中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用
PAT家族蛋白包括perilipin、adipophilin、TIP47、S3-12和OXPAT 5种蛋白.研究发现这些蛋白定位于脂滴表面,介导脂质代谢,并与肥胖症、糖尿病等脂代谢疾病相关.RNA干扰是一种基因沉默技术,现已广泛应用到生物医药领域,若能通过此技术制备相关生物制剂调节脂质代谢,将为缓解甚至治疗脂代谢疾病提供新思路.本文旨在对RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用作一综述.
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生物发光技术在细菌生物被膜感染中的应用
细菌生物被膜感染难以根除,应用传统方法研究动物生物被膜感染需耗费大量动物且不能动态监测动物体内生物被膜发展情况,生物发光技术解决了这一难点.近年来,生物发光技术逐渐应用于细菌生物被膜感染研究中,展现了良好的发展前景.本文对细菌生物发光技术的机制、特点及近年来生物发光技术在生物被膜感染模型、抗菌药物有效性方面、指征移植材料上生物被膜易感性的应用做一综述.
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青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展
近年来的研究表明,青蒿琥酯具有抗肿瘤活性,能够明显抑制胃癌、食管癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤、骨髓瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制包括启动内源性线粒体凋亡途径,增高Bax、caspase-9及caspase-3蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达等.本文对青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡的作用及其机制进行综述.
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2种不同分子量玻璃酸钠对兔骨关节炎的疗效研究
目的 观察2种不同分子量玻璃酸钠对骨关节炎的治疗作用.方法 采用关节内注射木瓜蛋白酶构建兔膝骨关节炎模型,采用病理学研究,评价不同分子量玻璃酸钠对骨关节炎的治疗效果.结果 2种不同分子量玻璃酸钠对骨关节炎模型关节软骨和滑膜的病变均有不同程度的治疗作用;在注入木瓜蛋白治疗兔骨关节模型中,150万Da以下小分子量玻璃酸钠病理评分为(1.3±0.16),明显优于对照组的(0.10±0.03)、模型组的(2.8±0.17)、大分子组的(1.90±0.03)(P＜0.05),因此可以证明小分子量玻璃酸钠在治疗骨关节炎方面有更好的疗效.结论 玻璃酸钠治疗骨关节炎疗效确切,小分子量的玻璃酸钠(80 ～ 150万Da)在促进软骨组织修复、减少滑膜组织增生方面更显优势.
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地塞米松联合淀粉样β蛋白对大鼠海马组织损伤的实验研究
目的 探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)联合淀粉样β蛋白(amyloid β-protein,Aβ)对大鼠海马组织的损伤机制.方法 采用水迷宫方法检测DEX联合淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆的影响;采用MTT方法检测DEX联合Aβ蛋白对大鼠海马神经元活力的影响作用;采用彗星实验检测DEX联合Aβ蛋白对大鼠海马神经元中DNA的损伤程度.结果 与GC维持+DEX1组比较,GC维持+DEX1+ Aβ组第10天的逃避潜伏期和游泳距离均延长,差异具有统计学意义(P＜0.05).与GC维持+DEX5组比较,GC维持+ DEX5+ Aβ组第10天的逃避潜伏期显著延长,具有显著性差异(P＜0.01),第9、10天的游泳距离延长,差异具有统计学意义(P＜0.05);与GC维持+Aβ组比较,GC维持+DEX1+ Aβ组第10天的逃避潜伏期和游泳距离均延长,差异具有统计学意义(P＜0.05).与GC维持+Aβ组比较,GC维持+DEX5+ Aβ组第10天的逃避潜伏期显著延长,具有显著性差异(P＜0.01),并且第10天游泳距离延长,差异具有统计学意义(P＜0.05);与溶剂对照组比较,各浓度的DEX分别与不同浓度的Aβ合用时,均会使海马神经元的活力下降,且差异均具统计学意义(P＜0.05);DEX10+ Aβ5组分别与DEX10组和Aβ5组比较,均有较严重彗星拖尾现象,且均具有显著性差异(P＜0.01).结论 DEX与Aβ合用比单用DEX或Aβ对大鼠学习记忆力下降影响较大;DEX与Aβ合用从细胞水平上会降低海马神经元的活力,单用任何一种均无影响;DEX与Aβ合用会造成海马神经元中DNA损伤.
