P＜0.05),HA组caspase-3蛋白表达水平较L/R组显著偏低(P=0.023).5组p38MAPK蛋白表达量无显著差异,但是HA组p-p38MAPK蛋白表达量较I/R组显著偏高(P=0.038).结论 大蒜素对大鼠心肌缺血具有明显的保护作用,且这种保护作用可能与心肌凋亡的抑制作用及p38蛋白的活化具有一定关系.
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二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响研究
目的 研究二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响.方法 选取20只成年新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕动物模型,待伤口上皮化后,将其随机分成两组,每组10只.对照组灌胃给予10 mL的生理盐水,实验组灌胃给予10 mL的二氢青蒿素,1次/天,连续给予1周.记录观察术后20d和50d2组兔耳瘢痕的发生和兔耳瘢痕的大小.结果 对照组兔耳瘢痕的发生率大于实验组兔耳瘢痕的发生率,差异有统计学意义(P＜0.05),表明二氢青蒿素具有降低兔耳瘢痕发生的疗效;对照组兔耳瘢痕大于实验组兔耳瘢痕,差异有统计学意义(P＜0.050),表明二氢青蒿素具有治疗兔耳瘢痕的作用.结论 二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕具有显著的疗效,作为一种有效的药物,值得对其做进一步的研究.
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八种常用化疗药物组合对人类宫颈癌细胞体外药物敏感试验研究
目的 探讨临床官颈癌原代肿瘤细胞对8种常用化疗药物组合方案的敏感性.方法 2013年6月～2014年10月苏州大学附属第一医院收治的41例宫颈癌术中切下肿瘤组织标本进行体外细胞培养,再将紫杉醇,紫杉醇+顺铂,紫杉醇+卡铂,托泊替康+顺铂,吉西他滨+顺铂,多西他赛,吉西他滨以及顺铂+环磷酰胺+多柔比星分别设定不同药物浓度梯度[200％,100％,50.0％,25.0％,12.5％血浆峰值浓度(plasma peak concertration,PPC)],采用ATP生物荧光法进行药敏试验.结果 8组化疗药物方案血浆峰值浓度下对宫颈癌的敏感性依次为:紫杉醇+顺铂＞紫杉醇+卡铂＞紫杉醇＞吉西他滨+顺铂＞顺铂+环磷酰胺+多柔比星＞托泊替康+顺铂＞多西他赛＞吉西他滨.结论 宫颈癌患者进行化疗药物敏感试验具有可行性,对临床个体化化疗具有现实指导作用.
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维生素D通过调节NF-κB活性对局灶性脑缺血大鼠的保护作用研究
目的 探讨维生素D(VD)通过调控NF-κB活性对局灶性脑缺血大鼠的保护作用.方法 72只SD大鼠随机均分为假手术组、对照组、VD缺乏组和VD治疗组,每组18只.假手术组及对照组均给予正常饲料喂养.VD缺乏组给予维生素D缺乏饲料喂养.VD治疗组给予补充维生素D饲料喂养.共喂养10周.除假手术组外,其余各组均建立局灶性脑缺血模型.对各组大鼠进行神经行为学评分.HE染色观察梗死中心区及海马CA1区神经细胞数目及形态.免疫组化检测细胞凋亡.电泳及免疫印迹观察NF-κB蛋白的表达.结果 与假手术组相比较,对照组、VD缺乏组及VD治疗组的海马CA1区NF-κB p65活性明显升高(P＜0.01);与对照组相比,维生素D缺乏组NF-κB p65表达明显增强(P＜0.01),维生素D治疗组NF-κB p65表达减弱(P＜0.01).结论 维生素D对大鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制NF-κB活化发挥抗炎作用而实现的.
