中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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牛凝血酶的制备研究
目的 从牛血浆中制备高活力及高收率的凝血酶.方法 以牛血为原料,采用柠檬酸钡吸附、硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素色谱等方法制备凝血酶原,并模拟生理条件用凝血酶原活酶复合物,包括牛凝血因子Ⅴ、Ⅹa、磷脂和Ca2+对凝血酶原进行激活.结果 采用此方法制备的凝血酶的比活力为85 U/mg,收率为135 μg/mL 血浆.结论 采用此制备技术,可以大规模制备高活力及高收率的牛凝血酶.
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牻牛儿基牻牛儿醇转移酶抑制对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响
目的 研究1种牻牛儿基牻牛儿醇转移酶抑制(GGTI-286)对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响.方法 用含有不同浓度的GGTI-286处理被10%胎牛血清(FCS)或血小板源生长因子(PDGF)刺激的大鼠肾小球系膜细胞,应用细胞增殖ELISA系统测定溴化脱氧尿嘧啶核苷进入细胞的量来评估DNA的合成,并测定细胞的数量.用蛋白质印迹法研究GGTI-286对原癌基因(Ras)蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活化的影响.结果 GGTI-286对10%FCS或PDGF刺激大鼠肾小球系膜细胞DNA的合成抑制是剂量依赖性,并且能够抑制细胞的生长,应用台盼蓝排除试验,GGTI-286并不改变系膜细胞的存活率.GGTI-286也能够抑制10%FCS或PDGF诱发的肾小球系膜细胞Ras蛋白活动和MAPK的激活.结论 GGTI-286通过影响肾小球系膜细胞Ras蛋白活动和MAPK的激活而抑制肾小球系膜细胞增殖,这可能为治疗系膜增殖性肾小球疾病提供1种新的方法.
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银耳孢子多糖抑制肿瘤及放射增效作用的研究
目的 研究银耳孢子多糖对小鼠淋巴瘤、U14宫颈癌的抑制作用及与γ射线合用协同增效作用.方法 用肿瘤抑制率评价银耳孢子多糖在6,12,24 mg/kg 3个剂量时对肿瘤的抑制作用及与γ射线合用协同增效的作用.结果 银耳孢子多糖在3个剂量下,对小鼠淋巴瘤和U14宫颈癌均有一定的抑制作用,6 mg/kg剂量时抑制肿瘤的效果好于24 mg/kg剂量.12 mg/kg剂量对淋巴瘤的抑制作用明显,抑瘤率为61.3%(P<0.01);6 mg/kg剂量时,与γ射线合用对肿瘤的抑制率为72.6%(P<0.001).对于U14宫颈癌,在6 mg/kg剂量时,间隔给药抑瘤效果明显,抑瘤率为47.5%,与γ射线合用对肿瘤的抑制率提高到71.2%(P<0.001),与对照组相比差异显著.结论 银耳孢子多糖对小鼠淋巴瘤、U14宫颈癌有较好的抑制作用,和γ射线合用对淋巴瘤的抑制作用增强,提示银耳孢子多糖和γ射线合用有一定的协同增效作用.
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高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β4(17~23)片段的含量
目的 建立育发凝胶中胸腺素β4(17~23)七肽片段的含量测定方法.方法 采用反相C-12色谱柱,以三氟乙酸-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为215 nm,用高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的含量.结果 胸腺素β4七肽片段含量的线性范围在0.02~0.18 mg/mL,r=0.999 8(n=5),平均回收率为100.06%,RSD为0.59%(n=9).结论 此法操作简便、快捷、准确、专属性高,可用于育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的含量测定.
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从人的肝癌组织中快速分离纯化γ-谷氨酰转移酶
目的 应用AKTATM explorer 100蛋白质快速色谱纯化系统从人肝癌组织中分离纯化特异性γ-谷氨酰转移酶(GGT),为制备其抗血清提供抗原材料,以便对肝癌早期诊断进行研究.方法 人肝癌组织经匀浆、离心、溶解、透析和色谱等步骤进行纯化;纯化过程中用国际临床化学学会推荐方法测定GGT催化活性,用紫外法监测蛋白质出峰图谱,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量.结果 人肝癌组织经过粗提、疏水色谱、DEAE阴离子交换色谱等纯化步骤得到电泳纯的GGT,其比活为0.36 U/mg蛋白质,纯化倍数为24,回收率为5.0%.结论 该纯化方法能较好且有效地分离纯化肝癌特异性GGT.
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抗重组人骨唾液酸蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
目的 研制重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法 以纯化的rhBSP免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗rhBSP mAb;用亚型鉴定试剂条鉴定IgG亚类;ELISA鉴定mAb的特异性和效价.结果 获得2株能稳定分泌特异性mAb的抗rhBSP的杂交瘤细胞系AHB1和AHB5,Ig亚类分别为IgG2a和IgG1,轻链均为κ型,其效价分别为1×10-3和1×10-7.腹水mAb经Protein A亲和色谱柱纯化后,纯度达92%以上.结论 获得抗rhBSP的mAb,为进一步研究BSP的生物学功能和用于临床诊断实验研究创造了条件.