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CD137L在非小细胞肺癌增殖、迁移、侵袭中的作用及机制
目的 研究CD137L在非小细胞肺癌中的表达,及其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其可能的分子生物学机制.方法 通过体外构建CD137L高表达慢病毒载体[A549-TC-1(+)]及CD137L-RNA干涉慢病毒载体[A549-TC-1(-)]和空白载体(A549-control),分别转染肺癌A549细胞.采用Western blot检测3组细胞CD137L蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖情况;Matrigeltranswell小室侵袭实验研究肺癌细胞侵袭能力;ELISA方法检测细胞上清IL-6和IL-8的水平.结果 Western blot结果显示:与A549细胞相比,CD137L蛋白在A549-TC-1(+)细胞中表达明显增多,A549-TC-1(-)细胞中表达明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05),在转染A549-control中无明显变化,表明3种病毒载体可用于后续实验.MTT细胞增殖实验及Matrigel Transwell小室侵袭实验结果显示:与A549-control相比,A549-TC-1(+)细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显增强,A549-TC-1(-)细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显减弱,差异均有统计学意义(P＜0.05).ELISA检测结果显示:A549-TC-1(+)细胞中细胞因子IL-6、IL-8的水平明显高于A549-TC-1(-)细胞组和正常A549细胞组.结论 CD137L对非小细胞癌细胞的增殖、侵袭具有正性调节功能,其作用机制可能与促进IL-6、IL-8的分泌进而增强肿瘤的生长、增殖和侵袭能力有关.
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稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定
目的 探讨RNAi慢病毒载体对HepG2稳转细胞株增殖、迁移的影响.方法 感染实验分为4组:空白对照组(未经处理的HepG2细胞),阴性对照组(只感染pLVTHm空病毒),感染pLVTHm-STAT6-RNAi组,感染pLVTHm-STAT6-ORF组.运用病毒感染HepG2细胞获得稳定表达STAT6-ORF和STAT6-RNAi的细胞株,利用PCR和Western blot的方法检测稳定细胞株中STAT6的表达丰度.CCK-8法检测稳转细胞株的细胞活性及Transwell实验检测稳转细胞迁移能力变化.结果 通过TET的筛选,成功获得了STAT6-ORF以及STAT6-RNAi的HepG2稳定表达细胞株.与对照组细胞相比,过表达STAT6-ORF转染的细胞增殖快(F=4.279,P =0.021),迁移率高;而STAT6-RNAi转染后,细胞增殖缓慢,随培养时间延长及传代(HepG2传到第三代细胞绝大部分细胞已经死亡),细胞逐渐崩解、漂浮死亡,细胞活性显著降低(F=290.114,P＜0.001),迁移能力显著下降.结论 成功构建STAT6-RNAi和STAT6-ORF稳定株,为后期建立动物模型,体内验证STAT6的生物学功能奠定了物质基础.
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吡咯喹啉醌对兔骨关节炎关节软骨保护机制的研究
目的 研究吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)对兔骨关节炎关节软骨的保护机制.方法 6月龄日本大耳白兔36只为实验对象,随机分为实验组、对照组及伪手术组(每组12只).观察软骨大体形态并行软骨Pelletier JP评分;制备切片行HE染色,光镜下观察HE切片并按照Mankin评分表对其评分;行II型胶原免疫组化染色,光镜下观察II型胶原表达情况;行软骨细胞凋亡检测(TUNEL法),在光镜下观察软骨细胞凋亡情况;通过透射电镜观察软骨细胞线粒体形态和数目的改变.结果 实验组和对照组的Kellgren-Lawrance评分差异有显著性(P＜0.05);实验组电镜下软骨细胞线粒体数多于对照组.结论 关节腔内注射PQQ可保护软骨细胞,从而减轻关节软骨结构及功能的破坏,促进软骨的代谢和自身修复,防止关节软骨退变.吡咯喹啉醌可能是通过保护软骨细胞线粒体而发挥作用的.