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积雪草苷对Aβ1-42致内皮细胞炎症因子表达的影响
目的 探索积雪草苷对Aβ1-42诱导内皮细胞炎症因子表达影响.方法 将人脐静脉血管内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为模型组,阴性对照组,积雪草苷10-5、10-6、10-7、10-8 mol/mL组,共6组.模型组给予50 nmol/mL Aβ1-42刺激HUVEC细胞24 h,积雪草苷各组在给予Aβ1-42刺激同时给予积雪草苷10-5、10-6、10-7、10-8 mol/mL干预.CCK-8试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8试剂盒)法检测HUVEC细胞活性;Western-blot检测COX-2蛋白表达;ELISA法检测IL-1,IL-6和TNF-α含量.结果 与模型组比较,积雪草苷各浓度组可以明显提高β淀粉样蛋白刺激后血管内皮细胞活性,减少细胞COX-2蛋白表达(P＜0.05),抑制β淀粉样蛋白致HUVEC细胞的IL-1,IL-6与TNF-α表达,有统计学意义(P＜0.05).结论 积雪草苷对Aβ1-42致内皮细胞炎症因子表达具有保护作用.
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阿霉素壳寡糖纳米粒的制备及体外抗肿瘤研究
目的 制备负载阿霉素的壳寡糖纳米粒,并研究其理化性质和体外抗肿瘤细胞毒性.方法 采用离子凝胶法制备负载阿霉素的壳寡糖纳米粒;透射电镜观察纳米粒形态,激光粒度仪测定粒径和表面电位,紫外分光光度法测量包封率、载药量,考察载药纳米粒的体外释药特性;采用MTT法对载药壳寡糖纳米粒在体外乳腺癌细胞株MCF-7的细胞毒作用进行评价.结果 制得的阿霉素壳寡糖纳米粒呈球形或类球形,形态较为完整,平均粒径为(136.77±1.21)nm,表面电位为(20.53 ±0.31) mV,包封率为(56.99±1.40)％,载药量为(15.49±0.38)％,168 h的累积释放率为72.15％;阿霉素和载药纳米粒对MCF-7细胞增殖的抑制作用存在明显的浓度和时间依赖性,且载药纳米粒对MCF-7细胞增殖的抑制作用随时间增加而逐渐强于游离阿霉素.结论 此方法制备的阿霉素壳寡糖纳米粒粒径较小,药物释放具有明显的缓释作用,并具有较好的抗肿瘤作用.
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纳豆激酶的制备及其降血脂功效研究
目的 利用纳豆芽孢杆菌制备纳豆激酶,并评价纳豆激酶的降血脂功效.方法 采用酪蛋白平板初筛-摇瓶发酵复筛的方法从市售纳豆中筛选获得高产纳豆激酶的纳豆枯草芽孢杆菌菌株,采用纤维蛋白平板法测定纳豆激酶酶活,以大豆为原料,利用该菌株制备纳豆激酶冻干粉.选取72只Wistar高脂模型大鼠进行降血脂功效研究,将其随机分为6组,分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(普伐他汀钠片200 mg/kg)、纳豆激酶冻干粉高剂量组(360 mg/kg)、中剂量组(180 mg/kg)和低剂量组(90 mg/kg).给药前后分别用自动生化分析仪测定总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(total triglyceride,TG).结果 成功发酵制得纳豆激酶冻干粉,大鼠喂养高脂饲料2周后其TC、TG水平较空白组显著升高(P＜0.05),纳豆激酶冻干粉高、中、低剂量组及阳性对照组在给药6周后均能显著降低TC,TG水平(P＜0.05).结论 本研究制备的纳豆激酶降血脂功效良好,为其作为降血脂药物和保健品奠定了基础.
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含氟咪唑酮系列衍生物的串联合成及其初步药理学研究
目的 优化以含氟乙酰丙酸乙酯衍生物为原料一锅法合成3a-三氟甲基-2,3,3a,4-四氢-1H-苯并[d]吡咯[1,2-a]咪唑-1-酮衍生物的方法,并对合成的衍生物进行初步的药理学研究.方法 以含氟乙酰丙酸乙酯衍生物与二羰基酯类化合物为原料,通过Claisen酯缩合再脱羧的方法合成3a-三氟甲基-2,3,3a,4-四氢-1H-苯并[d]吡咯[1,2-a]咪唑-1-酮类衍生物.初步药理学研究采用抗戊四唑(pentylenetetrazole,PTZ)实验对大鼠测定药物的抗惊厥活性;采用旋转法测定其神经毒性.结果 成功合成5个含氟乙酰丙酸乙酯衍生物,并将其与一系列胺类化合物反应,一锅法合成了22个含氟氮杂双环化合物.初步药理结果显示:2,3,3a,4-四氢-1H-苯并[d]吡咯[1,2-a]咪唑-1-酮的ED50为50 μmol/kg,保护指数(protection index,PI)为10.5 (PI=TD50/ED50),显示较好的抗惊厥活性.结论 本研究优化了反应条件,缩短了反应时间,提高了反应收率,合成的化合物均具有抗惊厥活性和神经毒性.
