首页 > 文献资料
-
雪菊不同提取部位对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响
目的:以3T3-L1前脂肪细胞为载体,考察雪菊总提物、正丁醇部位、黄酮单体CB-1及CB-2对该细胞增殖与分化的影响.方法:雪菊4个不同提取部位分别设3个剂量组.MTT法检测雪菊4个不同提取部位对3T3-L1细胞增殖的作用,油红O染色并通过比色分析细胞分化过程中胞浆脂质的形成与积累.结果:与对照组相比,雪菊总提取物100μg·mL-1,正丁醇部位0.5、5、50μg·mL-1,黄酮单体CB-1、CB-2在50μg·mL-1浓度时对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.01);正丁醇部位的作用呈一定的量效关系(相关系数r=-0.903).油红O染色结果表明,与对照组相比,雪菊总提取物1、10、100μg·mL-1均可以显著抑制细胞分化,减少细胞中脂质的形成(P<0.01);正丁醇部位能够剂量依赖性地抑制细胞分化(r=-0.779);CB-1与CB-2在50μg·mL-1浓度时对细胞分化有显著抑制作用(P<0.01).结论:雪菊总提物、正丁醇部位、CB-1与CB-2均能够抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖与分化,减少细胞中脂质积累.
关键词： 雪菊 3T3-L1前脂肪细胞 增殖 分化 -
染料木苷对3T3-L1脂肪细胞分化以及AMPK磷酸化的影响
目的 观察染料木苷(Genistin,GIN)对 3T3-L1 前脂肪细胞细胞分化以及分化过程中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)磷酸化程度的影响.方法 用激素鸡尾酒法诱导 3T3-L1 前脂肪细胞分化,用MTT法观察GIN 对细胞生存率的影响,以油红O染色法镜下观察3T3-L1前脂肪细胞分化的情况,并通过比色分析法检测GIN对细胞内脂滴堆积量的影响;用 Western blotting方法分别检测对照组和给药组细胞分化过程中细胞中AMPK,P-AMPK(Thr172)蛋白表达量,借以计算AMPK磷酸化比率.结果 分化诱导后,对照组脂肪细胞呈典型的成熟脂肪细胞表型,形成"戒指环"结构,经100 μM GIN干预后,脂滴数量减少,体积减小,通过比色分析法量化后显示100 μM GIN可减少胞内脂质的堆积(P＜0.05).与对照组相比,给药组从第4天开始上调p-AMPK(Thr172)/AMPK 比率,并持续到第10天(P＜0.05).结论 GIN可通过激活AMPK抑制3T3-L1脂肪细胞分化.
关键词： 染料木苷 3T3-L1前脂肪细胞 分化 腺苷酸活化蛋白激酶 -
含左归丸鼠血清对3T3-L1前脂肪细胞芳香化酶 mRNA 表达的影响
目的：观察含左归丸鼠血清对3T3-L1前脂肪细胞芳香化酶 mRNA 表达的影响。方法：将雌性育龄期大鼠分为正常组20只、假手术组17只、模型组8只、阳性对照组11只、左归丸高剂量组（左高组）6只、左归丸低剂量组（左低组）9只，连续灌胃11周，分离血清检测 E2；以2％各类鼠血清加入培养液培养分化中的3T3-L1前脂肪细胞，48 h 后测细胞上清液E2和细胞芳香化酶 mRNA 表达。结果：与模型组比较，左高组、左低组给药前后体重有升高趋势，但无明显统计学意义（P＞0.05）；左高组、左低组鼠血清 E2值较模型组无明显统计学意义（P ＞0.05）；培养3T3-L1前脂肪细胞48h 后，细胞上清液 E2值左高组（9.40±3.61）pg／mL、左低组（8.94±2.91）pg／mL 比模型组（3.99±0.76）pg／mL 略有升高；模型组（0.39）芳香化酶 mRNA 表达（P450arom／GAPDH）水平高于左高组（0.25）。结论：左归丸对去势雌鼠血清 E2和体重无明显影响，可增强3T3-L1前脂肪细胞的芳香化酶活性。
关键词： 补肾中药 左归丸 3T3-L1前脂肪细胞 芳香化酶 -
小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞及其胰岛素抵抗模型的影响
目的:探查小檗碱的体外安全浓度及其对脂肪细胞的抗胰岛素抵抗(IR)活性.方法:3T3-L1前脂肪细胞分为空白组和小檗碱不同浓度(0.001～10 μmol·L-1)组,48 h后MTT法测定各组的A值.成熟的3T3-L1脂肪细胞分为空白组和IR模型组,模型组细胞经10 μmol·L-1胰岛素(Ins)诱导24,48 h.检测各组培养液和细胞葡萄糖含量.检测IR模型细胞经小檗碱不同浓度(0.000 1～1 μmol·L-1)干预24,48 h后的培养液中葡萄糖含量.结果:小檗碱0.01～1μmol·L-13个浓度和10 μmol· L-1作用的前脂肪细胞A值均显著升高或降低(P＜0.05,P＜0.01);经Ins诱导24,48 h的培养液和细胞葡萄糖含量均显著增加或减少(P＜0.01);作用24 h的小檗碱0.01～1 μmol·L-1和作用48 h的0.000 1～1μmol·L-1各浓度组培养液中的葡萄糖量均显著减少(P＜0.01).结论:小檗碱的体外细胞安全浓度较低,低浓度小檗碱对脂肪细胞即具有显著的抗IR活性.
