中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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人白介素-15基因系列启动子克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建
目的 克隆人白介素-15(IL-15)基因系列启动子,构建IL-15基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 通过PCR方法 从HaCaT细胞基因组DNA中获得IL-15基因编码序列5'上游七段逐步缺失的IL-15启动子序列;双酶切后,分别重组到含萤火虫荧光素酶的报告基因pGL3-Basic载体上,构建IL-15基因系列启动子报告基因载体;用脂质体转染法将含长启动子序列的报告基因载体转染至HaCaT细胞,并设置空白对照组和LPS组分别处理;24 h后采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性.结果 经PCR方法 扩增出七段逐步缺失的IL-15基因启动子片段,PCR及双酶切鉴定各重组体构建正确;瞬时转染HaCaT细胞后经报告基因检测得知所克隆长序列具有启动子活性.结论 成功构建了IL-15系列启动子报告基因载体,并在HaCaT细胞中初步活性分析得知所克隆 IL-15基因调控系列内包含启动子核心区域,为进一步研究IL-15表达调控机制奠定了实验基础.
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蚓激酶的提取纯化及性质研究
目的 建立高效的蚓激酶纯化工艺,并研究其酶学性质.方法 以赤子爱胜蚓(Eisenia foelide)为原料,经过匀浆抽提、硫酸铵分段盐析、色谱分离、电泳等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并研究pH、温度、金属离子与抑制剂对蚓激酶活性的影响以及蚓激酶的作用机理.结果 纯化蚓激酶比活达5 100 U/mg,经SDS-PAGE电泳分析得2条带,相对分子质量为32000和33 500;体外溶栓实验表明,蚓激酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用.在中性和略偏碱性环境中稳定且活性高;温度适应范围广;不同种类及浓度的金属离子对蚓激酶活性的影响不尽相同;抑制因子及底物特异性研究发现,蚓激酶属于丝氨酸蛋白酶,不属于金属蛋白酶,同时含有二硫键.结论 该分离方法 可以得到较纯的蚓激酶.
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超声提取法优选枳实中橙皮苷的提取工艺
目的 优选枳实中的橙皮苷的佳提取工艺.方法 采用L9(34)正交实验,以橙皮苷的含量为标准筛选佳提取工艺.结果 枳实中橙皮苷的佳提取工艺为采用8倍量的95%甲醇,超声提取3次,每次20 min.结论 优选的提取工艺稳定,提取率高.
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新疆塔里木马鹿鹿茸干鲜品活性多肽的对比研究
目的 通过对新疆塔里木马鹿鹿茸干鲜品为原料制备的多肽的提取方式、含量和在体外对小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1细胞)增殖作用的比较,探讨新疆塔里木马鹿鹿茸的深加工和相关产品的开发原料选择的技术依据.方法 通过酸性缓冲液抽提和超滤等方法 制备得到马鹿鹿茸干鲜品多肽,以Folin-酚比色法测定其浓度,Tricine-SDS-PAGE电泳检测其相对分子质量(Mr)分布,MTT法检测其体外对MC3T3-E1细胞的增殖作用.结果 马鹿鹿茸鲜品多肽主要由Mr为14 400,9 500,6 500和4 100的多肽组成;而马鹿鹿茸干品多肽在Mr14 400和4 100~6 500之间的多肽含量较低.体外活性分析结果 显示,鲜品多肽能显著促进MC3T3-E1细胞增殖;而干品多肽促进MC3T3-E1细胞增殖效果不显著.结论 马鹿鹿茸鲜品多肽具有更高的促进成骨细胞增殖的作用.
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aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长及蛋白酶活化受体1的影响
目的 比较酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)对小鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用以及对蛋白酶活化受体1(PAR1)的影响,探讨PAR1与促进成纤维细胞增殖的关系.方法 取出生3周体质量为15~20 g的MH小鼠皮肤进行成纤维细胞培养,采用MTT法测定细胞数和活度,免疫细胞学XTT法检测aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长的影响,RT-PCR法检测小鼠皮肤成纤维细胞中PAR1 mRNA的表达.结果 小鼠皮肤成纤维细胞健康生长,aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长的促进作用在实验组与对照组间有显著性差异(P<0.05),其对成纤维细胞作用浓度梯度较为明显;小鼠皮肤成纤维细胞存在PAR1 mRNA的表达,且三种生长因子对其表达的影响有差异,以aFGF组表达显著.结论 aFGF、bFGF和EGF均能促进成纤维细胞增殖,以aFGF的促进作用强,PAR1可能参与成纤维细胞的增殖.
