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鸦胆子油乳及联合顺铂对卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤生长抑制的影响
目的 研究鸦胆子油乳对人卵巢癌细胞系SKOV3细胞及SKOV3裸鼠移植瘤的生长抑制作用.方法 MTT法测定不同浓度鸦胆子油乳单独及联合顺铂对人卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用.采用人卵巢癌细胞SKOV3移植方法构建卵巢癌裸鼠模型,将32只卵巢癌裸鼠随机分为4组,每组8只.空白对照组(简称对照组)、鸦胆子油乳组(简称鸦胆子组)、鸦油顺铂联合组(简称联合组)及顺铂组.A、B组分别每隔2日腹腔注射生理盐水、鸦胆子油乳注射液0.2 mL/20 9,联合组第1天腹腔注射顺铂0.2 mL(3 mg/kg),第2天腹腔注射0.2 m L/20 9鸦胆子油乳注射液,D组每隔2日腹腔注射顺铂0.2 mL(3 mg/kg).各组均注射6次,末次腹腔注射后48 h断颈处死裸鼠,观察腹腔肿瘤组织病灶形成情况,取肿瘤病灶标本进行HE染色和Western blot检测肿瘤组织运动相关蛋白MRP-1/CD9和整合素α-5表达水平.结果 鸦胆子油乳对人卵巢癌SK OV3细胞的抑制作用呈剂量—时间依赖关系,鸦胆子油乳与顺铂联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用显著高于这两种药物的单独应用.Western blot结果显示鸦胆子组和顺铂组MRP-1/CD9和整合素α-5的表达均上调,且差异有统计学意义(P＜0.05),但联合组表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 鸦胆子油乳注射液腹腔给药治疗卵巢癌具有可行性和一定的疗效性,并且鸦胆子油乳可能以MRP-1/CD9和整合素α-5为靶点抑制肿瘤细胞侵袭和转移,但具体的抗肿瘤机制尚未明确.
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中药对口腔细菌生长抑制作用的研究进展
口腔是一个多菌种环境,细菌种类繁多.目前从口腔中能分离出的微生物种类多达300余种.现代口腔医学认为,口腔菌群失调是导致口腔疾病的主要原因,而菌斑堆积是引起牙周疾病不可或缺的始动因子.血链球菌、变形链球菌、粘性放线菌、牙龈卟啉单胞菌等被认为是主要口腔致病菌,在口腔中的异常生长以及生化代谢产物均能诱发口腔疾病,如牙龈炎、牙周炎、口腔溃疡等.
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干扰素-β对不同胶质瘤细胞系的生长抑制及对其他细胞因子表达调节作用的研究
目的:研究干扰素-β(IFN-β)对胶质瘤细胞系的生长抑制和诱导凋亡作用,及其对细胞因子表达的调节作用.方法:分别用IFN-β基因和蛋白刺激胶质瘤细胞系SK-MG-1和T-98,通过MTT方法检测细胞增殖情况,运用流式细胞技术检测细胞凋亡情况,用实时定量PCR法检测细胞因子的表达变化.结果:IFN-β基因和蛋白可明显抑制SK-MG-1细胞增殖,诱发细胞凋亡,但对T-98细胞系的作用很弱.SK-MG-1细胞的对照组不能检测出白细胞介素-1β(IL-1β)的表达,在48h达到42.8±8.3;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在IFN-β基因刺激后24 h其表达达到10±2.1,P=0.001;IFN-β基因刺激后白细胞介素IL-6的表达在12 h一过性降低(0.2±0.1),P=0.001,在48 h其表达升高(9.7±1.3),P=0.000.T-98细胞的对照组不能检测出肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,在刺激48 h达到5.7±2.7;白细胞介素-1β(IL-1β)在IFN-β基因刺激后12 h表达达到6.8±1.1,P=0.002;白细胞介素-6(IL-6)表达在IFN-β基因刺激后,24 h升高(2.8±0.4),P=0.030.结论:IFN-β基因和蛋白可以抑制胶质瘤细胞的增殖,诱发细胞的凋亡,可以调节其他细胞因子的表达.但是在不同的细胞系中有不同作用.
