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染料木黄酮对去势小鼠脾细胞凋亡及雌激素受体表达的影响
目的 探讨染料木黄酮(GEN)对去势(OVX)小鼠脾细胞凋亡、凋亡基因Fas、FasL及雌激素受体(ER)亚型表达的影响.方法 流式细胞仪检测不同浓度GEN对OVX小鼠脾细胞的凋亡率,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞内Fas、FasL及ERa、ERβmRNA的表达.结果 OVX+GEN组与青年组相比,脾细胞凋亡率在GEN两个高浓度(37.0、92.5μmol/L)时都显著增高(P均＜0.05);而Fas基因表达在GEN 92.5μmol/L时显著增高(P＜0.05),FasL基因表达在GEN两个高浓度均显著高于青年组(P均＜0.05);与OVX空白组相比,GEN高浓度(92.5/μmol/L)时凋亡率显著增高(P＜0.01),Fas、FasL基因的表达均显著增高(P均＜0.05).ERa、ERβ基因的表达随GEN浓度增加而呈增加趋势,在GEN高浓度(92.5 μmol/L)时显著高于OVX空白组(ERa:P＜0.05;ERβ:P＜0.01).结论 高浓度GEN致脾细胞凋亡,与上调凋亡促进基因Fas、FasL基因表达有关.低浓度GEN可能逆转OVX小鼠脾细胞凋亡.高浓度GEN增加ERα、ERβ基因表达.GEN对脾细胞凋亡、ERs表达的调节可能不完全通过ER途径.
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异黄酮对前列腺癌细胞及PTEN基因的影响
目的通过大豆异黄酮抑制前列腺癌PC-3和LNCaP细胞生长和相关基因表达的影响,探讨大豆异黄酮类抑制前列腺癌的机制.方法对染料木黄酮和大豆甙元作用后的雄激素非依赖型前列腺癌(PC-3)、雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞的存活率、细胞毒作用、细胞周期和PTEN基因的mRNA表达等进行了研究.结果染料木黄酮和大豆甙元对PC-3、LNCaP细胞抑制效应具有时间和剂量依赖性,具有诱导凋亡和引起坏死效应;染料木黄酮能诱导PC-3和LNCaP细胞的(PTEN)表达,而大豆甙元只能诱导LNCaP细胞PTEN表达.结论PTEN基因表达的变化可能在染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞中具有重要的意义.染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞可能存在多种作用途径.
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染料木黄酮对乳鼠颅骨成骨细胞增殖分化的影响及其与c-jun的关系
目的 研究染料木黄酮对成骨细胞活性的影响及其相关机制.方法 胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶分步消化法获得乳鼠盖骨成骨细胞,Ⅱ代细胞用于实验.MTY和3H-TdR测定成骨细胞增殖和DNA合成,原位杂交的方法测定c-jun表达.结果 成骨细胞培养基中加入(10-5、10-6和10-7mol/L)染料木黄酮或10-9mol/L和10-10mol/L雌激素培养48h和72h后,MTT的吸光度值与对照组相比均明显升高,48h和72h后对照组、染料木黄酮组和雌激素组MTF值分别为0.19、0.15;0.39、0.45、0.46;0.29、0.32、0.37和0.35、0.38;0.50、0.49.3H-TdR掺入量均显著增加,对照组、染料木黄酮组和雌激素组3H-TdR掺入量分别为68.47;101、844、512和1108.8、1204.2.c-jun表达各组差异无显著性.结论 染料木黄酮不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化.
