中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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黄芩苷对化疗药物所致小鼠免疫低下的调节作用
目的 研究黄芩苷对化疗药物所致小鼠免疫功能低下的调节作用.方法 建立小鼠免疫低下模型,ig给予黄芩苷40,20,10 mg/kg,用流式细胞仪测定小鼠外周血中T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的分布,常规计数骨髓有核细胞数量,观察巨噬细胞吞噬指数、免疫器官脏器指数及组织形态的变化.结果 黄芩苷能够提升免疫低下小鼠外周血T淋巴细胞亚群的水平,提高免疫功能,并改善化疗药物导致骨髓造血功能低下的不良反应.结论 黄芩苷对化疗所致的免疫低下有保护作用,并能调节机体的免疫功能.
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一种中华稻蝗成虫抗菌蛋白质的初步分离
目的 提取中华稻蝗成虫中的抗菌蛋白质并测定其抗菌活性.方法 对中华稻蝗成虫经针刺损伤和菌液浸泡相接合的方法处理,粗提液经沸水浴热变性、凝胶过滤色谱、高效液相色谱分析,初步分离中华稻蝗成虫中的抗菌蛋白质,以金黄色葡萄球菌为指示菌,抑菌圈法检测其抗菌活性.结果 经高效液相色谱分析表明中华稻蝗成虫中能产生抗菌蛋白质,其相对分子质量约为3 600.结论 首次从直翅目昆虫中华稻蝗中分离到对革兰阳性菌有较强活性的抗菌蛋白质.
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壳聚糖/酸活化凹凸棒黏土复合物对双氯芬酸钠的吸附及体外释放
目的 研究壳聚糖/酸活化凹凸棒黏土(酸化凹土)复合物对双氯芬酸钠的吸附作用和体外释放性能.方法 采用紫外分光度法讨论复合物中壳聚糖的体积、pH值、吸附时间对吸附率和累积释放度的影响.结果 在吸附介质pH=7和吸附4 h条件下,复合物对双氯芬酸钠的吸附率和释放度可达到80%以上.结论 壳聚糖/酸化凹土复合物对双氯芬酸钠具有较好的吸附和释放性能,体外释放符合Higuchi方程.
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重组人白细胞介素21表达条件的探讨
目的 探讨重组人白细胞介素21工程菌诱导表达的佳条件.方法 用摇瓶发酵的方法探索不同诱导条件(诱导温度、诱导时间、接种量、IPTG浓度等)对目的蛋白质表达的影响.结果 该工程菌表达目的蛋白质的佳温度是42℃;高密度接种更有利于目的蛋白质的表达.结论 建立了BL251/pET-30a(+)-IL21工程菌佳诱导表达条件,为重组人白细胞介素21的制备奠定了基础.
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人C-型利钠肽-血清白蛋白融合蛋白质的构建及在毕赤酵母中的分泌表达
目的 构建重组表达人C-型利尿钠肽(CNP)-人血清白蛋白(HAS)融合蛋白质的毕赤酵母.方法 重叠PCR拼接CNP(400 bp)-HAS(1 800 bp)成融合基因,双酶切后克隆至表达载体pPIC9K中.电穿孔法转染毕赤酵母菌KM71,摇瓶培养分泌表达.结果 融合基因约为2 200 bp,序列测定正确.SDS-PAGE分析相对分子质量约为80 000,Western blot和RIA鉴定显示其为CNP与HAS的杂合分子.结论 实现了HAS-CNP融合蛋白质在毕赤酵母中的分泌表达.
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山楂熊果酸的制备及对小鼠免疫功能和肝癌细胞凋亡的影响
目的 探讨山楂熊果酸(UA)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用及UA对HepS肝癌细胞的影响.方法 腹腔注射CTX形成免疫抑制模型,观察UA对模型小鼠的免疫活性的影响;从小鼠腹腔抽取对数生长期肝癌细胞,用流式细胞术和DNA凝胶电泳法检测不同剂量UA对肿瘤细胞凋亡的影响.结果 3个剂量的UA均能显著升高外周血的白细胞数,增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进脾淋巴细胞增殖,增加脾指数;凝胶电泳检测DNA梯带,不同剂量的UA均能显著增加肿瘤细胞的凋亡率.结论 UA对CTX造成的免疫抑制小鼠有显著的正调节作用,对HepS肝癌细胞凋亡有显著促进作用.