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注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定方法研究
目的 建立注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定方法.方法 分别采用甲醇提取法、透析法、凝胶过滤法和超滤离心法去除供试品中的辅料后采用硫酸-苯酚法进行含量测定,并将结果与不去除辅料直接采用硫酸-苯酚法,分别以葡萄糖及含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线进行含量测定的结果进行比较.结果 各种供试品前处理方法在去除辅料时,都会造成灰树花倍他葡聚糖主药的损失,其中超滤离心法操作简便,主药的损失量小.在不去除辅料的情况下,采用以含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线的方法更能真实地反映供试品的含量.结论 采用硫酸-苯酚法以含处方量甘露醇的葡萄糖制作标准曲线,可消除辅料的干扰,并具有良好的精密度和重现性,适合于注射用灰树花倍他葡聚糖的含量测定.
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马兜铃酸Ⅰ肾毒性的实验研究
目的 观察马兜铃酸Ⅰ对SD大鼠的肾毒性反应,并评价其安全性.方法 马兜铃酸Ⅰ以30,15,5 mg/kg,ig,1次/d,连续14 d.结果 给药后高剂量组主要表现为体重减轻、活动减少、少尿或无尿;淋巴细胞计数、单核细胞计数、红细胞计数、红细胞压积、总蛋白质、白蛋白、总胆固醇、K+和Na+等均显著低于对照组,而血小板计数、中性粒细胞计数、葡萄糖、尿素氮、肌酐和乳酸脱氢酶等升高;尿中白蛋白、乳酸脱氢酶、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶等也显著升高,并有胆红素、白细胞和红细胞排出;肾脏脏器系数增大,肾小球出现红细胞堵塞,近曲小管上皮细胞变性较严重,伴有上皮细胞脱落,间质内可见较大面积的淤血、出血.结论 在该试验条件下,马兜铃酸Ⅰ对SD大鼠的肾脏毒性反应较强,不仅作用于近曲小管,亦能损伤肾小球,其安全剂量小于5 mg/kg.
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仙地液对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜ICAM-1表达的影响
目的 检测大鼠结肠黏膜中的ICAM-1,观察仙地液灌肠对ICAM-1蛋白表达的影响.方法 大鼠随机分为6个实验组,自由饮用葡聚糖硫酸钠水溶液诱导UC模型,以仙地液灌肠干预后,用免疫组织化学染色法检测大鼠结肠黏膜中ICAM-1蛋白的表达.结果 仙地液灌肠干预后的大鼠与模型组相比,结肠黏膜中ICAM-1含量均明显下降(P<0.05).结论 仙地液灌肠可能通过下调溃疡性结肠炎结肠黏膜中的ICAM-1表达实现其治疗作用.
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盐藻多糖体内抑菌及抗炎作用的研究
目的 观察盐藻多糖体内抑菌和抗炎作用.方法 通过小鼠腹腔注射感染金黄色葡萄球菌,考察盐藻多糖的体内抗菌作用;通过巴豆油致小鼠耳廓炎性肿胀和醋酸致小鼠腹腔通透性增加,考察盐藻多糖的体内抗炎作用.结果 盐藻多糖100和200 mg/kg剂量组能显著增加感染金黄色葡萄球菌小鼠24 h内的存活数,显著抑制巴豆油所致的小鼠耳廓炎性肿胀;盐藻多糖50,100和200 mg/kg剂量组均能显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔通透性的增加.结论 盐藻多糖具有一定的体内抑菌和抗炎作用.
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中草药纤溶酶的筛选与鉴定
目的 获得具有溶解纤维蛋白能力的中草药.方法 选择22种具有活血化瘀功能的中草药,分别进行蛋白质的提取,对蛋白质提取物进行纤维蛋白溶解活性的鉴定.结果 10种中草药具有溶解纤维蛋白的能力,作用强弱顺序为肉豆蔻、莪术、益母草、茜草、延胡索、皂角刺、祖师麻、石蒜、九里香、姜黄,其中肉豆蔻纤维蛋白溶解圈大而且透明.对出现溶圈的蛋白质提取物进行浓度测定,根据尿激酶标准曲线,计算其溶解纤维蛋白的比活力.益母草、延胡索、肉豆蔻、茜草的比活力相对较高,分别为582.43,543.18,480.20和264.52 U/mg.结论 建立了筛选具有纤溶酶活性的中草药的方法,并筛选出4种纤溶酶活力相对较高的中草药.
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DSA亲和色谱检测肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶的临床应用
目的 应用建立的凝集素亲和色谱技术,分离血清肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶(HS-GGT),并观察HS-GGT在正常人、良性肝病及原发性肝癌(PHC)患者中的变化,以期建立1种简便易行的PHC实验室诊断方法.方法 PHC 64例、肝外肿瘤22例、良性肝病68例及正常对照血清21例,以神经胺酸酶(NMD)水解后直接用欧蔓陀罗凝集素(DSA)亲和色谱柱分离,首先用柱平衡液洗脱不结合组分,再用0.05 mol/L醋酸洗弱结合组分,后用0.1 mol/L醋酸洗脱强结合组分,用连续监测法测定洗脱液的GGT活性,计算各组分所占比例,统计分析其临床应用价值.结果 DSA强结合的GGT Ⅲ为PHC患者所特有,以其在总GGT所占比例大于2%为PHC诊断的Cutoff值,其诊断特异性为95.5%,灵敏度为85.8%,准确度为92.0%.结论 该方法能较好地鉴别诊断PHC,较以往的其他检测方法更为简便,并有较高诊断灵敏度和特异性.