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青黛提取物对HEL细胞增殖、凋亡和分化的影响
目的 研究青黛有效成分在体外对HEL细胞的增殖、凋亡和分化作用.方法 应用MTT法检测青黛有效成分对HEL细胞的增殖抑制效应;流式细胞术检测CD14和CD11B,观察HEL细胞单核系分化趋势;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双标记法检测青黛有效成分对HEL细胞的早期凋亡诱导作用.结果 与阴性对照组相比25,50,75和100μg/mL青黛有效成分作用下HEL细胞均出现单核系分化趋势,其中100μg/mL的分化趋势明显;MTT结果 显示25,50,75及100μg/mL药物对HEL细胞的生长抑制率分别为16.01%,39.12%,50.06%和59.28%;青黛有效成分可诱导HEL细胞凋亡:25,50,75及100μg/mL药物对HEL的早期凋亡率分别是5.60%,13.7%,17.8%和18.4%,明显高于对照细胞的自发凋亡率(2.70%)(P<0.05).结论 青黛有效成分对体外培养的HEL细胞具有显著抑制增殖作用,且可诱导细胞早期凋亡和单核系分化.
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紫杉醇联合四君子汤对鼻咽癌荷瘤鼠的疗效研究
目的 研究紫杉醇联合四君子汤对鼻咽癌模型小鼠的治疗效果.方法 测量肿瘤体积,血细胞计数;放射免疫分析法测定血清介质含量.结果 紫杉醇联合四君子汤具有明显的抑制肿瘤生长的作用;与单用紫杉醇组比较,四君子汤可以增强紫杉醇的抗肿瘤作用,并降低紫杉醇免疫抑制的副作用.结论 紫杉醇与四君子汤合用可增强抗肿瘤作用,且和增强机体免疫调节功能有关.
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姜黄素逆转人结肠癌细胞株HCT-8/VCR多药耐药的研究
目的 探讨姜黄素对人结肠癌耐药细胞株HCT-8/VCR多药耐药性的逆转作用及可能机制.方法 运用MTT法进行药敏试验,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(Rh123)的表达,RT-PCR法检测多药耐药基因mdrl mRNA水平的变化,Western blot法检测mdrl基因蛋白产物P糖蛋白(P-gp)表达水平的变化.结果 经25μmol/L姜黄素处理后,增强了HCT-8/VCR细胞对VCR的敏感性,其逆转倍数为4.58倍,增加了细胞内Rh123的蓄积(P<0.05),明显抑制了多药耐药基因mdrl mRNA及其蛋白的表达(P<0.05).结论 本研究结果 提示姜黄素能抑制耐药基因的表达及功能,提高细胞对化疗药物的敏感性,从而逆转结肠癌细胞的多药耐药性.
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蒲黄煎液的抗大鼠实验性血栓作用
目的 研究蒲黄对大鼠血栓形成的影响.方法 分别采用大鼠动静脉吻合血栓形成模型和电刺激损伤颈总动脉血栓模型实验方法,将SD大鼠随机分为空白对照组、阿司匹林阳性对照组(0.3 g/kg)、蒲黄煎液高剂量组(8 g/kg)、中剂量组(4 g/kg)、低剂量组(2g/kg),各组动物连续灌胃给药7 d,末次给药后1 h建立模型,测定各组动物血栓湿重及血栓栓塞率;测定血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT).结果 蒲黄能抑制动静脉吻合血栓的形成,使血栓湿重降低,血栓抑制率达15%~43%;同时蒲黄降低了大鼠电刺激动脉血栓栓塞率,使大鼠APTT、PT、TT明显延长,且具有剂量依赖关系.结论 蒲黄能够对抗在体实验性血栓的形成,其抗血栓机制可能与APTT、PT、TT指标的改变有关.
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金钗石斛对糖尿病大鼠肾组织中糖基化终产物表达的干预作用
目的 研究金钗石斛对糖尿病(DM)大鼠肾组织中肾脏糖基化终产物受体(RAGE)表达的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分3组,用链脲佐菌素(STZ)建立DM模型,金钗石斛水煎剂10 g/(kg·d)灌胃给药12周后,肾组织病理切片HE染色观察肾组织病理变化;生化法测定血糖、尿蛋白、肌酐浓度;荧光光谱法测定尿液和血清糖基化终产物(AGE)含量;免疫组化检测肾组织RAGE蛋白;实时荧光定量PCR检测肾组织RAGE mRNA表达.结果 金钗石斛可降低DM模型大鼠血糖,减轻肾脏损害,降低血清中AGE以及肾组织RAGE mRNA和蛋白表达水平.结论 金钗石斛干预减轻DM肾脏功能损害可能通过降低血清中AGE和下调肾组织中RAGE表达而实现.