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壳聚糖介导HMGB1的siRNA对脓毒症大鼠肝肺中细胞因子的影响研究
目的 以壳聚糖纳米粒介导HMGB1的siRNA基因表达载体治疗脓毒症大鼠,为基因药物研发及其临床应用奠定实验基础和提供理论依据.方法 60只雄性SD大鼠,分成正常组、阴性组、模型低浓度组、模型中浓度组、模型高浓度组5组,每组12只.正常组行假手术,其余各组大鼠均行盲肠结扎穿孔术(CLP)构建脓毒症模型;正常组在大鼠尾静脉注射生理盐水、阴性组注射单纯纳米粒,各浓度模型组注射不同浓度的壳聚糖-pGenesil-HMGB1混合微粒.ELISA检测各组大鼠肝、肺组织炎症因子IL-6、IL-10、TNF-α的表达,观察比较各组大鼠存活率.结果 与正常组相比,阴性组肝肺组织中IL-6、TNF-α表达显著升高(P＜0.05),而IL-10表达差异无统计学意义;各治疗组IL-6、TNF-α表达显著降低(P＜0.05),而IL-10表达升高(P＜0.05);高浓度组大鼠生存率优于中浓度组和低浓度组(P＜0.05).结论 壳聚糖纳米粒联合基因治疗技术能够显著降低脓毒症大鼠肝肺组织中TNF-α、IL-6的表达,上调其抗炎细胞因子IL-10的表达,显著提高了脓毒症大鼠的存活率.该技术有望形成制备新的基因药物的治疗体系,提高脓毒症患者的生存率.
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缩宫素注射剂高分子量物质及过敏反应研究
目的 针对缩宫素注射剂在临床上可引起过敏性休克,水潴留等过敏反应的发生,考察缩官素注射剂中的高分子量物质与其过敏反应发生的相关性.方法 采用凝胶过滤色谱法对其原料及其制剂中的高分子量物质进行研究,截留高分子物质,并进行豚鼠全身主动过敏(active systemic anaphylaxis,ASA)试验及皮肤被动过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)试验.结果 提取 制备的缩宫素原料及注射用缩官素中均检出分子量大于5000的高分子物质,注射用缩宫素及其截留高分子物质(MW ＞5000)的溶液ASA试验为阴性,但PCA试验出现阳性结果.178批合成缩官素注射液均未检出分子量大于1500的高分子物质,过敏试验结果均呈阴性.结论 提取工艺生产的注射用缩宫素或有可能造成过敏反应的发生,与该品种中检出的高分子物质存在有一定的关联性,有必要在生产工艺中控制高分子量物质的产生.
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小檗碱胃粘附微球的制备和体外性质评价
目的 制备小檗碱胃粘附微球并评价其药剂学性质.方法 采用液中干燥法制备小檗碱胃粘附微球,以微球的成球效果、载药量、包封率为指标,分别考察无水乙醇与液体石蜡体积比、Span 80浓度、小檗碱用量、乙基纤维素和卡波姆的总用量、乙基纤维素和卡波姆的比例等5个因素,筛选佳工艺条件,对其制备的微球进行表征,并对所制备的小檗碱胃粘附微球进行体外释放度评价.结果 小檗碱胃粘附微球佳处方为无水乙醇与液体石蜡体积比为1∶8,Span 80浓度为2％,小檗碱用量为800 mg,乙基纤维素和卡波姆的用量分别为500 mg,乙基纤维素和卡波姆的比例为1∶1;制备得到的3批微球的载药量、包封率、粒径、表面形态以及圆整度均符合质量检测要求;制备的小檗碱胃粘附微球具有一定的缓释特性,体外释药行为符合Higuchi方程.结论 采用液中干燥法可将小檗碱制备成微球,制备的小檗碱胃粘附微球具有良好的缓释特性.
