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核转录因子-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中变化的研究
目的 研究NF-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化.方法 通过蛋白质免疫印迹法及免疫组织化学的方法检测p65在139A感染的脑组织均浆中的含量变化.利用免疫荧光方法检测p65在神经元及胶质细胞中的分布情况.结果 在139A感染终末期小鼠脑组织均浆中,p65含量下降,差异有统计学意义.对感染不同时间点的动态分析结果显示,p65含量呈先升高随后逐渐降低趋势.免疫组织化学显示,139A感染终末期小鼠大脑皮层p65含量明显下降.免疫组织荧光显示在正常和139A感染终末期小鼠脑组织中,p65与神经元细胞存在共定位现象.结论 NF-κB (p65)在小鼠中枢神经系统中主要分布于神经元细胞,在139A感染的小鼠终末期脑组织中,p65总量明显下降,提示在139A感染的小鼠脑组织中,NF-κB(p65)出现了变化,在疾病进程中发挥一定作用.
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蛹虫草对急性一氧化碳中毒大鼠的脑保护作用及机制研究
目的 研究蛹虫革对急性一氧化碳(CO)中毒大鼠的脑保护作用及其机制.方法 24只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、CO模型组(CO组)和蛹虫草干预组(Cordyceps组),每组8只.采用吸入法制作急性CO中毒模型,造模后14 d为时相点,应用Morris水迷宫试验检测大鼠平均潜伏期;根据Brailowsky描述的神经学评分方法对神经功能缺损进行症状评估;对海马组织行HE及突触素免疫组化染色;采用Western Blot方法检测各组大鼠海马组织NF-κB p65蛋白的表达.结果 水迷宫测试提示蛹虫草干预组平均潜伏期短于CO模型组(P＜0.05).蛹虫草干预组神经功能缺失症状明显减轻(P＜0.05);HE染色表明蛹虫草对CO中毒后海马有明显的保护作用;与CO模型组相比,蛹虫草能促进突触素的生成、降低海马组织NF-κB p65蛋白含量.结论 蛹虫草对大鼠急性CO中毒脑损伤有保护作用,其机制可能是通过上调突触素的表达、降低NF-κB p65蛋白水平而发挥作用.
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醋酸铅对PC12细胞核转录因子-кB转录活性的影响
目的 探讨醋酸铅及NF-кB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对核转录因子-kappa B(NF-κB)转录活性的影响. 方法 将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)暴露于不同浓度的醋酸铅0、12.5、25、50、100、200、400、800和1600 μmol/L,采用四唑盐比色实验(MTT)检测IC50值.用脂质体将pNF-кB-Luc报告基因质粒转染入PC12细胞,转染后的PC12细胞分别暴露于不同浓度的醋酸铅(100、200和400 μmol/L)及不同浓度醋酸铅加PDTC 100 μmol/L,24小时后采用萤光素酶检测试剂盒检测萤光素酶活性. 结果 用不同浓度的醋酸铅处理细胞24小时,其生长增殖受到不同程度的抑制,且呈现出剂量-反应关系,其IC50值为(533.966±100.830) μmol/L.用不同浓度的醋酸铅处理转染后的PC12细胞24小时,结果显示:PDTC对照组萤光素酶活性较空白对照组降低(P＜0.01);铅处理组萤光素酶活性较空白对照组高(P＜0.01),且具有剂量依赖性;铅+PDTC联合作用组与PDTC对照组相比,PC12细胞内萤光素酶活性增高(P＜0.01). 结论 醋酸铅可诱导PC12细胞的NF-кB转录活性升高.