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亲和共沉淀从红芸豆中提取红细胞凝集素及其性质研究
目的 研究一种从红芸豆中提取红细胞凝集素(PHA-E)的新方法.方法 红芸豆经过粗提,然后和甲状腺球蛋白的粗提取液进行共沉淀,利用超滤制得PHA-E产品,采用电泳和质谱进行鉴定,并研究其凝血活力.结果 所获样品的纯度高,其亚基相对分子质量为32000,等电点为6.5.经质谱鉴定,纯化产品为PHA-E.使兔红细胞50%凝集的PHA-E的低浓度为2.45μg/mL,单糖不影响PHA-E凝血活力,EDTA抑制其凝血活力,Zn2+促进其凝血.结论 通过亲和共沉淀的方法 能快速简便的提取活力高的PHA-E.
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抗平喘滴丸的制备工艺
目的 研究抗平喘滴丸的制备工艺.方法 在单因素考察基础上,以正交设计试验研究抗平喘滴丸的成型工艺.结果 佳成型工艺为药物组合物与基质比例为1:2.5,药液温度为85℃,滴速为40滴/min,冷却剂温度为(15±5)℃.结论 由佳工艺制备所得的滴丸硬度、圆整度和重量差异均符合要求.
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HBXAg反式调节基因11剪切体的克隆化及生物信息学分析
目的 克隆乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白反式调节的靶基因11(XTP11),获得未知功能的新基因-XTP11剪切体,对其进行生物信息学分析,探讨其结构和功能.方法 从肝母细胞瘤细胞系HepG2中提取总RNA,逆转录为cDNA后,设计特异性引物克隆XTP11剪切体,生物信息学技术获得编码序列、物理化学性质、蛋白质结构和功能等基本信息.结果 成功扩增出XTP11剪切体基因,生物信息学分析推定ORF为1 314个核苷酸,编码产物为437个氨基酸残基.结论 此文发现并鉴定了HBV XTP11剪切体,为阐明其在HBV X蛋白致病机制中的作用提供新的研究线索.
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姜黄素增强γδT细胞对神经胶质瘤细胞U251杀伤作用的机理
目的 探讨姜黄素提高γδT细胞对神经胶质瘤细胞U251杀伤作用的机理.方法 用10名健康人外周血单核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子培养γδT细胞;收集培养至第7天的γδT细胞,与不同浓度(0,1.25,2.5,5,10,20 μmol/L)的姜黄素共培养,同时设无水乙醇组.用FACS法测γδT细胞表型、穿孔素、颗粒酶B、细胞凋亡率和凋亡蛋白capease-3;用LDH法测定γδT细胞对U251细胞杀伤活性.结果 γδT细胞经2.5~10μmol/L姜黄素作用后能增加γδT细胞增殖,增加穿孔素、颗粒酶B的表达,杀伤U251活性明显增强(P<0.05).当姜黄素浓度达20μmol/L时,各组检测数据均低于对照组.低浓度的姜黄素能减低凋亡率和凋亡蛋白capease-3表达,浓度为5 μmol/L时为明显(P<0.05).结论 一定浓度的姜黄素能增强γδT细胞对U251的杀伤活性.γδT细胞杀伤活性增强与细胞内穿孔素和颗粒酶含量相关.一定浓度姜黄素能减少其凋亡率和capease-3含量,促进U251细胞生长.
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辛伐他汀后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及机制
目的 观察辛伐他汀对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)细胞凋亡的影响,初步探讨其机制.方法 采用Langendorff离体心脏灌流模型,32只SD大鼠随机等分为4组:对照组、I/R组、辛伐他汀后处理组、辛伐他汀+L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组.进行再灌注心律失常分析;冠脉流出液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及NO含量测定;Western印迹法检测心肌组织p-Akt信号蛋白的表达;Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡指数(AI).结果 与I/R组比较,辛伐他汀后处理组心律失常发生率下降、CK和LDH含量降低、p-Akt蛋白表达及NO含量增加、细胞AI降低(P<0.01).辛伐他汀+L-NAME组较辛伐他汀后处理组心律失常发生率升高、CK和LDH含量增加、p-Akt蛋白表达及NO含量降低、细胞AI增高(P<0.01);与I/R组比较,无显著差异(P>0.05).结论 辛伐他汀后处理能减轻大鼠心肌I/R损伤,减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与P13K-Akt通路活化有关.