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气道给氧对百草枯所致大鼠急性肺损伤的影响
目的 探讨不同浓度气道给氧对急性百草枯大鼠模型肺组织氧化应激相关指标的影响.方法 160只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、30％浓度的给氧组(C组)和50％浓度的给氧组(D组),每组40只.B、C、D组以50 mg/kg百草枯(稀释于1 mL生理盐水)一次性灌胃染毒造模1h后,C、D给氧组通过气道给予相应浓度氧治疗,6 h/d.A组和B组正常吸入空气.分别于第1、3、7、14、21天每组各取8只SD大鼠,麻醉后腹主动脉采血1 mL立即行血气分析及血LAC检查,随即放血处死.留取右肺测湿/干重比,选取3d右肺上叶组织用10％甲醛固定,用于病理组织学检查;左肺制成匀浆,用于检测肺组织匀浆的过氧化氢酶(CAT)活力和SOD水平.结果 HE染色结果显示C组淤血、水肿现象减弱程度为明显.与B组各时间点比较,C、D组组织匀浆中SOD和CAT的水平均有不同程度的升高,动脉血中PO2上调,PCO2、LACP下调,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);但C、D组比较差异无统计学意义.与B组各个时间点比较,C、D组肺部组织湿/干(W/D)比值均有不同程度的下调,差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).结论 气道给氧可减弱百草枯致大鼠急性肺损伤的氧化应激反应,对肺组织有一定的保护作用,以30％氧浓度效果较好.
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性激素通过IL-1/IL-1R通路促进原发性肝癌的机制研究
目的 探讨雌激素E2(estradiol,E2)对原发性肝癌发生发展的影响,及是否通过白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)/白细胞介素-1受体(interleukin-1 receptor,IL-1R)通路.方法 选取南方医科大学南方医院2013年1月～2014年6月接收的原发性肝癌男性患者作为观察组,同期接收的非原发性肝癌患者为正常对照组.采用ELISA法检测2组患者血清中的E2、IL-1β和VEGF浓度,Western blot法检测2组肝组织E2R和IL-1βR蛋白表达水平.结果 观察组患者血清中E2、IL-1β和血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)浓度均明显高于正常对照组,2组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);观察组肿瘤组织中E2R和IL-1βR蛋白表达水平均明显高于正常对照组,2组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 E2对原发性肝癌的发生发展具有促进作用,其作用机制可能是通过上调IL-1/IL-1βR通路,促进VEGF的表达,从而促进肿瘤血管的形成.
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SATB1在甲状腺癌中的表达及促进甲状腺癌侵袭能力的实验研究
目的 研究富含AT序列的特异结合蛋白1(special AT rich sequence binding protein 1,SATB1)对甲状腺癌细胞侵袭转移的影响,探讨SATB1促进甲状腺癌侵袭转移的分子机制.方法 构建针对SATB1基因的过表达质粒,转染甲状腺癌SW-579细胞,qRT-PCR和Western blotting方法测定转染效率及上皮细胞标志蛋白E-钙粘素(E-cadherin)和间质细胞标志蛋白波形蛋白(vimentin)的表达变化;qRT-PCR进一步检测转录因子Twist1和Snail1,基质金属蛋白酶MMP2和MMP9,以及炎性因子IL-6和IL-8的表达变化;倒置显微镜观察细胞形态改变;细胞创伤愈合实验及Transwell方法检测过表达SATB1后甲状腺癌细胞迁移、侵袭能力变化.Western blotting检测SATB1增强表达后Akt磷酸化表达变化,PI3K/Akt通路抑制剂LY294002处理细胞后观察过表达SATB1的SW579细胞迁移侵袭能力变化.结果 细胞迁移实验结果显示,过表达SATB1后每个视野下迁移细胞数(196±10)个,较对照组(107±12)个明显增加(P＜0.01);侵袭实验结果显示,过表达SATB1后穿过基质胶的细胞数(158±12)个,较对照组(86±15)个明显增加(P＜0.01).Western blotting结果显示转染SATB1后,在总Akt蛋白无改变的情况下,SW-579细胞磷酸化Akt(p-Akt)明显增加.而通过加入PI3 K/Akt通路抑制剂LY294002后,细胞迁移及侵袭能力明显减弱.结论 SATB1与甲状腺癌侵袭转移有关;其高表达具有促进甲状腺癌细胞上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用;PI3K/Akt信号通路可能参与了SATB1的促转移过程.