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植物雌激素染料木黄酮与钙、维生素D3联合预防去卵巢小鼠骨质疏松的作用
目的 评价不同剂量植物雌激素染料木黄酮与钙、维生素D3联合应用预防卵巢切除小鼠骨质疏松的作用.方法 63只平均体重29g CD-1雌性小鼠随机分为7组,包括Sham组、卵巢切除(OVX)组、OVX给药组分为碳酸钙、维生素D3联合染料木黄酮的高剂量组( GH 67mg/kg)、中剂量组(GM 33.5mg/kg)、低剂量组( GL 16.75mg/kg)3组以及单纯染料木黄酮组、雌激素组(E2).给药6用,测定小鼠骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC)、骨生物力学和骨代谢生化指标.结果 GH、GM、GL组对卵巢切除小鼠的子宫有刺激生长作用,其中GL组作用小.GM组明显增加卵巢切除小鼠的BMD、BMC和股骨长度、股骨宽度,GL组明显增加卵巢切除小鼠的BMD(P ＜0.01).GL组对卵巢切除小鼠的股骨大载荷和大应力升高显著(P＜0.01).GL组骨碱性磷酸酶(BALP)明显升高、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)显著降低(P＜0.01).结论 低剂量植物雌激素染料木黄酮与钙、维生素D3联合应用对卵巢切除小鼠的刺激子宫生长作用小.低剂量植物雌激素染料木黄酮与钙、维生素D3联合应用增加BMD,改善骨生物力学参数,促进骨形成和抑制骨吸收,降低了染料木黄酮的用量,并且较雌激素安全.
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染料木黄酮对人甲状腺鳞癌SW579细胞增殖、侵袭等的影响
目的 探讨染料木黄酮对人甲状腺鳞癌SW579细胞增殖、粘附、侵袭、迁移能力的影响及其机制.方法 利用MTT法检测不同浓度的染料木黄酮对SW579细胞增殖的影响;分别采用粘附、侵袭、迁移实验观察染料木黄酮作用后与肿瘤转移相关的细胞粘附、侵袭及迁移能力的变化;实时荧光定量PCR检测染料木黄酮对SW579细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2) mRNA水平的影响.结果 与对照组相比,染料木黄酮对SW579细胞有促进增殖的作用,而对SW579细胞的粘附、侵袭、迁移和mRNA表达具有抑制作用.结论 40、80和160μmoL/L染料木黄酮均可抑制SW579细胞的侵袭迁移能力,其作用机制可能与其抑制MMP-2基因的表达有关.
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染料木黄酮对去势大鼠骨密度、生物力学和形态学参数的影响
目的研究染料木黄酮对去势大鼠骨密度、生物力学和形态学参数的影响.方法将47只雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、去势对照组、去势+雌激素组(己烯雌酚每天20μg/kg BW)、去势+染料木黄酮组(剂量分别为每天25、50、100mg/kg BW).饲养3个月后处死,测定骨密度、生物力学参数和形态学参数.结果去势后大鼠骨小梁体积减少,平均骨小梁板密度降低,平均骨小梁板间隙增加,股骨骨密度降低,与假手术组相比均有显著性差异(P＜0.05),但大应力只有降低的趋势.补充染料木黄酮后,骨小梁体积增加,平均骨小梁板厚度和密度增大;股骨骨密度和大应力有改善的趋势.结论染料木黄酮可以减少去势大鼠骨量的丢失,预防骨质疏松的发生.
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染料木黄酮对大鼠异位子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1表达的影响
目的:探讨染料木黄酮(GEN)对患子宫内膜异位症(EMs)大鼠的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达水平的影响.方法:将68只Wistar大鼠分为正常组(A组,n=8)和EMs组(n=60),EMs组通过手术方法建立大鼠EMs模型,3周后测量移植物体积.EMs组大鼠随机分为4亚组:模型组(B组)和GEN低剂量组(C组,0.5mg/kg)、GEN中剂量组(D组,5mg/kg)、GEN高剂量组(E组,50mg/kg),连续皮下注射药物84d后处死大鼠,测量移植物体积、观察其组织学结构,并采用免疫组化法观察异位内膜组织中MMP -9、TIMP -1的表达.结果:与治疗前比较,E组移植物体积明显缩小(P＜0.01),而C组和D组无差异；与A组比较,B组MMP -9表达率明显升高(P＜0.05),TIMP-1表达率明显降低(P＜0.01)；与B组比较,E组MMP -9表达率明显降低,TIMP-1表达率明显升高(P＜0.05),C组和D组无差异.结论:GEN可抑制大鼠EMs模型中异位内膜的生长,其抑制作用可能与MMP -9表达下降和TIMP -1表达升高,平衡MMP -9和TIMP -1的表达比例有关.