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节杆菌黄嘌呤氧化酶提取优化的初步研究
目的 从节杆菌Arthrobacter sp.XL2胞内中初步提取黄嘌呤氧化酶(XOD).方法 探讨了不同破壁方法和硫酸铵盐析提取粗酶的条件.采用响应面分析法优化了超声波法抽提XOD的条件.结果 菌体用超声波破壁,在频率25 KHz,细胞浓度80 mg/mL下每次辐射2 s,间隔2 s,总辐射时间18 min,输出功率400 W,破碎产酶量达到(4.69±0.11) U/mL.用40%～60%饱和度硫酸铵阶段盐析提取粗酶效果好.将盐析粗酶用Sephadex G-25脱盐后,比酶活达到6.95 U/mg,纯度提高了3.43倍,然后进行XOD粗酶部分酶学性质研究.XOD的稳定pH和温度范围分别为:pH 7.0～9.0和低于50℃.XOD的适反应温度和pH分别为:40℃及pH 8.0.Zn2+,Cd2+,Cu2+,Pb2+,Ag+,Hg2+强烈抑制酶的活性.结论 此粗酶提取工艺可以有效地将XOD从细胞内释放出来,提高了粗酶抽提得率.为后续的进一步纯化研究奠定了基础.
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金针菇免疫调节蛋白基因表达及活性初步研究
目的 对金针菇免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein from flammulina velutipes,FIP-fve)基因进行原核表达及活性测定.方法 通过RT-PCR得到FIP-fve,构建pUC19-FIP-fve,和表达质粒pET30-FIP-fve,转化大肠杆菌DE3(BL21),经IPTG诱导,表达产物纯化后进行活性试验.结果 该基因在DE3(BL21)中获得了大量表达.表达产物能促进巨噬细胞吞噬功能(P＜0.01)、明显增加小鼠血清中IFN-γ的含量(P＜0.01)及抑制小鼠移植性S180肉瘤的生长,其抑瘤率分别为31.84%(P＜0.05)和36.04%(P＜0.05).结论 表达蛋白具有活性,这对于将其开发为免疫调节、抗过敏、抗肿瘤新药具有重要意义.
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胸腺五肽给药间隔对重症肌无力小鼠T淋巴细胞亚群的影响
目的 检测胸腺五肽不同给药间隔对实验性自身免疫性重症肌无力小鼠(EAMG)T淋巴细胞亚群的影响.方法 C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组及3种不同给药间隔的治疗组,每组8只.治疗期内各治疗组给药总量相同,分别于模型成功后每1天(Ⅰ组)、每2天(Ⅱ组)或每4天(Ⅲ组)给药.结果 荧光显微镜法检测CD4+/CD8+结果显示,正常对照组低于EAMG模型组或给药Ⅰ组(P＜0.05),给药Ⅱ组低于EAMG模型组(P＜0.05);给药Ⅲ组接近EAMG模型组(P＞0.05).结论 提示胸腺五肽作为EAMG小鼠CD4+/CD8+的免疫调节剂,以每2天给药1次的效果较好.
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壳聚糖及其衍生物对肝癌细胞SMMC7721的生长抑制作用
目的 观察壳聚糖及其衍生物对肝癌细胞SMMC7721的生长抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究了不同浓度水溶性壳聚糖、磺化壳聚糖、羧甲基壳聚糖和壳寡糖对肝癌细胞株SMMC7721的生长抑制作用.结果 在4种不同壳聚糖及其衍生物中,水溶性壳聚糖和磺化壳聚糖可显著抑制肝癌细胞的生长,并在一定范围内(50～400 mg/L)呈剂量依赖关系,其中以磺化壳聚糖为显著,羧甲基壳聚糖和壳寡糖对肝癌细胞无生长抑制作用.结论 壳聚糖及其衍生物可抑制肝癌细胞的生长,并且呈剂量依赖关系.