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玉米油对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠葡萄糖转运蛋白4 mRNA表达的影响
目的 通过检测玉米油对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠葡萄糖转运蛋白4 (glucose transporter 4,GLUT-4) mRNA表达的影响,研究玉米油改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用机制.方法 采用高脂高糖饲料及小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型.将造模成功的大鼠随机分为模型组、玉米油低剂量组(0.5 mg/kg)、玉米油高剂量组(1.0 mg/kg)和罗格列酮组,分别连续灌胃相应试剂.6周后,采用葡萄糖氧化酶法测定各组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平,RT-PCR法测定GLUT-4 mRNA表达.结果 与模型组相比,玉米油低剂量组和高剂量组大鼠血糖水平明显降低,GLUT-4 mRNA表达明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玉米油可通过增加2型糖尿病大鼠GLUT-4 mRNA的表达来改善胰岛素抵抗,从而使血糖降低.
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蛇床子素对大鼠肝癌动物模型肝细胞生物行为学特性及血管特征的影响
目的 探讨蛇床子素对二乙基亚硝胺致癌和Walker-256移植瘤Wistar大鼠的生物行为学特性及血管特征的影响.方法 选取造模成功的二乙基亚硝胺致癌和Walker-256移植瘤的Wistar大鼠各20只,前者均分为A组和C组,后者均分为B组和D组,A、B2组给予等体积的生理盐水灌胃,为对照组;C、D2组给予2.5μg/(g·d)蛇床子素灌胃,为治疗组.治疗4周后,对各组进行微血管直径的测量,肿瘤微血管密度的计数,肿瘤直径的测量,肿瘤分化程度评价以及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)的表达.结果 治疗4周后,C组肿瘤直径较A组明显降低(P＜0.01),D组肿瘤直径较B组有一定程度的降低(P＜0.05);C组较A组,D组较B组大鼠的门脉癌栓率均显著性降低(P＜0.01);2治疗组肿瘤细胞分化程度有一定程度的升高,但与对照组比较差异无统计学意义;微血管密度和微血管直径C组较A组,D组较B组均有一定程度的降低(P＜0.05).C组较A组,D组较B组肿瘤瘤块体积均明显降低(P＜0.01).A、B组血管内皮细胞VEGF呈现高表达状态,C、D组经过蛇床子素4周治疗后,血管内皮细胞VEGF的表达均明显降低.结论 蛇床子素可通过影响肝细胞癌生物行为学特性及血管特征而抑制2种肝癌实验动物模型肝癌的生长.
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丹参川芎嗪注射液对妊娠期高血压模型大鼠的疗效及胎盘细胞Cyclin B1和p21蛋白的影响
目的 探讨丹参川芎嗪注射液对妊娠期高血压大鼠模型的效果及对胎盘细胞CyclinB1、p21蛋白表达量的影响.方法 将64只孕鼠随机分为4组:正常妊娠大鼠作空白对照,妊娠高血压大鼠作阴性对照,硫酸镁治疗组作阳性对照,丹参川芎嗪注射液组为实验组;每组16只.妊娠14 d时,尾静脉注射亚硝基左旋精氛酸甲酯建立妊娠期高血压模型.从妊娠第14天开始给药,空白对照组及阴性对照组均给予与药物同剂量的生理盐水;阳性对照组及实验组给予硫酸镁及丹参川芎嗪注射液治疗,3d为一个给药疗程.通过大鼠套尾法测量血压,尾静脉取血法测定24 h尿蛋白,并观察各组妊娠大鼠所生新生鼠的身长、体重、死胎率、后肢畸形率和胎盘重量,并通过免疫蛋白印迹法测定各组大鼠胎盘细胞中CyclinB1、p21蛋白表达量.结果 与空白组相比,阴性对照组孕鼠尿蛋白及血压明显增加,新生鼠的身长、体重和胎盘重量均显著降低,死胎率以及畸形率显著增高(P＜0.05);与阴性对照组相比,阳性对照组和实验组孕鼠收缩压及尿蛋白浓度均显著降低,新生鼠的身长、体重和胎盘重量均显著升高,死胎率以及畸形率显著减少(P＜0.05);阳性对照组及实验组各指标差异无统计学意义.与空白对照组比较,阴性对照组孕鼠CyclinB1蛋白浓度显著下降(P＜0.05),p21浓度显著增高(P＜0.05);与阴性对照组相比,阳性对照组和实验组孕鼠CyclinB1蛋白浓度显著升高(P＜0.05),p21浓度显著降低(P＜0.05);阳性对照组与实验组相比较,差异无统计学意义.结论 川芎嗪注射液能够显著降低妊娠高血压孕鼠的死胎率以及畸形率,改善新生鼠状况,并且能够上调cyclinB1以及下调p21表达,这可能是川芎嗪注射液治疗效果的原因之一.
