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索氏法提取蛹虫草子实体多糖的工艺研究
以蛹虫草子实体为原料,研究索氏法提取工艺,提取蛹虫草子实体多糖.通过单因素试验和正交试验方法探讨乙醇的浓度、固液比、提取时间对多糖提取率的影响,建立了佳的工艺参数,即50％乙醇,固液比1:50,提取时间4h,此时多糖平均提取收率为10.86％.
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蛹虫草对急性一氧化碳中毒大鼠的脑保护作用及机制研究
目的 研究蛹虫革对急性一氧化碳(CO)中毒大鼠的脑保护作用及其机制.方法 24只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、CO模型组(CO组)和蛹虫草干预组(Cordyceps组),每组8只.采用吸入法制作急性CO中毒模型,造模后14 d为时相点,应用Morris水迷宫试验检测大鼠平均潜伏期;根据Brailowsky描述的神经学评分方法对神经功能缺损进行症状评估;对海马组织行HE及突触素免疫组化染色;采用Western Blot方法检测各组大鼠海马组织NF-κB p65蛋白的表达.结果 水迷宫测试提示蛹虫草干预组平均潜伏期短于CO模型组(P＜0.05).蛹虫草干预组神经功能缺失症状明显减轻(P＜0.05);HE染色表明蛹虫草对CO中毒后海马有明显的保护作用;与CO模型组相比,蛹虫草能促进突触素的生成、降低海马组织NF-κB p65蛋白含量.结论 蛹虫草对大鼠急性CO中毒脑损伤有保护作用,其机制可能是通过上调突触素的表达、降低NF-κB p65蛋白水平而发挥作用.
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冬虫夏草及其混淆品蛹虫草的比较
从资源、性状、化学成分、药理功效等方面,结合新研究进展对冬虫夏草及其混淆品蛹虫草进行了详细的比较分析,为冬虫夏草和蛹虫草的进一步开发利用提供参考.
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复方蛹虫草制剂对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的:研究蛹虫草复方制剂(CCM)对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能影响.方法:C57 BL/6雄性小鼠腋下皮下注入Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤鼠分为模型组、阳性对照组以环磷酰胺ip 20 mg· kg-,复方蛹虫草制剂低、中、高剂量组(1.2,2.5,7.5)g·kg-1ig给药,连续给药14 d,以抑瘤率为指标考察CCM的体内抗肿瘤活性,分别测定其抑瘤率、T淋巴细胞亚群CD4 +/CD8+；荷瘤小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；抗体生成细胞数以及力竭游泳时间.结果:CCM高剂量组(7.5 g·kg-1对肿瘤生长有明显的抑制作用(P＜0.05),其抑瘤率为40.3％,CCM高剂量组T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD4+/CD8+均高于模型对照组；同时中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠血清TNF-α,IL-2,IL-12的水平；抗体生成细胞数和力竭游泳时间也均高于荷瘤对照组(P＜0.05).结论:CCM具有提高荷瘤小鼠免疫功能的作用.
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UPLC-MS/MS同时测定蛹虫草中6种成分的含量
目的:建立同时测定蛹虫草中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素含量的方法.方法:液质联用技术,以甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相等度洗脱,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,通过电喷雾离子源,选择正离子模式多反应监测方式检测.结果:腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素的线性范围分别为37.5～1 200 μg·L-1(r=0.998 5),20 ～640 μg·L-1(r =0.996 4),40～1 280 μg·L-1(r=0.999 1),77.5 ～2 480 μg·L-1(r=0.993 5),27.5～880μg·L-1(r=0.992 4),90～2 880 μg·L-1(r=0.9937),加样回收率在92.1％～102.6％,RSD均＜8,1％.腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素在蛹虫草中的平均质量分数分别为268.33,11.28,185.66,1 421.44,10.67,812.21μg·g-1.结论:该法专属性强、快速灵敏,可用于蛹虫草中腺苷、胞苷、鸟苷、甘露醇、腺嘌呤、虫草素的含量测定.
