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食品工业用菌的病原性研究
为研究食品工业用真菌的致病性,将不同浓度的米曲霉和黑曲霉孢子经小鼠尾静脉注射,观察14 d内动物出现的中毒症状、死亡和体重变化,实验终结时测定脑、肝、肾、脾中的生存菌数,同时作病理组织学检查.结果表明,2个菌种对小鼠造成的主要损害为肾脏化脓性病变,1×105以上剂量组小鼠2个以上脏器同时检出活菌.米曲霉1×105以上剂量组动物出现了中毒症状和死亡,黑曲霉实验组动物未见中毒和死亡.致病性随染孢子量的增加而加重,呈正剂量-反应关系.本研究为完善我国食品工业用菌安全性评价体系提供了依据.
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酶联免疫吸附法检测血清半乳甘露聚糖用于侵袭性曲霉菌感染早期诊断的实验研究
国外学者通过对血清和尿液中曲霉菌半乳甘露聚糖(galactomannan ,GM)抗原的检测,发现其对侵袭性曲霉病(IA)的早期诊断有较重要价值[1,2].我们建立了IA兔模型,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测感染后动物血清中GM的含量,通过与传统的血培养比较,评价ELISA检测GM在诊断IA中的价值.
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实验大鼠侵袭性肺曲霉病早期诊断的研究
目的建立高效液相色谱技术(HPLC)检测(1-3)-β-D-葡聚糖的方法, 并与巢式聚合酶链反应(PCR)方法进行比较,评价其在实验大鼠侵袭性肺曲霉病(IPA)早期诊断中的意义.方法将烟曲霉孢子注入实验大鼠左肺以制作IPA模型;采集各组实验大鼠血样及脏器标本,进行巢式PCR、HPLC及培养方法的检测.结果 HPLC检测(1-3)-β-D-葡聚糖低检测限度为1~2 pg/ml,临界值为15 pg/ml.模型组检测值和阳性率均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.01);随感染时间延长检测值和阳性率逐渐上升,各组差异有统计学意义(P<0.01);感染死亡大鼠血液标本的检测值与死亡时间呈负相关关系,其相关系数r为-0.949(P<0.01).1周内HPLC方法敏感度(77.8%)和特异度(91.7%)均较巢式PCR高,但差异无统计学意义(P>0.05),两者敏感度均高于血培养,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 HPLC 检测大鼠血中(1~3)-β-D-葡聚糖浓度,在早期预测大鼠肺曲霉感染的发生、发展及预后判断方面明显优于传统的血培养,也要优于巢式PCR方法.
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侵袭性曲霉病的诊断进展
侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)的发病率近年来逐年上升,尤其是在某些免疫受损人群中.研究显示,IA的发病率在急性白血病患者中为5%~25%,在异体骨髓移植患者中为5%~10%,在血液病接受化疗或自体骨髓移植患者中为0.5%~5.0%.
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抗真菌药物敏感性试验及其意义
随着高效广谱抗生素的广泛应用,抗肿瘤治疗的深入开展,器官移植和外科其他介入性治疗的不断实施,皮质类固醇激素的广泛应用,以及AIDS患者的不断增多,侵袭性真菌感染呈现上升趋势,且病情严重,念珠菌已经成为引起血行感染的第4位的病原菌,侵袭性曲霉病已经成为白血病和骨髓移植受者等重症免疫受损、机体发生死亡的主要原因[1-2].
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侵袭性曲霉菌感染的诊断治疗进展
侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)主要发生在免疫受损人群,如急性白血病、骨髓干细胞移植、实体器官移植、恶性肿瘤化疗等患者.近年来的流行病学观察表明,IA患者的发病率有逐年增多趋势,在尸解病例中超过了念珠菌感染.本病的病死率很高,在56%~88.1%之间.早期诊断后应用抗真菌药物治疗可以显著改善患者预后.