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原花青素对高脂饮食大鼠胸主动脉壁过氧化物酶增殖激活受体γ及核转录因子-κB途径的影响
目的 观察葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对高脂饮食大鼠胸主动脉壁过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)mRNA表达及核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法 雄性SD大鼠32只,随机分为4组:对照组、高脂组、吡格列酮组、原花青素组.每组8只,其中吡格列酮组为阳性对照组.对照组饲基础饲料,其他3组饲高脂饲料.各组在饲喂饲料的同时,灌胃给相应的干预剂,吡格列酮和原花青素灌胃量分别是10mg/(kg·d)、100mg(kg·d),吡格列酮组和高脂组灌蒸馏水.在0周、3周、6周空腹尾静脉采血,测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量.实验期末,取大鼠胸主动脉组织,保存于-70℃.运用RT-PCR检测PPARγ的mRNA表达水平,EMSA检测NF-κB活性.结果 (1)高脂组较对照组大鼠血清TC、TG水平含量明显升高(P<0.05).原花青素组和吡格列酮较高脂组血清TG、TC的含量显著降低(P<0.05),原花青素组与吡格列酮组、对照组间差异无显著性.(2)高脂组与对照组相比,PPARγmRNA表达显著降低(P<0.05),胸主动脉壁NF-κB活性明显升高.(3)吡格列酮组与高脂组比较,胸主动脉壁PPARγmRNA表达水平升高(P<0.05).(4)原花青素组与高脂组比较,胸主动脉壁PPARγ mRNA表达水平明显升高(P<0.05),NF-κB活性显著降低.结论 原花青素具有预防血清TG、TC升高的作用;原花青素能通过预防高脂状态下大鼠胸主动脉壁PPARγ mRNA表达下调,抑制NF-κB的激活.
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EPA、DHA对人单核细胞NO的产生、iNOSmRNA表达及NFκB活性的影响
目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸(Eicosapentaenoic acid EPA,Docosahexenoic acid DHA)对人单核细胞炎症因子--一氧化氮(NO)的分泌和诱导型NO合酶(iNOS mRNA)表达的影响,以及EPA、DHA对核转录因子(NFκB)与DNA结合活性的影响.方法 硝酸还原酶法测定NO的含量,RT-PCR技术分析iNOSmRNA表达水平,凝胶电泳迁移实验检测NFKB与DNA的结合活性.结果 EPA、DHA在10～20tμg/ml浓度范围内能够降低体外培养的人外周血单核细胞NO的分泌和iNOS mRNA的表达并降低NFκB的DNA结合活性.结论 EPA,DHA能够抑制单核细胞炎症因子NO的产生,减少iNOS mRNA的表达,并通过抑制信号转导途径中NFκB与DNA的结合活性这一通路来抑制炎症因子分泌,产生抑制炎症作用.
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海兔素对酒精性肝损伤大鼠NF-κB、iNOS及COX-2的影响
目的 通过观察酒精性肝损伤大鼠NF-κB p65、iNOS和COX-2的表达,探讨海兔素对酒精性肝损伤的保护机制.方法 (1)8周龄雄性Wistar大鼠,按体重随机分为6组(空白对照组,酒精模型组,阳性对照组,海兔素低、中、高剂量组),每组10只.各组均采用灌胃方式给药,每日一次,连续6周.除空白对照组每日灌胃生理盐水外,其余各组前2周每日给予50％乙醇8 ml/kg,后4周提高至12 ml/kg.海兔素低、中、高剂量组每日还同时分别给予海兔素50、100和150 mg/kg BW,阳性对照组则每日给予200 mg/kg甘草酸二铵.实验结束后ELISA法检测大鼠血浆中iNOS和COX-2活性.(2)8周龄成年雄性Wistar大鼠45只,按体重随机分为3组,空白对照组每日生理盐水灌胃,酒精模型组和海兔素组每日给予50％乙醇8 ml/kg灌胃2周,然后将剂量提高至12 mL/kg,持续6周.海兔素组每日酒精灌胃前4h,先给予150 mg/kg海兔素灌胃.8周后经二步胶原酶技术分离培养获取大鼠原代肝细胞,每组大鼠各获得一组原代肝细胞.Western Blot法检测大鼠原代肝细胞NF-κBp65蛋白的表达.结果 酒精模型组iNOS与COX-2活性均明显高于空白对照组(P＜0.05);与酒精模型组相比,海兔素低、中、高剂量组iNOS、COX-2活性均有所降低(P＜0.05).并且海兔素高剂量组iNOS及COX-2的活性与阳性对照组相比差异无统计学意义.酒精模型组NF-κB p65蛋白的表达明显高于空白对照组(P＜0.05),是空白对照组的1.5倍;而海兔素干预组NF-κB p65蛋白表达明显被抑制(P＜0.05),与酒精模型组相比,下降52.7％.结论 海兔素可通过抑制NF-κB、iNOS及COX-2的表达,对酒精性肝损伤起到一定的保护作用.
