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CKJ方文献资料
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组分复方“CKJ”药物血清对大鼠原代肝星状细胞活化和转化生长因子β1及其受体的影响
目的 探讨由虫草多糖、苦杏仁苷、绞股蓝总皂苷组成的“CKJ方”药物血清对大鼠原代肝星状细胞(primary hepatic stellate cells,rHSCs)活化的影响及相关药理作用机制.方法 分离并培养rHSCs,将培养4天的rHSCs分为正常组、模型组及CKJ组.模型组及CKJ组以2.5 ng/mL转化生长因子β1 (TGF-β1)刺激造模24 h,正常组以不合TGF-β1的基质液(无血清的DMEM)作为对照.药物组以5％CKJ方药物血清继续孵育24 h,正常组及模型组以5％空白血清孵育24 h.采用细胞高内涵筛选技术(HCS)免疫荧光法及Western blot检测rHSCs α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、血小板源性生长因子β受体(PDGF-βR)、TGF-β1、转化生长因子β受体1(TGF-βR1)、转化生长因子β受体2(TGF-βR2)mRNA的表达水平.结果 与正常组比较,模型组rHSCs α-SMA蛋白表达及α-SMA、Col-Ⅰ、PDGF-βR、TGF-f1、TGF-βR1、TGF-βR2mRNA表达水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,5％ CKJ药物血清组rHSCs α-SMA蛋白表达及α-SMA、Col-Ⅰ、PDGF-βR、TGF-β1、TGF-βR1、TGF-βR2 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 组分复方“CKJ”药物血清可降低大鼠rHSCs α-SMA的蛋白表达,其主要作用机理可能与抑制TGF-β1及其相关受体有关.
