口服二磷酸果糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究二磷酸果糖钠(FDP)对CCl4和D-氨基半乳糖两种模型引起小鼠肝损伤的保护作用,并分析其对肝微粒体细胞色素P450酶的活性影响.方法在对小鼠连续灌胃FDP 4 d后,采用ip CCl4和D-氨基半乳糖两种化学物质造成小鼠急性肝损害,研究其有无保肝作用;并采用Omura法测定了FDP对正常小鼠的肝细胞色素P450酶活力的影响.结果 FDP 0.15 g/kg和0.30 g/kg灌胃剂量下对肝损伤模型小鼠有一定的保护作用,并有提高正常小鼠肝微粒体P450酶活性的作用.结论 FDP能防止化学物质造成的肝损伤,保护肝功能.

卡介菌多糖和卡介苗素的免疫调节作用的比较研究

目的比较卡介菌多糖(BCG-PSA)与卡介苗素(BCG-PSN)的免疫调节作用.方法运用碳粒廓清、溶血素测定、二硝基氟苯所致迟发型变态反应等实验方法测定BCG-PSA及BCG-PSN对小鼠的免疫调节功能.结果 BCG-PSA能有效地提高正常小鼠和免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能,提高非特异性免疫功能(P<0.05);能提高免疫小鼠血清中溶血素的含量,增强动物的特异性体液免疫功能(P<0.05);能减轻迟发型变态反应所致水肿(P<0.05);能提高免疫小鼠巨噬细胞数、血清溶菌酶活力、巨噬细胞的吞噬百分率及吞噬指数,具有显著的巨噬细胞激活功能,与BCG-PSN作用相似;结论 BCG-PSA不但是BCG-PSN的主要组成成分,而且也是其发挥免疫调节功能的重要有效成分.

针对HBV X基因的反义核酸抑制HBV表达的体外研究

目的筛选反义脱氧寡核苷酸(ASON)抗乙型肝炎病毒(HBV)的有效靶向位点.方法设计合成针对HBV X翻译起始位点的ASON即序列Ⅰ ,并设非互补序列作对照即序列Ⅱ,以人肝癌细胞系(2.2.15)为细胞模型,应用ELISA动态观察不同浓度(1、5、10 μmol/L)ASON一次性用药对HBV基因表达的抑制作用,用MTT比色法观察ASON对细胞代谢的影响,以苔盼蓝染色计数观察ASON对细胞活性的影响.结果 ASON 可有效地抑制HBV基因的表达,在1、5、10 μmol/L浓度时对HBsAg 的抑制率分别为63%、45%和57%,对HBeAg的抑制率分别为38%、41%和56% ; 而对照序列Ⅱ对HBsAg和HBeAg的抑制率均低于12%.MTT法表明ASON对2.2.15细胞代谢无影响(P>0.05), 苔盼蓝染色计数表明ASON对2.2.15细胞活性无影响(P>0.05).结论 HBV X翻译起始区是ASON抗HBV复制表达的有效靶向位点.

重组人血小板生成素的分离和纯化

目的探讨重组人血小板生成素(rhTPO)的分离、纯化工艺.方法高效表达rhTPO的CHO细胞的无血清培养液,经离心去除细胞碎片后,以二步液相色谱法进行纯化,对所得产物以HPLC法及SDS-PAGE法进行纯度检测,用MO7e细胞,MTS细胞计数法测定其生物活性.结果终产品为单一条带、单一峰,生物活性为0.9×105U/mg.结论经分离与纯化后得到的TPO产品,纯度高、生物活性好,有一定应用价值.

诱生型一氧化氮合酶抗体的制备与初步应用

目的制备诱生型一氧化氮合酶(iNOS)特异性抗体并应用于iNOS检测.方法将iNOS N端片段装入原核表达载体pET-28a(+),在大肠杆菌BL21中表达,两步法纯化目的蛋白,使用纯化蛋白制备iNOS多克隆抗体.获得的抗血清用于小鼠巨噬细胞及小鼠脑缺血模型中iNOS的检测. 结果得到具有较高表达量的融合蛋白,经两步纯化获得iNOS N端融合蛋白纯品,将此蛋白免疫家兔,得到iNOS多克隆抗体,Western blot分析表明该抗体不与nNOS、eNOS交叉反应,而能检测组织、细胞中的iNOS.结论原核表达iNOS N端片段制备的iNOS抗体具有很好的反应性及特异性.

互花米草成分研究Ⅰ.GC-MS法研究叶片中脂肪酸

目的研究互花米草叶中的脂肪酸.方法经提取、甲酯化,运用GC-MS法测定互花米草叶中脂肪酸的成分.结果共检出互花米草叶片中含13种脂肪酸.结论该结果有助于对互花米草的深入研究.

利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅱ.抗凝血酶Ⅲ和蛋白C抑制物的纯化与鉴定

目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)和蛋白C抑制物(PCI)的分离纯化.方法以钡盐吸附上清为原料,采用铝盐吸附、有机沉淀、离子交换层析、分子筛层析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化AT-Ⅲ和PCI.结果从利凡诺去白蛋白人血浆10 L中得到了AT-Ⅲ 160 mg和PCI 4.2 mg,得率分别为12.7%和10.5%,其相对分子量分别为(57±0.8)和(56±0.8)kD;等电点分别为4.81±0.02和8.01±0.02;分别富含Glu、Asp、Leu 和Glu、Leu、Asp;毛细管区带电泳分析高度均一;与文献报道基本一致.结论该纯化路线经济、简便,有助于利凡诺去白蛋白人血浆的综合再利用和抗凝血成分输血制剂的研制和开发.

简化提取核心蛋白聚糖的方法及扩大活性检测范围

目的简化分离、纯化核心蛋白聚糖的程序,了解其对瘤细胞生长的抑制作用.方法经匀浆、溶解沉淀、透析、研磨等步骤制备核心蛋白聚糖, MTT染料结合法检测A549、BT325等四种癌细胞体外生物学活性.结果简化法制备的核心蛋白聚糖得率为3 mg/g大鼠肌肉,SDS-PAGE显示在相对分子质量36～38 kD间有两条带,除明显抑制A549生长外,对Hela、胃7901及BT325三者同样具有抑制生长活性,抑制率依次为69.19%、48.19%、54.47%、67.80%.结论此法成本低、纯度好、收获量及生物学活性略有提高.

重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性标准品的免疫学活性测定

目的测定重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)生物学活性标准品的免疫学活性.方法用深圳晶美公司及美国R&D公司的G-CSF ELISA试剂盒分别对WHO rhG-CSF生物学活性国际标准品、惠尔血针剂-75(GRAN75)及用WHO rhG-CSF生物学活性国际标准品标定过生物学活性的工作标准品T1、T2、T3进行免疫学活性测定.结果不同公司的rhG-CSF ELISA试剂盒对所测定样品的测定结果不同,且用不同稀释液稀释样品测定结果亦不同.结论用免疫学方法定量测定rhG-CSF的含量是有条件的,且免疫反应能识别聚体但不能识别蛋白分子的降解.

23-羟基桦木酸对B16细胞系的诱导分化作用

目的评价23-羟基桦木酸对黑色素瘤B16细胞的抑瘤作用.方法以MTT法测定细胞增殖的抑瘤率,并以B16细胞形态、黑色素含量、细胞周期变化及体内致瘤能力的测定作为观察指标.结果用10～20 μg/ml的23-羟基桦木酸作用肿瘤细胞,见有不同程度的抑瘤作用(P<0.001).表现为黑色素生成能力增加,细胞生长缓慢.可使B16细胞阻断在G1期,肿瘤体积明显缩小.结论 23-羟基桦木酸低剂量(10～20 μg/ml)对B16细胞有明显的分化诱导作用,而对体内外黑色素瘤增殖有明显的抑制作用.

人用疫苗佐剂研究中存在的问题

新一代重组亚单位、合成肽及DNA疫苗虽然作用特异性及安全性提高,但普遍免疫原性较差,因此对佐剂的研制提出了新的要求.目前人用疫苗佐剂研究中存在的主要问题是安全性与有效性问题,以及普适性、模型抗原、动物模型及检测方法的选择缺乏统一的标准等问题,这些问题的解决将推动佐剂的研究与开发.

牛磺酸应用于心血管疾病的研究进展

综述了近年来国内外牛磺酸在抗心律失常、保护血管平滑肌、调血脂、降血压、保护心肌细胞、抑制血小板凝聚和血栓形成等心血管疾病方面应用的研究进展.

多肽在生物医药和诊断试剂中的应用

简要介绍多肽作为药物及诊断试剂的特点、主要的筛选途径及国内外研究概况.系统介绍多肽在疫苗、抗肿瘤、抗病毒及抗菌药物、导向药物、细胞因子模拟肽、诊断试剂等领域的研究及应用情况.

肝素类药物在呼吸系统疾病中的应用研究进展

肝素类药物初作为抗凝药应用于临床,后来研究表明还具有多种非抗凝生物活性和药理作用.此文结合作者的研究工作,着重就国外肝素类药物在呼吸系统疾病中的研究进展作一综述.

洛美沙星壳聚糖阴道栓的研制及临床观察

目的研制洛美沙星壳聚糖阴道栓,试用于临床.方法以壳聚糖、明胶、甘油为基质制备洛美沙星壳聚糖阴道栓,建立质量标准,并对其进行临床观察.结果该栓剂制备工艺可行,质量标准能够控制此品的质量,临床疗效可靠,无不良反应. 结论此品适用于临床.

高效凝胶渗透色谱法测定硫酸软骨素的分子量及其分布

目的用高效凝胶渗透色谱法对硫酸软骨素的相对分子量及其分布进行测定.方法色谱柱为TSK 4 000 PW(7.8 mm×300 mm),以已知相对分子量的葡聚糖为标样,0.2 mol / L硫酸钠溶液(用稀硫酸调pH5.0)为流动相,柱温35℃,示差折光检测器.结果测得硫酸软骨素的重均分子量(Mw)为37 000～48 000 D,分布宽度(Mw / Mn)为1.34～1.45.结论该法操作简便,快速,可用于硫酸软骨素的分子量及其分布的质量控制.