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迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数的建立
目的建立迁移率改变法检测核转录因子-κ B实验参数,为准确检测核转录因子-κ B奠定基础.方法分子探针标记 , 细胞的分离、培养和核转录因子的提取 ,NF-κ B聚丙烯酰胺凝胶电泳分析.结果实验条件为 300V,电泳 18分钟后,对分子探针活性没有影响,分子探针与核转录因子结合特异性良好,电泳条带清晰.结论本文建立的方法省时、简便,敏感性高、特异性强.
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苦参总碱对2,4,6-三硝基苯磺酸大鼠结肠炎的治疗作用及相关机制探讨
目的:研究苦参总碱对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)大鼠结肠炎的治疗作用,对核因子-κB(NF-κB)及其下游细胞因子表达的影响.方法:采用TNBS制备大鼠结肠炎模型,大鼠随机分为TNBS处理组,苦参总碱低、中、高剂量治疗组(100、200、400 mg/kg),柳氮磺胺吡啶治疗组及正常对照组(n=10).将大鼠处死后留取结肠组织标本,观察结肠大体形态变化,并进行病理组织学检查.使用酶联免疫吸附测定法测定TNBS模型大鼠血清中的肿瘤坏死因子-α的含量、白介素-8(IL-8)和白介素-1(IL-1)的含量.结果:给药14 d后,苦参总碱(200、400 mg/kg)组及柳氮磺胺吡啶治疗组大鼠体重均高于TNBS组(P<0.05);结肠黏膜大体形态评分及病理评分低于TNBS组(P<0.05).血清细胞因子的测定结果显示苦参总碱(200、400 mg/kg)能抑制细胞因子TNF-α、IL-1、IL-8的表达,并呈现一定的剂量依赖性,与TNBS组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:苦参总碱(200、400 mg/kg)能减轻大鼠TNBS结肠炎炎症.
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HO-1、NF-κB在矽肺纤维化中作用机制的实验研究
目的 观察血红素加氧酶-1 (HO-1)及核转录因子kappa B(NF-κB)在大鼠矽肺纤维化中的作用机制及相互关系.方法 实验动物采用Wistar大鼠60只,体重180～220 g,雌雄不拘,适应性饲养1周后,随机分为4组,分别为对照组(A组)和染尘模型组(B组)、染尘+HO-1抑制剂组(C组)、染尘+HO-1诱导剂组(D组),每组15只.采用气管暴露法滴注二氧化硅悬液制造大鼠矽肺模型.建模28 d后HE染色观察各组大鼠肺组织病理结构,采用Western blot法检测各组肺组织HO-1和NF-κB蛋白含量,采用荧光定量PCR法检测各组肺组织HO-1和NF-κB mRNA的表达.结果 Western blot检测结果显示HO-1、NF-κB蛋白含量,对照组明显低于其他各组(P＜0.05),C组较B组明显降低,而D组较B组表达量明显升高(P＜0.05).RT-PCR检测各组HO-1 mRNA相对表达量分别为2.25±0.38、1.81±0.74、7.75±0.56,C组较B组表达明显降低,而D组较B组表达显著升高(P＜0.05);NF-κB mRNA相对表达分别为3.06±0.42、6.15±0.37、1.39±0.14,C组较B组表达明显升高,而D组较B组表达显著降低(P＜0.05).结论 HO-1、NF-κB共同参与了大鼠矽肺纤维化的形成过程,通过对其干预可以改变大鼠矽肺纤维化的程度,可为矽肺纤维化的诊断与治疗提供新途径.
