角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究

目的研究重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)工程菌的高密度发酵和提纯工艺.方法通过增加培养基营养成分,发酵过程补加葡萄糖,获得高产率菌体.细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化,电泳分析结果.结果每1 L发酵液可获得菌体12.2 g,表达率达28.7%.纯化后rhKGF-2纯度达97%.结论 rhKGF-2工程菌可获得高密度发酵.纯化工艺适用于rhKGF-2的大量制备.

胸腺来源免疫抑制提取物对不同组织肿瘤细胞作用的研究

目的探讨小牛胸腺来源免疫抑制提取物(TISE-c)对不同组织来源肿瘤细胞的影响.方法采用3H-TdR掺入方法,检测TISE-c对肝癌、肺腺癌、膀胱癌传代细胞株细胞增生的影响,以及在显微镜下观测TISE-c对癌细胞形态学变化的影响.结果 TISE-c对3种肿瘤细胞均具有抑制分裂增生作用,但是癌细胞形态正常.结论 TISE-c可能是一种能够抑制癌细胞分裂增生的生物制剂;对不同组织来源的癌细胞不存在组织特异性;抑制癌细胞增生不是通过细胞毒性或杀伤机制.

猪十二指肠类肝素抗血管内膜增生的研究

目的以挤压大鼠颈总动脉造成血管损伤,观察猪十二指肠类肝素(冠心舒)对血管损伤后再狭窄的防治作用.方法 60只大鼠随机分为5组,即病理模型组,低、中、高剂量冠心舒组及阿司匹林对照组.术前1周开始灌服药物,每天1次,共4周.术后3周,在光镜下以显微测微计测量、计算内膜增生程度.结果病理模型组(不给药)血管内膜横切面积占有率明显增大,管腔面积占有率明显缩小;与病理模型组比,给冠心舒动物血管内膜横切面积剂量依赖地明显缩小,管腔面积占有率明显增大,并有抑制平滑肌细胞转型及促内皮修复作用.结论冠心舒有抗大鼠颈总动脉挤压伤后再狭窄作用.

化学修饰胰岛素降血糖作用及抗胰蛋白酶降解能力的研究

目的评价化学修饰胰岛素的降血糖作用及抗胰蛋白酶降解的能力.方法将修饰胰岛素和胰岛素经小鼠皮下注射, 用血糖仪测定它们的降血糖作用,比较它们抗胰蛋白酶降解的能力.结果修饰胰岛素和胰岛素有相似的降血糖作用,但修饰胰岛素抗胰蛋白酶降解的能力比胰岛素有明显的改善,降解的时间延长了4 h.结论修饰胰岛素具有较好的降血糖作用,并具有一定的抗胰蛋白酶降解能力.

羊胚胎盘肽功能测试

目的探讨羊胚胎盘肽的制备及生物活性.方法应用膜技术制备羊胚胎盘肽,对羊胚胎盘肽的含量、肽谱、氨基酸、活性、紫外吸收等进行测试,利用动物实验观察羊胚胎盘肽对调节免疫、延缓衰老的作用.结果羊胚胎盘肽是一组小分子多肽,分子量小于10 000 D的占37.3%,紫外吸收峰在194 nm.结论羊胚胎盘肽具有调节免疫和延缓衰老的生物学活性.

TNFHis-IL-11温度诱导融合表达载体的构建

目的构建TNFHis-IL-11温度诱导融合表达载体.方法用Eco RI和Pst I消化pGEMIL-11质粒后,回收IL-11基因片段,以同样的酶切位点克隆入TNFHis表达载体.将重组质粒转入大肠杆菌DH5 α菌株,经42℃温度诱导4.5 h后做SDS-PAGE和免疫活性鉴定.结果融合蛋白获得了表达,其分子量为37 kD,其表达量占菌体总蛋白的25%.免疫印迹反应结果显示,表达的融合蛋白可与抗IL-11多克隆抗体产生阳性反应.该融合蛋白经盐酸羟胺裂解后可获得IL-11单体.结论 TNFHis-IL-11温度诱导融合表达载体构建成功.

丙氨酸转氨酶参考品的研制

目的研制用于丙氨酸转氨酶(ALT)测定的参考品.方法猪心作原料,经硫酸铵沉淀、DEAE- Sephadex A 50、CM-Sephadex C 50、Sephadex G 150及抗天冬氨酸转氨酶(AST)免疫亲和色谱提纯,用一定的基础液稀释后分装冻干.结果提纯品ALT比活为173 U/mg蛋白,得率22.8%,温度加速变性试验测得预期年失活率,在-20℃、4℃分别为0.05%、0.12%.结论此法提纯ALT得率高,仅含少量AST,冻干品稳定,在不同方法间与人血清有互换性,适合作ALT测定的校正品或参考品.

一条新的可诱导PC12细胞转化为交感神经原表型的小分子肽链

目的根据神经生长因子(NGF)的氨基酸序列及其晶体构象资料,对β-NGF进行限制性酶解,从而获得关键的功能区域片段.方法选择溴化氰在9位Met处, Trypsin在Arg或Lys处裂解β-NGF,用 Sephadex G 50色谱、DE52离子交换色谱和反相高效液相色谱进行分离纯化.所得片段用PC12细胞测定活性,对活性片段进行氨基酸组成及序列分析.结果从β-NGF裂解片段中获得一可诱导PC12细胞分化的活性片段,氨基酸组成及序列分析表明,此片段由16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与14肽HWNSYCTTTHTFVK通过一对二硫键连接而成,与β-NGF肽链的10～25和75～88氨基酸残基序列相对应.生物活性分析表明其佳作用浓度为0.001～0.1 ng/ml.结论此实验获得了β-NGF关键的功能区域片段,虽然其空间结构和功能的关系尚需研究探讨,但它的成功分离和鉴定为合成或表达高活性小分子神经营养物质奠定了重要的基础.

肽核酸及其在生物学中的应用

肽核酸是一种核酸类似物,为电中性,不易被核酸酶和蛋白酶降解,能以高亲和性、高特异性与DNA或RNA杂交形成稳定的双螺旋和三螺旋结构.肽核酸在疾病的基因诊断、反义药物的开发、基因表达与调控、基因序列及结构分析中有广泛的应用价值, 对生命起源研究也有重要启示.

玻璃酸钠促进角膜上皮损伤愈合作用的机制研究

对玻璃酸钠促进角膜缺损愈合的作用机制和临床研究进行了综述.

细菌内毒素与抗内毒素治疗

综述了有关细菌内毒素的分子结构及其特征、识别机制、生物学效应及抗内毒素治疗的研究进展.

高效液相色谱法测定顺铂注射液的含量

目的采用高效液相色谱法测定顺铂注射液中顺铂的含量.方法以Hypersil-NH2色谱柱,0.1% NaCl溶液为流动相,流速为0.8 ml/min,顺铂和反铂的保留时间分别为3.37和5.51 min,检测波长为210 nm、低检测限为6 ng.结果标准曲线的线性范围为100.04～300.12 μg/ml(r=0.999 7),方法回收率为99.07%,RSD为0.54%.结论此法可用于直接测定顺铂注射液中顺铂的含量.

水飞蓟宾-卵磷脂复合物制备工艺比较

目的建立实验室制备水飞蓟宾-卵磷脂复合物的方法.方法将水飞蓟宾和卵磷脂共溶于不同溶剂中,在一定条件下进行反应,然后将反应物分离、干燥、称重,比较收率.结果水飞蓟宾和卵磷脂可共溶于乙醇和热丙酮中.二者在55℃乙醇中反应不完全,收率很低(27%),制备物为红棕色,不易干燥.二者在55℃热丙酮中反应10 min和70 min,收率分别为59%和93%,制备物为黄白色类结晶固体物,易于干燥.结论此制备工艺中影响收率和质量的主要因素是反应介质的性质与反应时间.

人绒促性素粗品制备新工艺

目的寻求人绒促性素(HCG)的高效吸附剂.方法用色谱硅胶吸附孕妇尿中的HCG,用酶联免疫HCG定量法分别检测原尿、硅胶吸附后上清液和洗脱液中HCG的总效价,计算硅胶对HCG的吸附率及洗脱率.结果硅胶对孕妇尿中HCG的平均吸附率为(99.6±1.2)%,HCG从硅胶上的洗脱平均回收率为(79.2±13.3)%,原尿HCG的总活性平均回收率为(61.3±11.9)%.结论硅胶是一种理想的孕妇尿中HCG高效吸附剂,易于推广应用.

土茯苓体外抗菌活性实验

目的用改良方法测定土茯苓水煎液对金黄色葡萄球菌等8种细菌的抗菌活性.方法用K-B法(培养基为MH固体培养基)测定抗菌活性;以液体稀释法及MH固体培养法测定小抑菌浓度、小杀菌浓度值及抑菌率.结果土茯苓水煎液对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌有极强的抑菌活性和很高的抑菌率;对大肠杆菌、溶血链球菌、绿浓杆菌、鼠伤寒沙门菌的抑菌活性稍弱.结论土茯苓水煎液具有较强的抗细菌活性及较宽的抗菌谱,作为抗细菌资源具有一定的利用价值.

磷酸转乙酰化酶对辅酶A效价测定的影响

目的考察不同批号及不同浓度磷酸转乙酰化酶(PTA)对辅酶A(CoA)效价测定的影响.方法 PTA紫外分光光度法测定CoA效价,考察3个批号PTA,每批用3种浓度进行测定.结果 PTA的浓度为30～40 u/ml时,对测定影响不大,但浓度为60 u/ml时,有显著影响;不同批号PTA所测效价有较大差异,如PTA的吸收度偏大,所测CoA效价偏高.结论 PTA的纯度,即比活影响测定结果.宜采用比活大的PTA,并注意勿使失活.

