中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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邻苯二甲醛柱前衍生化高效液相色谱法测定组织中肌肽含量
目的 建立测定小鼠各组织肌肤含量的高效液相色谱法.方法 采用C18色谱柱,以甲醇和0.05 moL/L磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相,用邻苯二甲醛为柱前衍生剂,在柱温38℃下采用二元梯度洗脱,对小鼠各组织中的肌肽含量进行了测定.结果 肌肤在0.63～10.00 μg/mL时峰面积与进样质量浓度有良好的线性关系,其相关系数为0.999 6.回收率在98.2%～99.7%之间.检测限为0.05 μg/mL(S/N=10).结论 该法灵敏可靠、专属性强、重现性好.小鼠心脏、肝脏、肾脏、大脑皮层和海马中肌肽含量分别为123.67,22.86,158.86,76.57,81.86 mg/g.
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仙人掌多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用
目的 研究仙人掌多糖(OPS)对CCl4肝损伤小鼠的保护作用.方法 采用OPS溶液预先灌胃30 d,末次灌胃后2 h,腹腔注射0.10%CCl4(20 mL/kg)的花生油溶液,造成小鼠急性肝损伤,测定血清ALT活性和AST活性及肝脏GSH舍量、GR活性、GST活性和GSH-Px活性,取肝组织做病理学检测.结果 预先灌胃OPS溶液,可显著地抑制CCl4引起的小鼠血清ALT和AST活性升高,改善肝中毒小鼠GSH含量及GST活性和GSH-Px活性水平,并减轻肝组织的病理变化.结论 OPS对CCl4致小鼠肝损伤具有保护作用,这可能与增强谷胱甘肤系统抗氧化能力有关.
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人胰岛素样生长因子-1的原核表达和纯化
目的 构建高表达、易纯化的人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程菌.方法 采用pET32a(+)质粒构建带羟胺裂解部位的表达栽体,转入大肠杆菌DH5α进行诱导表达.表达产物经镍离子-亲和柱色谱分离后进行羟胺裂解.裂解产物纯化后用MALDI-TOF-MS法测定相对分子质量(Mr).结果 重组质粒序列完全正确.工程菌可表达预计Mr的融合蛋白,经Western blot证实有hIGF-1抗原活性.经镍离子-亲和柱色谱分离、羟胺裂解后得到的肤的Mr为7 640,和理论值相符.结论 成功构建了表达bigF-1的工程菌,为开发hIGF-1奠定了基础.
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超声波对胰蛋白酶活力影响的机理研究
目的 探索超声波对胰蛋白酶催化的影响效果和作用方式.方法 研究胰蛋白酶经不同频率、不同功率、不同时间的超声波处理后酶活力的变化;用动力学参数变化和光谱学探索其影响催化的机理.结果 经超声波处理后酶活力普遍升高.用15 kHz、50 W超声波处理胰蛋白酶3 min,酶活力可提高45.4%.将粗酶用SephadexG75凝胶色谱,分部液在聚丙烯酰胺凝胶电泳检验显示出一条带,说明酶被纯化到电泳纯程度.对纯酶进行动力学分析,结果表明经超声波处理后Km值变小,Vmax值也降低,说明超声波处理使酶对底物的亲和力增大.超声波处理不会改变胰蛋白酶分子的构型,但会改变酶分子的构象.结论 超声波对胰蛋白酶催化活性的提高可能是由于改变酶分子的构象、增强酶分子对底物的亲和力的结果.
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荧光光谱法研究过氧化氢酶溶液稳定性
目的 考察不同环境因素对过氧化氢酶(CAT)活性和构象的影响,为蛋白质制剂过程提供依据.方法 改变温度、pH、变性剂浓度,用紫外分光光度法考察CAT溶液活性变化,并用荧光光谱法研究其构象变化.结果 CAT溶液25℃、pH 7时,活性及荧光强度都达到大;温度升高,荧光强度逐渐下降;pH降低或升高,荧光大发射波长均红移;低浓度变性荆对CAT活性中心有稳定作用;浓度增加,荧光谱带红移,活性降低甚至丧失;脲和盐酸胍对CAT荧光有动态猝灭作用.结论 用荧光光谱法研究CAT溶液稳定性,方法简便、准确、可靠.
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雅致小克银汉霉对16α,17α-环氧黄体酮C11α-羟基化的工艺研究
目的 研究雅致小克银汉霉对16α,17α-环氧黄体酮的C11α-羟基化的工艺条件.方法 通过单因素试验和正交设计,以C11α-羟基化转化率为指标,确定佳发酵工艺条件.结果 该菌株佳发酵工艺条件为:葡萄糖3%,玉米浆2.8%,(NH4)2SO4 0.3%,MnSO4 0.01%,BaCl2 0.02%,ZnSO4 0.005%,LiCl 0.01%,初始pH 4.5,接种量3%,装液量100 mL/500 mL,摇床选用往复式摇床.结论 采用优化后的培养条件,C11α-羟基化转化率迭65.16%.作为1株高羟化能力的新菌株,具有良好的应用前景.
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重组人干扰素α-2b滴鼻剂对小鼠免疫功能影响的研究
目的 研究重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)滴鼻剂对小鼠免疫功能的影响.方法 应用比色法、ELISA双抗体夹心法,分别测定在高(10 000 u/只)、中(1 000 u/只)、低(100 u/只)3种剂量rhIFNα-2b滴鼻剂作用下,不同时间(10,20,30 d)小鼠脾脏NK细胞毒指数和唾液IgA含量的变化.结果 与基质液组比较,10 d高剂量组、10,20,30 d中剂量组和20,30 d低剂量组的NK细胞毒指数均显著增加(P<0.05),20 d高剂量组增加极显著(P<0.01).10,20,30 d各剂量组IgA含量均极显著增加(P<0.01),20 d高、中剂量组IgA含量高,药理作用强于10,30 d组(P<0.05).结论 rhIFNα-2b滴鼻荆具有显著提高小鼠免疫功能的作用.
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甲基强的松龙对深低温脑缺血再灌注大鼠脑组织S-100β蛋白表达的影响
目的 观察甲基强的松龙(MP)对深低温脑缺血再灌注大鼠脑组织S-100β蛋白表达的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和MP组,应用SABC技术检测脑组织S-100β蛋白表达.结果 假手术组脑组织S-100β蛋白呈基础水平表达;MP组S-100β蛋白表达量与模型组比较显著降低.结论 MP可能通过抑制S-100β的过量表达,对深低温缺血再灌注脑损害发挥保护作用.
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D-氨基葡萄糖盐酸盐诱导淋巴细胞增殖及其机制
目的 研究D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)对小鼠淋巴细胞增殖及其作用机制.方法 利用荧光染料CFSE为细胞标记,研究GAH对小鼠淋巴细胞增殖的影响.激光共聚焦显微镜、流式细胞仪分别检测GAH对细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白(CaM)表达的影响.结果 GAH可使淋巴细胞增殖.加入GAH 2,4,6 h后,细胞内Ca2+浓度与对照组相比显著升高.GAH作用72 h后,细胞内CaM阳性表达细胞的百分率与对照组相比显著增加,由(61.80±0.97)%增至(79.21±0.95)%,说明GAH能够诱导淋巴细胞内CaM表达增加.结论 GAH能够提高淋巴细胞内Ca2+浓度,促进CaM表达,触发Ca2+信号通路,活化淋巴细胞增殖.
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叶酸-白蛋白纳米粒偶联荧光素制备工艺的研究
目的 研究叶酸-白蛋白纳米粒(叶酸-BSA纳米粒)偶联荧光素的制备工艺.方法 制备叶酸-BSA纳米粒偶联物,将所得偶联物物理包合荧光素,通过透析将大部分未包裹的荧光素除去,并用葡聚糖凝胶柱色谱法进一步分离纯化,用紫外分光光度法测定荧光素上裁效率.结果 通过物理包合可以成功将荧光素包裹到叶酸-BSA纳米粒内,荧光素上载效率为6.4%.结论 通过研究叶酸-BSA纳米粒包裹荧光素的制备工艺,可为进一步利用叶酸-BSA纳米粒偶联物包裹近红外荧光染料,对肿瘤体内在位监测奠定了基础.
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蝮蛇毒小分子多肽的分离、纯化及其抗肿瘤作用研究
目的 从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽saxis,测定理化性质,研究其对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法 利用有机溶剂沉淀和Sephadex G-50、Sephadex G-25凝胶过滤色谱等方法分离纯化长白山栖岩蝮蛇蛇毒中的1种小分子多肽Saxis;采用Trieine-SDS-PAGE鉴定;利用Bradford蛋白质测定法测定蛋白质浓度;运用MTT比色法检测该小分子多肽对宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞SMMC-7721和胃腺癌细胞SGC-7901的生长抑制作用.结果 该小分子多肽Saxis的相对分子质量约为5 200,它能抑制Hela、SMMC-7721和SGC-7901细胞的增殖,并且对这3种肿瘤细胞的抗增殖作用具有药物剂量依赖关系,24 h的IC50分别为66.3,54.5,62.2μg/mL.结论 利用有机溶剂沉淀和凝胶过滤色谱法可以从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,其对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用.
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流动注射化学发光法测定溶菌酶含量
目的 建立测定溶菌酶的流动注射化学发光法.方法 在酸性介质中,高锰酸钾能氧化溶菌酶产生化学发光,而甲醛能够显著增强该体系的发光强度.据此建立简单快速测定溶菌酶的流动注射化学发光法.结果 在优条件下,溶菌酶的线性范围在0.05～0.34 mg/mL之间,检测限是7.15μg/mL.对0.20 mg/mL溶菌酶标准溶液进行11次平行测定,RSD为3.82%.结论 此法用于人唾液中溶菌酶的含量测定,结果令人满意,方法重复性好,灵敏度高.