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扶阳通络汤对糖尿病神经病变血清NF-κB表达的影响
目的 探讨我院经验方扶阳通络汤对阳虚血瘀证糖尿病周围神经病变(DPN)患者血清NF-κB mRNA表达的影响.方法 采用扶阳通络汤治疗DPN 40例,同时与甲钴胺治疗DPN 40例作对照,观察两组患者治疗前后临床症状、TCSS评分及RT-PCR技术检测血清NF-κB mRNA的表达的变化.计数资料采用χ2检验.各组间两两比较采用t检验,相关性采用Pearson相关分析.结果 治疗组总有效率为92.5%,对照组为85.0%(P<0.05).治疗8周后,与对照组相比,治疗组临床症状明显改善,TCSS评分及血清NF-κB mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),疗效优于甲钴胺组.Pearson相关分析显示DPN患者TCSS评分与血清NF-κB mRNA的表达呈显著正相关(r=0.945,P<0.01).结论 扶阳通络汤治疗阳虚血瘀证DPN安全有效,其相关机制可能与降低血清NF-κB mRNA的表达有关,其相关作用机理尚待进一步研究.
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青蒿酯对房颤大鼠心肌核转录因子-κB表达的干预作用
目的 通过建立房颤大鼠模型,观察核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB )mRNA的表达水平以及青蒿提取物对其表达的影响.方法 40只大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、青蒿组、卡托普利组,每组10只.利用舌下静脉注射乙酯胆碱和氯化钙的方法建立房颤大鼠模型,使用青蒿提取物进行干预,以卡托普利作为对照药.实验前2周青蒿组以1.25 g生药·kg-1灌胃,卡托普利组以3.25 mg·kg-1灌胃,对照组及模型组均以等体积生理盐水灌胃.通过PCR以及Western-blot技术观察NF-κB mRNA表达以及NF-κB蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠心肌NF-κB mRNA的表达显著增加(P＜0.05).青蒿组能明显减少房颤大鼠心肌NF-κB mRNA的表达(P＜0.05),卡托普利对NF-κB mRNA的表达无影响.NF-κB蛋白的表达与mRNA的表达呈一致规律.结论 NF-κB与房颤的发生关系密切.房颤大鼠NF-κB的表达明显增加.青蒿提取物能够有效地减少房颤大鼠心肌NF-κB的表达,这可能是青蒿抗心律失常的机制之一.
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益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠NF-κB/p38 MAPK通路的影响
目的 观察益气化瘀解毒方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的保护作用并探讨其作用机制.方法 30只SD大鼠随机分为空白组、模型组及益气化瘀解毒方低、中、高剂量组5组,每组6只.尾静脉注射LPS建立ARDS模型.治疗组益气化瘀解毒方灌胃,造模后16小时处死大鼠收集标本,测定大鼠肺系数、肺通透指数、核转录因子-κB p50、IκBα、p38的蛋白表达及光镜下观察肺组织病理学改变.结果 益气化瘀解毒方减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润,降低肺系数(P<0.05)与肺通透指数(P<0.01),并在一定程度减少核转录因子-κB p50、丝裂原活化蛋白激酶p38,增加抑制因子IκBα的蛋白表达.结论 益气化瘀解毒方对LPS诱导的ARDS有一定的保护作用,其机制与抑制NF-κB/p38MAPK炎性反应信号通路有关.
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中药筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞NF-κB表达的影响
目的 观察中药筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞(SCs)中NF-κB蛋白及其mRNA表达的影响.方法 原代培养并纯化Wistar乳鼠坐骨神经SCs,蛋白S-100免疫组织化学法进行鉴定.取第3代SCs,加入不同培养基,分为正常组、高糖组、筋脉通组和神经妥乐平组进行培养,48 h后采用激光扫描共聚焦显微技术检测NF-κB蛋白的表达,实时荧光定量PCR技术检测NF-κB mRNA的表达.结果 正常组NF-κB绿色荧光强度较弱,主要表达于胞浆区;高糖组荧光强度于胞浆区和胞核区表达都较正常组增强;筋脉通组和神经妥乐平组表达都较高糖组减弱,主要表达于胞浆区.高糖组SCs中NF-κB的蛋白及其mRNA表达较正常组明显增强(P＜0.01);与高糖组比较,筋脉通组和神经妥乐平组NF-κB的蛋白及其mRNA的表达显著下降(P＜0.01).结论 筋脉通含药血清可抑制高糖培养SCs中NF-κB蛋白及其mRNA的表达.
