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刺五加多糖的功能研究及其对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用分析
目的:刺五加多糖(ASPS)对Lewis荷瘤小鼠抗肿瘤免疫调节作用及机制的研究;方法:采用C57BL/6模式标准建立Lewis实体瘤模型小鼠80只,随机分为生理盐水组,ASPS高、中、低浓度组,在灌药28天后进行瘤体称重,检测TNF-α、IL-1β和IL-6水平情况;结果:ASPS较生理盐水可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤重量,随着药物浓度的增大,肿瘤重量也越小,组间差异具有统计学意义,P＜0.05;ASPS较生理盐水可显著升高TNF-α、IL-1β和IL-6水平,随着药物浓度的增大,其水平也越高,组间差异具有统计学意义,P＜0.05.结论:刺五加多糖可显著抑制Lewis荷瘤小鼠瘤体大小,提高其免疫功能,值得临床进一步研究.
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白芍总苷对荷瘤小鼠抗肿瘤活性与免疫功能的影响
目的:研究探讨白芍总苷对荷瘤小鼠的抗肿瘤活性及对小鼠免疫功能的影响.方法:选择20只健康的昆明小鼠为研究对象,建立小鼠肝癌的实体瘤模型,随机分为A、B两组,每组各10只.A组注射白芍总苷提取物,B组注射生理盐水,连续给药2周后处死各组小鼠,解剖得到肝癌肿瘤,测量比较各组小鼠的瘤重、瘤体积、抑瘤率、脾指数、胸腺指数等抗肿瘤活性指标.结果:与B组相比,A组小鼠的瘤重、瘤体积均有下降,而C组的下降幅度显著高于B组,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).以B组为参照,A组小鼠抑瘤率为65.84％,表明白芍总苷有较高的抗肝癌肿瘤活性.A组小鼠的脾指数、胸腺指数均高于B组小鼠,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).表明白芍总苷能够提高荷瘤小鼠的免疫功能.结论:白芍总苷对荷瘤小鼠有显著的抗肿瘤活性,能够抑制小鼠瘤体的增长,且能改善小鼠的免疫功能.
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大黄(庶虫)虫丸加减方对荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响
目的 探讨大黄(庶虫)虫丸加减方对克洛氏(S180)荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响.方法 建立小鼠S180肉瘤动物模型,将荷瘤小鼠分为大黄磨虫丸加减方高、中、低剂量组及模型组,同时设正常组,流式细胞术检测荷瘤鼠T淋巴细胞亚群.结果 大黄(庶虫)虫丸加减方能调节CD4/CD8细胞比例,尤以高剂量组为明显.结论 大黄(庶虫)虫丸加减方能缓解和改善S180荷瘤小鼠免疫力的低下和免疫紊乱状态,其中高剂量组疗效佳.
关键词： 大黄(庶虫)虫丸加减方 荷瘤小鼠 T淋巴细胞亚群 -
加味升阳益胃汤组方对荷瘤小鼠化疗后骨髓抑制及免疫功能的影响
目的：重点探究加味升阳益胃汤组方对荷瘤小鼠化疗的骨髓抑制及免疫功能的影响。方法建立小鼠肉瘤 S180移植性肿瘤模型,并将小鼠分成五组,荷瘤细胞对照组腹腔注射生理盐水0.2 mL,环磷酰胺组注射环磷酰胺(cyclophosvnamide,CTX)20 mg/ kg,三组治疗组分别给予注射同等剂量 CTX 化疗,同时给予不同剂量的加味升阳益胃汤组方,其中小剂量组每只中药灌胃0.1 mL,中剂量组每只中药灌胃0.2 mL,大剂量组每只中药灌胃0.3 mL,1 mL 大约含有70 g 生药量。结果环磷酰胺组小鼠的白细胞、血红蛋白及血小板均降低,荷瘤对照组和环磷酰胺组对比差异有统计学意义(P<0.05)。大剂量组、中剂量组、小剂量组的白细胞、血红蛋白及血小板均正常,大剂量组、中剂量组升高程度相对明显。三个剂量组和环磷酰胺组对比差异存在统计学意义(P<0.05)。结论加味升阳益胃汤组方能拮抗荷瘤小鼠化疗后引起的骨髓抑制及免疫功能的下降。
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艾灸对荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:观察艾灸对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:将40只荷瘤小鼠随机分为四组,对照组、艾灸组、5-氟脲嘧啶(5FU)组、5FU+艾灸组.艾灸组、5FU+艾灸组分别在"中脘"、"神阙"、"关元"穴隔药饼灸,隔天1次,治疗8次.5FU组、5FU+艾灸组在腹部注射0.25 mg/0.1 mL5FU,3天1次,共治疗4次.所有治疗完毕后24 hr处死动物.测定小鼠T淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)及进行淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)杀伤功能检测.结果:艾灸组CD3、CD4、CD4/CD8比率、NK细胞、LAK杀伤活性比5FU组显著提高(P＜0.05、P＜0.005、P＜0.1、P＜0.1、P＜0.01),差异明显,具有显著性意义.结论:艾灸能提高小鼠的免疫力,而5FU有抑制作用,使荷瘤小鼠免疫力降低.
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艾克清胶囊对荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:观察艾克清胶囊对荷瘤小鼠免疫功能的作用.方法:采用炭粒廓清法,T淋巴细胞酯酶染色率法,绵羊红细胞致小鼠溶血素抗体生成法,验证艾克清胶囊对免疫功能的作用.结果:艾克清胶囊对荷瘤小鼠的吞噬指数K及校正吞噬指数α均有明显的增强作用,与对照组比较有显著性差异(P<0.05～0.01),能够提高荷瘤小鼠T淋巴细胞酯酶的染色率,与对照组比较有显著性差异(P<0.05～0.01);可提高荷瘤小鼠溶血素抗体生成,与对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论:艾克清胶囊可提高荷瘤小鼠的免疫功能.
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扶正抗瘤方的辅助抗肿瘤研究
目的:观察扶正抗瘤方对S180荷瘤小鼠的辅助抑瘤作用及免疫调节作用.方法:建立小鼠移植s180肉瘤模型,观察扶正抗瘤方400 mg·kg-1ig连续45 d,对荷瘤小鼠瘤重及免疫学指标的影响.结果:扶正抗瘤方组和环磷酰胺(CTX)组肿瘤生长受到抑制,而且二者合用(联合组)时抑瘤效果显著;扶正抗瘤方联合CTX组胸腺指数、脾指数、吞噬指数、足跖肿胀度与模型组比较均有提高,联合组与CTX比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),扶正抗瘤方组和联合组ALT与荷瘤模型组比较均有下降,与CTX组比较亦有下降(P<0.05);二者尿素氮(BUN)与模型组相比有下降趋势;扶正抗瘤方组自然杀伤细胞(NK)细胞活性高于模型组(P<0.05),而联合组则明显高于模型组及CTX组(P<0.01).结论:扶正抗瘤方联合化疗药物不仪可以抑制肿瘤生长,还可提高小鼠的免疫功能,具有良好的免疫调节作用.
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复方蛹虫草制剂对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:研究蛹虫草复方制剂(CCM)对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能影响.方法:C57 BL/6雄性小鼠腋下皮下注入Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤鼠分为模型组、阳性对照组以环磷酰胺ip 20 mg· kg-,复方蛹虫草制剂低、中、高剂量组(1.2,2.5,7.5)g·kg-1ig给药,连续给药14 d,以抑瘤率为指标考察CCM的体内抗肿瘤活性,分别测定其抑瘤率、T淋巴细胞亚群CD4 +/CD8+；荷瘤小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；抗体生成细胞数以及力竭游泳时间.结果:CCM高剂量组(7.5 g·kg-1对肿瘤生长有明显的抑制作用(P＜0.05),其抑瘤率为40.3％,CCM高剂量组T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD4+/CD8+均高于模型对照组；同时中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠血清TNF-α,IL-2,IL-12的水平；抗体生成细胞数和力竭游泳时间也均高于荷瘤对照组(P＜0.05).结论:CCM具有提高荷瘤小鼠免疫功能的作用.
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中药复方双术油抗肿瘤机制的研究
目的:探讨复方双术油(BELY)体内外抗肿瘤作用及其机制.方法:设置空白组、阴性对照组、分别采用CCK-8法检测BELY(1 00,80,60,40,20,10,5 mg·L-1)对肿瘤细胞株K562,乳腺癌细胞系MDA-MB-231,人结直肠腺癌细胞LOVO和人肝癌细胞HepG2的抗增殖作用；建立小鼠S180及H22皮下肿瘤模型,设空白组(NS)、溶媒对照组(1％DMSO)和顺铂组(DDP,1 mg·kg-1)、BELY低、中、高剂量组(100,200,400 mg· kg-1).DDP ip给药,其余ig给药.末次给药24 h后颈椎脱臼处死小鼠,剥取瘤块、胸腺和脾脏并称重,计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数；ELISA法测定移植瘤血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,探讨BELY对荷瘤小鼠免疫功能的影响；流式细胞仪测定BELY对荷瘤小鼠外周血CD4+/CD8+的影响.结果:BELY对HepG2,K562,Lovo,MDA231均有一定的生长抑制作用,并有良好的量效关系.BELY显著抑制S180和H22的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数、脾指数和体重.与空白组比较,BELY可明显升高小鼠血清中IL-2,IL-6,IL-12和TNF-α的水平,外周血CD4+/CD8+明显升高(P＜0.01或P＜0.05).结论:BELY既可以抑制肿瘤细胞生长,又可通过增强免疫从而达到双相抗肿瘤的作用.