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免疫性肝纤维化大鼠血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度的相关性研究
目的 探讨血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度的相关性.方法 通过注射猪血清构建不同分期大鼠肝纤维化模型.采用Agilent 1100,通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph,HPLC)测定大鼠血浆中的氨基酸浓度.利用统计学方法分析血浆氨基酸浓度与肝纤维化程度之间的相关性.结果 根据柱前衍生高效液相色谱法测定的大鼠血浆中16种游离氨基酸含量及Spearman等级相关分析和方差分析发现:血浆组氨酸(histidine,His)、苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)、苏氨酸(threonine,Thr)、酪氨酸(tyrosine,Tyr)、缬氨酸(valine,Val)等与肝纤维化程度具有相关性(His:rs=0.512,P=0.015; Phe:rs=0.713,P＜0.01;Thr:rs=0.567,P=0.006;Tyr:rs=0.753,P＜0.01;Val:rs=0.508,P=0.016);His、Phe和Tyr在不同肝纤维化病理分期中的浓度均与正常组有统计学差异,但在不同病理分期间无统计学差异.结论 血浆中His、Phe和Tyr浓度与肝纤维化程度正相关,但对肝纤维化病理分期无判别意义.
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尼莫地平对大鼠急性脑缺血再灌注损伤NF-κB和caspase-3蛋白表达的影响
目的 探讨尼莫地平对大鼠急性脑缺血再灌注损伤中NF-κB和caspase-3蛋白表达的影响.方法 45只雄性SD大鼠随机分为3组,即假手术组、模型组和尼莫地平注射液治疗组,每组15只.参照Zealonga等的改良线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型.脑缺血再灌注后,利用Bederson法评价各组大鼠神经功能评分,采用TUNEL法检测大鼠海马CAI区神经元凋亡率,免疫组织化学和Western blot法检测NF-κB和caspase-3蛋白表达情况.结果 脑缺血再灌注24h后,模型组NF-κB和caspase-3表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比较,尼莫地平治疗组NF-κB和caspase-3的表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 尼莫地平可能通过抑制NF-κB和caspase-3的蛋白表达,对缺血再灌注损伤起到保护作用.
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侧脑室注射apelin-13对大鼠远端结肠推进的影响及机制研究
目的 探讨侧脑室apelin-13对大鼠远端结肠推进活动的影响及其作用机制.方法 将SD大鼠随机分为6组,每组8只,生理盐水为对照组(i.c.v.,2μL)、apelin-13组(0.1、0.3、1、3、10 nmol,i.c.v.,2μL),通过排珠实验检测各个剂量的apelin-13对大鼠远端结肠推进活动的影响;对照组(3组)分别为大鼠腹腔1次性注射2 mL的M型胆碱能受体的阻断剂阿托品(atropine,ATR)(20mg/kg)组、肾上腺素受体阻断剂酚妥拉明(phentolamine,PHE)(1 mg/kg)和普洛奈尔(propranolol,PRO)(1 mg/kg)组、N型胆碱能受体的阻断剂六烃季铵(hexamethonium,HEX)(1 mg/kg)组;20 min后在对照组基础上,各组分别侧脑室注射2μL 1 nmol apelin-13,考察apelin-13在结肠推进作用上的可能机制.结果 与对照组相比,apelin-13以剂量依赖的方式延长了实验动物的排珠时间(P＜0.01),即抑制大鼠远端结肠的推进活动;N型胆碱能受体的阻断剂HEX能完全消除apelin-13对结肠推进的抑制作用;而M型胆碱能受体的阻断剂ATR以及肾上腺素受体阻断剂PHE和PRO都不能影响apelin-13在结肠推进上的作用.结论 中枢apelin-13能剂量依赖的抑制大鼠远端结肠的推进,它的这种作用可能是通过N型胆碱能受体实现的.