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猪肝组织中硫酸乙酰肝素的分离纯化及二糖组成分析
目的 从少量猪肝组织中分离纯化硫酸乙酰肝素(HS)并进行二糖组成分析.方法 分别采用胰蛋白酶及中性蛋白酶对猪肝组织进行酶解,再分别采用AG 50W-X2强阳离子交换色谱、Sephadex G-10凝胶过滤色谱、Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱法纯化.将纯化的HS分别采用肝素酶Ⅰ和Ⅲ降解,所得到的二糖经2-氨基苯甲酰胺标记后,采用PA03色谱柱分析其二糖组成.结果 经色谱和电泳分析,所得到的HS不含蛋白质及其它糖胺聚糖,其二糖组成以非硫酸化和低硫酸化二糖为主.结论 该方法可以有效分离、纯化猪肝组织中的HS,并适用于少量组织中HS二糖组成分析.
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交联重组枯草杆菌纤溶酶聚集体的制备及其性质研究
目的 制备交联重组枯草杆菌纤溶酶聚集体(CLEAs),对其酶学性质进行研究,提高重组枯草杆菌纤溶酶(rBSFE)的稳定性.方法 通过微生物发酵,分离得天然rBSFE,经硫酸铵沉淀后,以戊二醛作为交联剂对其进行化学交联,得CLEAs.用常规方法测定各种因素对rBSFE稳定性的影响.结果 在对耐热性、有机相中稳定性、对抗血清蛋白水解酶的能力的研究中,CLEAs均显示比游离酶更高的稳定性.在有机相N,N-二甲基甲酰胺中作用24 h后,CLEAs的活性下降速率为游离酶的50%.在小鼠体外血清中作用2.5 h后,游离酶活性下降56.3%,而CLEAs活性仅下降4.5%,稳定性显著高于游离酶.结论 运用CLEA技术可以较大提高rBSFE的稳定性.
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蚕蛹油中α-亚麻酸的尿素包合法纯化与含量测定
目的 纯化蚕蛹油中d-亚麻酸并建立含量测定方法.方法 采用尿素包合法富集α-亚麻酸并用均匀设计法优化筛选其佳工艺条件,气相色谱法测定蚕蛹油中α-亚麻酸的含量.结果 尿素包合后,蚕蛹油中α-亚麻酸的含量由35.2%提高到74.7%;α-亚麻酸浓度在0.125～4.000 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.8%.结论 尿素包合法能有效提高蚕蛹油中α-亚麻酸含量;气相色谱法用于测定蚕蛹油中α-亚麻酸的含量,方法简便、准确、可靠,可用于α-亚麻酸及其制剂的质量控制.
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不同因素对酶联免疫法测定破伤风免疫球蛋白活性的影响
目的 考察不同因素对酶联免疫法(ELISA)测定破伤风免疫球蛋白生物活性的影响.方法 将破伤风免疫球蛋白加入不同pH的缓冲液、不同浓度的氯化钠、硫酸铵以及聚乙二醇(PEG,相对分子质量为1 000,6 000和10 000)溶液,采用ELISA法测定其活性.结果 pH 5～9的缓冲溶液对活性测定的影响不大,而pH≤4和≥10的缓冲溶液都会使测定值显著降低,当pH＜2或pH＞12时,活性下降到正常值的10%以下.随氯化钠浓度的增加测定值先下降到正常值的37.3%,后回升到41.2%,再下降;随硫酸铵浓度的增加测定值先下降到正常值的67%,后回升到99.4%,再下降.PEG对活性测定有较大影响,随PEG浓度的增加活性测定值降低.结论 缓冲液pH、盐以及PEG对破伤风免疫球蛋白活性测定有影响.
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抗凝血多肽及类肽研究进展
目的 凝血是机体重要的生理防御过程,但一些病理性血栓的形成则严重危害着人类的健康.抗凝血多(类)肽类与其他抗凝化合物相比(如肝素、华法林等),具有起效快、副作用低等优点,是今后抗凝药研究的重点.此文对抗凝血多(类)肽药物及先导物的新进展予以评述,着重介绍其结构活性关系、作用机理、应用进展.