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二氢卟吩e6脂质体在荷瘤小鼠体内的药动学及靶向性分析
目的:研究二氢卟吩e6(Ce6)磷酸盐缓冲液(PBS)溶液及其脂质体在荷瘤小鼠体内的药物动力学特性,并验证Ce6脂质体的肝脏靶向性和肿瘤靶向性.方法:荷瘤小鼠尾静脉注射Ce6溶液或其脂质体后,通过HPLC测定不同时间点血浆及组织中Ce6的质量浓度,流动相乙腈-0.2％磷酸盐(50:50),检测波长403 nm.采用DAS 2.1.1软件计算药动学参数,以8h内相对摄取率(RE)来评价Ce6对主要器官的靶向性.结果:Ce6溶液和Ce6脂质体在荷瘤小鼠血浆中的药动学模式均符合二室模型,分布相半衰期(t1/2α)分别为1.516,0.507 h;消除相半衰期(t1/2β)分别0.457,1.366 h;清除率(CL)分别为0.178,0.067 L·h-1·kg-1;药时曲线下面积(AUC0-∞)分别为16.734,51.475 mg·h·L-1.在肝、脾、肿瘤组织中,RE分别为1.149,1.477和1.277.经统计学分析,Ce6溶液和Ce6脂质体的药动学结果有显著性差异(P＜0.05).结论:Ce6脂质体在体内的药物代谢清除速度更缓慢,分布更迅速、广泛,并能选择性聚集于肝脏和肿瘤组织.Ce6脂质体制剂可继续开发以用于治疗肝癌.
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白英抑瘤作用有效部位的初步筛选
目的:从白英不同组分[白英总碱(SLTA)、白英总皂苷(SLTG)、SLTA+SLTG、白英总提物]中筛选出抑瘤作用的主要有效部位,并通过对人癌细胞体外增殖的抑制作用进行验证.方法:首先建立S-180肉瘤和艾氏腹水瘤(EAC)荷瘤小鼠模型,给予阳性对照药及白英不同组分进行干预,分别以抑瘤率及小鼠的生命延长率为主要检测指标,比较组间抗肿瘤药效强度,选出白英抗肿瘤有效部位.选取人肝癌细胞SMMC-7721、人肺腺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-803、人宫颈癌细胞HeLa、人乳腺癌细胞MDA-MB-231多种人癌细胞作为研究对象,以紫杉醇为阳性对照药物,通过MTT法检测药物对癌细胞的抑制率,并计算相应的半数抑制浓度(IC50)值.同时显微镜下观察在给予IC50浓度的样品处理时细胞数目及形态的改变.结果:白英不同组分均有一定的抗肿瘤作用,其中SLTA的抑瘤作用强,以中剂量(8g/kg)效果好,对S-180荷瘤小鼠的抑瘤率为54.05％,对EAC荷瘤小鼠的生命延长率为31.71％.SLTA样品对多种人癌细胞均有一定的抑制作用,对人肝癌细胞SMMC-7721、人肺腺癌细胞A549、人胃癌细胞BGC-803、人宫颈癌细胞HeLa、人乳腺癌细胞MDA-MB-231的IC50分别为292.0、93.0、181.4、396.3、244.7mg/L.与空白对照组比较,半抑制下的细胞数目急剧下降,且均呈现萎缩的趋势.结论:SLTA为白英抑瘤作用的主要有效部位.