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CD13分子对非小细胞肺癌浸润Treg细胞免疫抑制的机制研究
目的 通过检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组和正常对照组中CD13分子与CD4+ CD25+ FoxP3+Treg细胞的表达,研究CD13分子对NSCLC浸润Treg细胞免疫抑制的机制.方法 随机选取2013年6月～2014年5月间中南大学湘雅医学院附属海口医院收治的NSCLC患者160例为NSCLC组,选取同期因其他肺部疾病行手术切除的患者60例作为正常对照组.采用反转录RT-PCR和免疫组化检测2组CD13分子与CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞的表达,并进行比较.结果 对照组中CD13和CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg mRNA的表达均显著低于NSCLC组,差异有统计学意义(P＜0.05);CD13分子在NSCLC组的表达明显多于对照组:对照组中有12例(20.0％) CD13呈阳性表达,NSCLC组患者中有131例呈阳性表达,差异有统计学意义(P＜0.05);NSCLC组的CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞表达水平(24.1±6.3)显著高于对照组(0.7±2.1),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CD13分子可降低组织相容性复合物Ⅱ(MHCⅡ)的粘附抗原决定簇,从而降低T细胞对肿瘤细胞表面抗原的识别能力,导致机体对肿瘤的免疫无应答或免疫耐受.这可能是CD13分子对非小细胞肺癌浸润Treg细胞免疫抑制的主要分子机制.
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应用直肠癌QPCR数据筛选差异表达基因并探索其与临床参数间的相关性
目的 研究在直肠癌组织与正常直肠组织中的微小RNA(miRNA)表达差异,并分析其与临床指标的关系,探讨血清微小RNA在直肠癌中诊断和预后的应用价值.方法 选取12例直肠癌患者,手术后取癌组织标本,QPCR检测miRNA在直肠癌组织与癌旁组织中的表达,筛选具有差异表达的miRNA.通过聚类分析,并筛选出P＜0.001的miRNA,分析基因间的聚集性;并进一步探讨直肠癌患者临床病理参数、不同临床分期、有无淋巴结转移与筛选的miRNA之间的相关性.结果 在变化倍数＞1.6,P＜0.01的条件下初步筛选得到26个结肠癌患者具有差异表达miRNA,聚类分析P＜0.001下,筛选出3大类具有相似性的基因和3组具有相似性的个体.miRNA100、miRNA125a-5p、miRNA125b、miRNA145、miRNA145*和癌细胞淋巴转移有关系.miRNA9在肿瘤样本中高表达,在对应患者中随着vilin基因增高表达下调,表明其作为疾病相关的癌基因和疾病的发生机制有关.CK20指标和miRNA4770、miRNA4700-5p呈高度负相关(P＜0.05).结论 miRNA1,miRNA145,miRNA4799-5p,miRNA-4790-5p等miRNAs可作为诊断的分子靶标指导结肠癌的诊断.micro RN 100,miRNA145等miRNAs可能成为一种非侵入性的分子靶标显示是否为结肠癌.
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miR-181a-5p在非小细胞肺癌中抗癌机制的研究
目的 探索miR-181a-5p的抑癌机制,探讨其是否可作为临床检测肺癌的标志物.方法 采用CCK8法检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株A549细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕和Transwell实验检测miR-181a-5p对A549细胞运动的影响;利用双荧光报告基因实验和RT-PCR实验探讨miR-181a-5p与靶基因的相互作用.结果 在非小细胞肺癌细胞株A549中过表达miR-181a-5p能明显抑制A549细胞株的增殖,促进细胞的早期凋亡(P＜0.05).细胞划痕和Transwell实验结果表明miR-181a-5p能明显抑制细胞的运动(P ＜0.05);miR-181a-5p可通过3'UTR靶向下调Kras基因的表达,且在NSCLC中Kras表达与miR-181a-5p表达有一定关系.结论 miR-181 a-5p可显著抑制NSCLC A549细胞的生物进程,是潜在的治疗NSCLC的靶标.