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青蒿素对大鼠心梗后交感神经重构的影响及其机制研究
目的 研究青蒿素对大鼠心梗后交感神经重构的作用并探索其分子机制.方法 SD雄性大鼠70只,随机分成3组,假手术组10只,心梗组30只,心梗治疗组30只.开胸结扎冠状动脉左前降支制造心梗动物模型,术后24h开始灌胃大鼠,心梗治疗组给予青蒿素75 mg/(kg·d),每天分3次灌胃,心梗组给予等剂量的0.5％羧甲基纤维素钠.假手术组开胸仅冠状动脉下穿线但不结扎,同时给予等剂量的0.5％羧甲基纤维素钠.治疗4周后,将动物处死并按需要取材.Masson染色法测量左室梗死面积,免疫组织化学定量分析梗死周边区生长相关蛋白(growth associated protein 43,GAP43)与酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性交感神经纤维的分布和密度及巨噬细胞数目,蛋白免疫印迹法检测梗死周边区IKBα、GAP43、TH、NGF等的表达.RT-PCR检测心肌组织炎症因子TNF-α和IL-13的mRNA表达水平.结果 心梗组与心梗治疗组心梗面积没有显著差异.心梗组GAP43和TH阳性交感神经纤维密度高于假手术组(P＜0.05),心梗治疗组GAP43和TH阳性交感神经纤维密度低于心梗组(P＜0.05).心梗组TNF-α和IL-1β的mRNA高于假手术组(P＜0.05),心梗治疗组炎症因子TNF-α和IL-1β的mRNA低于心梗组(P＜0.05).心梗组IKBα蛋白高于假手术组(P＜0.05),心梗治疗组IKBα蛋白表达低于心梗组(P＜0.05).心梗组NGF、GAP43及TH蛋白的表达高于假手术组(P＜0.05),心梗治疗组NGF、GAP43及TH蛋白的表达水平低于心梗组(P＜0.05).梗死组巨噬细胞数目比假手术组高,而心梗治疗组巨噬细胞数目低于心梗组(P＜0.05).结论 青蒿素可以抑制心梗后交感神经重构,其机制可能是通过抑制心梗后炎症反应.
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软骨素酶ABC诱导大鼠尾椎间盘退变的实验研究
目的 探讨软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)诱导SD大鼠椎间盘退变动物模型的稳定性及可行性.方法 80只雄性SD大鼠,随机分为7天组和30天组,每组40只,取浓度为0.25 unit/mL ChABC 0.1 mL,注入(coccygeal vertebrae,Co7/8)椎间盘作为造模组,(coccygeal vertebrae,Co6/7)近端椎间盘不作处理作为对照组.术后第7天、第30天行尾椎7.0T磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI),取标本行HE染色,阿尔新蓝染色,马森三色染色及Ⅱ型胶原和蛋白多糖免疫组织化学,观察椎间盘退变情况.结果 MRI结果显示:术后第7天,第30天,对照组Co6/7椎间盘T2信号强度均未见明显变化,而造模组Co7/8椎间盘T2信号强度均明显降低,Co7/8与Co6/7椎间盘T2信号值差异具有统计学意义(P＜0.05),两时间点Co7/8椎间盘T2信号值比较差异无统计学意义;术后第7天和第30天,HE染色,阿尔新蓝染色,马森三色染色提示Co7/8椎间盘均出现明显退变,Co7/8椎间盘Ⅱ型胶原和蛋白多糖免疫组织化学积分光密度值均较Co6/7椎间盘显著降低(P＜0.05).结论 软骨酶素ABC诱导构建大鼠尾椎间盘退变模型是一种简单有效、重复性好的建模方法.
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光谱法研究洛索洛芬钠与牛血清白蛋白的相互作用及共存金属离子的影响
目的 研究洛索洛芬钠(LS)和牛血清白蛋白(BSA)的相互作用及共存金属(Mn2、Cu2、Cr3+、Mg2、Fe3+)离子对LS与BSA相互作用的影响.方法 在模拟人体生理条件下,用紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法研究LS与BSA的相互作用.298.5、308.5、318.5 K温度下,根据S-V方程计算出猝灭常数(Ksv)和速率常数(Kq);根据L-B双倒数方程,计算出静态猝灭结合常数(KLB);根据双对数方程,计算出结合常数(Kb)和结合位点数(n);根据热力学公式,计算出焓变(△H)、熵变(△S)和吉布斯自由能变(△G);根据Hill方程计算出Hill系数(nH).结果 3个温度下的BSA荧光强度随着LS浓度升高,有规律地降低;Ksv、Kq、KLB和nH值随着温度升高而降低;△G＜0,△H ＜0,△S ＞0;n约等于1;nH小于1.结论 LS对BSA的荧光有猝灭作用,其猝灭过程属于静态猝灭.其相互作用主要靠静电作用力.LS可以被BSA运输,结合位置位于BSA的亚螺旋域ⅡA中,结合位点偏向于酪氨酸.Mg2+、Cu2+、Mn2+和Fe3+对LS与BSA结合产生竞争作用,可提高药效;Cr3+对LS与BSA结合产生促进作用,可减弱药物毒性.
