中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
棘白霉素治疗侵袭性真菌感染的研究进展
近年来,由真菌引起的侵袭性感染逐渐增加,已成为威胁人类健康的重要问题之一,尤其是对免疫功能受损的人群.棘白霉素是作用于真菌细胞壁的一类新的抗真菌药,具有疗效高且不良反应小的特点,其在临床上的应用越来越多.本文结合国内外研究报道,主要介绍棘白霉素药的作用方式、抗菌谱、抗药性、药代动力学和安全性,并就其在治疗侵袭性真菌感染中的应用加以简介.
-
多糖基质蛋白质分子印迹聚合物研究进展
多糖基质分子印迹材料具有良好的生物亲和性、亲水性和胶凝性,并能与模板蛋白形成弱相互作用,是得天独厚的蛋白质分子印迹聚合物材料.文章主要综述了蛋白质分子印迹方法、机理、蛋白质分子印迹聚合物、多糖基质的蛋白质分子印迹的制备及印迹效果评价,并对其应用前景进行了展望.
-
肥胖的遗传学研究
随着人们生活水平的提高,肥胖的发生率也越来越高,肥胖是高血压、糖尿病等疾病的高危因素,体重指数(body BMI值和腰围成为衡量人们健康的重要标志;肥胖的发生机制和防止肥胖的方法和药物成为研究热点.随着人类基因组计划的完成,各种疾病相关基因陆续定位,单核苷酸图谱得以构建,使人们对疾病可以进行准确的基因诊断.本文搜集了国内外近年的肥胖相关基因、黑色素皮质激素第四受体基因、组胺相关基因和瘦素受体基因,分析这些基因突变与肥胖的关联,为肥胖的发病和治疗提供新的思路.
-
应用2215细胞研究中药抗乙肝病毒的进展
目的 应用2215细胞作为药物体外筛选模型目前已发展到比较成熟的阶段,按照现有实验对不同药物处理方法分类,本文归纳总结中草药、中药提取物、中成药以及含药血清等应用2215细胞进行抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)的实验研究现状,为中药抗乙肝病毒的研究和开发提供了参考.
-
氟代柠檬酸对骨癌痛大鼠CB2表达的影响研究
目的 研究氟代柠檬酸(fluorocitrate,FC)对骨癌痛大鼠CB2基因表达的影响及意义.方法 40只SD大鼠注射Walker-256肿瘤细胞,建立骨癌痛模型,另取10只SD大鼠作为假手术组,10只作为对照组.首先比较假手术组和骨癌痛大鼠热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL).再将骨癌痛大鼠随机分为FC组和非FC组,每组20只.FC组术后14 d注射氟代柠檬酸0.01 mL(1 nmol),非FC组注射生理盐水0.01mL,记录大鼠机械缩足阈值(paw withdrawl mechanical threshold,PWMT).同时采用免疫印迹法测定CB2表达结果,观察灰度值.结果 骨癌痛组大鼠TWL先缩短后恢复正常,假手术组基本保持不变,2者在第3d具有统计学差异(P＜0.05).FC组大鼠注射氟代柠檬酸后,PWMT值有先升高后降低现象.假手术组和骨癌痛组大鼠CB2均明显高于基础值(P＜0.05);非FC组大鼠CB2逐渐降低,第7天和第14天时显著高于假手术组(P＜0.05).FC组大鼠与非FC组相比,CB2在7d时有统计学差异(P＜0.05),14 d和21d时略低,但差异无统计学意义.结论 患骨癌痛后,机体CB2表达会有一定程度增加,引起疼痛,而氟代柠檬酸可抑制CB2的表达,从而缓解疼痛.
-
内质网应激反应触发肝硬化大鼠模型肝细胞凋亡及纤维化机制的探讨
目的 用动物实验的方法,探讨研究在肝硬化组织中形成肝纤维化的特殊机制.方法 将60只Wistar大鼠随机平均分为3组:肝硬化组(n=20)、假注射组(n=20)、对照组(n=20);在肝硬化组大鼠腹腔内注射二甲基亚硝胺建立肝硬化模型.大鼠肝组织经HE染色后观察肝纤维化及肝硬化,使用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和结蛋白(desmin)的表达,使用流式细胞仪检测早期及晚期凋亡.内质网应激(ER stress)相关的未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)通道蛋白和凋亡蛋白(CHOP和caspase-12)均进行Western blot检测和/或RT-PCR检测.结果 肝硬化组均成功建立肝硬化大鼠模型,并发现在肝硬化大鼠模型中出现了更多的肝纤维化.流式细胞学检测显示,在肝硬化模型中出现的早期和晚期细胞凋亡显著高于对照组(P＜0.05).肌醇激酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE1)在肝硬化鼠模型中的表达均显著升高(P＜0.05).内质网应激蛋白(CHOP)在肝硬化大鼠模型中的表达与对照组比较也显著升高(P＜0.05).结论 在肝硬化大鼠模型的肝组织中可发现明显的细胞凋亡,这种细胞凋亡是通过激活内质网应激介导的IRE1和CHOP蛋白引起的.