关键词： 小檗碱 3T3-L1前脂肪细胞 胰岛素抵抗 -
miR-202通过抑制PGC1β表达促进3T3-L1前脂肪细胞分化
目的 观察miR-202对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及可能的机制.方法 通过慢病毒感染构建稳定表达AMO-miR-202和乱序对照miRNA细胞系,随后诱导分化.至分化的第9天,油红O染色观察细胞内脂滴的情况;RT-PCR检测过氧化物酶体激活增殖受体γ2(PPARγ2)和aP2的基因表达;Western blot检测PPARγ2、aP2和miR-202靶基因PPARγ辅助活化因子1β(PGC1β)蛋白表达.结果 经293T细胞慢病毒包装AMO-miR-202、乱序对照miRNA,荧光显微镜下可见约80%~90%荧光细胞;将上述2组病毒液分别感染3T3-L1前脂肪细胞后,可见约70%~80%荧光细胞.AMO-miR-202组细胞内脂滴及PPARγ2和aP2的mRNA表达显著低于乱序对照组和对照组(P<0.05).与乱序对照组和对照组相比,AMO-miR-202组PGC1β蛋白表达显著增加(P<0.05),PPARγ2和aP2蛋白表达显著降低(P<0.01),而乱序对照组和脂肪细胞组上述指标无明显差异.结论 miR-202可能通过抑制PGC1β、提高PPARγ2和aP2的表达促进3T3-L1前脂肪细胞分化.
关键词： miR-202 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪细胞分化 PGC1β -
二甲双胍通过调节成脂影响脂肪细胞对白血病细胞作用
目的:探讨二甲双胍对3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化作用,并研究处理后脂肪细胞对白血病细胞的影响.方法:在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟过程中分别给予不同浓度二甲双胍处理,诱导后通过油红O染色和吸光度值(OD值)检测其分化程度;应用rea1-time PCR检测成脂后关键基因PPARγ、C/EBPα、FABP4(ap2)mRNA的表达水平.诱导后的脂肪细胞分别与GFP+-THP-1细胞共培养,加入1μg/ml的阿糖胞苷,48 h后采用流式细胞仪检测GFP+-THP-1细胞的凋亡.收集诱导后脂肪细胞的上清,与肿瘤细胞基础培养液(RPMI 1640)以1∶1混合后培养肿瘤细胞,应用CCK8检测脂肪细胞对白血病细胞增殖,加入1 μg/ml的阿糖胞苷,48 h后应用细胞计数仪检测其化疗保护作用.结果:二甲双胍处理组OD值及成脂基因C/EBPα、FABP4表达较对照组低,而PPARγmRNA表达无明显改变;二甲双胍处理后的脂肪细胞共培养组白血病细胞凋亡率高于对照组.脂肪细胞促进白血病细胞增殖并对其有化疗保护作用,这些作用被二甲双胍降低.结论:二甲双胍能抑制3T3-L1前脂肪细胞的成脂分化,并调节脂肪细胞对白血病细胞凋亡、增殖及化疗的保护作用.