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神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及其生物学活性研究
目的 探讨Neurturin(NTN)基因转染Vero细胞后的表达情况,为恒河猴帕金森病(PD)基因治疗打下基础.方法 将表达栽体pcDNA3-hNTN转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对表达的人NTN蛋白进行了体外生物学活性测定.结果 pcDNA3-hNTN质粒转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆且有目的 蛋白hNTN表达,表达的hNTN在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的胚胎中脑多巴胺能神经元的存活.结论 获得了能稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,其表达的hNTN对体外培养的中脑多巴胺能神经元具有保护作用,为移植并进行PD猴基因治疗动物实验打下了基础.
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骨唾液酸蛋白稳定性及成骨活性研究
目的 对重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)进行稳定性及成骨活性研究,为进一步研究rhBSP功能活性,揭示相关病理机制奠定基础.方法 Western blot检测rhBSP抗原性;SDS-PAGE蛋白电泳及毛细管电泳分析rhBSP的降解稳定性;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测rhBSP对小鼠胚胎成骨细胞株(MC3T3-E1)ALP活性的影响.结果 rhBSP能与BSP单抗稳定结合;rhBSP对温度敏感,在4和25℃极易降解,而在-20℃和冻干保存则相对稳定;rhBSP能提高MC3T3-E1细胞的ALP活性.结论 rhBSP的稳定性主要受温度的影响,-20℃保存相对稳定;rhBSP可以促进MC3T3-E1细胞ALP的表达.
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山楂中谷甾醇抑制肿瘤细胞的研究
目的 从山楂中提取及鉴定谷甾醇,并研究其对3种肿瘤细胞和人体正常肝脏细胞的作用.方法 取对数生长期的细胞进行MTT法细胞增殖实验及DNA凝胶电泳实验,观察谷甾醇对不同细胞的作用.结果 MTT法细胞增殖实验显示一定剂量的谷甾醇对体外培养的HepS、S180、EAC细胞有显著的抑制作用(P<0.01),抑制率总体上与时间和浓度呈正相关;对L02细胞无明显的抑制作用(P0.05);电泳结果显示经谷甾醇作用的HepS细胞DNA出现梯带.结论 谷甾醇可能是通过促进肿瘤细胞凋亡来抑制其增殖.
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我国疫苗产业发展现状与展望
通过比较国内外疫苗行业的发展情况,从分析我国疫苗流通体系,调研传统疫苗和新型疫苗的品种和质量,以及评价我国疫苗制品和疫苗生产企业的双重竞争等三方面,综述了我国疫苗制品、疫苗市场与疫苗生产企业的发展现状,指出了我国疫苗产业的市场前景与发展方向.
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单糖类似物在糖基化研究和临床治疗中的应用进展
糖基化是生物体常见的共翻译和翻译后修饰过程.糖链在生物的生长、发育和疾病过程中起着重要作用.人工合成带有各种活性基团的单糖类似物,使其被细胞摄取,进入到糖基化途径中,不仅使糖基化过程的调控和研究变得更为方便,还展示出诱人的临床治疗前景.
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海藻酸钠接枝聚合物研究进展
海藻酸钠作为药用辅料具有良好的生物相容性和生物降解性,且无毒、无免疫原性.海藻酸钠的结构特点是含有大量羧基和羟基,可以通过多种接枝反应如化学接枝、化学-酶法和紫外光接枝等对其进行改性.为更合理选择改性方法以便推进海藻酸钠接枝聚合物广泛的药学应用,此文对海藻酸钠与烷烃、环糊精、烯类、氨基酸类、醇类等的接枝反应及其改性聚合物应用进行了综述.
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叶酸的生物合成及其代谢工程研究进展
叶酸分子由喋呤、对氨基苯甲酸和谷氨酸从头合成,人体缺乏合成叶酸的完整体系,需从食物中摄取.人体缺乏叶酸将导致一系列疾病,加上叶酸在某些肿瘤和心血管疾病方面的作用,使通过基因工程的方法研究和改变植物或微生物中叶酸的代谢受到相当重视.此文概述近年来通过基因工程对叶酸生物合成途径中关键酶及其基因的研究进展.
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新型抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂帕拉米韦研究进展
神经氨酸酶(NA)抑制荆是近年来开发的一类抗流感病毒药物,具有对各亚型流感病毒广谱的有效性、低耐药性、良好的患者耐受性等优点,成为当前抗击人感染高致病性禽流感和新型甲型H1N1流感病毒主要的一类药物.帕拉米韦作为一种新型NA抑制剂,可以抑制多种甲、乙型流感病毒的NA活性,已进入临床研究阶段,但存在口服生物利用度不高的问题.此文介绍了帕拉米韦的研发历程、理化性质、NA抑制作用及其药动学、药效学及临床实验等研究状况.
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肝素的抗感染作用
通过对肝素并结合硫酸乙酰肝素在抗感染方面的文献加以综述,总结了研究方法与研究现状,为肝素作为广谱的抗感染制剂进行药物开发提供参考.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