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黄芪总皂苷对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及iNOS/NO表达的影响
目的 探讨黄芪总皂苷(astragalosides,AST)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及一氧化氮(NO)含量的影响.方法 将常规培养的MCs分为正常组、甘露醇组、高糖组及高糖+AST(50、100、200μg/mL)组.MTT法观察细胞增殖情况;Western blot法检测各组细胞iNOS表达;Griess比色法检测各组培养上清中NO水平.结果 与正常组比较,高糖组培养24、48 h MCs增殖显著,胞内iNOS表达增强(P＜0.01)、NO含量增加(P＜0.01);与高糖组比较,各浓度AST干预组均能抑制MCs的增殖,并显著抑制iNOS表达、减少NO的含量.结论 AST能抑制高糖诱导下MCs的过度增殖;下调iNOS表达、降低NO含量,从而发挥对糖尿病肾脏的保护作用.
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溴化1-甲基-1-苄基-4-(((三苯基锡基)硫)硫代甲酰基)哌嗪-1-铵的活性测定
目的 测定硫代甲酸盐有机锡类成盐化合物溴化1-甲基-1-苄基-4-(((三苯基锡基)硫)硫代甲酰基)哌嗪-1-铵对小鼠的半数致死量(median lethal dose,LD50)、对小鼠体液免疫功能的影响及其抗菌活性.方法 急性毒性试验检测LD50,溶血素测定法测定体液免疫功能,纸片扩散法、倍比稀释法检测其抗菌活性.结果 以小鼠急性死亡率为指标,测得LDs0为93.7 mg/kg,可信限为(100.98±8.66) mg/kg,可信限率为8.58％,小于10％,表明实验方法准确度高,数据可靠性高;溶血素测定结果表明:与对照组相比,低、中、高3个剂量组的半数溶血值(half value of hemolysin,HC50)显著较高(P＜0.01),差异有统计学意义,与阴性对照组相比,空白对照组及3个剂量组均较高(P＜0.01),差异有统计学意义,表明此药有提高体液免疫的效果;抗菌活性测定结果表明此药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和伤寒杆菌均显示抑菌作用,其中对伤寒杆菌抑制效果好,其低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC值)为0.31 mg/mL.结论 溴化1-甲基-1-苄基-4-(((三苯基锡基)硫)硫代甲酰基)哌嗪-1-铵为中度毒性药物,有体液免疫调节作用,且随剂量增加作用降低,对所测菌株具有抗菌活性.
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水飞蓟宾磷脂酰胆碱复合物与水飞蓟宾对四氯化碳所致的小鼠肝损伤的保护作用比较
目的 研究水飞蓟宾磷脂酰胆碱复合物(SPC)与水飞蓟宾对四氯化碳所致小鼠肝损伤的保护作用.方法 选择100只健康成年的昆明小鼠,按照随机数表法分为5组,每组20只,分别为水飞蓟宾组、SPC-A组、SPC-B组、CCl4模型组以及正常对照组.5组小鼠通过测5组小鼠血清中的AST和ALT,对病理学切片进行比较.结果 水飞蓟宾组小鼠血清ALT及AST的含量与CCl4模型组相比较明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);SPC-A组、SPC-B组小鼠的血清ALT及AST的含量也显著低于CCl4模型组差异有统计学意义(P ＜0.05);SPC-A组、SPC-B组小鼠的血清ALT及AST的含量显著低于水飞蓟宾组(P ＜0.05);SPC-B组的小鼠的血清ALT及AST的含量低于SPC-A组差异有统计学意义(P＜0.05).肝脏的病理学切片比较,正常对照组的切片是完全正常的;水飞蓟宾组、SPC-A组、SPC-B组均能够减轻小鼠的肝脏病理学的变化,其病理学变化小于CCl4模型组,且病理学变化幅度由小到大排序为正常对照组、SPC-B组、SPC-A组、水飞蓟宾组、CCl4模型组.结论 SPC和水飞蓟宾都对四氯化碳所致的小鼠肝损伤的保护作用明显,但是SPC功效更好,值得临床进一步研究.