-
丹参经肝动脉灌注对大鼠移植性肝癌的治疗及其肝功能保护作用研究
目的 观察丹参经肝动脉灌注对大鼠移植性肝癌的治疗作用,并研究丹参在抗肿瘤的同时对移植性肝癌大鼠肝功能的保护作用.方法 选用Sprague-Dawley雄性大鼠150只,并成功建立Walker-256移植性肝癌模型120只.所有造模大鼠随机分为对照组、丝裂霉素组和丹参组,每组40只.正常饲养10d后,取各组大鼠血液检测血清ALT、AST和ALP水平,剖腹测量计算移植性瘤体体积.同时行经胃十二指肠动脉至肝脏固有动脉插管灌注治疗:对照组大鼠灌注2 mL的注射用生理盐水,丝裂霉素组大鼠灌注丝裂霉素(2.5 mg/kg),丹参组灌注丹参(1.6 g/kg).灌注1周后,取血液检测ALT,AST和ALP水平,测量计算瘤体体积,并计算肿瘤增长率和抑制率.同时处死所有大鼠,取出瘤体,显微镜下观察肿瘤坏死范围并判断坏死程度.结果 灌注治疗后,对照组、丝裂霉素组和丹参组大鼠分别剩余37只、37只和38只.丝裂霉素组和丹参组肿瘤体积及增长率均明显小于对照组(P＜0.05),丝裂霉素组和丹参组肿瘤体积及增长率无明显差异.丝裂霉素组和丹参组对移植性肝癌肿瘤的抑制率分别为22.32％和26.38％,差异无统计学意义.灌注后,丹参组和丝裂霉素组大鼠中度坏死明显高于对照组,丝裂霉素组和丹参组轻、中、重肿瘤坏死分布无显著性差异.灌注后,丹参组和丝裂霉素组大鼠血清ALT,AST和ALP的水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);丹参组上述指标显著低于丝裂霉素组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 丹参经肝动脉灌注对大鼠移植性肝癌有良好的抑制作用,其抑瘤活性与常用抗肿瘤药物丝裂霉素的活性相当.在抑制肿瘤的同时对移植性肝癌大鼠的肝功能也具有较好的保护作用.
-
洋地黄对小型猪急性心肌梗死合并急性心力衰竭后左室重塑的影响
目的 探讨洋地黄在小型猪急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)合并急性心力衰竭后左室重塑的应用价值.方法 应用球囊封堵法建立小型猪AMI合并急性心衰模型(n=8),再灌注后随机分为洋地黄组(n=4)和对照组(n=4),分别在建模后给予西地兰(0.025 mg/kg)和单纯生理盐水静注,次日洋地黄组加用地高辛0.125 mg/d治疗.超声测量2组左室容积、不同区域室壁厚度及室壁增厚率的变化,分别于AMI后7d和1 m后处死,取心脏测量梗死面积.结果 造模后2组小型猪左室容积均增大、室壁变薄,与造模前比较差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);洋地黄组用药后1、2、3h左室容积缩小、室壁呈增厚趋势,但至7d后2组左室容积明显增大,梗死区室壁明显变薄、局部增厚率明显降低,与用药后1、2、3h比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);而交界区及正常区代偿性增厚,但室壁增厚率各时间点无明显差异.2组小型猪梗死面积比较差异无统计学意义.结论 AMI合并心衰动物模型上早期使用洋地黄可以显著改善血液动力学效应,但对梗死面积和近期左室重塑无明显影响.
-
脂氧素在对乙酰氨基酚所致急性肝损伤中的保护作用及机制研究
目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4,LXA4)在对乙酰氨基酚所致肝损伤中的保护作用及可能机制.方法 100只雄性新西兰大白兔随机分为空白对照组、对乙酰氨基酚组(PCM组)、N-乙酰半胱胺酸组(NAC组)和脂氧素A4组(LXA4组)4组,每组25只.除空白组兔外给其他3组兔对乙酰氨基酚灌胃24 h后NAC组静脉注射NAC,LXA4组静脉注射LXA4,36 h后,麻醉动物取肝脏组织进行免疫组化及RT-PCR分析并检测肝组织中TNF-α和IL-10的表达,Western blot检测NF-κB p65的表达.结果 PCM组NF-κB p65的表达水平明显高于空白对照组(P＜0.01),NAC、LXA4治疗组NF-κB p65的表达显著低于PCM组且具有统计学意义(P＜0.01).对乙酰氨基酚组肝脏组织中TNF-α mRNA水平高于脂氧素A4组和空白对照组(P＜0.05).脂氧素A4组中IL-10mRNA表达水平明显高于对乙酰氨基酚组(P＜0.05).结论 脂氧素A4通过抑制对乙酰氨基酚中毒所致急性肝损伤中NF-κB p65的活化,下调促炎因子TNF-α基因的表达,促进抗炎因子IL-10基因的表达,从而控制炎症反应进程,继而发挥其肝脏保护作用.
