猪肺血管紧张素转换酶的制备

目的利用猪肺制备血管紧张素转换酶(ACE).方法将新鲜猪肺匀浆,6 000×g离心30 min后,经1.6～2.6 mol/L (NH4)2SO4分级沉淀,Sephadex G-200,Q HyperD离子交换色谱,得到经SDS-PAGE显示一条带的ACE纯品.结果猪肺300 g可制备出ACE 11.25 mg, 活力回收率为20.70%,比活力为1 480.0 u/mg,较组织匀浆上清提纯提高428.99倍.结论此法结果较理想,可用于较大规模制备ACE.

角燕制剂对小鼠免疫功能的调节作用

目的观察角燕提取物对小鼠免疫功能的影响.方法采用盐溶液提取、有机溶剂分级沉淀等步骤,从角燕的有效部位中制备得到角燕制剂,用不同剂量的制剂给小鼠灌胃,观察其对小鼠免疫功能的调节作用.结果角燕制剂能显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数,促进淋巴细胞转化,增强小鼠NK细胞杀伤活性及腹腔巨噬细胞的吞噬活性.结论角燕制剂能明显提高机体的免疫功能,提示也是其抑瘤作用机制之一.

乳清提取物对小鼠免疫功能影响及抗癌作用的初步研究

目的观察豆乳清中活性物质对小鼠免疫功能的影响及抗癌活性.方法乳清活性物质经灌胃或腹腔注射给药后,测定各组小鼠的胸腺指数、脾指数、巨噬细胞吞噬功能及抗癌效应.结果灌胃给药一定剂量可明显增加小鼠胸腺和脾指数(P＜0.01),与对照组比较其吞噬百分率、吞噬指数差异显著(P＜0.01);腹腔注射给药对荷U14肿瘤和荷HepA肿瘤小鼠的肿瘤生长有一定的抑制作用,抑瘤率以HepA更为显著.结论乳清活性物质具有一定的免疫增强功能和抗癌效应.

微波辐射快速制备水溶性壳聚糖

目的快速制备水溶性壳聚糖.方法利用微波辐射,用过氧化氢作氧化剂,非均相降解高分子量壳聚糖.设计了正交试验法,得到优化反应条件.结果优反应条件为5%过氧化氢、5%壳聚糖,微波辐射功率约400 W,辐射3 min,所得水溶性壳聚糖分子量为 1.1×104 D,收率可达60%.结论微波法制备低聚壳聚糖效果理想,可进一步扩展到壳聚糖的其它化学修饰.

甲状旁腺素1-34肽的固相合成

目的以Wang树脂为载体,应用芴甲氧羧基/tBu方法合成人甲状旁腺素.方法芴甲氧羧基保护氨基酸用1-氧-3-双二甲胺羧基苯骈三氮唑四氟化硼盐/1-羧基苯并三氮唑活化后,进行缩合反应.合成的多肽用三氟乙酸处理,从Wang树脂上切除.所得粗肽用SP-Sepharose-FF色谱柱和半制备型高效液相色谱分离纯化.结果用反相高效液相色谱法和毛细管电泳法鉴定纯度在92%以上.通过电喷雾质谱法测定其分子量为4 116 D,与计算值相符.总收率为8%.结论此工艺简单,易于扩大,适合于规模化生产.

内皮抑素融合蛋白的发酵与纯化

目的对内皮抑素融合蛋白的发酵和纯化工艺进行研究.方法利用5 L发酵罐,设定了溶氧、搅拌速度、补液量、补液时机和补液速度等发酵条件;用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、离子交换色谱等方法纯化目的蛋白质.结果工程菌目的蛋白质表达量占菌体总蛋白质的20%;纯化后纯度达95%以上.结论研讨了大肠杆菌高效表达内皮抑素融合蛋白发酵及纯化工艺,为实际应用奠定了基础.

安络化纤丸对免疫功能的影响

目的观察安络化纤丸对实验动物免疫功能的影响.方法测定安络化纤丸对正常和免疫功能低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素生成以及脾脏T淋巴细胞增殖的影响.结果安络化纤丸可增强正常小鼠和地塞米松所致免疫功能低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能,促进血清溶血素的生成;显著提高刀豆球蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖功能.结论提示安络化纤丸可显著提高小鼠的免疫功能,增强机体抵抗力.