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恩度联合放射线对鼻咽癌细胞裸小鼠移植瘤生物效应及机制研究
研究认为抗血管生成药物通过抑制血管新生具有抗肿瘤浸润和转移的作用,其中内皮抑素引人关注[1-2].恩度是我国首例重组人血管内皮抑素,可诱导血管内皮细胞凋亡、抑制肿瘤新生血管形成,进而抑制细胞增殖和迁移[3].其对鼻咽癌的相关作用及其机制研究报道尚少见,故采用人鼻咽癌细胞( CNE2)裸小鼠移植瘤模型观察恩度联合放射线对其生长抑制作用,并通过免疫组化技术检测细胞增殖和凋亡相关基因的表达,探讨其机制.
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增溶剂对九类人癌细胞的影响作用
目的 抗肿瘤药物筛选常用各种增溶剂或者溶剂混合物增溶难溶化合物.本实验系统考察了各类常见助溶剂对9类人癌细胞生长的影响,为溶解低水溶性抗肿瘤化合物选取适当溶媒提供参考.方法 采用磺酰罗丹明B法,研究聚乙二醇400(PEG400)、聚山梨酯类(聚山梨酯20、聚山梨酯80)、乙醇、丙三醇、聚氧乙烯环氧蓖麻油(Cremophor EL)、二甲基亚砜及前六种溶剂与二甲基亚砜不同配比的共19种溶剂组合对生长相对较快的A549(人肺癌细胞株)、HCT116(人肠癌细胞株)、786-0(人肾癌细胞株)、OVCAR-3(人卵巢癌细胞株)、K562(人白血病细胞株)、SF295(CNS)、DU-145(人前列腺癌细胞株)、MCF7(人乳腺癌细胞株)及UACC-257(人黑色素瘤细胞株)等9种人癌细胞生长的影响.结果 细胞生长率＞90％(percentagegrowth)时视为溶剂对细胞生长无明显抑制作用；80％＜细胞生长率＜90％时视为弱抑制作用；细胞生长率＜80％时视为强抑制作用.本实验认为具有弱抑制作用或者无明显抑制作用(细胞生长率＞80％)的溶剂系统可用于筛选.当二甲基亚砜终体积分数小于0.1％时对9种测试细胞均显示弱抑制作用或无明显抑制作用；单独PEG400及乙醇终体积分数为0.25％以及丙三醇终体积分数为0.5％时,对9种测试人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比),在终体积分数为0.25％时对9种人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.1％、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.25％时对九种细胞的作用为弱抑制作用；单独聚山梨酯20、聚山梨酯80、Cremophor EL以及三者与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比)时,在体积分数0.1％对所有的测试癌细胞均表现出显著的强抑制作用；当比例为1∶9(体积比)时,三者中仅Cremophor EL/二甲基亚砜在终体积分数为0.1％时可选择性用于A549、786-0、OVCAR-3、SF295、DU-145和UACC-257等5种细胞的筛选.结论 利用上述9种人癌细胞筛选抗癌化合物时,乙醇、丙三醇、PEG400及三者与二甲基亚砜不同比例配伍(1∶1及1∶9)时,推荐使用终体积百分比不高于0.5％ (0.25％/0.25％及0.05％/0.45％)；单独二甲基亚砜使用终体积分数低于0.25％为宜；不建议使用或添加聚山梨酯20、聚山梨酯80及Cremo-phor EL等三种溶剂,但必要时可在低比例混合溶剂条件下小心使用Cremophor EL助溶.不同细胞的敏感度不同,人白血病细胞K562对所有溶剂均较敏感,人乳腺癌细胞MCF7尤其对二甲基亚砜敏感,使用时应特别注意.