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多指标优选蛹虫草提取工艺
目的:优选蛹虫草的提取工艺.方法:用多指标综合评分法,采用L9(34)正交试验设计,以虫草素、腺苷、尿苷、多精及出膏率为检测指标,考察了4种因素(溶剂用量、乙醇体积分数、提取时间、提取次数)对其提取工艺的影响.结果:蛹虫草佳提取工艺条件为加8倍量水,煎煮3次,每次1 h.结论:本研究优化了蛹虫草的提取工艺,并为蛹虫草的进一步利用和产品开发提供了实验依据.
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富硒蛹虫草提取物硒蛋白多糖对荷瘤小鼠的影响
目的:提取及分析富硒蛹虫草硒蛋白多糖活性成分,初步探讨富硒蛹虫草硒蛋白多糖的抗肿瘤作用.方法:分别应用Folin-酚试剂法(Lowry法)、苯酚一硫酸法和2,3-二氨基萘荧光分光比色法测定蛋白质、多糖及硒含量,建立荷瘤小鼠模型,分为模型组、环磷酰胺组及虫草高、低剂量组(200,100 mg·kg-1),通过对小鼠体重及抑瘤率、外周血淋巴细胞转化率、廓清指数K、吞噬系数α、肝脏系数及脾脏系数、GSH-Px和SOD活力及MDA含量的测定,观察富硒蛹虫草硒蛋白多糖的体内抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.结果:富硒蛹虫草硒蛋白多糖对荷瘤小鼠具有显著的抑瘤作用,抑瘤率高达46.92%;且提高了荷瘤小鼠的免疫功能,抑制了由环磷酰胺造成的荷瘤小鼠肝脏系数和脾脏系数的下降;增强了机体的抗氧化能力.结论:富硒蛹虫草提取物硒蛋白多糖具有良好的抗肿瘤生长作用.
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用蛹虫草固体发酵法高效生产虫草素的研究
目的:研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的佳方法.方法:通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法埘影响虫草素产量和含量的各影响因子(包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等)进行系统优化.结果:JF-1是虫草素生产的佳菌株,现蕾期是收获提取虫草素的佳时期;佳的培养基配方为水料比1.1:1(mL·g-1),营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22.6,6.0,25.4 g·L-1,营养水pH 6.6;佳的环境条件为:光照强度4 400 lx,每日光照时间18 h,温度18～22℃.结论:用以上方法固体发酵生产虫草素,经过约13 d的培养,培养基中虫草素达到0.60%,比传统液体发酵方法的高产量高近2倍,并且培养时间缩短2 d.
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虫草及其发酵制品抗氧化能力研究
目的:考察天然冬虫夏草、蛹虫草及其发酵制品水和乙醇提取物体外抗氧化活性.方法:测定样品的6个抗氧化指标:抑制亚油酸氧化的能力;清除DPPH自由基、羟自由基、过氧化氢和超氧阴离子的活性以及螯合金属离子(Fe2+)的效果.结果:各样品具有不同程度的抗氧化能力,没有一种提取物在所有测试中均显示出很强的活性,但可以认为天然蛹虫草水提物的抗氧化能力为8个样品中高,它在抑制亚油酸氧化,螯合金属离子以及清除DPPH自由基和羟自由基的实验中都显示了很高的活性.研究同时表明天然及发酵虫草水和醇提物中多酚类的含量差异很大.结论:虫草及其发酵制品可作为一种潜在的天然抗氧化剂,发酵培养能够影响虫草制品的抗氧化活性,而天然与发酵虫草的抗氧化能力与其含有的多酚类的量没有显著相联.
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蛹虫草化学成分及药理作用研究进展
蛹虫草是一种能寄生在多种鳞翅目昆虫蛹及幼虫上的虫草菌,在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒和抗感染等方面有很强的活性,值得深入研究和开发.该文分别从蛹虫草的有效成分及药理作用综述新研究进展.