-
首乌方对左旋多巴诱导异动症大鼠的干预作用及其机制
目的 探讨首乌方对左旋多巴诱导的异动症(levodopa induced dyskinesia,LID)大鼠的干预作用及其机制.方法 32只雄性SPF级SD大鼠,随机分为4组:假手术组(sham operation,SO组)、异动症模型组(levodopa induced dyskinesia,LID组)、首乌方高剂量组(shouwuang-high dose,SWF-H组)、首乌方低剂量组(shouwufang-low dose,SWF-L组),每组8只.单侧双位点注射6-羟基多巴胺造成PD模型后,灌胃给予多巴丝肼(30 mg/kg)22 d诱发LID,首乌方剂量组同时灌胃(SWF-H含生药27g/kg,SWF-L含生药18g/kg).观察各组LID发病率并进行动物AIM评分;清醒自由活动状态下脑内纹状体微透析、水杨酸捕获羟自由基方法采样,高效液相-电化学检测动态观察病变靶器官细胞外液中羟自由基指标(2,3-DHBA、2,5-DHBA)的浓度变化;检测大鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平的变化.结果 首乌方可明显降低大鼠LID的发病率及AIM评分,降低纹状体细胞外液2,3-DHBA及2,5-DHBA的浓度、并显著降低血清内MDA的水平.结论 首乌方可以改善大鼠LID的行为学指标,有预防及干预LID的作用,其机制可能与减轻整体特别是病变靶器官的氧化应激损伤有关.
-
MCHR1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定
目的 构建有效针对小鼠黑色素浓集激素受体1(melanin-concentrating hormone receptor 1,MCHR1)的shRNA(smallhairpin RNA)真核表达载体.方法 设计合成3条小鼠MCHR1基因的shRNA序列以及1条无同源性的shRNA序列作为阴性对照,与质粒重组构建sh-MCHR1干扰载体,并进行菌液PCR和DNA测序鉴定;脂质体法转染小鼠3T3-L1细胞后观察MCHR1 mRNA和蛋白表达的变化.结果 经菌液PCR及DNA测序鉴定表明各shRNA载体构建成功;转染3T3-L1细胞后,与空载体组相比,阴性对照组MCHR1 mRNA和蛋白的表达均无明显差异,但实验组3种干扰载体均能显著抑制MCHR1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.05),且3种载体的抑制程度有一定的差异,以sh-MCHR1-1载体沉默效果佳.结论 sh-MCHR1干扰载体构建成功,为进一步探究MCHR1与肥胖症之间的关系奠定了实验基础.
-
小麦戊聚糖对2型糖尿病小鼠肠道菌群和血糖的影响
目的 研究小麦戊聚糖对2型糖尿病小鼠肠道菌群和血糖的影响.方法 昆明种小鼠30只,随机分为3组,正常对照组,模型组,治疗组,每组10只.以腹腔注射链佐霉素构建糖尿病小鼠模型,治疗组在普通饮食基础上加用小麦戊聚糖制剂灌胃[6.7g/(kg·bw)].观察造模后3周采用葡萄糖氧化酶法测各组空腹血糖的变化,采用16S rRNA实时荧光定量PCR检测小鼠肠道主要的菌群,比较各组菌群的差异.结果 链佐霉素诱导2型糖尿病后小鼠空腹血糖升高(P＜0.05),双歧杆菌、乳酸杆菌数量下降(P＜0.05),且肠道双歧杆菌及乳酸杆菌的数量与空腹血糖呈负相关(P=0.001,r=-0.918;P =0.019,r=-0.718).灌胃小麦戊聚糖制剂后,小鼠空腹血糖逐渐降低(P＜0.05),肠道双歧杆菌及乳酸杆菌的数量有所恢复.结论 2型糖尿病小鼠肠道菌群发生紊乱,小麦戊聚糖制剂能调节2型糖尿病小鼠肠道菌群紊乱,降低血糖水平.
-
利用DNA洗牌技术一次性克隆多个基因
目的探讨DNA洗牌技术(DNA shuffling)对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义.方法 利用DNA洗牌技术一次性克隆多个基因片段到表达载体,并同时突变基因内部的2个氨基酸位点,PCR、酶切、测序检测构建表达载体的准确性.结果 成功地一次性克隆了3个编码小RNA的串联短片段MSb1、MSb2、MSb3以及3个蛋白编码基因FokI、MS2、FokI,并一次性将PLRV-P0基因内部2个编码色氨酸(W)的密码子TGG突变为编码丙氨酸(A)的GCG密码子.结论DNA洗牌技术可应用于基因组学、多基因功能鉴定、融合基因表达和一次性构建基因内部多个点突变的研究,具有精确、快速和高效的特点.
-
番茄红素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用
目的 研究番茄红素(lycopene,LP)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将80只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组、肝脏缺血再灌注模型对照组、番茄红素(5、10和20 mg/kg)治疗组,每组16只;术后番茄红素各治疗组连续4周灌胃给予相应剂量番茄红素治疗,假手术组和肝缺血再灌注模型组分别灌胃给予等体积的生理盐水,每天1次.检测各组大鼠血清中转氨酶(ALT和AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性,丙二醛(MDA)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)水平;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性;通过苏木精-尹红(HE)染色观察各组肝脏组织病理学改变.结果 与假手术组相比,肝脏缺血再灌注模型对照组大鼠血清中ALT、AST、ALP活性和MDA含量均显著升高(P＜0.01),T-AOC水平显著降低(P＜0.01);肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性均显著降低(P＜0.01),且肝脏组织出现明显的病理学改变.与肝脏缺血再灌注模型对照组相比,番茄红素(5、10和20 mg/kg)治疗组大鼠血清中ALT、AST活性和MDA含量均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);番茄红素(10和20 mg/kg)治疗组大鼠血清中ALP活性均显著降低,且T-AOC水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),肝脏组织中SOD和CAT活性显著升高(P＜O.05,P＜0.01);番茄红素(20mg/kg)治疗组大鼠肝脏组织中GSH-Px活性显著升高(P＜O.01);番茄红素各治疗组肝组织病理性改变出现不同程度的改善.结论 番茄红素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用,该作用可能与番茄红素能够有效改善抗氧化酶系统活性,减轻自由基损伤,改善肝功能有关.
-
基于多芳环多吡啶配体的单功能铂配合物DNA结合研究
目的 验证配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物的DNA结合能力.方法 合成一个多芳环多吡啶配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4).配体(L4)与Pt (DMSO)2Cl2反应得到配合物4,表征配合物,通过紫外、荧光和凝胶电泳的方法研究了配合物4的DNA结合能力.结果 紫外和荧光实验表明该配合物均可与DNA嵌入结合,结合常数分别为2.1×104M-1、2.78×107M-1.凝胶电泳实验表明配合物可使DNA超螺旋形式完全解旋,有效扰乱DNA的二级结构.结论 配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物与DNA具有较强的结合能力,可以缓慢结合形成DNA的加合物,并且能够有效扰乱DNA构象.
-
苦参碱对人乳腺癌MCF-7细胞的促凋亡作用及其对线粒体跨膜电位的影响分析
目的 研究苦参碱对人乳腺癌(michigan cancer foundation-7,MCF-7)细胞的促凋亡作用及对线粒体跨膜电位的影响.方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,观察组细胞中加入不同浓度的苦参碱溶液,对照组细胞中加入等量的培养液.MCF-7细胞的凋亡与细胞线粒体跨膜电位采用流式细胞仪检测,MCF-7细胞的抑制率采用MTT的方法检测.结果 苦参碱处理24h后观察组的MCF-7细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),且随着浓度的升高而升高;苦参碱对于MGF-7细胞抑制率的结果显示,随着时间与浓度的增加苦参碱对于MGF-7细胞抑制率效应也随之增强,且差异有统计学意义(P＜0.05);苦参碱处理24h后的罗丹明染色阳性数低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),表明线粒体跨膜电位与浓度呈负相关.结论 苦参碱对人乳腺癌MCF-7细胞有促凋亡的作用,其促凋亡的作用可能是通过降低线粒体跨膜电位而使MMP的通道打开.
-
Notch1对局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响
目的 研究Notch1对脑局灶性缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响,为缺血性脑血管病临床治疗寻找新的靶点.方法 72只SD雄性成年大鼠随机分为等量4组:假手术组(Sham组),缺血再灌组(I/R组),Notch1抑制剂组(DAPT组),溶剂对照组(Vehicle组).采用线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)模型制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血90 min为标准.Sham组仅分离血管,不插入线栓,Notch1抑制剂组或Vehicle组在模型建立再灌注恢复后立即向缺血对侧侧脑室分别注射DAPT或单纯溶剂(PBS+DMSO),每天1次,分别于术后1、3、7d断头取脑,病理学观察缺血再灌注侧皮层损伤情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡指数(AI),Weatern blot检测PARP裂解片段含量、Notch1活性片段NICD、Akt和Bad磷酸化水平.结果 与Sham组相比,I/R组神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平升高,差异有明显统计学意义(P＜0.05);与I/R组相比,给予Notch1抑制剂DAPT后,神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量明显增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平明显下降,差异有显著性(P＜0.05),而溶剂对照Vehicle组的各项指标无明显差异.结论 Notch1在脑缺血再灌注损伤中具有抑制神经细胞凋亡作用,其作用机制可能与增强Akt磷酸化水平,促进Bad失活有关.