五味子中α-葡萄糖苷酶抑制剂对小鼠的降血糖作用

目的探讨五味子所含α-葡萄糖苷酶抑制的体内活性。方法以100mg/(kg·d)剂量灌胃，观察其对小鼠血糖含量以及糖耐量的影响。结果该抑制剂能明显降低正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖，降低坚上腺素引起的高血糖，提高正常小鼠的糖耐量。结论 从中药五味子中分离得到的α-葡萄糖苷酶抑制剂可能具有良好的降糖作用。

外源性装饰蛋白在组织修复中对胶原形成的抑制作用

目的观察转化生长因子-β(TGF-β)的拮抗剂装饰蛋白(decorin)对瘢痕中胶原形成的抑制作用.方法手术造成家兔结膜瘢痕,即刻和d 1、3、7在结膜瓣下注射decorin 100 μl(0.1 mg/ml),30 d后用天狼星红-偏振光法检测胶原的合成情况,同时用免疫组化法检测TGF-β1的表达.结果用药后Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维较瘢痕组密度降低(P＜0.01), 与正常结膜中Ⅰ、Ⅲ型胶原排列状况相似,并且TGF-β1表达的阳性率降低非常显著(P＜0.01).结论decorin通过降低TGF-β1的表达明显减少Ⅰ、Ⅲ型胶原合成量,从而减轻局部的纤维化反应,可作为抑制瘢痕形成的辅助药物.

用龙虾壳制取D-氨基葡萄糖盐酸盐

目的研究从龙虾壳制备甲壳质,解决D-氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)的工业生产技术问题.方法先由龙虾壳制备甲壳质,经盐酸水解得D-氨基葡萄糖盐酸盐.采用正交试验,优化水解工艺条件.结果以12 mol/L HCl,温度90℃～95℃,2.5～3 h效果佳.收率＞60%,纯度＞98%.结论此法为工业化生产提供了依据.

异丁基壳聚糖的制备与生物降解性研究

目的研究壳聚糖化学结构的修饰方法及改构后膜的生物降解性能.方法在碱性条件下,以溴代异丁烷为卤化剂对壳聚糖进行化学修饰,并通过体外观察及体内植入法研究膜的生物降解性能.结果改构后的壳聚糖有良好的水溶性和生物降解性能.结论异丁基的取代有效地破坏了壳聚糖的分子内氢键,使异丁基壳聚糖有良好的水溶性,且产物的生物降解性能远优于壳聚糖.

海带硫酸多糖的提取、纯化及其理化分析

目的研究海带硫酸多糖(LPS)的提取制备及其组分的纯化和理化性质.方法采用酶解法从海带提取制备LPS,海带浆加入纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶,50℃水解4 h.取滤液加入氯化钙,离心去除海藻酸钙.取上清液加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与LPS结合沉淀,离心收集CTAB-LPS沉淀物.加入氯化钙溶液进行盐解,将LPS游离释放出来,加入乙醇使LPS析出.离子交换色谱和凝胶过滤色谱法分离纯化其多糖组分.结果酶解提取法的收率为5‰,色谱法分离得到4个主要多糖组分,测定其分子量分别为210、120、400和140 kD.酶解法的提取收率高于水煮法.结论 LPS的开发具有广阔的前景.

苦瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及抗氧化活性的研究

目的改进苦瓜籽核糖体失活蛋白的提取工艺,并对其抗氧化活性进行研究.方法苦瓜籽经粉碎,50 mmol/L乙酸抽提,硫酸铵沉淀,经阳离子交换及凝胶柱色谱等步骤进一步纯化后,测定所得两种核糖体失活蛋白的理化性质. 结果纯化后得到一种分子量为29.6 kD的蛋白质和一种小分子量蛋白质,两者在无细胞系统中抑制50%蛋白质合成浓度分别为4.3×10-6、1.4×10-6 mol/L,含糖量分别为4.83%、 1.82%,类超氧化物歧化酶(SOD)活性分别为79.05、17.25 u/mg.阳性对照纯品SOD活性为1 267 u/mg.结论从苦瓜籽中分离纯化出两种不同分子量的核糖体失活蛋白均为糖蛋白质,且具有一定的抗氧化活性.

硫酸软骨素含量测定方法介绍

综述了硫酸软骨素含量测定方法的研究进展.含量测定方法包括比色法、色谱法、电泳法、原子吸收法、比浊法、配位滴定法及免疫法.对各种含量测定方法的原理和特点进行了介绍.

新型重组人肿瘤坏死因子-α的研究进展

提高肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的抗肿瘤活性,降低其毒副作用,是将人TNF-α应用于临床的关键.此文综述了近年来对TNF-α进行结构基因改造、构建融合蛋白基因用以制备高效、毒副作用小的新型抗肿瘤药物的研究进展.

高效液相色谱法测定奥曲肽注射液的含量

目的建立奥曲肽注射液的含量测定方法.方法采用ODS-C18色谱柱,流动相A为 含0.1%三氟乙酸的水溶液,流动相B为含0.1%三氟乙酸的乙腈溶液,采用梯度洗脱,流动相B 在20 min内由20%至40%,检测波长215 nm,流速1.5 ml/min.结果奥曲肽浓度在40.8～142.8 μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9 ),回收率为100.29%(RSD=0.48%).结论此法简便、快速、准确,可用于奥曲肽注射液的含量测定.