-
胰升血糖素样肽1对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响
探讨胰升血糖素样肽1 (GLP-1)对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响.在3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的不同阶段添加不同浓度梯度的GLP-1 (7-36),使用XTT比色法测定细胞增殖情况,油红O脂肪染色、异丙醇萃取法评价细胞分化情况,RT-PCR法测定不同分化阶段PPARγmRNA表达水平. 结果高浓度GLP-1( 10-9～10-7 mmol/L)能够减弱3T3-L1前脂肪细胞的增殖能力；GLP-1在10-11～10-8mmoL/浓度梯度均存在抑制3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化的作用,但对分化过程中PPARγ mRNA的表达水平均未见显著影响. 结论 本研究发现GLP-1能够抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化,提示脂肪细胞可能也是GLP-1减轻体重作用的潜在靶点.
关键词： 胰升血糖素样肽1 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪细胞 增殖 分化 -
木犀草苷对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用
目的 观察木犀草苷对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用.方法 用噻唑蓝(MTF)法检测木犀草苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;用鸡尾酒法诱导3T3-L1细胞分化,用油红O染色、三酰甘油含量检测脂肪细胞分化程度;采用RT-PCR和Western blot方法检测木犀草苷对脂肪细胞过氧化物酶体增殖物活化受体v(PPAR γ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA和蛋白表达的影响.结果 木犀草苷5～80 μmol/L不影响细胞活性,160～320 μmol/L显著抑制细胞活性,呈剂量依赖性抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,显著降低脂肪细胞PPARγ、C/EBPα mRNA和蛋白的表达.结论 木犀草苷能抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,减少脂质聚集,是通过下调PPARγ、C/EBPα的表达实现的.
关键词： 木犀草苷 3T3-L1前脂肪细胞 分化 PPARγ C/EBPα -
雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态和分泌功能的影响
目的 探讨雷帕霉素对前脂肪3T3-L1细胞脂质稳态、分泌功能的影响,阐明雷帕霉素引起高脂血症的可能机制.方法 体外培养前脂肪细胞3T3-L1细胞株,分成对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组.用油红O染色(定性)及高效液相色谱法(定量)检测3T3-L1细胞内胆固醇水平,酶联免疫吸附实验分析瘦素、脂联素的分泌量,实时荧光定量PCR法及Western blot法检测3T3-L1细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ) mRNA和蛋白的表达.结果 油红O染色显示雷帕霉素组脂肪细胞脂滴数量较对照组明显减少；对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组细胞内游离胆固醇含量分别为(12.89±0.16)、(9.84±0.45)、(9.39 ±0.46)和(8.61 ±0.34) mg/ml,与对照组相比,雷帕霉素能抑制3T3-L1前脂肪细胞内胆固醇的蓄积(P＜0.05).对照组、雷帕霉素50、100、200 nmol/L组瘦素分泌量分别为(19.02±0.52)、(16.98±0.01)、(15.62±0.01)和(13.84±0.66)ng/ml,与对照组相比,雷帕霉素能减少成熟后3T3-LI脂肪细胞瘦素的分泌水平(P＜0.05).雷帕霉素50、100及200 nmol/L组PPARγ mRNA表达量分别为对照组的94％、62％和47％,均显著低于对照组(P＜0.05)；PPARγ蛋白表达量分别为对照组的80％、74％和61％,均显著低于对照组(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,检测PPARγmRNA的表达分别为对照组的(0.60±0.14)、(0.67 ±0.03)和(1.30±0.14)倍,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05); PPARγ蛋白表达与mRNA的表达变化趋势相似,差异具有统计学意义(P＜0.05).雷帕霉素100 nmol/L、PPARγ阻断剂GW9662 10 μmol/L、PPARγ增敏剂曲格列酮10 μmol/L分别处理细胞96 h,ELISA检测各处理组瘦素表达量分别为(19.02 ±0.52)、(15.62 ±0.10)、(14.45±1.01)和(18.07 ±0.66) ng/ml,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 雷帕霉素通过下调PPARγ的表达减少脂肪细胞内的脂质蓄积,并且抑制其瘦素分泌,这为临床上雷帕霉素引起的高脂血症提供了一个可能的解释.
关键词： 雷帕霉素 3T3-L1前脂肪细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 瘦素 胆固醇 -
DHA诱导3T3-L1前脂肪细胞G2/M期阻滞及ERK1/2通路的作用
目的 探讨ERK1/2丝裂素活化蛋白激酶信号转导途径在DHA抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖中的作用.方法 四唑盐比色法（MTT法）检测DHA处理24h对体外培养的3T3-L1前脂肪细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞周期,蛋白免疫印迹法检测ERK1/2、p-ERK1/2、p21水平.结果 MTT结果显示DHA干预24h可剂量依赖性降低3T3-L1前脂肪细胞的活力,抑制增殖,IC50为100μ mol/L；流式细胞术结果表明,DHA可将3T3-L1前脂肪细胞阻滞在G2/M期；蛋白免疫印迹发现,DHA可明显升高3T3-L1前脂肪细胞ERK1/2磷酸化水平、增强p21蛋白表达.结论 DHA可能通过活化ERK1/2通路诱导G2/M期阻滞,进而抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖.
-
染料木黄酮对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用及其机制研究
目的 观察染料木黄酮(genistein,GEN)对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,探讨GEN抑制3T3-L1细胞分化的作用及分子机制.方法 用含1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松和胰岛素的培养液(MDI)诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,同时用GEN或p38抑制剂SB203580干预.作用6 d后,用油红染色实验观察脂肪形成情况;检测细胞培养液中非酯化脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)的含量;用Western blotting技术检测细胞中脂肪酸合酶(FAS)的蛋白表达.用GEN预处理30min后,用胰岛素刺激3T3-L1细胞,检测磷酸化p38MAPK(p-p38)的蛋白表达.结果 GEN可以有效抑制3T3-L1细胞的脂肪形成,降低培养液中NEFA、TG的含量.胰岛素刺激后,3T3-L1细胞中P-p38的表达迅速增强,并在5min时达到高峰,GEN可以有效降低P-p38的表达.GEN、SB203580均能降低FAS的蛋白表达.结论 染料木黄酮能有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的脂肪分化,其机制是通过p38途径对FAS的抑制发挥作用.
关键词： 染料木黄酮 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪分化 磷酸化p38MAPK 脂肪酸合酶 -
3T3-L1细胞分化过程中线粒体含量和葡萄糖摄取的动态变化
目的对分化过程3T3-L1细胞脂质含量、线粒体含量及细胞对葡萄糖的摄取进行动态观察，为选择适宜分化时点的脂肪细胞进行肥胖研究提供有力证据。方法经典鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。分别于分化的第0、2、4、6、8、10、12日，对细胞进行油红O染色，分光光度法检测细胞内脂质含量；Mito-Tracker Green探针法检测分化过程中线粒体含量变化；2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,34羟氨基]-2-脱氧葡萄糖（2-NBDG）染色法直接观察细胞对葡萄糖摄取，葡萄糖氧化酶法测定培养基葡萄糖含量间接评价脂肪细胞对葡萄糖的摄取。结果3T3-L1前脂肪细胞在分化第10日，镜下观察即有90%以上的细胞内可见大量脂滴呈“戒环样”分布。分化过程中3T3-L1细胞内脂质含量逐渐升高，线粒体含量逐渐增加，葡萄糖摄取逐步增强，至第10日趋于稳定。结论对于从成熟脂肪细胞的角度进行肥胖及其相关疾病的研究，选择分化第10日的3T3-L1脂肪细胞比较合理。[营养学报，2015，37（3）：259－264]
关键词： 3T3-L1前脂肪细胞 分化 线粒体含量 葡萄糖摄取 -
淫羊藿苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响
目的 研究淫羊藿苷(ICA)不同作用浓度及不同作用时间对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的抑制作用.方法 采用MTT法观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;应用ICA诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化,油红O染色测定细胞内脂质含量,观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的影响.结果 67μg/mL ICA对细胞增殖起抑制作用,持续至96 h并达到大;30 μg/mL和15 μg/mL ICA在72 h、96 h对细胞增殖起抑制作用.结论 较高浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化有抑制作用,而低浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化作用不明显.
关键词： 淫羊藿苷 小鼠 3T3-L1前脂肪细胞 增殖 诱导分化 -
中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响
目的:探讨中药复方益糖康对313-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响.方法:培养3T3-L1前脂肪细胞;以四甲基偶氮唑盐(MTT)的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,通过流式细胞仪检测细胞增殖的周期;以油红O染色异丙醇萃取的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂肪积聚的影响.结果:10%含益糖康的大鼠血清,对3T3-L1前脂肪细胞的增殖影响佳,细胞增殖在S、G2期与对照组比较增多;5%含益糖康大鼠血清抑制分化过程中的脂肪积聚佳.结论:中药复方益糖康具有促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的作用.
关键词： 益糖康 3T3-L1前脂肪细胞 细胞增殖 细胞分化 -
蚕丝支架与3T3-L1前脂肪细胞生物相容性的体外实验
背景:蚕丝是天然制品,其力学性能及生物相容性优于传统人工合成的可降解高分子材料,在医疗领域中已获得了广泛的应用而受到关注.目的:观察蚕丝对3T3-L1前脂肪细胞吸附作用及蚕丝对3T3-L1前脂肪细胞形态和功能的影响.方法:取原料蚕丝和用胰酶消化后的蚕丝任意缠绕成网状立体构型纤维条索,架空固定在自制的不锈钢支架上,支架网孔70～200 μm,厚200-300 μm,孔隙率为20%.消化后的蚕丝三维支架放入24孔培养板中,将浓度为6×10L~(-1)的3T3-L1前脂肪细胞悬液每孔滴入3滴,每孔细胞数量为1×10~7个.悬空孵育4 h,待细胞充分吸附在支架上后加入培养液,令细胞完全浸没,隔两三天换半液,培养1～4周.结果与结论:①倒置显微镜观察3T3-L1前脂肪细胞-蚕丝复合物可见细胞伸出细长的突起沿着蚕丝不断向前迁移延伸,细胞首尾相互融合,渐渐连成一片分布于蚕丝网眼内.②扫描电镜观察3T3-L1前脂肪细胞-蚕丝复合物可见细胞与支架紧密贴附,适度伸展,并有基质分泌.提示蚕丝对3T3-L1前脂肪细胞具有良好的吸附作用,并能维持3T3-L1前脂肪细胞正常形态和功能.
关键词： 3T3-L1前脂肪细胞 细胞培养 蚕丝 组织工程 -
3T3-L1前脂肪细胞的体外培养及胰岛素样生长因子1对其增殖、分化的作用
背景:前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化潜力的特异化的前体细胞,如果能够找到可以强力促进前脂肪细胞增殖和分化的因子或药物,在脂肪组织移植的同时使用,则有希望提高脂肪组织的移植效果.目的:摸索体外培养经典的3T3-L1前脂肪细胞的佳培养环境并积累培养经验,观察胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,并探求胰岛素样生长因子1的佳作用剂量.设计、时间及地点:以细胞为对象的对照观察实验,于2007-10/2008-02在辽宁医学院科学实验中心完成.材料:3T3-L1前脂肪细胞株购于上海中科院生命科学院:胰岛素样生长因子1购于美国Biological公司.方法:根据3T3-L1前脂肪细胞的体外培养条件分为6组:空白对照组应用含体积分数为0.1的胎牛血清的标准高糖DMEM培养基培养:各实验组分别应用含有5,10,20,50,100 μ g/L胰岛素样生长因子1的含体积分数为0.1的胎牛血清的高糖DMEM培养基培养.主要观察指标:倒置显微镜下观察各组3T3-L1前脂肪细胞的生长、增殖及分化情况并拍照记录.待细胞铺满瓶底达到单层汇合时,应用流式细胞仪检测细胞周期,应用四甲基偶氮唑盐比色法测定3T3-L1前脂肪细胞的增殖率:应用油红O染色提取法测定3T3-L1前脂肪细胞内脂肪含量的增殖率.结果:①倒置显微镜下观察分化前3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞浆内无脂滴,分化后3T3-L1前脂细胞呈圆形,胞浆内舍有大量的脂滴,脂滴聚集于核周,被油红O染成橙红色,形成"戒环"样形态.②四甲基偶氮唑盐比色法和油红O染色提取法检测结果均显示,不同剂鞋的胰岛素样生长因子1组中3T3-L1前脂肪细胞的增殖率及细胞内脂肪含量的增殖率均高于空白对照组(P<0.05),胰岛素样生长因子1 20 μ g/L组对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化作用为明显(P<0.05):流式细胞仪的分析结果与四甲基偶氮唑盐比色法及油红O染色提取法的枪测结果基本一致.结论:体外细胞培养实验表明,胰岛素样生长因子1对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化有明显促进作用,其促进作用与浓度并非成正比,而是达到一定剂量后,其促进作用不再增加,而这个剂量接近本实验的佳剂量值,即20 μ g/L.