-
丁苯酞对血管性痴呆大鼠记忆功能及海马神经元代谢产物的影响
目的 探究丁苯酞(3-N-butylphthalide,NBP)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆功能及海马神经元代谢产物的影响.方法 90只健康雄性SD大鼠,随机选取10只为假手术组,其余80只用2VO法制作大鼠VD模型.术后8周共存活48只大鼠,随机分为VD模型组、NBP低剂量组、NBP中剂量组、NBP高剂量组4组,每组各12只.术后8周NBP低、中和高剂量组大鼠分别腹腔注射NBP12.5、25和50 mg/(kg·d),VD模型组和假手术组则注射相同体积的0.5％ Tween-80溶液,所有大鼠均连续注射4周.采用定位航行试验和空间探索试验考察各组大鼠行为学变化,1 H-MRS法检测神经元代谢产物变化.结果 定位航行试验结果表明大鼠的学习记忆能力与DBP剂量成正比,即1～5 d,NBP中、高剂量组的平均逃离潜伏期低于模型组,差异均有统计学意义(P＜0.05),空间探索试验结果表明DBP高剂量组能够显著改善大鼠学习记忆能力;1H-MRS检测结果表明与给药后VD模型组相比,NBP中、高剂量组NAA/Cr、Cho/Cr和mI/Cr与模型组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05),表明中、高剂量NBP对海马内神经胶质细胞的增生有明显促进作用,而NBP低剂量组则无明显作用.结论 丁苯酞可以对血管性痴呆模型大鼠的学习记能力起到改善作用,通过调节海马神经元代谢产物,达到改善VD作用.
-
羧甲基茯苓多糖抗乙型肝炎病毒的体内与体外研究
目的 探讨羧甲基茯苓多糖(carboxymethyl-pachymaran,CMP)抗HBV、调节免疫、抗肝纤维化的作用及其机制.方法 体外实验:人肝癌HepG 2.2.15细胞株作为细胞模型,分为阴性对照组、CMP(1.5、3.0、6.0、12.0 mg/mL)组和阳性对照阿昔洛韦(aciclovir,ACV,浓度分别为0.5、1.0、1.5 mg/mL)组,MTT法观察CMP的细胞毒作用,ELISA法测定2.2.15细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量.体内实验:采用四氯化碳复合因素法制作SD大鼠肝纤维化模型,分为正常对照组、模型组、CMP组,香菇多糖组及秋水仙碱组,每组10只,免疫组织化学法观察CMP对转化生长因子β(TGF-β)、细胞凋亡相关因子caspase-3、Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ)、层粘蛋白(laminin)的影响,Western blot检测Smad3、Smad7的表达.结果 体外实验:CMP对HepG2.2.15细胞株的半数毒性浓度(TC50)为13.61 mg/mL,对HepG2.2.15细胞株HBsAg、HBeAg分泌的半数有效浓度(IC50)分别为4.38 mg/mL、5.78 mg/mL,治疗指数(TI)值分别为3.15和2.45,CMP对HBsAg和HBeAg有抑制作用,并且抑制HBsAg和HBeAg分泌的作用优于ACV.模型组与TGF-β、caspase-3、Ⅲ型胶原、层粘蛋白的表达高于正常对照组(P＜0.01);CMP,香菇多糖,秋水仙碱能够降低肝纤维化大鼠肝脏中TGF-β、caspase-3、Ⅲ型胶原、层粘蛋白的表达(P ＜0.05,P＜0.01).模型组Smad-3的表达高于对照组、Smad-7的表达低于对照组(均P＜0.01);CMP,香菇多糖,秋水仙碱能够降低肝纤维化大鼠Smad-3的表达、升高Smad-7的表达(均P＜0.01).CMP显示了较好的抗纤维化作用,与香菇多糖组比较无统计学差异.结论 通过体内和体外实验,证明CMP具有抑制HBV,调节TGF-β/Smad信号转导通路等作用,本研究为CMP在慢性乙型肝炎临床的应用提供了重要的理论和实验依据.
-
N-乙酰半胱氨酸对心衰兔氧化应激和核因子NF-κB的干预研究
目的 探讨N-乙酰半胱氨酸对心衰兔氧化应激和核因子NF-κB的干预研究.方法 40只健康成年大白兔,耳缘注射阿霉素制作心衰模型.8周后取造模成功的27只大白兔随机分为心衰组(n=14)和N-乙酰半胱氨酸组(NAC组,n=13),另取10只为对照组.对照组和心衰组给予注射生理盐水1 mL/(kg·d),NAC组给予注射NAC 300 mg/(kg·d).干预4周后,测定各组兔超声心动图参数(LVEDD、LVESD、IVST、EF、FS)、血清及心肌组织总抗氧化能力;酶联免疫检测各组兔血清和心肌组织8-iso-PGF2α的含量;免疫组化和Western blot检测NF-κB p65及其抑制物IκB-α在左室心肌细胞的表达和核结合活性的改变.结果 与对照组相比,心衰组兔左室舒张期末内径(LVEDD)、左室收缩期末内径(LVESD)明显增大(P＜0.05);射血分数(EF)与短轴缩短率(FS)明显降低(P＜0.05),室间隔厚度(IVST)未见明显变薄.心衰组血清和心肌的总抗氧化能力均低于对照组(P＜0.01);与心衰组比较,NAC干预组总抗氧化能力明显升高(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.NAC注射组较心衰组心肌细胞NF-κB p65向核内移位表达的阳性细胞明显减少,NAC治疗后兔心肌细胞NF-κB p65的表达较心衰组减少(P＜0.05),IκB-α表达较心衰组多(P＜0.05).心衰后给予NAC干预的兔血清和心肌组织8-iso-PGF2α含量较心衰组显著降低(P＜0.05),血清和心肌8-iso-PGF2α的含量均与心功能显著相关(r =0.975,P＜0.005;r =0.974,P＜0.05).结论 氧化应激参与了心力衰竭的发生和心功能的恶化;NAC可通过抑制氧化应激,拮抗NF-κB的活化和其在核内的表达,减少心肌细胞凋亡及炎症反应,有效改善心功能,保护心肌.