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复方鳖甲软肝方血清防治肝纤维化作用机制的实验研究
目的 探讨复方鳖甲软肝方血清防治肝纤维化的作用机制.方法 将45只雄性SD大鼠按照1∶1∶1的比例随机均分为正常组、模型组及复方鳖甲软肝片组(FFBJRGP组),正常组皮下注射橄榄油3 mL/(kg.d),并以1g/(kg.d)的剂量灌服蒸馏水,连续6周;模型组皮下注射以橄榄油配制的40％的CCl4构建大鼠肝纤维化模型,并以1g/(kg·d)的剂量灌服蒸馏水,连续6周;FFBJRGP组皮下注射以橄榄油配制的40％ CCl4,3 mL/(kg·d),并以1g/(kg·d)的剂量灌服复方鳖甲软肝片,连续6周.比较3组血清相关指标、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA、COX-2蛋白、鼠抗α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、血栓烷B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)及TXB2/6-K-PGF1α水平.结果 模型组与FFBJRGP组总蛋白、AST及ALT水平均显著高于正常组(P＜0.05),白蛋白水平均显著低于正常组(P＜0.05);FFBJRGP组总蛋白、AST及ALT水平均显著低于模型组(P＜0.05),白蛋白水平显著高于模型组(P＜0.05).模型组与FFBJRGP组COX-2mRNA、COX-2蛋白、α-SMA评分均显著高于正常组(P＜0.05),FFBJRGP组上述指标评分均显著低于模型组(P＜0.05).正常组与FFBJRGP组TXB2、TXB2/6-K-PGF1α水平均显著小于模型组(P＜0.05),3组6-K-PGF1α水平差异无统计学意义.结论 复方鳖甲软肝方可有效改善肝纤维化大鼠肝功能,其通过降低肝纤维化大鼠COX-2水平可能是其防治肝纤维化的作用机制之一.
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石杉碱甲生物合成与代谢调控关键基因的差异表达分析
目的 选择并比较L-赖氨酸脱羧酶、CYP450(CYP450-71A1和CYP450-72A1)、加双氧酶、N-甲基转移酶等石杉碱生物合成途径可能的关键基因(酶)在华南马尾杉(Phlegariurus austrosinicus (ching)L.B.Zhang)和有柄马尾杉(Phlegariurus petiolatus (C.B.Clarke) H.S.Kung et L.B.Zhang)中差异表达的情况.方法 以相同生境但石杉碱甲含量差异明显的一对石杉科马尾杉属植物华南马尾杉与有柄马尾杉为试材,提取总RNA并进行总RNA的反转录,根据文献分别设计引物,开展荧光定量PCR实验并对2者的差异表达结果进行分析.结果加双氧酶基因在高含量石杉碱甲的有柄马尾杉中表达,但在华南马尾杉中表达量极低或者不表达;在有柄马尾杉植体中相对高表达的基因有L-赖氨酸脱羧酶基因(约180倍),CYP450-71 A1基因(约33倍),CYP450-72A1基因(约223倍);N-甲基转移酶基因在2种材料中表达量接近.结论 加双氧酶基因极有可能编码石杉碱生物合成限速酶和关键酶,导致2种植物中石杉碱甲的含量明显差异;L-赖氨酸脱羧酶基因、CYP450-71 A1基因、CYP450-72A1基因编码的蛋白对石杉碱甲的积累具有促进作用;N-甲基转移酶基因应是编码定位于石杉碱生物合成途径下游石杉碱与石杉碱甲之间转换的催化酶,但非关键限速酶.