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特异性转移因子对人宫颈癌细胞影响的研究分析
目的 探讨分析特异性转移因子对人宫颈癌细胞的生长抑制作用.方法 在体外实验条件下采用噻唑蓝比色法,探讨不同浓度宫颈癌特异性转移因子的作用下,人外周血单核细胞对人宫颈癌细胞的杀伤作用、其内在的剂量依赖性及实验的靶效关系.结果 在不同浓度的宫颈癌特异性转移因子作用48h后,实验组对宫颈癌细胞的杀伤活性明显高于对照组(P＜0.05)；实验组在宫颈癌特异性转移因子作用下不同效靶比的杀伤活性率均高于对照组(P＜0.05).结论 特异性转移因子对于宫颈癌细胞的生长有着一定的抑制作用,在宫颈癌免疫治疗中可能有着较好的前景.
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根皮素对K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响
根皮素(Phloretin)是一种天然的非类固醇雌激素,存在于梨、苹果等水果和多种蔬菜汁液中,具有很强的抗氧化作用,同时也可作为一种化疗药物,治疗肿瘤性疾病[1].白血病是一组造血系统恶性肿瘤,具有较高的致死率.寻求新的高效低毒的治疗药物是白血病治疗的迫切需要.我们以根皮素为研究对象,探讨其对白血病细胞株K562的生长抑制作用.
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氮杂胞苷类似物的设计、合成及抗肿瘤活性
目的 为了提高DNA甲基转移酶抑制剂氮杂胞苷的稳定性,降低其细胞毒作用,以氮杂胞苷为先导化合物,设计并合成了6-氨基-4-烷基/芳基-1-吡喃糖基-1,3,5-三嗪-2(1H)-酮和4-氨基-6-烷基-1,3,5-三嗪-2-基-1-硫代-吡喃糖苷两类化合物.方法 以眯基脲(或眯基硫脲)与原酸酯(或苯甲酸甲酯)为起始原料,经5步反应合成目标化合物;以氮杂胞苷为阳性对照药,采用MTT法评价了目标化合物对人白血病细胞HL-60和人乳腺癌细胞MCF-7的体外抗增殖活性及与全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)的联合用药情况.结果与讨论 合成了16个未见文献报道的化合物,其结构经1H-NMR谱和MS谱确证;与氮杂胞苷相比,目标化合物细胞毒作用均显著降低,具有中等强度的细胞生长抑制作用;吡喃糖/双糖硫苷4-胺基-6-甲基-1,3,5-三嗪-2-基-1-硫代-6'-去氧-α-L-吡喃甘露糖苷(化合物7g)和ATRA联合用药能增强抗MCF-7增殖活性,有进一步研究的价值.
关键词： DNA甲基转移酶抑制剂 氮杂胞苷 吡喃糖 生长抑制作用 联合用药 -
蝙蝠葛酚性碱对胃癌菏瘤鼠抗肿瘤作用
目的:初步现察蝙蝠葛酚性碱对胃癌小鼠原位移植瘤生长的抑制作用.方法:取50只小鼠建立肿瘤鼠动物模型,测定小鼠瘤重、检测蝙蝠葛酚性碱对肿瘤的抑制率.结果:蝙蝠葛酚性碱各组对荷瘤鼠肿瘤生长具有抑制作用,三个剂量组的抑瘤率分别是55.13％、48.67％、39.92％,与模型对照组比较具有统计学意义(P＜0.05).结论:蝙蝠葛酚性碱对胃癌荷瘤鼠具有抑制作用,本研究为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据.
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毛萼乙素纳米混悬剂.Ⅱ.对小鼠肝癌H22移植瘤的生长抑制作用
采用小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,考察不同给药途径和剂量下,毛萼乙素纳米混悬剂的抗肿瘤作用及毒性.在适宜的给药剂量下,毛萼乙素纳米混悬剂经静脉注射、腹腔注射和灌胃3种途径给药均可抑制小鼠肝癌H22移植瘤的生长,并呈现明确的量效关系,但其毒性也随着剂量的增加而明显增大.在10 mg/kg的剂量下,腹腔注射的抑瘤作用优于静脉注射；但该途径给药产生的毒性也比静脉注射大.灌胃给药的抑瘤作用弱,且高剂量时会产生严重的胃肠道不良反应.