-
洛伐他汀生物合成途径中酰基转移酶LovD的活性机制研究
目的 将突变前后的蛋白进行分子动力学模拟,从而探讨酰基转移酶LovD活性提高的原因.方法 对酰基转移酶的平面结构进行拟合,通过底物通道NVR2.1计算软件得到LovD的主要底物,在酶活性测定过程中计算均方根偏差(root mean square deviation,RMSD)和势能、G0和G5的均方根波动(root mean square fluctuation,RMSF)数值、主要α螺旋区域Ⅰ与通道周围其他螺旋区域的距离等指标.结果 RMSD和势能的计算结果表明,叠合后的蛋白结构组成并没有发生较大的变换;G0和G5的RMSD数值比较表明,G0和G5整体的运动没有发生较大的变化;G0和G5的RMSF数值比较表明,4个局部柔性峰值微弱变化区域和1个柔性变化较大的区域;通过底物通道计算软件得到LovD主要的4条底物通道,α螺旋区域Ⅰ是形成通道的核心螺旋区域;比较G0和G5的主要通道的宽度、长度、弯曲率等数值,突变后G5的主要通道变宽、变短、弯曲率变小;G5的距离变大.结论 远距离的突变使得LovD活性提高是由于α螺旋Ⅰ末端的柔性变化,导致α螺旋Ⅰ的运动的变化,使得在α螺旋Ⅰ附近底物通道变短、变宽、弯曲率减小.这些变化可能降低了底物进出主要通道的阻力,使得参与酶催化的底物在通过这些通道的时候的速率加快,从而使得催化效率提高.
-
成骨生长肽对MC3T3-E1成骨细胞增殖的影响及其可能机制
目的 探讨成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)对MC3T3-E1成骨细胞的增殖的影响及其机制.方法 常规培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分为OGP高、中、低剂量组(1 ×10-8、1×10-10、1×10-12 mol/L)以及对照组,利用MTT法检测OGP作用24h、48 h以及72 h对MC3T3-E1成骨细胞增殖作用,利用免疫化学染色法检测成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白水平,ELISA法检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)含量.结果 在24h时,各剂量OGP对MC3T3-E1的增殖无影响;作用48、72 h,OGP 10-10 mol/L以及OGP 1 ×10-8 mol/L显著促进MC3T3-E1细胞增殖(P＜0.05),其中OGP 1×10-8mol/L 48 h促进MC3T3-E1细胞增殖作用强.作用24 h,各组成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白IOD值差异均无统计学意义;作用48 h,OGP 1×10-8mol/L组细胞Ⅰ型胶原蛋白IOD值显著高于对照组(P＜0.05);作用72 h,OGP 1×10-10mol/L组以及OGP 1×10-8mol/L组细胞Ⅰ型胶原蛋白IOD值均显著高于对照组(P＜0.05).作用24h,各组成骨细胞OPN OD值差异均无统计学意义;作用48 h、72 h,OGP 1×10-1omol/L组以及OGP1 ×10-8mol/L组细胞OPNOD值显著高于对照组(P＜0.05).结论 OGP能够明显促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖,其可能的作用机制是增加成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达以及OPN的表达,且其作用与浓度密切相关,在1×10-8mol/L时,其促成骨细胞增殖作用强.
-
促红细胞生成素对外伤性颅脑损伤大鼠神经丝的保护作用
目的 观察促红细胞生成素(erythropoietin EPO)对创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)大鼠脑皮质中神经丝的影响,并探讨其意义.方法 45只Wistar大鼠按随机原则分为9组,正常对照组、颅脑损伤组(各组于建模后6、12、24、72 h取标本),EPO处理组(各组于建模后6、12、24、72 h取标本),每组5只,采用Myneurolab脑立体定向仪和Benchmark颅脑损伤撞击器制作创伤性颅脑损伤模型.应用免疫组化法观察上述时间点损伤灶周围皮层神经丝的形态改变,Western blot检测各时间点中神经丝蛋白H(neurofilament H,NF-H)的表达变化.结果 免疫组化结果显示:正常对照组NF-H含量丰富,呈棕黄色丝状结构,在脑皮质的大椎体细胞层、小椎体细胞层,海马区,胼胝体中表达尤为明显,而颅脑损伤组于脑外伤后6h见NF-H较正常组稀疏,部分结构中断,6～24h内可见神经丝数目进一步减少,排列紊乱加重,至24h破坏程度达到高峰,72 h时上述情况有所缓解,外伤后EPO处理组神经丝数量在各个时间点均比外伤组多,且排列较外伤组整齐.神经丝的密集程度在12h达到高峰,然后逐渐降低.Western blot显示:与正常组相比,颅脑损伤组损伤后6h可见NF-H的表达减少(P＜0.05).6～12h内NF-H蛋白表达持续减少(P＜0.05),24h后达低值(P＜0.01),72 h时升高(P＜0.05).但与颅脑损伤各组比较,EPO处理组NF-H的表达升高(P＜0.05).结论 EPO对脑具有保护作用,其可能机制为抑制神经丝蛋白降解.
-
二磷酸盐对骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达影响的研究
目的 分析趋化因子CXCL1及受体CXCR2在小鼠骨癌痛模型中的作用,并探讨二磷酸盐对小鼠骨癌痛模型的干预机制.方法 60只小鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组.股骨远端骨髓腔注射NCTC2742细胞复制小鼠股骨痛模型,治疗组给予二磷酸盐治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水.Real-time PCR分析各组中趋化因子CXCL1和CXCR2mRNA的表达,Western blot检测CXCL1、CXCR2蛋白及肿瘤坏死因子TNF-α以及细胞凋亡蛋白Bax/Bcl2以及Caspase-3的表达.结果 模型组小鼠的机械缩爪阈值较对照组有显著的增高(P＜0.05,P＜0.01),而药物治疗组对模型组小鼠的升高的阈值有显著的改善作用(P＜0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达明显增强(P＜0.01),二磷酸盐可以显著抑制CXCL1及CXCR2的表达(P＜0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠肿瘤坏死因子TNF-α、促细胞凋亡蛋白Bax及Caspase-3的表达明显增高,凋亡蛋白Bcl2的表达明显降低(P＜0.01),而二磷酸盐可以显著改善上述指标表达(P＜0.01).结论 二磷酸盐通过下调骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达、促进细胞凋亡发挥治疗骨癌痛模型小鼠的作用.
-
Hsulf-1在肝癌细胞系中的作用及STAT3信号通路研究
目的 基于肝癌细胞中人硫酸酯酶-1(human sulfatase-1,Hsulf-1)基因对STAT3信号通路的影响,探讨Hsulf-1基因在肝癌发生发展中的作用.方法 应用RT-PCR方法测定Hsulf-1在肝癌细胞中的表达;通过Western blot方法测定Huslf-1在HGF加入前后对STAT3磷酸化(p-STAT3)水平及下游蛋白的影响.结果 5-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC和曲古抑菌素Actrichostain A,TSA)处理HepG2细胞中Hsulf-1表达增加,且2者具有协同作用;与正常细胞相比,Hsulf-1在肝癌细胞系中(HepG2,Hep3B,Huh-7,SMMC-7221)表达水平下降,在转染pcDNA3.1(+)/Hsulf-1以及pcDNA3.1(+)/STAT3siRNA-Hsulf-1中的HepG2细胞,Hsulf-1的蛋白表达量增加,p-STAT3和c-met的表达水平下降,在未转染组以及转染阴性siRNA的HepG2细胞中,结论则相反.结论 Hsulf-1在肝癌细胞中表达下降;Hsulf-1在肝癌细胞中可抑制由HGF刺激的p-STAT3及下游蛋白的表达水平.
-
钼对小鼠睾丸组织中MAPK信号通路的影响及其对雄性生殖系统的毒性机制研究
目的 探讨钼对小鼠睾丸组织中MAPK信号通路的影响,分析其对雄性生殖系统的毒性机制.方法 取雄性昆明系小鼠60只,随机分为4组,每组15只,分别为生理盐水对照组、低剂量组(钼酸钠,300 mg/kg)、中剂量组(钼酸钠,600 mg/kg)、高剂量组(钼酸钠,1200 mg/kg).每日进行灌胃染毒,连续30 d,取出睾丸.采用荧光定量PCR检测小鼠睾丸ERK1、ERK2、JNK1、JNK2、p38基因mRNA表达.结果 低、中、高剂量组ERK2、JNK2、p38 mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05);低、中、高剂量组ERK1、JNK1mRNA表达显著高于对照组(P＜0.05);且呈剂量依赖性,随着剂量的增加,ERK2、JNK2、p38 mRNA表达显著降低,ERK1、JNK1mRNA表达显著升高(P＜0.05).结论 钼在ERK、JNK、p38信号通路mRNA水平上对小鼠睾丸组织产生影响,钼对雄性生殖系统损伤是通过激活ERK、JNK、p38通路的活性来调控的,且呈剂量依赖性.不同浓度钼酸钠中毒可损伤小鼠睾丸组织的MAPK信号通路.
-
miR-27a对两种结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响
目的 探讨microRNA-27a(miR-27a)对2种结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 应用miR-27a反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)在体外转染结肠癌细胞系SW620和HCT116,设置转染无义序列组作为对照组.RT-PCR检测细胞miR-27a表达;MTT法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测转染细胞FOXO1蛋白表达.结果 与对照组相比,转染miR-27a ASO后结肠癌细胞系SW620和HCT116的miR-27a表达水平均明显降低(P＜0.001),增殖能力和侵袭能力均受到明显抑制(P＜0.01),FOXO1蛋白表达均明显增高(P＜0.05).结论 抑制miR-27a表达可显著降低结肠癌细胞系SW620和HCT116的增殖能力和侵袭能力,而调控下游FOXO1蛋白表达可能是miR-27a参与结肠癌细胞增殖和侵袭的主要机制.
-
DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷的抗胃肠道肿瘤机制研究
目的 观察DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对胃癌细胞生长的影响.方法 将野生型P53人胃癌细胞株AGS细胞,加入不同浓度的5-Aza-CdR,体外培养至不同时间.MTT法检测细胞增殖活性;平板细胞克隆形成实验检测细胞长期增殖活性(0 ～2.5 μM);流式细胞仪检测细胞周期变化(25 μM,0、12、48、96 h);Annexin V/PI双染实验检测细胞凋亡情况(2.5 μM,0、12、48、96 h);比色法检测Caspase-3活力、Western blot检测Caspase-3前体蛋白及PARP(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白的含量(2.5 μM,0、12、48、96 h).结果 随着5-Aza-CdR浓度增加,对肿瘤细胞的抑制作用亦增强,在50 μM作用72 h时,细胞存活率达低值(31.9％);随着药物处理时间的延长,胃癌AGS细胞凋亡增多,96 h的2.5μM 5-Aza-CdR作用下,细胞的生长抑制达到了高峰(44.4％),且其抑制作用表现为浓度和时间依赖性.5-Aza-CdR对肿瘤细胞长期生长有影响,克隆形成抑制率呈线性增加.流式细胞仪分析结果显示,随5-Aza-CdR作用时间延长,G2期细胞比例从0h的(5.7±0.2)％增加到96h的(28.5±0.2)％.随着药物作用时间的累加,其凋亡率逐渐增加,各时间组的细胞凋亡率与空白对照组之间的差异均具有统计学意义(P＜0.05).与空白对照组比较,Caspase-3活力在药物处理48、96 h后显著提高(P＜0.05),但12 h AGS细胞的Caspase-3活力无变化;48 h Caspase-3前体比12h和未用5-Aza-CdR时明显减少,96 h减少为明显;PARP在AGS细胞内经5-Aza-CdR作用48 h后亦被活化,96h后几乎检测不到PARP的存在.结论 5-氮杂-2'-脱氧胞苷,能增强肿瘤细胞对化疗药的敏感性,可作为一种有效的抗胃肠道肿瘤药,.
-
柴胡与氯苯那敏在大鼠体内药物间的相互作用研究
目的 探讨柴胡提取物与氯苯那敏在大鼠体内药物间的相互作用.方法 将20只SD大鼠随机分为2组,实验组10只给予20 mg/kg的柴胡提取物2周,对照组10只平行给予生理盐水,第15天分别给予氯苯那敏,于(0、0.1、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、24h)点采血200 μL,采用LC-MS分析方法测定氯苯那敏的血药浓度,以Graphpad prism 5.01软件计算2组的药代动力学参数.结果 实验组的AUC(0-∞)[1.40±0.27(μg·h)/mL]明显高于对照组[0.87±0.25(μg·h)/mL];而代谢清除率CLint[14.25±2.84(L·kg)/h]明显低于对照组[22.97±2.03(L·kg)/h] (P ＜0.05).结论 柴胡提取物能够降低大鼠体内氯苯那敏的代谢清除率,临床上用药时应尽量避免2种药物的联合使用.
-
HPLC法测定生姜半夏汤单煎与合煎中6-姜酚和6-姜醇含量
目的 HPLC法测定生姜半夏汤单煎液与合煎液中6-姜酚、6-姜醇的含量变化.方法 采用Amethyst C18-P柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(60∶40)为流动相,检测波长281 nm,流速0.9 mL/min,柱温25℃.结果 6-姜酚、6-姜醇在合煎液中含量均明显高于单煎液.结论 生姜半夏汤使用时应采用合煎的方式制备,否则会降低6-姜酚、6-姜醇浸出的含量,影响生姜半夏汤的药效.
-
二丁酰环磷腺苷钠的制备及其含量和相关物质的测定
目的 制备二丁酰环磷腺苷钠并测定其含量及有关物质.方法 自制二丁酰环磷腺苷钠后,采用高效液相色谱法测定其含量和有关物质,色谱条件为:ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol/mL磷酸二氢钾溶液(25∶75)为流动相,流速1 mL/min,273 nm为检测波长.结果 二丁酰环磷腺苷钠为白色粉末状固体(收率＞70％,HPLC＞ 99％);含量测定线性范围为20～30μg/mL,r=0.9997;重复性良好(RSD=0.4％,n=6);回收率为101.2％(RSD =0.3％);有关物质定量限为50.08 ng/mL,该浓度下检测结果稳定;线性范围为0.05 ～ 3.75 μg/mL,r=0.9999;重复性良好(RSD=4.53％,n=6);回收率为93.5％(RSD =1.8％).结论 该合成路线简单,制备得到二丁酰环磷腺苷钠纯度高,建立的HPLC法测定其含量及有关物质简便,结果可靠.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