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Elafin在肿瘤坏死因子-α诱导的炎性反应中的抗炎机制
目的 探讨Elafin的抗炎机制.方法 体外培养人支气管上皮细胞系16HBE细胞,将已构建好的pEG-FP-N1-Elafin载体转染到细胞中,并以空质粒载体作其对照,以外源性肿瘤坏死因子(TNF)-α作为刺激物共同孵育.间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜检测细胞核中核因子(NF)-κB的活性,ELISA检测细胞上清液中炎性介质(选取IL-1β、IL-8作为代表)的含量,免疫共沉淀法结合Western blot检测小泛素样修饰蛋白(SUMO)-1-p-IκBαt含量.结果 重组质粒组的细胞中NF-κB的活性和IL-1β、IL-8的生成量与空质粒载体组细胞相比明显降低,而SUMO-1-p-IκBα的含量则显著升高(P<0.01).结论 Elafin能够通过促进IκBα的类泛素化阻止NF-κB的活化,下调前炎性介质的生成,从而发挥其抗炎作用.
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抗肿瘤活性抗菌肽的研究进展
综述了各种结构类型的具有抗肿瘤活性的抗茵肽(抗癌肽),并对其具体的作用机制、结构改造、联合应用及未来发展趋势进行了论述.
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甾类药物生物脱氢技术研究新进展
甾类药物是医药工业中重要的一大门类,通常以甾体母核结构为基础,通过化学法或生物法合成,其中微生物转化是许多甾类药物或其中间体合成路线中关键的环节.此文对甾类药物生物转化脱氢反应涉及的催化剂类型、转化率提高的途径、新型生物脱氢反应体系等方面进行了综述.
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患者退变软骨及滑膜组织中一氧化氮的表达及意义
目的 骨关节炎是一种常见疾病,一氧化氮(NO)是关节炎病因的一种重要介质,NO的表达影响滑膜和关节软骨细胞的功能并导致滑膜充血而诱发关节炎.本文综述了近年来骨关节炎NO表达研究进展以及通过抑制NO含量对骨关节炎进行治疗临床应用.
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透明质酸皮肤填充剂的研究进展
透明质酸(HA)是皮肤中保持水分的主要物质,随着年龄的增加,皮肤中HA含量不断减少,皮肤含水量下降,皮下组织体积减少.注射HA可以逆转皮肤老化,使皮肤恢复活力.透明质酸皮肤填充剂(HAFs)以其独特的生物活性越来越受到关注,HAFs市场迅速发展并持续稳定增长,占据皮肤填充剂市场的大部分份额.本文对HAFs的研究进展作一综述.
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原花青素对心肌缺血再灌注大鼠血清T-AOC、CRP及NO的影响
目的 观察原花青素对心肌缺血再灌注大鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、C反应蛋白(CRP)、一氧化氮(NO)及超氧化物歧化酶(SOD)的影响.方法 选择SD大鼠40只,制备心肌缺血再灌注模型.分为2组:对照组和观察组,每组20只.观察组在造模前用100 mg/(kg·d)原花青素灌胃.再灌注结束后采血,测定2组大鼠血清T-AOC、CRP、NO及SOD的变化.结果 观察组T-AOC和SOD均明显高于对照组(P<0.01);CRP及NO均明显低于对照组(P<0.05).结论 原花青素可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,提高机体抗氧化能力.
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G250-DC-CIK细胞协同索拉菲尼对肾癌细胞的杀伤作用
目的 探讨G250-DC-CIK细胞协同索拉菲尼对肾癌细胞的杀伤作用,从而探讨肾癌的新的治疗方法.方法 制备出DC、CIK细胞后共培养诱导产生DC-CIK、DC-CIK-G250细胞;将实验分组分为空白组,靶对照组,效应对照组,实验组四类组别共8组.每组设3个复孔,比较各组对肾癌细胞的杀伤作用,数据进行统计学分析.结果 随着效靶比增加,CIK细胞对人肾癌细胞杀伤作用增强,效靶比20:1时杀伤作用高于效靶比5:1时(P<0.01).在同一效靶比下,DC-CIK组对人肾癌细胞的杀伤率则明显高于CIK组(P<0.01).DC-CIK-G250组对ACHN细胞的杀伤率明显高于CIK细胞和DC-CIK细胞,效靶比为20:1时,达到90.2%.结论 免疫治疗结合药物靶向治疗作为一种新方法,在临床肿瘤治疗上具有广阔前景.