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葛根素联合丹皮酚对三种2型糖尿病动物模型胰腺组织变化及葡萄糖转运蛋白4的影响
目的 探讨葛根素联合丹皮酚对3种2型糖尿病动物模型胰腺组织变化及葡萄糖转运蛋白4的影响.方法 分别采用特殊膳食诱导法、注射链脲菌素(STZ)、特殊膳食加注射STZ法构建2型糖尿病动物模型,取造模成功的3种Wistar大鼠,每种40只.将各模型随机分为糖尿病(DM)组、单用葛根素(Pue)组、单用丹皮酚(Pae)组和葛根素联合丹皮酚(Pue+ Pae)组,每组10只.试验进行8周后测定每种模型的4组大鼠的胰腺线粒体中的ROS、SOD及MDA;Western blot方法检查处理后的肾周围脂肪组织细胞葡萄糖转运蛋白4的含量.结果 在实验过程中没有动物死亡,全部进入结果分析.Pue组、Pae组及Pue+ Pae组较DM组大鼠胰腺线粒体SOD活性有显著升高(P＜0.01),而MDA、ROS水平呈现不同程度降低(P＜0.01或P＜0.05),其中Pue+ Pae组变化更加明显(P＜0.01);设定每种模型DM组的脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4的吸光度为1,其它组数据与DM组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),且Pue+ Pae组是DM组的2～3倍(P＜0.01).结论 葛根素联合丹皮酚组能降低3种2型糖尿病模型胰腺组织中的MDA、ROS水平、升高SOD水平;葛根素联合丹皮酚治疗组能提高葡萄糖转运蛋白4蛋白的含量.
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石杉碱甲对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子的表达及氧化应激水平的影响
目的 探索石杉碱甲(huperzine A)对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophicfactor,GDNF)的表达及氧化应激水平的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、石杉碱甲组,每组12只.模型组和石杉碱甲组采用大脑中动脉永久性缺血模型,造模后7d石杉碱甲组开始给药,0.1 mg/(kg·d),每天1次,连续灌胃给药30 d,正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水.观察各组动物行为学变化、检测脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(ace@eholinesterase,AChE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;观察脑组织病理形态学变化;原位杂交法检测GDNF mRNA的含量.结果 石杉碱甲可以缩短模型大鼠学习反应时间,延长记忆时间,减少错误次数(P＜0.05);增强大鼠脑组织中SOD活性,降低胆碱酯酶活性,MDA和NO含量减少(P＜0.05);形态学观察结果显示:石杉碱甲对血管痴呆大鼠海马区神经元有一定的改善作用;与模型组比较,石杉碱甲组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 石杉碱甲可显著改善血管性痴呆大鼠的学习记忆障碍,其机制可能与石杉碱甲能增强脑组织SOD活性,降低胆碱酯酶活性,减少MDA和NO含量,从而提高了脑组织的抗氧化水平,发挥其神经保护作用有关.
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子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义
目的 探讨子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义.方法 选取2013年5月～2014年5月入住山东省交通医院分娩的100例产妇的胎盘绒毛组织,随机均分为对照组和子痫前期组,每组各50例.采用RT-PCR法检测各组胎盘组织中miRNA-101的表达情况;Western blot法检测过表达和封闭miRNA-101后,各胎盘组织ERp44的表达情况;采用流式细胞仪检测滋养细胞的凋亡情况.结果 与对照组相比,子痫前期组中miRNA-101的表达明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05).在滋养细胞HTR-8/SVneo中过表达miRNA-101后,ERp44的表达显著下调(P＜0.05);封闭miRNA-101后,ERp44的表达上调(P＜0.05);过表达miRNA-101,细胞凋亡数量减少;封闭miRNA-101,细胞凋亡数量增加.结论 子痫前期中,miRNA-101可通过调控内质网蛋白ERp44的表达来调控胎盘滋养细胞的凋亡过程.