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虫草属EST-SSR标记系统的建立研究
目的:通过球孢虫草、蛹虫草EST设计EST-SSR引物,建立虫草属EST-SSR标记系统.方法:从NCBI公共数据库下载获得虫草EST,利用Sequece Seiners 1.2软件去除冗余序列并设计引物,进行PAGE电泳.结果:通过去除EST总序列中低质量的和冗余的序列后,得到全长为2 953 173 bp的4 556条无冗余球孢虫草EST.从中发掘出718个EST-SSR,分布于616条EST中,出现频率是15.8％.平均分布频率是每4 096 bp出现1个,三核苷酸重复序列有419个,是出现多的重复类型.蛹虫草EST去冗余后得到1 363条无冗余EST,共含有1 117个EST-SSR,出现频率为81.95％,出现多的重复类型是A核苷酸重复.根据球孢虫草EST-SSR序列,设计合成50对引物,有扩增产物的引物为34对,占总设计引物数的68％.根据蛹虫草EST-SSR,设计合成40对引物,有扩增产物的引物为39对,占总设计引物数的97.5％.基于SSR标记进行聚类分析,7种虫草无性型均能分开,且分为4支.结论:虫草属EST-SSR出现频率较高、类型较丰富、多态性潜能较高,具有较高的利用价值.球孢虫草和蛹虫草EST开发的SSR标记在虫草属有较好的转移性与通用性,可以很好的应用于虫草种间遗传关系的研究.应用虫草物种EST建立分子标记是一条简便而又有效的途径.
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蛹虫草健康益寿养生临床研究探讨
蛹虫草为子囊菌门,又名北蛹虫草,有地区亦称为蛹虫草,一般把活体虫蛹培养的北虫草称为蛹虫草.研究证实,人工培养的蛹虫草医药临床效果,与天然的冬虫夏草相同,同样能够调节全身功能、提高免疫能力、增强巨噬细胞的吞噬功能、促进抗体的形成,主要有保肺益肾养肝、止咳平喘祛痰、润肤防皱抗衰老、抗菌抗炎、镇静、扩张血管、降低血压、降低血糖、抗疲劳、耐缺氧等作用,可做为日常保健品参考使用.
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不同产地的蛹虫草、虫草花与冬虫夏草中虫草素含量对比
目的 探讨不同产地蛹虫草、虫草花、冬虫夏草中虫草素含量的差异,以期为选择合适的虫草素提取原料提供参考.方法 通过超高速液相色谱法建立虫草素检测方法;检测并对比天然蛹虫草、人工栽培蛹虫草、虫草花、冬虫夏草中虫草素的含量.结果 检测的冬虫夏草中并不含有虫草素;检测的虫草花和蛹虫草中虫草素含量分别在0.03％ ～0.23％及0.05％ ～0.51％之间;而虫草素在蛹虫草子实体和虫体中的分布并不相同.结论 虫草花中虫草素含量比蛹虫草中略低,都可作为虫草素的提取原料.
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人工栽培虫草的工艺研究与分析
培养基是人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的具有多种营养成分的混合物.培养基的组成对微生物的生长繁殖、生物合成、分离纯化以及产品的质量和产量都有重要影响.本研究就是以正交设计的方法,在以往使用的培养基中加入鲜活蚕蛹的蛹液,来进一步筛选配出更适合于冬虫夏草生长的培养基.通过实验证明:纯蛹液的培养基菌丝发出的早,生长的高、密、颜色深,大米加15%的蛹液的培养基先形成原基.