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壳聚糖及其衍生物对肝癌细胞SMMC7721的生长抑制作用
目的 观察壳聚糖及其衍生物对肝癌细胞SMMC7721的生长抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究了不同浓度水溶性壳聚糖、磺化壳聚糖、羧甲基壳聚糖和壳寡糖对肝癌细胞株SMMC7721的生长抑制作用.结果 在4种不同壳聚糖及其衍生物中,水溶性壳聚糖和磺化壳聚糖可显著抑制肝癌细胞的生长,并在一定范围内(50～400 mg/L)呈剂量依赖关系,其中以磺化壳聚糖为显著,羧甲基壳聚糖和壳寡糖对肝癌细胞无生长抑制作用.结论 壳聚糖及其衍生物可抑制肝癌细胞的生长,并且呈剂量依赖关系.
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糖酵解抑制剂对低氧胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响
肿瘤内血管生长的滞后及肿瘤细胞快速增殖导致肿瘤细胞缺氧是实体肿瘤微环境的基本特征之一[1].胰腺癌是消化道恶性程度高的恶性肿瘤之一,早期诊断极其困难,预后极差,其5年生存率低于2%.本研究旨在建立体外低氧培养人胰腺癌细胞panc-1的实验模型,观察糖酵解抑制剂2-脱氧-D.葡萄糖(2-DG)对panc-1细胞的生长抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响.
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黄芩苷联合顺铂对人肝癌细胞HepG2.0的生长抑制作用
目的 探讨黄芩苷联合顺铂对人肝癌细胞HepG2.0的生长抑制作用,并初步探讨其抑癌机制.方法 设置阴性对照组(仅加含10％小牛血清的DMEM培养液的HepG2.0细胞)、阳性对照组(12 μg/mL顺铂处理的HepG2.0细胞),及设置不同浓度单药黄芩苷、单药顺铂及黄芩苷联合顺铂,分别作用于人肝癌细胞HepG2.0,采用CCK-8法检测细胞活性,以细胞生长抑制率反映各药对人肝癌细胞HepG2.0的抑制作用;利用流式细胞仪检测经联合药物作用24 h后的人肝癌细胞HepG2.0的细胞周期的改变.结果 (1)1.0～4.0 mg/mL黄芩苷单药、2.0～4.0 μg/mL顺铂单药分别作用于人肝癌细胞HepG2.0,均有明显生长抑制作用(P＜0.05),但两者之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)黄芩苷0.5 mg/mL联合顺铂3.0～4.0μg/mL对人肝癌细胞HepG2.0有协同抑制作用,黄芩苷1.0～4.0 mg/mL联合顺铂0.5 ～4.0μg/mL对人肝癌细胞HepG2.0有协同抑制作用;且3.0～4.0 mg/mL黄芩苷与0.5 ～4.0μg/mL顺铂联合应用有明显协同作用;协同指数在0.37 ～0.97之间;黄芩苷2.0 mg/mL联合顺铂1.0μg/mL对人肝癌细胞HepG2.0的生长抑制率为50％.(3)黄芩苷2.0 mg/mL联合顺铂1.0μg/mL作用于人肝癌细胞HepG2.0,对比阴性对照组,G0/G1期比例增大,S期和G2/M期比例减少.结论 通过将不同浓度药物作用于人肝癌细胞HepG2.0后筛选出的适联合用药量,可以减少顺铂用量,其机制可能与阻滞人肝癌细胞HepG2.0的细胞周期于G0/G1期有关.