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川芎嗪对激素性股骨头缺血坏死模型兔血管新生因子的影响及促成骨作用的研究
目的 探讨川芎嗪对激素性股骨头缺血坏死模型兔血管新生因子的影响及其促成骨作用.方法 选取28只健康新西兰大白兔,雌雄各半,体质量(2.5±0.6)kg,随机分成A、B2组.A组10只,每周肌注2次生理盐水,为对照组;B组18只,每周肌注2次8 mg/kg地塞米松磷酸钠造模,为模型组.连续处理4周后,随机选取对照组和模型组各2只大白兔,行影像检查并做病理组织切片.证实造模成功后,将B组随机分成模型组和治疗组,每组8只.治疗组给予耳缘静脉注射14 mg/kg盐酸川芎嗪注射液,模型组给予1.5 mL生理盐水.实验8周后处死动物,采用Western blot法检测旋股内侧动脉和股静脉血管VEGF的表达,数字减影血管造影法检测股骨头血管数目及高倍显微镜下计算空骨陷窝比列.结果 治疗组旋股动脉和股静脉血管VEGF表达量较模型组高,差异有统计学意义(P＜0.01);治疗组股骨头血管数目较模型组多,差异有统计学意义(P＜0.01);空骨陷窝比例,治疗组较模型组低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 川芎嗪能上调激素性股骨头坏死模型兔的血管新生因子表达,且对股骨头的重生具有促进作用.
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重组人白细胞介素-2活化的自然杀伤细胞对大鼠梗死心肌功能的影响
目的 探讨注射重组人白细胞介素-2(recombinant human interleukin-2,rhIL-2)活化后的自然杀伤细胞(natural killercells,NKC)对大鼠梗死心肌功能的影响.方法 体外提取大鼠NKC,实验组经rhIL-2活化,对照组未活化,比较2组NKC的杀伤能力;体外提取大鼠心肌微血管内皮细胞,分成3组,分别与rhIL-2-NKC、NKC和PBS液共培养0d和10d,观察3组共培养液对内皮细胞增殖的影响;取大鼠梗死1h的心肌组织,分别注射rhIL-2-NKC、NKC和PBS(空白对照组),并于注射后0、1、2、4、8、16 d采用RT-PCR检测各组单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的mRNA表达水平;取处理16 d的3组大鼠用于测定血液动力学指标:左心室收缩压(left ventricularsystolic pressure,LVSP)、舒张末压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、压力大上升速率(+ dp/dt)和压力大下降速率(-dp/dt),并以免疫组织化学方法检测心肌梗死区域面积和微血管密度(MVD)及梗死边缘区域的血管密度以及血小板内皮细胞粘附分子(CD31)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达水平.结果 rhIL-2-NKC杀伤力增加,且随效应细胞与靶细胞比例增加而增加;心肌微血管内皮细胞与rhIL-2-NKC共培养处理后,细胞增殖数量为空白对照组的1.28倍,差异有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果表明:rhIL-2-NKC处理组大鼠心肌组织MCP-1、TNF-α和IL-2 mRNA表达均上调,于2～8d时显著高于NKC组和空白对照组(P＜0.05);血液动力学指标检测表明:rhIL-2-NKC组大鼠LVEDP、MAP和+dp/dt均高于NKC组和空白对照组,但LVSP和-dp/dt均低于NKC组和空白对照组,rhIL-2-NKC组各指标与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);免疫组化检测结果表明:rhIL-2-NKC组心肌梗死面积(19.23±5.61)低,而MVD(15.29±1.77)高,与其他2组差异均有统计学意义(P＜0.05);rhIL-2-NKC组梗死边缘区域CD31 (238.17±16.82)和VEGF(221.32±16.97)蛋白表达水平高于NKC(CD31和VEGF分别为66.81±11.84和87.33±10.18)和空白对照组(CD31和VEGF分别为29.23±5.57和76.21±9.23),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 心肌注射rhIL-2-NKC能够促进梗死心肌的血管再生,具有改善大鼠心肌功能的作用.