高效液相色谱法测定青春宝片剂中人参皂苷Rg1和Re的含量

目的建立青春宝片剂中人参皂苷Rg1和Re的含量测定方法.方法青春宝片剂经提取后,以乙腈-0.05%磷酸溶液(20∶80)为流动相,检测波长203 nm, 采用高效液相色谱法,测定其中人参皂苷Rg1和Re的含量.结果 Rg1和Re的回收率分别为97.5%和97.8%,RSD分别为2.16%和2.01%.结论此法分离良好,灵敏度高,可用于青春宝片剂的质量控制.

生脉注射液治疗病毒性肝炎的临床观察

对于病毒性肝炎的治疗原则,目前仍是强调整体综合治疗法、中西医结合疗法.近年来国内对各型病毒性肝炎广泛地开展了中西医结合的研究,取得了较好的成绩.我们采用生脉注射液治疗病毒性肝炎取得较好疗效,报告如下.

毛细管电泳法测定泛昔洛韦的含量

目的研究毛细管电泳法测定泛昔洛韦的含量.方法用50 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 3.0),毛细管柱(75 μm×50 cm),以托吡卡胺为内标于210 nm波长处测定泛昔洛韦的含量.结果泛昔洛韦在0.05～0.5 mg/ml浓度范围内与泛昔洛韦和内标峰面积之比呈良好线性关系,回收率为99.53 %,RSD为0.9%(n=10).结论此法结果准确,重现性好,可用于泛昔洛韦的含量测定.

比色法测定正大维他滴眼液中硫酸锌的含量

目的测定正大维他滴眼液中硫酸锌的含量.方法以4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚作为离子显色剂,用比色法测定硫酸锌的含量.结果测定波长493 nm,辅料对测定无干扰,平均回收率为100.1%,RSD为0.60%.结论此法操作简便、快速,结果准确,重现性好,适合该产品质量检验分析,测定结果与EDTA-2Na络合滴定法测定结果基本一致.

尖吻蝮蛇蛇毒中镇痛成分的研究

目的利用国产尖吻蝮蛇蛇毒筛选阿片受体激动剂,从中寻找无成瘾性新型镇痛药物.方法通过层析分离方法,从国产尖吻蝮蛇蛇毒中获得电泳纯样品 ,采用微生理测定仪测定样品对CHO-μ受体细胞的活性,同时进行动物热板法镇痛试验,小鼠竖尾、跳跃成瘾性试验.结果从尖吻蝮蛇蛇毒中获得一分子量为1.2万的电泳纯蛋白质,且与CHO-μ受体细胞亲和力活性很高,该成分对小鼠具有较高的镇痛作用,无成瘾性,无毒性.结论该成分具有较好的临床应用价值.

门冬氨酸钾镁注射液细菌内毒素的检测

目的建立门冬氨酸钾镁注射液的细菌内毒素检查法.方法用不同厂生产的鲎试剂对不同厂家、不同批号的门冬氨酸钾镁注射液分别进行干扰试验.结果注射液原液及大有效稀释倍数(MVD=10)的溶液,对鲎试剂均无干扰作用,结果与兔法一致.结论利用细菌内毒素检查法代替门冬氨酸钾镁注射液热原检查是可行的.

高单位尿促性素研制初报

目的由尿促性素(HMG)中间体(13～47 u/mg)中提取高单位HMG.方法使用一种新型的高效阳离子交换剂,吸附活性成份,用蔗糖-Tris缓冲液将它洗脱下来,用乙醇使其沉淀.结果所得成品效价为102.06～333.5 u/mg,收率为62.3%～87.9%,提纯倍数为5.50～9.78,电泳呈一区带.结论采用此法可获得高纯度的HMG.

玻璃酸钠微生物限度检查的探讨

玻璃酸钠(sodium hyaluronate,SH)在临床应用的研究正在深入开展.同时,SH作为化妆品的一种重要成分,应用日渐广泛.SH具有酸性黏多糖的共有特性,其溶液具有高黏度.这给其微生物限度检查带来了一些困难.

SDS-PAGE法测定重组人红细胞生成素糖基化程度

目的建立重组人红细胞生成素(rhEPO)糖基化程度的测定方法.方法利用聚糖酶部分酶解rhEPO,通过SDS-PAGE电泳分离酶解片段,鉴定rhEPO的的糖基化程度.结果 rhEPO N-聚糖酶部分酶解的电泳图谱,可以明确指示N-连接糖基化程度.结论此法可以用于rhEPO的常规质量控制.

甲状腺片薄膜包衣片的制备及其稳定性的考察

目的研制甲状腺薄膜包衣片,提高稳定性.方法进行光照、高温、高湿及加速试验比较甲状腺薄膜包衣片与糖衣片的稳定性.结果甲状腺薄膜包衣片与传统的糖衣片比较具有较强的抗光照、高温及高湿的能力,加速试验结果稳定性良好.结论甲状腺薄膜包衣片的稳定性明显优于其糖衣片.

中国药学会历届生化药物专业委员会建立的时间和组成人员