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重组人脑利钠肽对急性心肌梗死后心力衰竭的疗效
目的 研究重组人脑利钠肽对于急性心肌梗死后(AMI)心力衰竭的疗效及其对循环内分泌的影响.方法 选取AMI心力衰竭患者66例,随机分为治疗组和对照组,各33例,对照组给心梗常规治疗及利尿、扩血管等纠正心衰治疗,治疗组在对照组的基础上,将硝酸甘油替换为静脉注射重组人脑利钠肽(rhBNP).比较两组患者治疗后,心功能指标、心力衰竭症状缓解情况及肾素-血管紧张素Ⅱ-醛固酮水平的变化.结果 在治疗72 h后,两组患者左心室射血分数均有提高,且治疗组改善更显著(P<0.05);缓解心力衰竭症状方面,治疗组显著优于对照组(P<0.05);且治疗组肾素、血管紧张素Ⅱ及醛固酮水平均较对照组显著降低(P<0.05).结论 本研究结果 显示AMI心力衰竭患者静脉注射rhBNP可显著缓解症状,改善心功能,并有效抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统.
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素高捷疗软膏联合碱性成纤维细胞生长因子对复发性口腔溃疡疗效
目的 观察素高捷疗软膏联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对复发性口腔溃疡的疗效.方法 2009年1月-2011年1月我科收治的90例复发性口腔溃疡患者,随机分为3组:对照组、观察Ⅰ组、观察Ⅱ组,每组30例.对照组给予维生素C片0.1 g,3次/d;维生素B2片5mg,3次/d;西瓜霜0.2 g,喷敷患处,5次/d;观察Ⅰ组在维生素C片、维生素B2片基础上,给予bFGF喷涂于溃疡面,4次/d;观察Ⅱ组:在观察I组基础上,患处涂抹素高捷疗软膏,4次/d;疗程均为1周.结果 观察Ⅱ组的疗效优于观察Ⅰ组(P<0.05),观察Ⅰ组优于对照组(P<0.05).结论 素高捷疗口腔膏联合bFGF对复发性口腔溃疡疗效显著.
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丹参酮ⅡA磺酸钠对肺心病患者血流变及血脂的影响
目的 观察丹参酮ⅡA磺酸钠对肺心病患者血液流变学及血脂的影响.方法 肺心病患者120例,随机分为观察组和对照组,每组各60例.对照组给予常规治疗;观察组在对照组基础上给予丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,疗程14 d.比较治疗前后血液流变学指标和血脂变化.结果 与对照组比较,治疗后观察组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇均明显降低(P<0.05);全血黏度、血浆黏度等血流变学指标均有统计学差异(P<0.05).结论 丹参酮ⅡA磺酸钠能够调节血脂,改善血液流变学异常,对肺心病患者具有保护作用.
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低分子肝素与肝素治疗急性冠脉综合征的疗效与安全性
目的 比较肝素与低分子肝素治疗急性冠脉综合征的疗效和安全性.方法 100例急性冠脉综合征患者随机分为肝素组和低分子肝素组.低分子肝素组:低分子肝素腹壁皮下注射0.4 mg/次,2次/d,总疗程7 d;肝素组:肝素腹壁皮下注射50 mg/次,2次/d,总疗程10 d;两组均给予口服肠溶阿司匹林、倍他乐克、硝酸酯类、ACEI类药物,疗程1个月.结果 低分子肝素组患者急性冠脉综合征胸部刺痛、少寝多梦、胸闷、心悸等症状明显缓解,心前区疼痛次数明显降低,明显优于肝素组(P<0.01);低分子肝素组和肝素组的心电图有效率分别为62%和56%,无显著性差异(P>0.05);在改善活动平板运动试验后指标上,两组无显著性差异(P>0.05).治疗组未发现毒副作用.结论 低分子肝素可改善心肌缺血,且无明显毒副作用,是治疗急性冠脉综合征的安全有效的药物.
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艾塞那肽对2型糖尿病患者控制血糖的疗效
目的 观察艾塞那肽对单用二甲双胍治疗未能有效控制血糖的2型糖尿病患者的疗效.方法 96例单用二甲双胍治疗未能有效控制血糖的2型糖尿病患者随机分为对照组和治疗组.两组患者均维持原二甲双胍降糖方案的基础上对照组加用吡格列酮,治疗组加用艾塞那肽注射液,治疗周期均为16周.分别于治疗前、治疗8周及16周测量糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG).每周进行常规检查,随访不良反应.结果 两组患者经治疗8周和16周时HbA lc、FBG和PBC均降低(P<0.05或0.01),并且治疗组血糖各参数相对于基线的改变与对照组有显著差异(P<0.05或0.01);治疗8周时两组血糖控制达到ADA降糖目标的百分率无显著差异(P>0.05),治疗16周时治疗组控糖达到ADA降糖目标的百分率显著高于对照组(P<0.05).结论 艾塞那肽注射液对单用二甲双胍未能有效控制血糖的2型糖尿病患者血糖控制良好,效果优于吡格列酮.
年 | 期数 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |