保加利亚乳杆菌胞外多糖对人癌细胞抑制作用的研究

乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的黏液或荚膜多糖.已有的一些报道表明:乳酸菌EPS通过抑制肿瘤、抗溃疡、免疫调节和降低胆固醇活性进而对人体健康产生促进作用.Oda等[1]早在20世纪80年代就确定了由瑞士乳杆菌约古特亚种(Lb.helveticus ssp.jugurti)产生的EPS具有抑制肿瘤活性.

白英抑瘤作用有效部位的初步筛选

目的:从白英不同组分[白英总碱(SLTA)、白英总皂苷(SLTG)、SLTA+SLTG、白英总提物]中筛选出抑瘤作用的主要有效部位,并通过对人癌细胞体外增殖的抑制作用进行验证.方法:首先建立S-180肉瘤和艾氏腹水瘤(EAC)荷瘤小鼠模型,给予阳性对照药及白英不同组分进行干预,分别以抑瘤率及小鼠的生命延长率为主要检测指标,比较组间抗肿瘤药效强度,选出白英抗肿瘤有效部位.选取人肝癌细胞SMMC-7721、人肺腺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-803、人宫颈癌细胞HeLa、人乳腺癌细胞MDA-MB-231多种人癌细胞作为研究对象,以紫杉醇为阳性对照药物,通过MTT法检测药物对癌细胞的抑制率,并计算相应的半数抑制浓度(IC50)值.同时显微镜下观察在给予IC50浓度的样品处理时细胞数目及形态的改变.结果:白英不同组分均有一定的抗肿瘤作用,其中SLTA的抑瘤作用强,以中剂量(8g/kg)效果好,对S-180荷瘤小鼠的抑瘤率为54.05％,对EAC荷瘤小鼠的生命延长率为31.71％.SLTA样品对多种人癌细胞均有一定的抑制作用,对人肝癌细胞SMMC-7721、人肺腺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-803、人宫颈癌细胞HeLa、人乳腺癌细胞MDA-MB-231的IC50分别为292.0、93.0、181.4、396.3、244.7mg/L.与空白对照组比较,半抑制下的细胞数目急剧下降,且均呈现萎缩的趋势.结论:SLTA为白英抑瘤作用的主要有效部位.

新研制的查耳酮类似物的人癌细胞体外评价

增溶剂对九类人癌细胞的影响作用

目的 抗肿瘤药物筛选常用各种增溶剂或者溶剂混合物增溶难溶化合物.本实验系统考察了各类常见助溶剂对9类人癌细胞生长的影响,为溶解低水溶性抗肿瘤化合物选取适当溶媒提供参考.方法 采用磺酰罗丹明B法,研究聚乙二醇400(PEG400)、聚山梨酯类(聚山梨酯20、聚山梨酯80)、乙醇、丙三醇、聚氧乙烯环氧蓖麻油(Cremophor EL)、二甲基亚砜及前六种溶剂与二甲基亚砜不同配比的共19种溶剂组合对生长相对较快的A549(人肺癌细胞株)、HCT116(人肠癌细胞株)、786-0(人肾癌细胞株)、OVCAR-3(人卵巢癌细胞株)、K562(人白血病细胞株)、SF295(CNS)、DU-145(人前列腺癌细胞株)、MCF7(人乳腺癌细胞株)及UACC-257(人黑色素瘤细胞株)等9种人癌细胞生长的影响.结果 细胞生长率＞90％(percentagegrowth)时视为溶剂对细胞生长无明显抑制作用；80％＜细胞生长率＜90％时视为弱抑制作用；细胞生长率＜80％时视为强抑制作用.本实验认为具有弱抑制作用或者无明显抑制作用(细胞生长率＞80％)的溶剂系统可用于筛选.当二甲基亚砜终体积分数小于0.1％时对9种测试细胞均显示弱抑制作用或无明显抑制作用；单独PEG400及乙醇终体积分数为0.25％以及丙三醇终体积分数为0.5％时,对9种测试人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比),在终体积分数为0.25％时对9种人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.1％、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.25％时对九种细胞的作用为弱抑制作用；单独聚山梨酯20、聚山梨酯80、Cremophor EL以及三者与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比)时,在体积分数0.1％对所有的测试癌细胞均表现出显著的强抑制作用；当比例为1∶9(体积比)时,三者中仅Cremophor EL/二甲基亚砜在终体积分数为0.1％时可选择性用于A549、786-0、OVCAR-3、SF295、DU-145和UACC-257等5种细胞的筛选.结论 利用上述9种人癌细胞筛选抗癌化合物时,乙醇、丙三醇、PEG400及三者与二甲基亚砜不同比例配伍(1∶1及1∶9)时,推荐使用终体积百分比不高于0.5％ (0.25％/0.25％及0.05％/0.45％)；单独二甲基亚砜使用终体积分数低于0.25％为宜；不建议使用或添加聚山梨酯20、聚山梨酯80及Cremo-phor EL等三种溶剂,但必要时可在低比例混合溶剂条件下小心使用Cremophor EL助溶.不同细胞的敏感度不同,人白血病细胞K562对所有溶剂均较敏感,人乳腺癌细胞MCF7尤其对二甲基亚砜敏感,使用时应特别注意.

茶多酚对人癌细胞和人体细胞增殖及凋亡的实验研究

目的选用4种人癌细胞和3种人体正常细胞进行试验,比较茶多酚(TP)对人肝癌细胞Bel-7402等和人体肝细胞CLC增殖周期的影响和诱导凋亡的作用.方法用MTT法测定TP对人癌细胞和人体正常细胞的细胞毒作用,用流式细胞仪(FCM)观察TP对细胞的周期改变和诱导凋亡作用.结果TP对人癌细胞Bel-7402,CNE1,KB和H-29的IC50依次为68.2,104.63,119.83和148.61 μg/mL;对人体正常细胞CLC,HEK-293和HD-MEC的IC50均＞400 μg/mL.150和300μg/mL TP处理Bel-7402细胞12,24和36 h,细胞凋亡率分别为13.2%,37.6%,40.7%和17.1%,39.9%,57.7%.表明TP可诱导Bel-7402细胞凋亡,使细胞周期停滞于S-G2/M期,而对CLC细胞无此作用.结论TP对人癌细胞的细胞毒作用显著高于对人体正常细胞的作用,提示TP对人癌细胞有一定的选择杀伤作用.

339粉背薯蓣根茎中2个甾体皂苷体外对人癌细胞的细胞毒作用

作者采用美国国立癌症研究所抗癌药筛选系统,对粉背薯蓣Dioscorea collettii var.hypoglauca根茎中的2个甾体皂苷--甲基原新纤细薯蓣皂苷(NSC-698793)和纤细薯蓣皂苷(NSC-698787)进行了体外细胞毒活性试验.

天然紫草萘醌类化合物及其衍生物的抗瘤作用研究

紫草为传统中药,具有广泛的药理作用,抗瘤作用是其中之一[1].由于天然紫草有效成分含量极低,抗癌活性不强,限制了临床上应用.为了提高萘醌类化合物的抗癌活性,现以紫草有效成分β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁作为先导化合物,进行结构改造[2,3],在芳环C-6或C-7以及侧链C-11引入含巯基或含氮基团,半合成系列紫草萘醌类衍生物(SYUNZs),对这系列衍生物进行体外体内试验,进一步了解紫草萘醌类衍生物的抗癌活性与其结构的相关性,为开发高效低毒的新型紫草萘醌类抗肿瘤药物提供理论数据.

蛇葡萄素聚合物胶束对3种人癌细胞体外增殖的影响

目的 观察蛇葡萄素聚合物胶束(ampelopsin loaded polymer micelles,AMP-PM)体外对人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人前列腺癌细胞PC-3和人肝癌细胞HepG-2增殖的影响,探讨AMP-PM的体外抗癌活性.方法 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人前列腺癌细胞PC-3和人肝癌细胞HepG-2,采用CCK-8法检测原料药及AMP-PM在不同时间和不同浓度下对3株人癌细胞增殖的影响,并与原料药进行对比;实验结果采用抑制率、细胞生长抑制曲线、半数抑制浓度分析.结果 蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)及其聚合物胶束对3株人癌细胞的增殖均表现出抑制作用,且这种作用呈现一定的剂量和时间依赖性;AMP对MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为33.6 μg/mL、81.9 tg/mL和75.8μg/mL;而AMP-PM对MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为25.4μg/mL、60.8 μg/mL和60.2 μg/mL;空白载体在相同实验浓度范围内对正常的人脐静脉内皮细胞HUVEC以及3种人癌细胞均无抑制作用.结论 AMP-PM在体外能显著抑制MDA-MB-231、PC-3和HepG-2细胞的增殖,且抑制作用明显高于原料药.

草珊瑚醇提物抗肿瘤有效部位的HPLC分离及各分离组分体外抗肿瘤作用的实验研究

目的 通过体外抗人癌细胞实验筛选草珊瑚醇提物抗癌活性部位或成分.方法 运用HPLC高效液相色谱对草珊瑚醇提物进行进一步分离,按峰收集得各组分再以MTT比色法评价[1]其对体外人前列腺癌细胞PC-3和人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用,进一步筛选出草珊瑚中抗肿瘤的有效成分.结果 UNS对两种人癌细胞均有较高抑制率,对UNS进行液相分离,并再次经体外细胞实验发现,UNS4的活性较高.结论 草珊瑚对PC3、MCF-7有抑制作用,但目前在草珊瑚醇提物水不溶物中还未找到活性比UNS4更高的成分,有待进一步研究.UNS4可以作为进一步研究活性较高的成分的选项.

中草药肿节风洗脱物对体外抗人癌细胞的实验研究

目的 通过体外抗人癌细胞实验筛选肿节风抗癌活性部位或成分.方法 采用超声提取法提取肿节风,所得粗提物以大孔树脂(HPD100)分离纯化.采用噻唑蓝(MTT)[1]比色法评价纯化后各洗脱部位对人乳腺癌细胞MCF-7和前列腺癌知胞PC-3的抑制作用,初步筛选出抗肿瘤有效部位,运用高效液相色谱对其进行进一步分离,按峰收集得各组分再以MTT比色法评价其对体外肿瘤细胞增殖的抑制作用,进一步筛选出肿节风中抗肿瘤的有效成分.结果 70％乙醇洗脱部位(SAE70)和水不溶物(UNS)对两种人癌细胞均有较高抑制率.结论 初步认为肿节风对PC3、MCF-7有抑制作用,但目前还未找到活性较高的成分,有待进一步研究.

3种中草药滴眼液对不同细胞株的体外细胞毒作用

目的:探讨3种中草药滴眼液对体外培养的人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用.方法:采用噻唑蓝(MTT法)测定鱼腥草滴眼液、葛根素滴眼液和双黄连滴眼液对6种细胞株(CNE2、Glc-82、HRPE、Fibro、3T3和ECV-304)的细胞毒作用并以半数抑制浓度(IC50)进行评价.结果:鱼腥草滴眼液对人癌细胞CNE2和Glc-82的IC50分别为11.5±0.25 μl/ml和24.0±0.8 μl/ml;对正常细胞HRPE、Fibro、3T3和ECV-304细胞的IC50分别为18.0±3.5 μl/ml、52.0±14.0 μl/ml、17.5±3.5 μl/ml和17.5±1.3 μl/ml.葛根素滴眼液对CNE2和Clc-82细胞的IC50为9.8±2.3 μl/ml和17.0±5.0 μl/ml,对ECV-304细胞的IC50为10.5±0.95 μl/ml,而对HRPE、Fibro和3T3的IC50均＞110 μl/ml.双黄连滴眼液对CNE2、Glc-82细胞的IC50为18.9±5.0 μl/ml和23.9±0.6 μl/ml,对HRPE细胞的IC50为113.9±25.6 μl/ml,对Fibro、3T3和ECV-304的IC50均＞100 μl/ml.结论:鱼腥草滴眼液对人癌细胞和正常细胞均有显著的细胞毒作用.葛根素滴眼液和双黄连滴眼液对正常细胞无明显的细胞毒作用.