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血清半乳甘露聚糖检测诊断侵袭性肺曲霉病的实验研究
目的 评价血清半乳甘露聚糖(GM)检测对侵袭性肺曲霉病(IPA)的诊断价值.方法 清洁级健康成年SD大鼠90只,按随机区组设计分为烟曲霉感染组、白假丝酵母菌感染组、毛霉感染组、肺炎链球菌感染组、烟曲霉口咽定植组,每组18只.气管插管滴入法建立大鼠侵袭性肺部真菌感染和细菌感染动物模型.经鼻腔和口咽滴入法建立烟曲霉口咽定植动物模型.分别于接种完成后第3天、第7天、第12天处死大鼠,取心脏血,采用Platelia Aspergillus(法国Bio-Rad公司)试剂盒检测血清GM,取肺组织行组织病理学检查.多组间比较采用单因素方差分析,实验数据经SPSS统计软件处理.结果 除曲霉定植组外,光镜下各组大鼠肺组织均见明显炎症反应,真菌感染大鼠在肺组织中可见真菌菌丝或孢子.烟曲霉、白假丝酵母菌、毛霉、肺炎链球菌感染组和烟曲霉口咽定植组大鼠血清GM的吸光度指数均值分别为1.69±0.29、0.89±0.46、0.87±0.39、0.77±0.34和0.90±0.49,烟曲霉感染组与其他4组分别比较,差异明显.以吸光度指数为1.5作为诊断阈值诊断IPA的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为78.6%、87.5%、57.9%和94.9%;以吸光度指数为1.5时,第3天、第7天和第12天血清GM检测诊断IPA的敏感性分别为60%、80%和100%.结论 GM检测可区分IPA与白假丝酵母菌感染、毛霉感染、肺炎链球菌感染和烟曲霉口咽定植;GM检测诊断IPA的敏感性随感染时间的延长而增加;以吸光度指数为1.5作为诊断阈值诊断IPA的敏感性、特异性较理想.
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慢性坏死性肺曲霉病的诊断与治疗
目的探讨慢性坏死性肺曲霉病(CNPA)的诊断与治疗.方法本研究包括8例2000年至2004年间在浙江大学医学院附属第一医院经病理证实的慢性坏死性肺曲霉病住院病例,结合文献分析其临床表现、影像学、诊断和治疗方法.结果 CNPA是少见的一种肺曲霉病.常见的症状是咳嗽、咳痰(8/8)、咯血(7/8)和全身中毒症状(5/8)."空气新月征"有提示性诊断意义,在本组共发现4例,实变阴影也较为多见(5/8).CNPA的病理特点是肺组织内曲霉菌丝侵袭、组织坏死和肉芽形成.结论 CNPA的临床表现无特异性,影像学检查在其诊断中起重要作用,其诊断需要病理依据支持.所有CNPA患者都需要系统抗真菌药物治疗,对于病程迁延和反复咯血者可以考虑手术切除.
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免疫功能正常宿主发生侵袭性曲霉病二例
侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)多见于免疫缺陷或有严重基础疾病的患者.现报道2例经病理和(或)组织培养方法确诊的无基础疾病且常规免疫功能检查正常的IA病例.
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变态反应性支气管肺烟曲霉病合并变应性肉芽肿性血管炎一例
患者女,40岁,因"反复咳嗽、咳痰伴胸闷气急6年余"于2010年1月8日入院.患者6年前无明显诱因出现咳嗽、咳痰,伴有鼻塞.痰为脓性,呈污浊褐色,量较多,严重时伴少量咯血.经常伴有胸闷气急,严重时不能平臥.患者曾在外院被诊断为"支气管哮喘",给予平喘药物治疗后症状可以缓解,但停药后症状反复发作.4年前咯血量增多,经X线胸片检查后诊断为"肺结核",给予标准抗结核方案治疗7个月后停药,但患者仍时有咯血.