关键词： 黄芩苷 顺铂 人肝癌细胞HepG2.0 生长抑制作用 细胞周期 -
木犀草素联合替莫唑胺治疗脑胶质瘤及其机制的研究
目的:探讨木犀苹素联合替莫唑胺治疗脑胶质瘤的效应,并阐明木犀草素的低毒性和抑制作用机制.方法:利用MTT法测定木犀草素和替莫唑胺对脑胶质瘤细胞系U87-MG和人正常脑细胞细胞生长的抑制作用,并利用荧光染色法检测细胞形态的变化;分光光度法检测木犀草素对细胞凋亡蛋白caspase-3活性,采用Transwell小室法分析木犀草素和替莫唑胺对U87-MG细胞转移能力;采用非放射性NF-κB EMSA试剂盒测定U87-MG细胞中NF-κB表达.结果:随着木犀草素和替莫唑胺浓度的增加,U87-MG细胞生长抑制率从(0.08±0.01)％分别增加到(87.30±8.45)％和(81.94±7.32)％,木犀草素和替莫唑胺对的半抑制率IC50分别为(30.54±2.98)和(32.79±3.08) μmol/L;但木犀草素作用下的正常脑细胞的生长并未受到明显的抑制.木犀草索与替莫唑胺联合使用时,对U87-MG细胞的生长抑制起到了良好的协同作用;与空白对照组比较,木犀草素和替莫唑胺存在下的U87-MG细胞的侵袭能力从(100.36±8.91)％分别降到了(15.48±1.23)和(27.66±2.76);U87-MG细胞中凋亡蛋白caspase-3相对活性增加了(90.44±5.61)％,并能够NF-κB信号的表达下调了(89.64±6.77)％.结论:低毒性的木犀草素可能通过下调NF-κB信号通路和激活凋亡caspase-3酶联反应的方式对U87-MG细胞的侵袭、增殖产生抑制作用,并与低浓度的替莫唑胺联合使用有良好的协同作用.
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抗人NRP-1单克隆抗体对肝癌HepG2细胞株的生长抑制作用及机制初探
目的 研究抗人神经纤毛蛋白-1 (Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用及其机制.方法 小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 mAb)并用rProteinA亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平.Western blot检测NRP-1 mAb对HepG2细胞的特异性,细胞免疫荧光和流式细胞术检测NRP-1蛋白在肝癌细胞株HepG2上的表达,MTT法检测NRP-1 mAb对HepG2的生长抑制作用,Westem blot检测ERK1/2、P-ERK1/2、Akt、P-Akt蛋白的表达水平.结果 SDS-PAGE和间接ELISA检测纯化的NRP-1 mAb纯度为95％以上,效价为1×10-6;Western blot检测结果显示NRP-1 mAb可与HepG2细胞膜上的NRP-1蛋白特异性结合.细胞免疫荧光染色结果显示NRP-1定位于HepG2细胞膜,流式细胞术结果显示NRP-1蛋白在HepG2细胞上表达水平较高;MTT法检测结果显示NRP-1 mAb对HepG2细胞有生长抑制作用.Western blot检测到在不同浓度NRP-1 mAb作用下,HepG2细胞裂解液P-ERK1/2、P-Akt蛋白的条带信号逐渐减弱.结论 纯化的NRP-1mAb能抑制HepG2细胞的生长,其抑制作用是通过EGF和HGF信号通路实现的.
关键词： 人神经纤毛蛋白-1 肝癌 NRP-1单克隆抗体 生长抑制作用 -
驱虫斑鸠菊提取物体外对肿瘤细胞生长抑制作用的初步研究
目的:观察驱虫斑鸠菊提取物在体外对肿瘤细胞生长抑制的影响.方法:用四甲基噻唑氮蓝比色法测定驱虫斑鸠菊提取物对人恶性黑色素瘤细胞株A375、小鼠黑色素瘤B 16细胞、人乳腺癌细胞BCF-7、人胃癌细胞BGC-823、人肝癌细胞HepG-2生长抑制的影响.结果:驱虫斑鸠菊提取物在体外对5种肿瘤细胞生长有不同程度的抑制作用.结论:驱虫斑鸠菊提取物在体外对多种肿瘤细胞有不同程度的生长抑制作用,尤以对恶性黑色素瘤A375细胞较为明显.