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糖胺聚糖和蛋白聚糖对神经细胞及中枢神经系统的调节作用
糖胺聚糖及其与蛋白组成的蛋白聚糖属于体内糖复合物大分子.此文综述了它们对神经生长和中枢神经系统的调节作用.发现硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸角质素、肝素和硫酸皮肤素等糖胺聚糖或蛋白聚糖对神经细胞生长能起到一定的调节作用,这对揭示它们在脑科学的生物学功能以及开发神经系统药物有着重大的意义.
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凝胶控释注射给药系统研究进展
此文综述了可注射高分子水凝胶在药物控释领域的研究进展,主要包括天然、半天然以及人工合成的高分子水凝胶,重点介绍了两类研究比较深入的水凝胶-壳聚糖水凝胶和泊洛沙姆水凝胶.
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细菌对抗生素耐药性的生化机制与对策
细菌对抗生素的耐药性主要通过3种机制产生:改变对抗生素的敏感部位;降低透过及提高排出抗生素的能力;产生导致抗生素失效的酶.近年来,人们已经针对其机制提出了一些解决方法,例如规范化抗生素类药物的使用,开发新型抗菌药物等等.此文将对耐药性产生的生化机制及其对策进行综述.
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第12批磷酸组织胺国家对照品的建立
目的 制备、标定第12批磷酸组织胺国家对照品.方法 用第11批磷酸组织胺国家对照品(批号:150510-9411)为标准,采用猫血压法标定.结果 此批待标品,经4个实验室的标定结果合并计算效价为101.83%.结论 可以作为第12批磷酸组织胺国家对照品使用.此批国家对照品效价定为100%,即1 mg的磷酸组织胺相当于0.342 mg的组织胺,并已于2005年6月正式分发使用.
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高效亲和色谱法检测细胞培养上清中的抗体融合蛋白质
目的 建立高效亲和色谱检测抗体融合蛋白质的方法,用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制.方法 正压匀浆法装填rProtejn A Sepharose,用不同pH值缓冲液分步洗脱.结果 在25～1 000 μg/mL浓度范围内,重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)浓度和峰面积显著相关,r=0.999 6;回收率范围为91%～99%,对表达TNFR-Fc的CHO工程细胞的不同培养阶段的3份上清分别进行3次重复测定,RSD在2%以内.结论 该方法适用于抗体及抗体融合蛋白质生产的过程控制.
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高效液相色谱法测定胰岛素及其制剂中胰岛素的效价
目的 建立用高效液相色谱法测定胰岛素及其制剂的效价,并将之与已有的小鼠血糖法比较.方法 色谱柱:C18柱(岛津VP-ODS,4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:O.2 mol/L硫酸盐缓冲液(用乙醇胺调pH至2.3)-乙腈(73:27);检测波长:214 nm;流速:1 mL/min.结果 胰岛素在10～50 u/mL范围内线性关系良好,回归方程为:Y=0.001 4 X+0.222 7,r=0.999 8;精密度、重现性良好.结论 此法灵敏度高、专属性强、准确、可靠,较生物测定法方便,适于胰岛素及其制剂中胰岛素的效价测定.
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肺癌特异性转移因子口服液的研制
目的 制备羊脾特异性转移因子口服液,并检测其免疫活性.方法 采用肺癌患者术后肿瘤组织加佐剂免疫羊,取其脾用透析法制备肺肿瘤特异性转移因子.检测其理化性质,并通过E玫瑰花环试验、白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏反应实验(DTH)检测特异免疫活性.结果 制品的各项理化指标均达到了国家药品标准(WS1-XG-037-2000),E-玫瑰花法结花率为20.5%,多肽含量为1.38 mg/mL,核糖含量为83.5μg/mL.该制品能明显抑制小白鼠白细胞黏附,并能诱导小鼠皮肤迟发型超敏反应,表明该口服液对T淋巴细胞的增殖和玫瑰花结的形成均有促进作用.结论 本法制备的羊脾特异性转移因子口服液,为抗肿瘤制剂的研究奠定理论基础.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