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深部真菌感染:新的挑战与展望
大自然中有真菌30余万种,引起人类疾病的致病真菌及条件致病真菌有280余种.近30年来,人类生活的显著变革创造了真菌感染的机会,随着社会的老龄化、广谱抗生素、抗肿瘤药、免疫抑制剂、介入治疗的广泛应用,器官移植的大量开展,尤其是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的流行,急性侵袭性真菌感染明显增多,而频繁的城市改建或许正是曲霉流行的重要因素之一[1].美国学者报道:1980至1982年与1992至1993年相比,念珠菌病发病率由每年2.6/100万增至72.8/100万,隐球菌病由4.0/100万增至65.5/100万,曲霉病由8.4/100万增至12.4/100万[2].北京协和医院1953至1993年间3 447例尸检结果显示,后20年深部真菌感染率由1.5%增至5.6%[3].据我国医院感染监控网分析,医院真菌感染率从1993至1996年的13.9%上升至1998至1999年的17.1%,1999至2000年的24.4%.侵袭性真菌病多发生在有严重基础疾病的患者,预后差,病死率高,念珠菌病病死率30%~40%,曲霉病病死率高达50%~100%.
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侵袭性肺曲霉菌病8例临床分析
目的 总结侵袭性肺曲霉菌病(IPA)的临床特点,以利早期诊断.方法 回顾性分析2006年4月至2006年12月解放军总医院呼吸科确诊的8例IPA患者的临床资料.结果 本组病例全部经病理诊断为IPA.6/8的患者出现发热症状;1/2的患者具有"新月征"、"气环征"的CT表现;7/8的患者有病灶内空洞或空腔形成;1/2患者痰培养曲霉菌阳性,1/4的患者在病理诊断前痰培养阳性;本组入院前初次诊断正确率为0;本组1例系统性曲霉菌病患者死亡,7例经治疗好转出院. 结论 IPA的临床症状缺乏特异性,早期具有典型CT表现者较少,痰培养曲霉菌阳性率低,这些原因容易造成早期误诊.因此应关注有基础疾病的患者,对于新发肺部阴影者警惕IPA的可能,对可以耐受经皮肺穿刺或气管镜者,通过尽早病理检查等措施可提高早期诊断率.
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血清半乳甘露聚糖检测血液病患者侵袭性曲霉菌病的价值
目的 侵袭性曲霉菌病(IA)在血液病患者发病逐年增多,且伴随很高的病死率.本研究旨在评价血清半乳甘露聚糖(GM)抗原检测作为早期诊断和评价IA疗效的价值.方法 81例中性粒细胞减少伴发热(T>38.5℃),经广谱抗生素治疗无效的血液病患者被纳入研究.每周采集患者血液标本2次,共测定标本302份.GM检测采用双夹心酶联免疫吸附法,GM实验阳性定义为连续2次不同时点检测,A值>1.5.对GM实验阳性的患者给予两性霉素B或伊曲康唑抢先抗曲霉治疗.结果 81例患者中27例GM实验阳性(33.0%),其中11例临床确诊IA,GM实验在该11例中检出7例阳性(敏感性63.6%),14患者临床排除IA,GM实验在该14例中检出12例阴性(特异性85.7%),同时GM实验显示可早于真菌培养结果3~30 d预测曲霉感染.27例GM实验阳性患者中,19例完成针对曲霉的抢先治疗,12例有效,7例无效死亡,病死率为36.8%.治疗有效组GM值下降到正常,治疗无效组GM值反而上升(P<0.0005).结论 研究提示:血清GM抗原检测用于早期诊断IA是一种有效的方法,在高危血液病患者以GM实验阳性为起点抢先抗曲霉治疗可降低IA病死率,监测GM值的动态变化具有评价疗效的价值.
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常用抗菌药物对血清半乳甘露聚糖检测结果的影响
近年来侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)在临床上的发病率逐年增高.随着抗肿瘤治疗力度加强和器官移植的开展等,侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)的发生率明显增高.国际上ELISA法血清半乳甘露聚糖(GM)检测诊断正日益成为IA的重要辅助诊断手段,该检测方法的假阳性问题也逐渐得到重视,在我们对IA高危患者进行血清GM抗原监测过程中也发现了数例假阳性结果,且与某些抗菌药物的使用有关.为此,特予进一步研究.