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骨桥蛋白及其整合素β3受体在肺动脉高压大鼠心肌中的表达及意义
目的 观察骨桥蛋白及其整合素β3受体在肺动脉高压大鼠心肌中的表达变化及其与右心室重塑的关系,为研究其在心血管病理生理机制中的作用奠定基础.方法 60只SD大鼠分为5组,对照组和4个肺动脉高压实验组(PAH组),实验组大鼠通过皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型,在注射后第1,2,3,4周的4个时间取材,命名为PAH1、PAH2、PAH3和PAH4组.测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)和右心室肥厚指数;采用免疫组化、Western blot和RT-PCR法测定不同时间点各组大鼠右心室心肌骨桥蛋白(OPN)及其整合素β3受体mRNA的表达水平.结果 与对照组大鼠相比,肺动脉各高压组右心室心肌OPN与整合素β3表达均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),并随着肺动脉高压产生的时间延长而增高.相关性分析显示右心室肥厚指数与右心室心肌0PN mRNA表达水平呈明显正相关性(r=0.828,P＜0.01),同时与右心室心肌整合素β3 mRNA也呈明显正相关(r=0.822,P＜0.01).结论 大鼠肺动脉高压及右室肥大形成过程中,右心室心肌OPN及其受体整合素β3基因表达增高,可能在右心室心肌重塑中起重要的作用.
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光谱法研究山柰酚与牛血清白蛋白的相互作用
目的 利用荧光光谱研究了山柰酚与BSA之间的相互作用.方法 利用Stern-Volmer方程,计算山柰酚分子与牛血清白蛋白的出双分子碰撞猝灭常数Kq和静态猝灭结合常数Ka.结果 双分子碰撞猝灭常数Kq分别为15.20×1012L/(mol·s)(298K),13.41×1012L/(mol·s)(310 K),10.70×1012L/(mol·s)(318 K),静态猝灭结合常数Ka分别为3.491×105 L/mol(298 K),8.183×105 L/mol(310 K),11.35×105 L/mol(318 K),并能形成一个结合位点.结论 中药小分子山柰酚分子确实与牛血清白蛋白结合,且通过静态猝灭的方式对BSA的内源荧光进行猝灭.
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依诺肝素钠中残留N,N-二甲基甲酰胺的测定
目的 建立依诺肝素钠原料中N,N-二甲基甲酰胺残留的测定方法.方法 采用乙醇作为萃取剂,使依诺肝素钠生成沉淀,N,N-二甲基甲酰胺则溶于乙醇,取上清液直接进样,用气相色谱仪分析.色谱柱为Agilent DB-wax(30 m×0.53mm,1.0μm);载气为高纯氮气;流速为3 mL/min;采用程序升温的方式;进样口温度为200℃;FID检测器温度为250℃.结果 该方法测得的线性范围为8.8～880 μg/mL;定量限为11.6 μg/mL;检出限为3.5 μg/mL;加样回收率为94.8％,RSD为2.0％.结论 该检测方法方便、快速、准确,避免了样品基质对测定的干扰,可用来控制依诺肝素钠中痕量N,N-二甲基甲酰胺残留.
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响应面法优化马来酸曲美布汀缓释片处方工艺
目的 利用响应面分析法优化马来酸曲美布汀缓释片处方工艺.方法 通过单因素考察确定对释放度影响较大的3个因素:HPMC K4M和HPMC K100-LV的比例、酒石酸的用量、粘合剂PVP-K30的浓度,以释放度综合评分作为响应值,利用Box-Benhnken中心组合实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,确定各处方的用量.结果 筛选得到优化的处方及工艺为:骨架材料HPMC K4M和HPMC K100-LV的比例为6∶10、酒石酸的用量为22％、PVP-K30的浓度为15％,其体外释药行为较理想.结论 筛选所得的马来酸曲美布汀缓释片处方工艺稳定可行.
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扎来普隆双释放胶囊的制备
目的 制备扎来普隆双释放胶囊.方法 将扎来普隆速释片与扎来普隆控释片按照1∶1比例灌装成扎来普隆双释放胶囊.采用单因素考察法筛选优化扎来普隆双释放胶囊的处方设计和制备工艺.结果 所制得扎来普隆双释放胶囊可立即释药,产生药效,2h后再次释放药物.结论 制备的扎来普隆双释放胶囊物作用时间延长,药效增强.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