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针刺联合栀子苷对糖尿病复合脑缺血大鼠脑内小胶质细胞激活及核转录因子-κB表达的影响
目的:探讨针刺联合栀子苷的脑保护机制.方法:雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、药物组、针刺组、针药结合组,每组12只.链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型,双侧颈总动脉阻断法制造脑缺血再灌注模型.药物组大鼠予以栀子苷(25 mg/kg)生理盐水溶液灌胃,每日1次,连续治疗1周;电针组大鼠选取“百会”和“大椎”两穴,每次电针20 min,隔日1次,共10次;针药结合组大鼠接受栀子苷治疗的同时,也接受电针治疗.Morris水迷宫行为实验测试大鼠学习记忆状况;免疫组化法检测海马及杏仁核内小胶质细胞标志物OX-42和核转录因子-κB(NF-κB)免疫活性的变化.结果:电针、药物以及针药结合3个治疗组治疗后,动物在撤台后于靶象限游泳路程的百分比和游泳时间的百分比较模型组明显增加(P＜0.05).模型组大鼠海马与杏仁核OX-42阳性标记小胶质细胞数量与吸光度明显高于正常组(P＜0.01),治疗后明显降低(P＜0.05),3个治疗组间差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠海马和杏仁核NF-κB阳性标记细胞数量与吸光度显著高于正常组(P＜0.05),治疗后明显降低(P＜0.05),3个治疗组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:针刺和栀子苷均通过NF-κB-小胶质细胞信号通路,抑制糖尿病复合脑缺血模型大鼠脑内小胶质细胞的活性,从而缓解糖尿病复合脑缺血模型大鼠的学习记忆障碍.针刺加栀子苷复合治疗与单纯针刺或药物治疗效果相同.
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宣白承气汤对急性肺损伤大鼠肺组织CD14和NF-κB mRNA表达的影响
目的:探讨宣白承气汤对脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织CD14和核转录因子-κB (nuclear factor-κB,NF-κB) mRNA表达的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、宣白承气汤组共4组,每组8只.模型组与各治疗组大鼠采用尾静脉注射LPS(6 mg·kg-1)复制ALI模型.正常对照组和模型组给等容积生理盐水ig,地塞米松组给药为5 mg· kg-1ip,宣白承气汤组给药为7 560 mg·kg-1ig.于3d末次给药后采用实时荧光定量PCR法测定肺组织CD14和NF-κB mRNA表达.观察肺组织病理变化.结果:与正常对照组比较,模型对照组的支气管肺泡灌洗液蛋白含量、肺体指数、CD14和NF-κB mRNA表达均明显升高(P＜0.01).与模型对照组比较,宣白承气汤组支气管肺泡灌洗液蛋白含量、肺体指数、CD14、NF-κB mRNA和CD14蛋白染色阳性细胞面积率表达均降低(P ＜0.05或P＜0.01).病理学观察,模型组大鼠肺泡腔内充满炎性渗出物和出血,宣白承气汤组大鼠肺组织病理改变明显轻于模型组,肺细支气管轻度间质性炎症.结论:宣白承气汤能减轻内毒素致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其抑制肺组织CD14和NF-κB mRNA表达有关.
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清燥救肺汤对结肠癌侵袭转移相关蛋白NF-κB,VEGF,VEGFR-1,MMP-9表达的影响
目的:探讨清燥救肺汤对荷CT26小鼠结肠癌增殖及侵袭转移相关蛋白核转录因子-κB(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB),血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),血管内皮细胞生长因子受体-1(vascular endothelial growth factor receptor-1,VEGFR-1),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)表达的影响.方法:将50只雄性BALB/c小鼠,随机分为模型组,化疗[50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,清燥救肺汤高、中、低剂量(15.2,7.6,3.8 g·kg-1·d-1)组,每组10只.小鼠右腋下注射CT26细胞建立结肠癌小鼠模型,清燥救肺汤组以相应剂量造模前2周开始灌胃给药,造模后化疗组以5-氟尿嘧啶[5-FU,50 mg·kg-1·(2 d)-1]腹腔注射给药,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,造模后2周后处死各组小鼠并取瘤,称重计算抑瘤率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB,VEGF,VEGFR-1及MMP-9蛋白表达.结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组瘤重显著减小(P＜0.01).化疗组及清燥救肺汤高、中、低剂量组抑瘤率分别为83.90％,60.98％,44.39％,21.46％.与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组NF-κB及VEGF蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,清燥救肺汤高、中、低剂量组VEGFR-1及MMP-9蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论:清燥救肺汤可能通过降低NF-κB,VEGF,VEGFR-1,MMP-9蛋白表达,发挥抑制荷CT26小鼠结肠癌细胞增殖及侵袭转移的功效.
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金振口服液对LPS致急性肺损伤模型小鼠NF-κB,MAPK信号通路的影响
目的:探讨金振口服液(JZKFY)对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)模型小鼠的影响及其分子水平作用机制.方法:小鼠随机分为正常组、模型组、醋酸地塞米松组、金振口服液高、中、低(4.4,2.2,1.1 g·kg-1)剂量组,各给药组给予相应剂量药物,正常组和模型组灌胃同等剂量的生理盐水,1次/d,连续7d后,模型组及药物组小鼠腹腔注射LPS(10 mg·kg-1)复制急性肺损伤小鼠模型,正常组腹腔注射同等剂量的生理盐水.6h后采集小鼠肺组织,测定左肺湿/干质量比(W/D);酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL)-1β;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肺组织中p65,IκBα,ERK1/2,p38蛋白及其磷酸化蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组小鼠W/D显著升高(P＜0.01),肺组织中TNF-α,IL-1β水平显著升高(P＜0.01),p65,IκBα,ERK1/2,p38蛋白磷酸化水平显著上调(P＜0.01).与模型组比较,金振口服液低、高剂量及地塞米松组W/D显著降低(P ＜0.05,P＜0.01);金振口服液各剂量组及地塞米松组肺组织中TNF-α,IL-1β水平显著降低;金振口服液各剂量组及地塞米松组p65,IκBα,p38蛋白磷酸化水平显著下调(P＜0.05,P＜0.01),金振口服液高剂量、地塞米松组ERK1/2蛋白磷酸化水平显著下调(P＜0.05,P＜0.01).结论:金振口服液能够有效改善LPS诱导的ALI肺组织间质性水肿及降低致炎细胞因子的含量,其作用机制与抑制p65,IκBo,ERK1/2,p38多个靶蛋白磷酸化,从而阻断核转录因子-κB(NF-κB),丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)炎症通路的信号传导密切相关.
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金蝉花多糖对D-GlaN致小鼠急性肝损伤的保护作用及机制
目的:观察金蝉花多糖对D-半乳糖胺(D-galactosamine,D-GlaN)致小鼠急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:75只雄性昆明小鼠根据数字表法随机分为5组,每组15只,正常组,腹腔注射生理盐水;模型组,腹腔注射D-GlaN;金蝉花多糖低、中、高剂量组,腹腔注射D-GlaN的同时予以金蝉花多糖溶液(0.5,1.0,2.0 g·kg-1)灌胃治疗.治疗12 d后检测各组肝组织病理评分、肝匀浆指标[超氧化物歧化物(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px),一氧化氮(nitric oxide,N0)],血清学指标[天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP),胆碱酯酶(cholinesterase,CHE)],采用免疫组化法检测各组肝组织核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB),肿瘤坏死因子-o(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平.结果:模型组肝组织病理评分,MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平均明显高于正常组(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平明显低于正常组(P＜0.05);金蝉花多糖低、中、高剂量组肝组织病理评分均明显低于模型组(P＜0.05),且随治疗剂量升高,肝组织病理评分呈明显降低趋势(P＜0.05);金蝉花多糖低、中、高剂量组MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平均明显低于模型组(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平均明显高于模型组(P＜0.05),且随治疗剂量升高,MDA,NO,AST,ALT,ALP,NF-κB,TNF-α水平明显降低(P＜0.05),而SOD,GSH-Px,CHE水平明显升高(P＜0.05).结论:金蝉花多糖对D-GlaN致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,且呈剂量依赖性,其作用机制可能为抑制NF-κB炎性反应信号通路有关.