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伊曲康唑注射液和口服液序贯治疗脑曲霉病二例
脑曲霉病因其病情严重、诊断困难、治疗棘手,而给临床诊治带来极大困难,我们首次尝试采用伊曲康唑注射液、口服液序贯治疗2例脑曲霉病并获成功,现报道如下.
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肝移植术后肺曲霉菌感染的诊治
目的探讨肝移植术后肺曲霉菌感染的诊治方法. 方法肝移植术后患者常规进行痰培养,应用二性霉素B、伊曲康唑和氟康唑等抗真菌药物治疗,回顾性分析了3例肺部曲霉菌感染患者的诊治经过. 结果 54例肝移植患者有3例发生肺曲霉菌感染,治愈1例,死亡2例. 结论(1)过度免疫抑制是导致肺曲霉素感染的重要因素.(2) 二性霉素B治疗肺曲霉菌感染有效.(3)为降低二性霉素B的毒副作用和增强疗效,治疗方法上可采用渐进性给药、间断性给药、低浓度给药、联合给药,真菌培养阴性后用伊曲康唑巩固治疗2~3周.
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肺移植术后曲霉菌感染(附4例报告和文献复习)
目的探讨肺移植术后曲霉菌感染的预防、监测和治疗方法.方法 2003年1月至2004年9月,6例重度肺气肿病人成功实行同种异体单肺移植术,其中4例术后痰培养发现曲霉菌.结果 2例临床上无肺部感染症状,口服伊曲康唑治疗近2个月.1例术后1个月纤维支气管镜提示支气管吻合口局部侧壁软化、狭窄,被坏死组织覆盖,活检找到霉菌,置入镍钛网状支架后症状改善.另1例术后并发自体肺严重曲霉菌浸润性肺部感染,咳出桔红色痰,量多达180ml/d.X线胸片提示有空洞表现,经伊曲康唑静脉注射和应用两性霉素B雾化吸入治疗6周后,症状消失、X线胸片空洞关闭而治愈.结论应用伊曲康唑和两性霉素B雾化吸入,对肺移植术后早期曲霉菌感染的预防和治疗都是有效的.
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慢性重型病毒性肝炎合并曲霉病的临床分析
目的 探讨慢性重型病毒性肝炎合并曲霉菌属感染的临床特点、易感因素及防治措施.方法回顾性分析3例慢性重型病毒性肝炎合并曲霉菌属感染患者的临床表现及诊治经过.结果 23例慢性重型病毒性肝炎合并真菌感染患者中,有3例合并曲霉菌属感染;易感因素为机体抵抗力差、抗菌药物的不合理使用及侵入性操作,3例患者均死亡.结论 慢性重型病毒性肝炎合并曲霉菌属感染预后差,主要的防治措施是积极治疗原发病、合理使用抗菌药物、减少或避免侵袭性操作以及注意定期空气消毒.
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伏立康唑治疗改善中枢神经系统曲霉病患者的预后
中枢神经系统曲霉病的死亡率接近100%,治疗效果急需改进.伏立康唑治疗侵袭性曲霉病的有效率和生存率都显著优于两性霉素B,而且,与其他抗真菌药相比,伏立康唑也能更好地穿透血脑屏障,进入中枢神经系统.我们回顾性地评价了81例使用伏立康唑治疗的确诊(n=48)或疑诊(n=33)为中枢神经系统曲霉病患者的预后和生存率,完全和部分反应率为35%,不同疾病组反应率有差异:血液系统恶性肿瘤54%,其他疾病50%,长期免疫抑制45%,实体器官移植36%,造血干细胞移植16%.
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抗真菌药伏立康唑
伏立康唑(voriconazole,商品名Vfend),于2002年9月在英国上市[1],是一种结构上与氟康唑相似、抗菌作用谱与伊曲康唑相似的三唑类抗真菌药,主要用于治疗侵袭性曲霉病及尖端足分支霉菌引起的顽固性感染.对于深部真菌感染,伏立康唑在安全性及有效性方面优于两性霉素B.