胰岛素含片用于高血糖大鼠模型的试验研究

目的利用动物模型对胰岛素口含片的降糖效果进行研究.方法用四氧嘧啶诱发大鼠高血糖模型,半麻醉下进行口含片降糖试验.结果有较高的血糖抑制率,其中高剂量组血糖抑制率为62.47%,低剂量组血糖抑制率为42.54%.结论胰岛素含片具有较好的降糖效果.

玻璃酸钠的微生物限度检查试验方法的研究

目的通过实验寻找适合玻璃酸钠微生物限度检查的方法,解决难以对其进行微生物限度检查的问题.方法采用含有无菌玻璃酸酶的磷酸盐缓冲液加入一定量的对照菌,再加入玻璃酸钠,先在低温条件下使其充分溶胀,然后42℃水浴振摇不同时间,加入对照菌,按照药典方法同时对供试品和对照品进行检测.结果确定了供试品与对照品检测结果基本一致的试验条件.结论 42℃振摇15 min用于玻璃酸钠微生物限度检查是可行的.

复方硫酸软骨素片中甘草的薄层色谱鉴别

目的建立复方硫酸软骨素片中甘草的鉴别方法.方法采用薄层色谱法,以甘草对照药材为对照,经10%硫酸乙醇溶液显色,进行对照鉴别.结果供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显示相同颜色的斑点.结论该法灵敏,专属性强,操作简便、易行,可用于复方硫酸软骨素片中甘草的鉴别.

超微量肝素钙治疗新生儿硬肿症22例疗效观察

目的探讨超微量肝素钙对新生儿硬肿症的治疗效果.方法选择新生儿硬肿症住院病例42例,随机分成两组,治疗组在常规治疗的基础上用超微量肝素钙皮下注射,对照组仅采用常规治疗.结果治疗组有效率(95.5%)明显高于对照组(60.0%),差异有显著性,无毒副作用.结论超微量肝素钙皮下注射治疗新生儿硬肿症效果明显,值得推广.

肝素钙对颈动脉粥样硬化的影响

目的观察肝素钙对颈动脉粥样硬化的影响.方法颈动脉粥样硬化患者随机分为两组,对照组用辛伐他汀治疗;治疗组在辛伐他汀治疗的基础上加用肝素钙注射液.采用彩色多普勒超声法对患者颈动脉粥样硬化进行治疗前后的疗效观察.结果治疗后与治疗前比较,治疗组患者颈动脉粥样斑块消失、缩小,面积降低,内膜厚度降低,而对照组患者颈动脉粥样斑块面积、内膜厚度虽有降低但无显著差异.结论肝素钙能加强辛伐他汀的作用,对颈动脉粥样硬化的治疗效果良好.

肝素钙雾化吸入治疗哮喘及喘息性慢性支气管炎临床观察

目的研究肝素钙肺内给药对哮喘及喘息型慢性支气管炎的治疗效果及安全性.方法将50例患者分为肝素钙治疗组和对照组,治疗组除应用常规治疗外,应用肝素钙5 000 IU加入生理盐水20 ml,雾化吸入;对照组则以相同剂量生理盐水代之.观察患者胸闷喘息和肺部哮鸣音的缓解程度以及患者第1秒用力肺活量的改变.结果肝素钙雾化吸入后,大多数患者症状体征明显改善,第1秒用力肺活量治疗前后差异显著,未出现明显的不良反应.结论雾化吸入肝素钙可以显著改善哮喘和慢性支气管炎患者的临床体征及肺功能.

小剂量肝素钙与1,6-二磷酸果糖联合治疗病毒性心肌炎临床观察

目的探讨肝素钙与1,6-二磷酸果糖联合治疗病毒性心肌炎的效果.方法 82例患儿,治疗组42例,除一般疗法外,加用小剂量肝素钙与1,6-二磷酸果糖;对照组40例,只用一般疗法.结果治疗组的疗效较好.结论两药联合治疗病毒性心肌炎效果良好,未见不良反应.

二十二碳六烯酸与二甲氨基乙醇复方制剂的临床研究

目的研究二十二碳六烯酸与二甲氨基乙醇复方制剂(胶丸)对脑功能障碍和高脂血症患者的临床效果.方法实验组口服该复方制剂,对照组脑功能障碍患者口服安慰剂,高脂血症患者口服月见草油胶丸,进行对比.结果供试胶丸能增强和改善脑功能,提高智力,调节血脂.结论供试胶丸适用于脑功能障碍综合征和高脂血症.

小剂量肝素钙佐治新生儿硬肿症63例观察

目的探讨小剂量肝素钙对新生儿硬肿症的治疗作用及安全性.方法治疗组与对照组各63例.两组均常规复温、纠酸扩容、抗感染、补充热量及血管活性药物等综合治疗.治疗组在上述基础上加用肝素钙,剂量10～12.5 u/(kg*次),每12 h 1次,皮下注射.结果小剂量肝素钙治疗组较对照组硬肿消退时间明显缩短,两组疗效差异有显著性,治疗过程中无毒副作用.结论小剂量肝素钙皮下注射治疗新生儿硬肿症是安全有效的方法.

药理学家--吴葆杰教授