关键词： 3T3-L1前脂肪细胞 胰岛素样生长因子1 细胞培养 -
硫酸软硫骨素对3T3-L1细胞增殖和分化的影响
目的 研究硫酸软骨素对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响,并对其机制进行初步探讨.方法 噻唑蓝法观察0、5、10、25、50、100、200 mg/L浓度的硫酸软骨素对3T3-L1细胞增殖能力的影响；3T3-L1细胞由3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松联合诱导分化,实验组加入硫酸软骨素干预,诱导分化第8天油红O染色观察脂肪细胞分化程度；荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPα)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4) mRNA表达水平；Western blot检测脂肪细胞分化过程中PPARγ、C/EBPα和Smad3蛋白表达.结果 硫酸软骨素对3T3-L1细胞的促增殖作用呈剂量和时间相关性,其中25 mg/L的硫酸软骨素作用24 h后对3T3-L1细胞的促增殖作用大.硫酸软骨素能够抑制3T3-L1细胞成脂分化,减少脂滴聚集.并且硫酸软骨素能够下调PPARγ、C/EBPα和FABP4 mRNA,抑制PPARγ和C/EBPα、上调Smad3蛋白表达水平.结论 在适当浓度范围内硫酸软骨素具有促进3T3-L1细胞增殖作用,并通过激活Smad3、下调PPARγ和C/EBPα抑制成脂.
关键词： 硫酸软骨素 3T3-L1前脂肪细胞 成脂分化 -
β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响
目的 观察β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对3T3-L1前脂肪细胞分化及相关基因mRNA转录的影响,并探讨其抗肥胖的作用机制.方法 将3T3-L1前脂肪细胞分为4组:空白对照组、常规分化组、BRL37344处理组、常规分化+BRL37344组.采用油红O染色法初步判断各组脂肪细胞的分化情况,RT-PCR法检测各组脂肪细胞分化过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(Peroxisome proliferators activated receptor γ2,PPARγ2)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte fatty acid binding protein,aP2)、脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA的转录水平.结果 经不同浓度的BRL37344处理8d后,3T3-L1前脂肪细胞中PPARγ2、aP2、LPL基因mRNA的转录水平均下调,且呈剂量依赖性,其中10-7 mol/L BRL37344作用明显;在不同的分化时间点,经10-7 mol/L BRL37344处理后,细胞分化相关基因与相应对照组相比,均呈下调趋势(P＜0.05).结论 β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344可能通过下调脂肪细胞分化相关基因的转录,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化.
-
大黄酸对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响
目的:研究大黄酸(1,8-dihydroxy-3-carboxyanthraquinone,Rhein,Rh)对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响,从分子生物学角度探讨大黄酸降脂的作用机理.方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝法(MTT)研究大黄酸(5、10、20、40、80、160 μM)对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性的影响;大黄酸(20、40、80μM)干预3T3-L1脂肪细胞诱导分化,油红O染色分析大黄酸对3T3-L1脂肪细胞分化过程中胞浆脂滴积累的影响;生化法检测大黄酸对3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯(Triglyceride,TG)的影响;实时荧光PCR法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding protein α,C/EBPα)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS) mRNA的表达水平.结果:大黄酸160 μM对3T3-L1前脂肪的增殖有显著的抑制作用,大黄酸20、40、80μM剂量依赖地降低3T3-L1脂肪细胞中脂滴的积累,同时显著降低3T3-L1脂肪细胞中rG含量,并且下调3T3细胞中脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα、FAS mRNA的表达.结论:大黄酸能够抑制3T3-L1脂肪细胞的诱导分化,降低细胞内TG含量,其作用机制可能与下调脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα、FAS mRNA的表达有关.
关键词： 大黄酸 3T3-L1前脂肪细胞 增殖分化 基因表达 -
山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞代谢的影响
目的 试图探讨山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞代谢的影响,从而初步揭示山楂降脂、抗炎的可能作用机制.方法 将3T3-L1前脂肪细胞进行分组培养,山楂果、叶煎液以一定的比例加入培养基,并采用噻唑蓝(MTT)比色法检测OD值,绘制生长曲线,观察不同时间点山楂果、叶对细胞生长的影响.结果 山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞的生长曲线无明显影响,但其可明显减少细胞内的脂肪含量及代谢上清液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素-6(IL-6)的含量(P＜0.05或0.01).结论 山楂果、叶可以影响3T3-L1前脂肪细胞的代谢,减少脂质及炎性因子的产生,对机体具有一定的降脂、抗炎作用.
关键词： 山楂 3T3-L1前脂肪细胞 降脂 抗炎