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蛹虫草提取物虫草素(3'-脱氧腺苷)对于高脂血症地鼠和大鼠的降血脂作用研究
3'-脱氧腺苷(又名虫草素)是从蛹虫草子实体中分离得到的一个具有生物活性的化合物.研究发现,虫草素具有多种生物效应,包括:调节免疫应答,抑制肿瘤生长,降压和舒张血管,促进肾上腺激素的分泌等.为研究其降血脂作用,本研究选用高脂饲料诱导的高脂血症金黄地鼠和大鼠,每天灌胃给予虫草素(12.5,25和50 mg·kg-1)共4周.在给药前及给药4周后,通过酶学方法测定地鼠和大鼠的血脂水平.结果显示,在饲喂高脂饲料后,两种动物的血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)水平显著上升.同时,虫草素均可降低这两种动物血清中TC、TG、LDL-C、VLDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)含量及LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C的比值,认为虫草素组动物脂蛋白酯酶(LPL)和肝酯酶(HL)活性的上升与调控血脂水平有关.另外,对ICR小鼠按照大耐受剂量灌胃给予虫草素(5 g·kg-1)14 d后,并没有出现明显的毒性反应.虫草素降血脂的作用机制仍需进一步研究.
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蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷的提取分离及对小鼠睡眠的影响
目的:探讨蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷对小鼠睡眠的影响.方法:蛹虫草子实体通过溶剂提取和色谱分离得到N6-(2-羟乙基)腺苷.N6-(2-羟乙基)腺苷通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验观察其对小鼠睡眠的影响.结果:N6-(2-羟乙基)腺苷可减少正常小鼠机体的自主活动性;与正常对照组比,N6-(2-羟乙基)腺苷高剂量组能显著性延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P＜0.01);中、高剂量组能显著增加戊巴比妥钠睡眠持续时间(P ＜0.05,P＜0.01)和缩短小鼠戊巴比妥钠睡眠潜伏期(P＜0.05).结论:蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷具有明显的镇静、催眠作用,可有效地改善睡眠质量.
关键词： 蛹虫草 N6-(2-羟乙基)腺苷 睡眠 -
蛹虫草菌丝体超氧化物歧化酶的制备
目的 从蛹虫草(Cordyceps militaris)菌丝体中制备Cu,Zn-超氧化物歧化酶.方法 超声破碎、硫酸铵沉淀、离子交换.结果 10 g湿菌丝体,佳超声破碎功率400 W,超声时间15 min.粗酶液经55%～95%硫酸铵沉淀,DEAE-FF阴离子交换柱,CM-52阳离子交换柱纯化,酶蛋白收率22.4%,比活达到13 592.1 U·mg(蛋白)-1,纯化倍数214.1倍.SDS-PAGE电泳分析呈现均一条带.紫外大吸收峰为266 nm.该酶对KCN和H2O2敏感.氨基酸组成和其他来源Cu,Zn-SOD相似.结论 本制备工艺切实可行,能获得理想的电泳纯蛋白.
关键词： 蛹虫草 Cu Zn-超氧化物歧化酶 制备 -
蛹虫草中4种核苷的含量分析
目的：建立高效液相色谱法(HPLC)测定蛹虫草中4种核苷类物质含量的方法,为蛹虫草的开发利用及其产品的指纹图谱提供依据。方法采用Agilent C18色谱柱；以甲醇-水为流动相,采用梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果样品中尿苷、鸟苷、腺苷和虫草素的加标回收率分别为94.10%、92.23%、94.97%、103.23%,相对标准偏差(RSD)分别为3.75%、5.40%、1.09%、0.30%。结论该法能简单、快速、准确地测定酶解液中4种核苷的含量。
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蛹虫草中虫草素的研究进展
本研究综述了蛹虫草中虫草素的药理作用、检测方法、培养技术及分离纯化工艺的研究进展.为蛹虫草与虫草素进一步研究、开发奠定了基础.
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用高虫草素菌粉开发药品和保健品
介绍蛹虫草、虫草素和虫草产品的开发情况,肯定了蛹虫草和虫草素的医疗保健功效,说明应用中存在问题、市场前景和应对办法.由于我国中草药产品有效成分不明确或含量不高,致使发源于我国的中草药产品未能占据国际市场主导地位,因此笔者提出用高虫草素含量的原料来生产虫草药品和保健品,在标签上明确标注虫草素含量并制定相关技术标准,以利进一步开发国内外市场的建议,同时明确了今后的工作方向.