关键词： 染料木黄酮 子宫内膜异位症 大鼠 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制因子-1 -
染料木黄酮对β淀粉样肽介导的脑血管内皮细胞损伤的保护作用研究
目的 研究染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的脑血管内皮细胞损伤的调节作用.方法 脑血管内皮细胞(bEnd.3细胞系)传代48 h后,分为4组(对照组、Aβ组、Gen组、Gen+ Aβ组).Gen预处理2h后,Aβ25-35染毒建立细胞损伤模型;24 h后收集细胞进行指标检测.采用ELISA法检测脑血管内皮细胞8-OHdG水平;酶法试剂盒检测GSH-Px水平;RT-PCR和Western blot法检测Bcl-2、Bax基因和蛋白表达的改变.结果 与对照组比较,Aβ组8-OHdG水平明显升高,GSH-Px活性明显下降,且差异均有统计学意义(P＜0.05);与Aβ组比较,Gen组和Gen+ Aβ组8-OHdG水平明显下降,GSH-Px活性明显升高,且差异均有统计学意义(P＜0.05);同时,Aβ组Bcl-2基因和蛋白表达水平较对照组明显下调,Bax基因和蛋白表达水平明显上调,且差异均有统计学意义(P＜0.05);与Aβ组比较,Gen+ Aβ组和Gen组Bcl-2基因和蛋白表达水平明显上调,Bax基因和蛋白表达水平明显下调,且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Gen可能通过拮抗Aβ25-35介导的脑血管内皮细胞氧化损伤,进而发挥对脑血管的保护作用.
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染料木黄酮对β淀粉样肽25-35介导的PC12细胞凋亡过程相关基因表达的影响
目的 研究不同剂量的染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨了可能的分子调控机制.方法 PC12细胞传代培养48 h后,选取生长良好的同批次细胞,随机分为5组,即对照组、Aβ模型组(20 μmol/L),Gen干预组(25,50和100 μmol/L),Gen预处理2h后,经Aβ25-35染毒,建立细胞损伤模型;24 h后,收集细胞,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PC12细胞caspase-3,caspase-9,bcl-xl,bad和LRP5基因的表达.结果 与对照组相比,Aβ组细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达上调,其差异具有统计学意义(P <0.05),bcl-xl,LRP5 mRNA表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与Aβ组相比,Gen高剂量组可显著下调PC12细胞caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达(P <0.05);Gen高剂量组可显著上调bcl-xl,LRP5 mRNA,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Gen可能是通过下调细胞凋亡促进基因caspase-3,caspase-9和bad mRNA表达,上调细胞凋亡抑制基因bcl-xl,LRP5 mRNA表达,拮抗Aβ诱导的神经细胞凋亡,从而发挥神经细胞保护作用.
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染料木黄酮对星形胶质细胞氧化损伤中Nrf2/ARE通路相关因子表达的调节作用
目的 研究染料木黄酮(Gen)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)介导的星形胶质细胞氧化损伤中Nrf2/ARE通路相关因子的调节作用.方法 以星形胶质细胞(C6细胞系)作为研究对象,用Aβ25-35染毒制备氧化损伤模型.实验共分4组:对照组、Aβ组(Aβ模型组)、Gen干预组(Gen+ AB组)及Gen组(Gen单独处理组)；采用RT-PCR方法和Western Blot方法检测星形胶质细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因和蛋白的表达.结果 与Aβ组比较,Gen干预组和Gen组星形胶质细胞Nrf2、HO-1、GCLC及MnSOD基因和蛋白表达水平显著上调(P＜0.05).结论 染料木黄酮可能通过调控Nrf2/ARE通路来拮抗Aβ325-35介导的星形胶质细胞氧化损伤作用.
关键词： 染料木黄酮 β淀粉样肽25-35 Nrf2/ARE通路 星形胶质细胞 基因表达 调节 -
染料木黄酮对小鼠卵母细胞成熟的抑制作用
目的 探讨染料木黄酮(GEN)对小鼠卵母细胞成熟的影响.方法 以小鼠为实验动物,随机分为4组,分别给予不同剂量(0、0.5、5.0、50.0mg/kg BW)的GEN处理7d,观察GEN对小鼠促排卵和生殖激素水平[雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)]的影响;同时,进行体外培养试验,用不同浓度的GEN处理体外培养卵丘-卵母细胞复合物(COCs)和裸卵(DOs),观察GEN是否抑制卵母细胞的减数分裂成熟过程.结果 GEN处理可降低小鼠促排卵数,但对机体生殖激素(包括E2、FSH和LH)水平无影响;体外培养过程中,GEN可抑制COCs中卵细胞的减数分裂成熟过程,但对DOs的成熟过程无明显影响.结论 GEN可干扰小鼠卵母细胞的成熟过程,其作用机制可能是发生在卵巢中.
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染料木黄酮的雌性生殖毒性及其对卵母细胞成熟的影响
染料木黄酮(GEN)是一种植物雌激素,属大豆异黄酮,由染料木苷经肠道细菌和肠细胞酶代谢活化而形成,具有内分泌干扰作用.其生殖毒性引起国内外学者的广泛关注,过量摄入GEN可引起动物(包括雌性与雄性)生殖系统结构与功能异常,但GEN的雌性生殖毒性作用机制尚不清楚.卵母细胞是维持正常雌性生殖的生理基础,是外源性化学毒性作用的潜在靶点.有研究表明,染料木黄酮可干扰哺乳动物卵母细胞的成熟过程,这可能是染料木黄酮生殖毒性的作用机制之一.不过,目前GEN影响卵母细胞成熟的机制尚不明确,有待进一步阐明.
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染料木黄酮抗辐射作用的研究进展
染料木黄酮(Genistein,Gen)是大豆异黄酮的主要成分之一,化学名称为5,7,4'-三羟异黄酮,生物学作用非常广泛,因此受到普遍关注.电离辐射可诱发自由基,造成组织损伤.
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染料木黄酮和叶酸对β淀粉样肽31-35诱导的细胞及线粒体膜损伤的拮抗作用
目的 探讨染料木黄酮(Gen)和叶酸(FA)对β淀粉样肽31-35(Aβ31-35)诱导的神经细胞膜及线粒体膜损伤的拮抗作用.方法 按照简单随机抽样的方法,将原代培养的大鼠大脑皮质神经细胞分为5组,即对照组、Aβ31-35(25μmol/L)、Gen(27μg/ml)、FA(40μg/ml)及Gen和FA(Gen 27μg/ml+FA 40μg/ml)联合干预组.各干预组预先在培养液中加入Gen和(或)FA,2 h后加入Aβ31-35,继续培养24 h后收集细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞的活性、荧光偏振法检测细胞膜流动性、激光扫描共聚焦显微镜(LCM)检测线粒体膜电位和流式细胞术(FCM)检测线粒体膜通透性转运作用.每个实验至少重复3次.结果 Gen组、FA组和Gen+FA组的A570值分别为0.982±0.110、0.947±0.061和0.996±0.090,与Aβ31-35组相比差异有统计学意义(t值分别为3.523、2.745和3.966,P值均＜0.01).细胞膜的黏度值与Aβ31-35组相比,Gen组(1.75±0.28,t=2.085,P＜0.05)和FA(1.66±0.37,t=2.357,P＜0.05)单独或联合(1.50±0.20,t=3.784,P＜0.05)干预后,细胞膜的黏度值显著降低,差异有统计学意义,表示细胞膜流动性升高.线粒体膜电位结果显示,Gen、FA与Gen+FA联合干预后,线粒体膜电位(荧光强度差值依次为5.286±1.792,5.884±2.022,6.120±2.124)比Aβ31-35组(3.364±1.140,F=7.585,P＜0.01;t值分别为:2.406、2.887、3.040,P值均＜0.01)显著增高.流式实验结果显示,经Aβ处理神经细胞的线粒体通透性转运孔(MPTP)开放,而此现象可经Gen和FA的干预有效逆转.结论 Gen和(或)FA对Aβ31-35引起的神经细胞膜及线粒体膜损伤具有拮抗作用.
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几种植物雌激素对细胞间隙连接通讯的影响
目的了解植物雌激素对细胞的细胞间隙连接通讯(GJIC)的影响.方法用荧光漂白后恢复技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察典型的植物雌激素(槲皮素、染料木黄酮、拟雌内醇和肠内脂)对正常人皮肤角质形成细胞株(HaCaT细胞)GJIC的影响.结果不同种类的植物雌激素在不同浓度下对GJIC的影响不完全相同.槲皮素在0.1～10.0 μmol/L浓度下对HaCaT细胞的GJIC功能无明显影响.染料木黄酮、拟雌内醇和肠内脂在0.1～10.0 μmol/L浓度下,能不同程度地抑制GJIC功能,荧光恢复率为31.77%～37.06%,显著低于溶剂对照组(44.74%).结论除黄酮类槲皮素外,常见的植物雌激素(染料木黄酮、拟雌内醇和肠内脂)在人体可能达到的血清浓度下,对HaCaT细胞的GJIC功能都有不同程度的抑制,提示在一定条件下可能有促癌作用.因此,将其用作药品或保健食品时应该慎重.
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染料木素对人胚皮肤成纤维细胞胶原、基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制剂mRNA表达的影响
目的：探讨染料木素对人胚皮肤成纤维细胞(CCC-ESF-1)胶原(collagen, Col)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase, TIMP)mRNA表达的影响。方法体外培养的CCC-ESF-1细胞按随机数字表法分为空白对照组、雌二醇组以及染料木素小、中、大剂量组。采用MTT法检测细胞活力，RT-PCR技术检测ColⅠ、ColⅢ、MMP-1、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达。结果与空白对照组比较，雌二醇组、染料木素中剂量组[(0.451±0.037)、(0.446±0.047)比(0.385±0.061)]均可促进CCC-ESF-1细胞增殖(P均＜0.05)，且雌二醇组、染料木素中剂量组细胞 ColⅠ[(0.960±0.012)、(0.929±0.015)比(0.812±0.014)]，Col Ⅲ[(0.892±0.009)、(0.824±0.022)比(0.768±0.025)]、TIMP-1[(0.841±0.023)、(0.838±0.053)比(0.751±0.027)]、TIMP-2[(0.456±0.017)、(0.448±0.036)比(0.381±0.029)]mRNA 水平较空白组增高(P 均＜0.01)，MMP-1[(0.398±0.043)、(0.402±0.044)比(0.525±0.006)]mRNA水平较空白组降低(P均＜0.01)。结论染料木素可促进 CCC-ESF-1细胞增殖，可能与上调 ColⅠ、Col Ⅲ、MMP-1、TIMP-1、TIMP-2以及下调MMP-1有关。
关键词： 成纤维细胞 染料木黄酮 胶原 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶抑制物 -
染料木黄酮治疗绝经期女性中重度干眼临床初探
目的:研究染料木黄酮治疗绝经期女性中重度干眼的临床效果.方法:72例中重度干眼绝经期女性患者使用染料木黄酮加用羟糖甘滴眼液滴眼治疗；分别在治疗前和治疗后3、7、28d各时间点检测并评定患者干眼主观症状、视力、泪膜情况,治疗前后均进行方差分析和样本均数或中位数差值分析.结果:治疗28d后,患者的样本均数差值[1.16(视疲劳)、1.33(干涩感)、0.82(异物感)、1.36(烧灼感)、1.16(畏光)、1.52(疼痛)、1.54(眼红)]均较治疗前明显改善(P＜0.05).患者的各检测指标样本中位数差值[0.30(视力)、5.00(Fl染色)、5.00(泪膜破裂时间)、5.00(基础泪液分液实验)]均较治疗前明显改善(P＜0.05).结论:染料木黄酮可明显减轻中重度绝经期干眼女性的症状和体征,具有一定的临床意义.
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染料木黄酮对人卵巢癌裸鼠移植瘤影响的实验研究
目的:探讨植物雌激素染料木黄酮对人卵巢癌HO-8910PM细胞裸鼠移植瘤的影响.方法:体外培养人卵巢癌HO-8910PM细胞,裸鼠皮下接种HO-8910PM细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为对照组和3个染料木黄酮治疗组,治疗组分别给予5,25,50 mg·kg-1染料木黄酮.治疗4周后,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率,免疫组化技术检测凋亡基因bcl-2,Fas,FasL蛋白的表达情况,并通过电镜进行形态学观察.结果:50 mg·kg-1染料木黄酮治疗组裸鼠移植瘤明显小于对照组,肿瘤细胞G0-G1期比例升高明显,S期细胞比例显著降低(P＜0.01),移植瘤细胞凋亡率为(15.14±2.27)%,明显高于对照组(3.12±1.12)%(P＜0.01);移植瘤细胞bcl-2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P＜0.05).电镜观察50 mg·kg-1染料木黄酮治疗组可见凋亡细胞明显增多.结论:染料木黄酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制卵巢癌细胞增殖,诱导细胞凋亡.
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淫羊藿苷促成骨细胞分化成熟主要不依赖其雌激素活性
目的:利用人乳腺癌细胞MCF-7检测淫羊藿苷(icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)雌激素样活性的大小.方法:MCF-7细胞系采用无酚红DMEM培养基(含5％活性炭吸附处理血清CS-FBS)培养48 h后,利用CCK-8试剂盒检测不同浓度的I和G对体外培养MCF-7增殖的影响,筛选出佳药物浓度;以佳浓度的I和G处理细胞12,24,36,48 h后提取总RNA,Real-time RT-PCR检测I和G对MCF-7细胞雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、雌激素调节蛋白(PS2)、孕激素受体(PR) mRNA表达水平的影响;以佳浓度的I和G处理MCF-7细胞48 h后,Western blot检测G和I对MCF-7细胞ERα,ERβ,PS2,PR蛋白表达量的影响.结果:I和G均能显著促进MCF-7的增殖,其中佳的I和G作用浓度为10 μmol·L-1,并且在该浓度下G促MCF-7增殖的能力明显高于I;I和G作用MCF-7细胞24,36 h后,10μmol·L-1的I和G均能显著促进ERα,ER,PS2,PR mRNA表达水平,其中G促进ERα,PS2,PR mRNA表达的能力明显强于I,对于ERβ mRNA的表达两者没有显著性差异;Western blot检测结果表明,10 μmol·L-1的I和G均能促进ERα,ERβ,PS2,PR蛋白的表达,其中G促进ERα,PS2,PR蛋白表达的能力明显强于I,对于ERβ蛋白的表达两者没有显著性差异.结论:10 μmol·L-1的G和I都具有较强的雌激素活性,但是该浓度下G的雌激素活性明显高于I,而本课题组前期研究表明,I在促进成骨细胞分化成熟及生物矿化的药理学活性明显强于G,因此I促成骨细胞分化成熟主要不是依赖其雌激素活性.
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淫羊藿苷与染料木黄酮对体外培养成骨细胞增殖及矿化成熟影响的对比研究
目的:对比研究淫羊藿苷( icariin,I)与染料木黄酮(genistein,G)对体外培养大鼠成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响及其药理活性的强弱.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养子含10％ FBS的MEM培养液中,3d后首次换液,铺满90％皿底后传代培养；I与G的作用终浓度为1×10-5 mol·L-1,增殖分析采用96孔板,MTT法分析；分化成熟分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3,6,9,12天分别测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色、茜素红染色和钙化结节计数；于成骨性诱导培养0,6,12,24,48,72 h提取总RNA,Real-time RT-PCR法检测Runx-2,bFGF,IGF-I,Osterix( OSX)等成骨性相关因子的表达情况.结果:终浓度为1×10-5 mol·L-1的I与G均不促进ROB的增殖,均能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量；同时上调Runx-2,bFGF,IGF-I和Osterix等成骨性相关因子的表达量；在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性明显强于G的活性.结论:1×10-5 mol·L-1的I与G均能促进ROB矿化成熟,均有抗骨质疏松的作用,但在成骨细胞水平上I促进ROB矿化成熟的药理学活性显著强于G.