狼毒大戟二萜内酯对人癌细胞体外抑制作用的研究

从狼毒大戟中分得的两个二萜内酯化合物:16-hydroxypseudojolkinolide B(化合物Ⅰ)和jolkinolide B(化合物Ⅱ),对人红白血病K562细胞及人鼻咽癌CNE2细胞的抑制作用呈明显的量效关系,化合物Ⅰ的IC50与阿霉素相当.

噻替派(Thiotepa)滴眼液对人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用

目的 了解0.05%Thiotepa滴眼液对各种不同的人癌细胞和正常细胞生长的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行体外细胞毒试验,测定Thiotepa滴眼液对人癌细胞和正常细胞的生长抑制作用,以半数抑制浓度(IC50值)进行评价.结果 Thiotepa滴眼液在50μg/ml～0.78μg/ml浓度下对人癌细胞Glc-82、K-562、Bel-7402、Hela和CNE2的IC50值依次为:22.7μg/ml、10.6μg/ml、15.3μg/ml、11.2μg/ml和9.6μg/ml.对人正常细胞Hk-293、ECV-304、HRPE、Fibro和小鼠3T3细胞的IC50值分别为:1.4μg/ml、12.5μg/ml、17.8μg/ml、36.6μg/ml和14.4μg/ml.结论 Thiotepa滴眼液对各种细胞有明显的生长抑制作用;0.05%Thiotepa滴眼液对各种人癌细胞和正常细胞均有强的细胞毒作用,且对人癌细胞无明显的选择性抑制作用.

BAG-1蛋白在人癌细胞中的表达和功能

1995年S Takayama等[1]发现一个可以显著促进Bcl-2抗凋亡作用的蛋白,将其命名为BAG-1(Bcl-2-associated athanogene 1).

九节龙皂甙对8株人癌细胞的抑制作用

0　引言　川产九节龙(Ardisea pusilla A. PC)系紫金牛科紫金牛属植物的全草，九节龙皂甙(Ardipusilloside)是从该全草中分离出的C53H86O22.2H2O，经初步药理试验表明具有提高免疫功能的作用［1］. 我们采用MTT法观察九节龙皂甙对8株人癌细胞的细胞毒作用.1　材料和方法1.1　材料　肝癌(SMMC-7721)，本校西京医院中医科提供；肝癌(HCC-9204)，本校病理科提供；胃癌(SGC-7901)，本校西京医院消化内科提供；卵巢癌(HO-8910)本校西京医院妇产科提供；宫颈癌(Hela)本校403研究所提供；肺癌(A549)、食管癌(Eca-109)、肾癌(GRC-1)本校实验动物研究中心提供. 九节龙皂甙由本校药物研究所提纯，批号：971017；丝裂霉素(MMC)日本协和发酵工业株式会社生产，批号：174AGF；MTT(SIGMA公司产品). 两种药物终浓度均为：50.0 mg.L-1→25.0 mg.L-1→12.5 mg.L-1→6.25 mg.L-1→3.13 mg.L-1→1.56 mg.L-1.1.2　方法　将8株人癌细胞制成单细胞悬液，接种于96孔平面培养板中，调正细胞数为5×104*mL-1，每孔细胞悬液100 μL. 将96孔板置于37℃，50 mL.L-1 CO2饱和温度的二氧化碳培养箱培养24 h，设实验，阴性对照及阳性对照孔. 实验和阳性对照孔分别加入50.0 mg.L-1, 25.0 mg.L-1, 12.5 mg.L-1, 6.25 mg.L-1, 3.13 mg.L-1, 1.56 mg.L-1的九节龙皂甙及MMC，阴性对照孔加入等量的培养液，以不含细胞的1640完全培养液为空白对照，每组6个平行孔，继续培养72 h，去除培养液，加入5 g.L-1 MTT 20 μL，继续培养4 h，加入二甲基亚砜(DMSO)150 μL/孔，并振荡待紫蓝色结晶完全溶解，采用DG-3022型酶标仪(国营华东电子管厂)测各孔的吸光度值(A490 nm )，按公式(实验孔平均A490 nm值/阴性对照孔平均A490 nm值)×100%计算，并以实验药物浓度的对数为横坐标，细胞存活率为纵坐标绘制剂量效应曲线，并求半数细胞抑制剂量值(IC50).　　统计学处理：采用SPLM软件方差分析，q检验.