提高眼宁注射液澄明度的工艺方法

目的探讨提高眼宁注射液澄明度的佳工艺条件.方法对影响眼宁注射液澄明度的3个工艺条件进行了比较试验.结果澄明度合格率随加炭量的增加而增加,但加炭量太大,会使有效成分含量下降;配料温度的升高和保温时间的延长可提高澄明度合格率.结论加0.5%活性炭,升温85℃,保温30 min,是提高其澄明度的佳工艺条件.

高效液相色谱法测定中新滴眼液中尿囊素与维生素B6 的含量

目的建立同时测定中新滴眼液中尿囊素与维生素B6含量的高效液相色谱法.方法采用Nova-Pak C18柱,流动相为甲醇-0.03 mol/L磷酸二氢钠溶液(10∶90),流速1.0 ml/min,检测波长230 nm,外标法计算.结果线性范围分别是:尿囊素0.205 4～4.108 mg/ml;维生素B6 0.010 1～0.202 0 mg/ml.回收率:尿囊素99.4%(RSD0.37%,n=5);维生素B6 99.5%(RSD 0.64%,n=5).结论此法分离效果好,辅料无干扰,快速、简便,适用于该制剂两组分的同时测定.

薄层扫描法测定肺安颗粒剂中麻黄碱含量

目的研究肺安颗粒剂中麻黄碱的定量方法.方法采用薄层扫描法进行测定,在硅胶G板经氯仿-甲醇-浓氨试液(20∶5∶0.5)展开显色后,以λs＝510 nm扫描.结果平均回收率为97.7%,RSD为1.9%(n=5).结论此法灵敏、简便、准确,可用于肺安颗粒剂的质量控制.

羊血浆法测定海普林软膏中肝素钠生物效价的探讨

目的研究用羊血浆法代替兔全血法检测海普林软膏中肝素钠生物效价的可行性.方法通过比较标准品和供试品在相同浓度下加入同量羊血浆,经重钙化一定时间后的凝固程度,测定供试品效价.结果供试品效价为340.0 u/g,相当于标示量的97.1%,经兔全血法复核符合规定.结论此法操作简单,结果准确,重现性好,可用于产品的质量控制.

注射用尿激酶的处方改进

目的改进注射用尿激酶的处方,确保制剂质量.方法在不改变原有制剂规格的前提下,选择赋形剂甘露醇、右旋糖酐,稳定剂人血白蛋白和缓冲剂磷酸盐不同用量制成的冻干品进行各项指标的检测.结果赋形剂甘露醇120 mg与右旋糖酐30 mg /瓶、人血白蛋白1.0%、缓冲剂0.42%,解决了制剂在外观、水分、澄明度、稳定性等方面的不足,且其它指标均符合规定.结论新处方较为合理,可提高制剂的质量.

注射用促肝细胞生长素的质量考察

目的研究注射用促肝细胞生长素的质量.方法测定水分、游离氨基酸、稳定剂、赋形剂含量,并考察制剂外观.结果与正常组比较,萎缩组游离氨基酸含量显著增加 (P＜0.01),褐变组稳定剂含量显著减少 (P＜0.01),水分含量增加(P＜0.05).结论在现有工艺条件下,注射用促肝细胞生长素外观质量与游离氨基酸、稳定剂、水分有关,控制其含量有助保证质量.

凝血酶制备工艺的研究

目的从猪血中分离纯化凝血酶.方法采用离子交换树脂法对从猪血制备获得的凝血酶进行纯化,并考察凝血酶原的激活条件.结果离子交换树脂法纯化的凝血酶平均比活为36.5 u/mg,凝血酶原的佳激活条件为:CaCl2浓度1.0%,时间15 min,温度37℃.结论离子交换树脂法分离纯化凝血酶的工艺是可行的,适用于规模化生产.

高效液相色谱法测定色甘酸钠滴眼液的含量

目的建立测定色甘酸钠滴眼液含量的高效液相色谱法.方法采用Waters Symmetry C18色谱柱,甲醇-乙腈-0.05 mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 3.5)-水(12∶10∶40∶38)为流动相,检测波长为325 nm.结果在0.4～16.4 μg范围内线性关系良好,r=0.999 9.此法与紫外分光光度法测得平均回收率分别为99.88%(RSD=0.49%)、99.26%(RSD=0.82%).结论此法简单、准确,专属性强,可用于色甘酸钠滴眼液的含量测定.

生化及生物医药工程专家——袁勤生教授