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红芪总多糖体内抗肿瘤的实验研究
目的:研究红芪总多糖(THPS)单用及与环磷酰胺(CTX)合用对荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其机制.方法:接种S180的昆明种小鼠腹腔注射低、中、高剂量THPS并联合使用CTX14天后,观察瘤重、抑瘤率、胸腺指数和脾指数,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群CD4+细胞和CD8+细胞数量.结果:与荷瘤对照组相比,中剂量THPS明显抑制小鼠S180瘤生长(P<0.01),增加胸腺指数(P<0.01)和脾指数(P<0.01),提高CD4+细胞数量(P<0.05);中剂量THPS与CTX合用后,与环磷酰胺组比较,明显降低瘤重(P<0.05),减轻CTX所致的胸腺指数(P<0.01)、脾指数(P<0.01)、CD4+细胞(P<0.01)和CD8+细胞(P<0.05)数量的下降.结论:中剂量的THPS具有抑制S180瘤生长,减轻CTX的免疫抑制作用,其机制与提高免疫器官的重量和T细胞介导的免疫应答有关.
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小半夏加茯苓汤及其组分对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾脏caspase-3基因表达的影响
目的:探讨小半夏加茯苓汤(简称XBPF)及其组分对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和脾脏组织caspase-3基因表达的影响.方法:通过给昆明小鼠接种H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,将60只小鼠分为空白对照组、模型组、多糖组、姜辣素组、XBPF组和顺铂组,干预15d后,观察抑瘤率,运用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测小鼠脾脏细胞中caspase-3基因的表达情况.结果:与模型组比较,XBPF组具有显著抑瘤作用(P＜0.01),而且XBPF组的抑瘤作用强于多糖组和姜辣素组(P＜0.05).与模型组对比,XBPF组小鼠脾脏caspase-3基因的表达明显增多(P＜0.01);XBPF组caspase-3基因的表达比多糖组和姜辣素组增多(P＜0.05).结论:XBPF对H22荷瘤小鼠肿瘤生长具有明显抑制作用,其机制可能与增强凋亡基因caspase-3表达有关.
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针灸对环磷酰胺模型荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复相关蛋白动态调节的研究
目的:观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗后的荷瘤小鼠白细胞及骨髓细胞DNA修复蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶.(MGMT)、DNA聚合酶β(POLβ)、切除修复交叉互补基因(XPD)表达的影响.方法:160只雄性清洁级昆明种小鼠植种S180肉瘤,按体质量随机分为荷瘤空白(A)组、荷瘤模型(B)组、荷瘤针刺(C)组、荷瘤艾灸(D)组.B、C、D组腹腔注射CTX 150mg/kg制备CTX荷瘤模型小鼠,A组注射同等剂量的0.9％氯化钠溶液.C、D组分别选取“大椎”“膈俞”“肾俞”“足三里”进行治疗,A、B组每日陪同抓取固定,不治疗.镜检各组小鼠外周血白细胞,免疫组化法检测骨髓细胞DNA修复蛋白MGMT、POLβ、XPD的表达情况,统计分析数据.结果:针灸可提升化疗后荷瘤小鼠白细胞数量(P＜0.05),亦能上调CTX化疗后荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复相关蛋白MGMT、POL β、XPD的表达.结论:针灸升高CTX化疗后荷瘤小鼠外周血白细胞的疗效确切,其升白机制与上调CTX化疗后荷瘤小鼠骨髓细胞DNA修复相关蛋白MGMT、POL β、XPD的表达及改善化疗后骨髓抑制关系密切.
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凋瘤方剂对荷瘤小鼠P53和PCNA表达的影响
当前恶性肿瘤的治疗仍然是以手术、放疗和化疗为主,近年随着分子生物学技术的发展,开辟了肿瘤基因治疗的新途径,然而恶性肿瘤的发生是多基因突变所致,病因较复杂,基因治疗尚未广泛用于临床.
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针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏组织中IL-12和TNF-α含量的影响
目的:探讨针灸改善荷瘤小鼠化疗所致免疫功能损伤的分子生物学机制.方法:将72只荷瘤模型建立成功小鼠,采用随机分层分组法,3天批、5天批各36只,均随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组9只.除空白组外,余组小鼠一次性腹腔注射环磷酰胺(cyclophospha-mide,CTX)溶液(150 mg/kg),制备CTX荷瘤小鼠模型;空白组腹腔注射同等剂量的0.9％NaCl溶液.4h后针刺组、艾灸组分别予以针刺、艾灸治疗,穴取"大椎""膈俞""肾俞""足三里",每天1次,空白组、模型组每日同时间抓取固定,不治疗.分别于治疗3天、5天后的第2天取材,采用ELISA法检测各组小鼠脾脏组织中白介素-12(IL-12)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:治疗3天、5天后,与空白组比较,模型组荷瘤小鼠脾脏组织中IL-12、TNF-α含量均降低(均P＜0.05);与模型组比较,针刺组、艾灸组小鼠脾脏组织中IL-12、TNF-α含量均升高(均P＜0.05);针刺组与艾灸组脾脏组织中IL-12、TNF-α含量比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:针刺和艾灸可以有效提高CTX化疗荷瘤小鼠脾脏组织中II-12和TNF-α的含量,减轻化疗所致的免疫功能损伤,提高机体免疫功能.
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荷瘤小鼠后爪部分证的标志图谱
辨证论治寻求佳个体化治疗是中医药的精髓,其前提是通过望闻问切进行辨证.对于小鼠这样小的动物实验,如何辨证一直是困扰中医药辨证论治实验研究的一大难题.本文报道了我们在既往探索荷瘤小鼠非创伤性辨证论治的基础上,进一步通过对小鼠后爪显微镜放大、数码相机拍摄的不同证的代表性图谱,并采用图像软件计算爪色的RGB分量值,进行初步望色的定量.结果表明放大后的小鼠爪有着丰富的变化,可以明显反映出不同的证,其色的变化可以通过其国际标准的RGB分量值定量,从而可以实现小鼠的辨证.
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肝郁脾虚因素对小鼠H22腹水瘤细胞周期的影响及疏肝健脾方的作用研究
目的:观察肝郁脾虚因素对H22荷瘤小鼠腹水瘤细胞增殖周期的影响以及疏肝健脾方药的治疗作用.方法:小鼠腹腔接种H22肿瘤细胞后给予肝郁脾虚因素刺激,建立肝郁脾虚证与移植性腹水瘤的病证结合模型,治疗组给予疏肝健脾方药.1 0d后处死小鼠,抽取腹腔液用流式细胞术检测肿瘤细胞增殖周期.结果:病证结合组与单纯肿瘤组比较,S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)明显上升(P＜0.01),G1期细胞比率明显下降(P＜0.01);中药治疗组与病证结合组比,SPF明显下降(P＜0.01),G1和G2/M期细胞比率明显上升(P＜0.01).结论:肝郁脾虚因素可以使H22荷瘤小鼠腹水瘤细胞SPF明显上升,促进肿瘤细胞分裂增殖.而疏肝健脾方药对肝郁脾虚因素所致的肿瘤细胞增殖周期改变有明显的逆转作用.
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黄芪对机体免疫系统影响的研究进展
黄芪含甙类、多糖类、黄酮类、氨基酸、微量元素、胆碱、叶酸等多种化学成分,具有广泛药理作用.现将近几年来黄芪对免疫系统作用的研究进展综述如下.1 基础研究1.1 对细胞免疫功能的影响聂氏[1]等应用黄芪注射液观察小鼠的免疫功能:体内给药62.5g/kg可显著增强ConA 0.625、2.5 μg/m1剂量诱导的淋巴细胞增殖.体内给药对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖影响不显著,但可显著增加荷瘤小鼠脾细胞总数.
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去甲斑蝥素联合环磷酰胺对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:探讨去甲斑蝥素联合环磷酰胺对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:采用小鼠体内培养H22腹水肝癌细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,并给予去甲斑蝥素联合环磷酰胺治疗,观察计算睥脏指数、胸腺指数.CCK-8检测荷瘤小鼠经去甲斑蝥素联合环磷酰胺治疗后的脾脏淋巴细胞转化实验,流式检测经去甲斑螫素联合环磷酰胺治疗后荷瘤小鼠T细胞业群CD3+、CD4+、CD8+百分率,骨髓有核细胞凋亡率及细胞周期.结果:与环磷酰胺组比较,去甲斑蝥素联合环磷酰胺处理组的脾脏指数有升高趋势;在淋巴细胞转化实验中,不同剂量的去甲斑蝥素联合环磷酰胺均可提高淋巴细胞转化率,且与去甲斑蝥素的剂量呈正相关.低剂量的去甲斑蝥素联合环磷酰胺可有效提高T细胞亚群的百分比,CD3+(%)为11.4±3.13,CD4+(%)为7.3±2.94,CD8+(%)为2.88±0.51,与环磷酰胺组比较P＜0.05,与去甲斑螫素的浓度呈负相关.随着去甲斑蝥素剂量的增加,骨髓有核细胞凋亡率也逐渐升高.结论:低剂量去甲斑蝥素(1mg/kg)联合环磷酰胺可以降低单纯环磷酰胺化疗药对免疫系统的抑制作用.为临床用药剂量提供参考依据.