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芍黄安肠汤对溃疡结肠炎大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响
目的:观察芍黄安肠汤(SAD)对UC大鼠模型Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的干预作用,对其治疗UC的作用机制进行探讨.方法:采用三硝基苯磺酸/无水乙醇灌肠法诱导UC大鼠模型.将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、SAD低、中、高剂量组(4.5,9,18 g·kg-1)、美沙拉嗪组(0.5 g·kg-1),每组各10只.造模后第2天,用药组分别给予相应药物连续灌胃10 d.观察UC大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠大体形态损伤以及组织学评分,采用免疫组化的方法观察UC大鼠肠道组织核因子-κB(NF-κB)表达,RT-PCR法检测Toll样受体4(TLR4)和髓样分化因子88 (MyD88) mRNA的表达.结果;模型组大鼠的DAI、结肠大体形态损伤及组织学评分均显著高于正常对照组(P＜0.05).芍黄安肠汤各剂量组的DAI评分、结肠大体形态损伤评分低于模型组(P＜0.05);与正常组相比,其余各组大鼠NF-κB,TLR4mRNA,MyD88 mRNA表达明显增强(P＜0.05);芍黄安肠汤各剂量组和美沙拉嗪组较模型组大鼠上述指标明显降低(P＜0.05).结论:芍黄安肠汤对UC有较好的疗效,其作用机制可能是抑制TLR4的表达,影响MyD88引发信号通路下游的基因表达,从而抑制NF-κB的活化,终减轻机体炎症反应.
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清燥救肺汤对Lewis肺癌小鼠EGFR,NF-κB,ICAM-1表达及JAK1,STAT1蛋白磷酸化的影响
目的:观察清燥救肺汤对荷Lewis小鼠肺癌瘤重、瘤指数、检测核转录因子-κB(NF-κB),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),两面神激酶1(JAK1),表皮生长因子(EGFR)表达及信号传导及转录激活因子1(STAT1)蛋白磷酸化的影响.方法:雄性C57BL/6J小鼠50只,随机分为模型组,化疗[50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,清燥救肺汤高、中、低剂量(15.2,7.6,3.8g·kg-1 ·d-1)组,每组10只.右腋下注射细胞建立荷Lewis肺癌小鼠模型,清燥救肺汤组以相应剂量造模前2周开始灌胃给药,环磷酰胺(CTX)组以CTX相应剂量腹腔注射给药,隔日1次,模型组以等体积生理盐水灌胃给药,2周后处死各组小鼠并取瘤组织,称定质量计算瘤指数,免疫组化法检测NF-κB蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测ICAM-1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EGFR,pJAK1及pSTAT1蛋白表达.结果:与模型组比较,清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组瘤重、瘤指数显著降低(P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组及CTX组NF-κB蛋白表达,EGFR蛋白表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中剂量组ICAM-1 mRNA,pJAK1蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),清燥救肺汤高、中、低剂量组pSTAT1蛋白磷酸化显著降低(P＜0.01),高、中剂量组效果优于CTX组(P＜0.01).结论:清燥救肺汤能显著抑制荷Lewis小鼠肺癌细胞增殖,其机制可能与降低NF-κB,ICAM-1,pJAK1,EGFR表达及抑制STAT1蛋白磷酸化有关.