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葛根素对α-葡萄糖苷酶抑制作用机理的探讨
目的 探讨葛根素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用机理.方法 取40只雄性小鼠,分为5组:对照组、阿卡波糖对照组、葛根素(2.5、5.0、10) μM,每组8只,采用酶抑制动力学方法,研究葛根素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用和抑制动力学,并用分光光度计测定葛根素对小鼠血糖含量变化的影响.结果 葛根素是一种可逆的竞争型α-葡萄糖苷酶抑制剂[半抑制浓度IC50为(4.32±0.42) μM],抑制常数Ki为(0.41±0.09) μM;与阳性对照阿卡波糖对比,葛根素能够明显的抑制大鼠血糖水平的增长.结论 葛根素作为一个α-葡萄糖苷酶抑制剂,诱导了酶活性的降低,对调节血糖水平起到重要作用,为临床降血糖提供了理论基础.
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正交试验筛选北五味子保肝活性成分的提取工艺研究
目的 筛选北五味子中3种保肝活性成分的佳提取工艺.方法 分别采用超声法和乙醇回流提取法,根据正交试验,提取北五味子中的3种保肝活性成分,应用反相高效液相色谱法,测定北五味子中3种保肝活性成分的含量.结果 以北五味子中3种保肝活性成分的含量为指标,佳提取条件为85％乙醇回流提取3h、料液比例1:8、提取次数2次.结论 该提取方法设计科学合理,提取工艺简单,提取率高,重现性好,适于工业生产,为研究北五味子的保肝药物新剂型和药材合理应用提供参考.
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UPLC测定丹七片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量
目的 建立超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)分离测定丹七片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量.方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm ×50 mm,1.8 μm)色谱柱,柱温30℃,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长203 nm,进样体积2μL.结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1分别在0.0300～0.3000,0.1201～ 1.2009,0.1200～1.1997 μg范围内线性关系良好,方法重复性及回收率均符合要求,平均加样回收率(n=6)分别为100.43％、100.65％、98.74％,RSD值分别为1.51％、1.30％、1.03％.按测定的方法测定市售2种丹七片的含量相近.结论 该方法简便、高效、准确、重复性好,分析速度提高近8倍,可以用于测定丹七片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量.
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一种绿色合成含氟异黄酮的新方法
目的 开发一种新的合成异黄酮的方法,使其合成更高效、低毒、有抗癌活性的含氟异黄酮化合物.方法 以3-碘色原酮为原料经锌粉插入合成3-碘色原酮锌试剂,再在6％ NiCl2(PPh3)2催化下与卤代芳烃经Negishi交叉偶联反应合成含氟异黄酮化合物.结果 合成了7种含氟异黄酮,其中2'-三氟甲基异黄酮、3'-三氟甲基异黄酮、4'-三氟甲基异黄酮、6-氟-2'-三氟甲基异黄酮、6-氟-3'-三氟甲基异黄酮共5种含氟异黄酮尚未见文献报道.目标产物经IR、HRMS、NMR结构表征确定.结论 本合成方法具有环境友好、快速便捷、反应路线短,总产率高、易于放大等优点,是一种绿色、高效合成含氟异黄酮的新方法.
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掩味头孢呋辛酯干混悬剂的制备及含量测定
目的 制备掩味头孢呋辛酯干混悬剂,并建立HPLC法对其含量进行测定.方法 采用热熔喷雾冷冻技术制备掩味的头孢呋辛酯微粒,并将微粒及辅料通过流化床制粒法制备干混悬剂.色谱条件为Diamonsil-C18(250×4.6 mm,5μm)作色谱柱,流动相为0.2 mol/L磷酸二氢铵溶液-甲醇(58∶42),流速为1.0 mL/min,检测波长为278 nm,柱温为30℃,进样量为20 μL.结果 所得制剂为类白色颗粒,气味芳香,味甜.头孢呋辛酯在25.00～ 750.0 μg/mL的范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r =0.9995),样品平均回收率为99.88％,RSD为0.25％.结论 本方法可成功制得掩味的头孢呋辛酯于混悬剂,检测方法准确、可靠、专属性强,适用于头孢呋辛酯干混悬剂的含量测定.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