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碱处理法在人神经生长因子注射液制备中的应用
目的 进一步提高人神经生长因子 (hNGF) 注射液的安全性,寻找碱处理灭活制品中可能存在脂包膜和非脂包膜病毒的佳工艺.方法 在hNGF注射液中间品中加入脂包膜和非脂包膜病毒,通过调整其pH值、蛋白质浓度等参数后,在25℃下的不同时间,监测其灭活病毒效果.结果 在pH(12.0±0.1)、(25±1)℃条件下存放2 h,可有效灭活加入的脂包膜和非脂包膜病毒,且其他相关指标也达到要求.结论 碱处理法是同时灭活生物制品中脂包膜和非脂包膜病毒的1种经济、有效的方法.
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生物活性肽的抗肿瘤作用及其机理研究进展
生物活性肽是一类天然存在于动、植物和微生物等生物体内,或动、植物蛋白质经蛋白酶酶解以及人工化学合成或生物工程方法而得,且具有特殊生理活性的生物物质,具有较显著的抗肿瘤作用.此文介绍了生物活性肽的分类与特性、抗肿瘤作用,并简述了生物活性肽增强机体特异性和非特异性免疫功能、抗自由基与辐射损伤、诱导肿瘤细胞凋亡和直接作用于肿瘤细胞等多种作用机理,并简述了生物活性肽实现抗癌以及临床抗肿瘤药用等内容.
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1,25-(OH)2D3的免疫调节特性及对相关疾病的作用
1,25-(OH)2D3(骨化三醇)是维生素D的衍生物,具有广泛的生物活性.此文主要从其对免疫细胞生物学效应及免疫相关疾病的可能治疗机制和副作用等方面做一综述.
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抗菌肽的研究进展
抗菌肽是动植物体以及人类防御体系的1个重要组成部分,近30年的研究证明,抗菌肽具有相对分子质量小,热稳定性好,广谱抗细菌、真菌、病毒及癌细胞等特点.此文就抗菌肽的来源分类、抗菌机理及其应用前景做一综述.
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一氧化氮供体新研究进展及应用前景
一氧化氮供体已经成为当今药物研究中的一大焦点,此文对近年来一氧化氮供体研究领域的新研究成果作一综述,并展望了其在医疗上的应用前景.
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不同pH值下尿素浓度对羧肽酶B活力的影响
目的 比较不同pH值下尿素浓度对羧肽酶B活力的影响.方法 分别检测在pH 7.65,9.0,10.0和尿素浓度为0,1,2,3 mol/L时的羧肽酶B活性.结果 尿素浓度在3 mol/L时,其活力降低至正常活性的30%左右;pH 10.0时,其活力降低至正常活性的60%左右.结论 尿素浓度增加比pH值升高对羧肽酶B活力影响大.
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用薄层色谱法检测林可霉素B组分
目的 通过实验寻找适合林可霉素中间供试品中B组分检测方法.方法 采用硅胶板,以醋酸-丁醇-水(2∶1∶1)为展开剂,用碘显色,观察不同的供试品浓度与展开时间.结果 供试品浓度控制在800~900 u/mL,展开60 min,可检测林可霉素中间供试品中的B组分.结论 该法快速简便,可用于生产中林可霉素中间供试品中B组分的检测.
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比色法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅲ)中的半胱氨酸
目的 建立比色法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅲ)中半胱氨酸的含量.方法 半胱氨酸与酸性茚三酮溶液反应,生成红色产物,在559 nm波长处测定吸收度,用对照品标准曲线法测定供试品含量.结果 半胱氨酸在0.03~0.07 mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.999),RSD为(97.6±1.0)%(n=9).结论 此法快速简便,有较好的专属性和准确度.
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柱前衍生化HPLC法测定N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺注射液的含量
目的 建立柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法测定N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺注射液含量的方法.方法 采用异硫氰酸苯酯作柱前衍生剂,色谱柱为Waters sunfire ODS柱(4.6 mm×250 mm),流动相为:乙腈-0.1 mol/L醋酸钠(用稀醋酸调整pH 5.50)为44∶56,柱温30℃,检测波长254 nm.结果 线性范围为0.025~2.5 mg/mL(r=0.999 8),平均加样回收率为99.9%,RSD为0.5%.结论 此法操作简单快速,灵敏度高,结果准确可靠,适用于N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺注射液中N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的含量测定.
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酶工程专家——王树岐研究员
王树岐研究员是我国著名的酶工程专家,在我国先从事酶化学修饰的研究,一直致力于生化技术的科研与教学工作,在生化制药等方面成就突出,为酶工程技术发展贡献了重要力量.
年 | 期数 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |