中国生化药物杂志
Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 중국생화약물잡지
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固定化谷氨酸脱羧酶转化γ-氨基丁酸的研究
目的 用固定化谷氨酸脱羧酶转化制备γ-氨基丁酸(GABA).方法 以海藻酸钠与明胶为协同作用载体包埋固定化酶,考察影响固定化酶活性的因素,获得固定化酶的优化条件,并将酶应用于制备GABA.结果 海藻酸钠、明胶、氯化钙和戊二醛浓度分别为2.5%,1.0%,3.0%和0.3%,硬化时间4 h,固定化酶的相对活性高,酶活回收率达到65.3%.以谷氨酸为底物,固定化谷氨酸脱羧酶为催化剂,采用填充床反应器连续制备GABA,连续反应60 h,酶相对活性仍保持在初始值的76.9%,谷氨酸转化率为98.7%.结论 该固定化谷氨酸脱羧酶可应用于生物转化法连续制备GABA.
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猪胰腺羧肽酶B提取工艺中的激活条件与稳定性研究
目的 研究猪胰腺羧肽酶B提取工艺中的激活条件以及激活后粗酶液的稳定性,并对酶进行纯化.方法 胰腺匀浆、激活,硫酸铵盐析进行初步提取,采用疏水色谱、离子交换色谱和分子筛等方法进行纯化,对胰腺匀浆后的粗酶激活条件进行了研究,考察了不同保存条件下粗酶液的稳定性.结果 纯化后的羧肽酶B经SDS-PAGE电泳鉴定为电泳纯.比活为152 u/mg,纯化过程的活性总回收率为51%.粗酶液中羧肽酶B的激活受各种条件影响,特别是激活温度和激活时间,4℃下激活80 h,或37℃下,激活6.5 h, 均可获得大酶活,激活后的粗酶液可直接于35%(NH4)2SO4中保存,保存60 h的酶活损失小于5%.结论 通过调整激活温度与激活时间可以获得猪胰腺羧肽酶B粗酶液大的激活效果,激活后的粗酶液可于35%(NH4)2SO4中短期保存.
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牛初乳类胰岛素生长因子-Ⅰ对大鼠糖尿病的预防作用研究
目的 探讨牛初乳类胰岛素生长因子-Ⅰ(BC-IGF-Ⅰ)对大鼠糖尿病的预防作用.方法 雄性Wistar大鼠分为4组,分别为链脲佐菌素(STZ)对照组,BC-IGF-Ⅰ低、中、高剂量组.BC-IGF-Ⅰ组分别按低[5 μg/(kg·d]、中[10 μg/(kg·d)]、高[20 μg/(kg·d)]灌胃BC-IGF-Ⅰ;STZ对照组灌胃蒸馏水[5 ml/(kg·d)].连续灌胃12 d后,腹腔注射STZ(55 mg/kg).于注射后3,7,14 d采集大鼠血清,检测血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯4项指标.结果 口服不同剂量的BC-IGF-Ⅰ组大鼠4项指标均显著低于STZ对照组(P＜0.001),且存在剂量效应.结论 口服BC-IGF-Ⅰ能够对STZ所致糖尿病起到预防和延缓的作用.
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羊胎盘肽对小鼠非特异性免疫功能的影响
目的 探讨羊胎盘肽对小鼠非特异性免疫功能的影响.方法 采用60Co γ射线照射的方法建立免疫抑制小鼠动物模型,利用巨噬细胞吞噬鸡红细胞和小鼠碳粒廓清实验,评价羊胎盘肽对免疫抑制状态小鼠非特异性免疫功能的影响.结果 羊胎盘肽有促进巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的作用(P＜0.05),并能显著提高机体碳粒廓清的能力(P＜0.01).结论 羊胎盘肽对小鼠具有一定非特异性免疫增强作用.
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白藜芦醇抑制耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM增殖的研究
目的 观察白藜芦醇对耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM增殖和细胞周期的影响及探讨其靶点蛋白质.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、光学显微镜观察观察白藜芦醇对MCF-7/ADM细胞增殖的影响,流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响,Western blot法、亲和甄别磁珠法鉴定白藜芦醇的靶点蛋白质.结果 白藜芦醇作用MCF-7/ADM 72 h之后,细胞增殖大量下降并且呈剂量依赖关系,而对正常肝细胞毒性很小.白藜芦醇可导致MCF-7/ADM细胞阻滞于G0/G1期.Cdk2、myosin和actin蛋白可能是白藜芦醇的靶点蛋白质之一.结论 白藜芦醇可能是1种新发现的Cdk2的抑制剂,同时通过作用于细胞的骨架结构蛋白质来干扰细胞的有丝分裂过程,使细胞周期延长从而导致MCF-7/ADM的增殖受到抑制.提示白藜芦醇是1种活性强、低毒的抗癌化学前体分子.
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肌苷口服液杂质分析及肌苷溶液的稳定性研究
目的 分析影响肌苷口服液澄明度的主要原因,并考察2%肌苷溶液在加热情况下和碱性条件下的稳定性.方法 用高效液相色谱法确认肌苷口服液中的杂质,并通过测定2%肌苷溶液在不同时间不同条件下的含量来考察其稳定性.结果 肌苷口服液中主要杂质为次黄嘌呤,2%肌苷溶液在60℃以下和弱碱性条件下较为稳定.结论 次黄嘌呤和肌苷的析出是影响肌苷口服液澄明度的主要原因,2%肌苷溶液在70℃和80℃条件下的降解符合一级动力学反应,在pH值13.5时的降解符合零级动力学反应.
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消癌平注射液对白血病细胞NB4作用的初步研究
目的 研究消癌平注射液对白血病细胞株NB4的效应并初步探讨其机制.方法 采用台盼兰染色法检测消癌平注射液对白血病细胞株NB4细胞增殖和活力的影响.流式细胞术分析消癌平注射液对NB4细胞周期和细胞表面分化抗原CD11b表达的影响.NBT还原实验检测对NB4细胞分化的影响.免疫印迹方法检测对细胞周期和凋亡相关蛋白的影响.结果 消癌平注射液能以时间和剂量依赖方式抑制白血病细胞NB4增殖.诱导NB4细胞发生G0/G1期阻滞,增加P21蛋白质的水平,但不改变P27的表达.对细胞凋亡相关蛋白质的PARP水平没有影响.消癌平注射液能增加NB4细胞表面抗原CD11b的表达,增加NBT阳性细胞数,诱导NB4细胞分化.结论 消癌平注射液能通过诱导细胞周期阻滞和细胞分化抑制NB4细胞增殖.
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新型NO供体β-Gal-NONOate对C6细胞的抗肿瘤作用
目的 比较研究二醇二氮烯翁(diazeniumdiolate, NONOate)与β-半乳糖基化的β-Gal-NONOate (β-galactosyl-diazeniumdiolate)的作用方式及其抗肿瘤效应.方法 以大鼠胶质瘤C6/LacZ和C6细胞为体外实验模型,以X-Gal(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactosidase)染色法检测β-半乳糖苷酶活性,Griess法比较β-Gal-NONOate与NONOate在C6/LacZ和C6细胞中NO的释放量,采用细胞计数和MTT法比较β-Gal-NONOate与NONOate的抗肿瘤效应.结果 β-Gal-NONOate在C6/LacZ细胞中的NO释放量与药物浓度呈剂量依赖关系,并在相同药物浓度条件下明显高于NONOate;而β-Gal-NONOate在不表达β-半乳糖苷酶的C6细胞中未检测到NO释放.β-Gal-NONOate对C6/LacZ细胞的抗肿瘤活性显著高于NONOate(P＜0.01),但对C6细胞则没有明显的抑制作用;NONOate在C6/LacZ和C6细胞中的NO释放量和对这两个细胞系的作用效果均无显著差异(P＞0.05).结论 β-Gal-NONOate比NONOate更加稳定并具有更高的抗肿瘤活性,其作用的发挥依赖于β-半乳糖苷酶的表达,是一个有效的定向胞内释放的NO供体,未来在肿瘤的治疗和研究中有较大的应用前景.
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柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸
目的 用柱前衍生-反相高效液相色谱法测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量.方法 采用二硝基氯苯(DNCB)为衍生试剂进行衍生,Waters Novapak C8(3.9 mm×150 mm,4 μm)色谱柱分离,以乙腈-乙酸钠水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长360 nm,在65 min内,测定各氨基酸含量.结果 回收率为97.5%～103.5%,RSD为0.7%～3.0%.结论 DNCB柱前衍生-反相高效液相色谱法可测定转移因子胶囊中游离氨基酸的含量.
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过饱和硫酸铵悬浮法提纯人凝血酶原
目的 从人血浆中简便、快速、高效地提纯凝血酶原.方法 氯化钡吸附维生素K依赖的凝血因子,解吸附后低温过饱和硫酸铵沉淀非目的蛋白质,同时悬浮起凝血酶原.结果 所提纯的凝血酶原得率较传统的硫酸铵两步沉淀法提纯凝血酶原得率高.结论 该方法简便易行,得率满意.
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腺苷产生菌Xn151的产物积累机制
目的 探索枯草芽孢杆菌黄嘌呤缺陷型突变株Xn151的腺苷积累机制.方法 通过测定野生型菌株和突变株的相关酶活力和嘌呤系物质对腺苷积累的影响,判断出那些酶是腺苷生物合成途径中的关键酶.结果 缺失腺嘌呤脱氨酶的黄嘌呤突变株Xn151能积累更多的腺苷,在发酵培养基中限量加入嘌呤系物质(鸟苷或腺嘌呤)能促进腺苷的积累,但超过一定的量则对腺苷积累不利.结论 在黄嘌呤缺陷型突变株Xn151中限量供应嘌呤系物质(鸟苷或腺嘌呤)能够解除产物的反馈抑制.腺嘌呤脱氨酶的缺失能促进腺苷的积累.
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超临界CO2萃取蚕蛹多不饱和脂肪酸的工艺研究
目的 提取蚕蛹油,测定主要成分的含量.方法 采用超临界CO2流体萃取(SFE-CO2)技术,并利用均匀设计法优化筛选佳萃取工艺条件.气相色谱法测定蚕蛹油主要成分的含量.结果 蚕蛹油SFE-CO2的佳工艺条件为:萃取压力(25.5±0.5)MPa,萃取温度55℃,萃取时间2.5 h,大萃取率为35.46%.各成分含量分别为:棕榈酸25.08%、硬脂酸7.55%、油酸25.40%、亚油酸7.58%、α-亚麻酸34.38%.结论 SFE-CO2技术可用于蚕蛹油提取,并可用于工业化生产.
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鼠尾藻多酚及其各组分的抗凝血活性筛选
目的 筛选鼠尾藻多酚及其各组分的抗凝血活性.方法 采用膜分离方法对鼠尾藻多酚进行分级;采用毛细管法测定小鼠凝血时间;采用剪尾法测定小鼠出血时间;采用试管法测定新西兰兔激活部分凝血活酶时间、血浆凝血酶原时间和血浆凝血酶时间.结果 高相对分子质量(Mr)鼠尾藻多酚分级级分极显著地延长小鼠凝血时间、出血时间、新西兰兔激活部分凝血活酶时间,且其延长程度与多酚Mr成正相关关系,Mr大于1.0×105的组分体内体外抗凝血活性与阿司匹林相近.结论 高Mr鼠尾藻多酚具有极显著的体内、体外抗凝血活性.
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玉米SOD的分离纯化与部分性质研究
目的 建立1种高效而简单的玉米SOD分离纯化方法.方法 采用初步提取、40%～80%硫酸铵分级沉淀、Cu2+螯合亲和色谱和DEAE-纤维素离子交换色谱处理的方法从玉米中提取SOD.结果 获得了比活为1.18×104U/mg的SOD-A组分,活力回收率为11.7%;纯化后的SOD-A组分经PAGE和SDS-PAGE均为一条带;等电聚焦结果表明该组分的等电点为7.2;经鉴定,该组分属于Cu/Zn-SOD.稳定性研究表明,该组分对热、酸碱及常见变性剂(如尿素)的稳定性较好.结论 利用Cu2+螯合亲和色谱和DEAE-纤维素离子交换色谱相结合的方法可以纯化得到高比活、稳定性好的玉米SOD-A组分.
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睫状神经营养因子突变体的中试工艺研究
目的 进行睫状神经营养因子及其突变体的应用开发,研究其中试生产工艺.方法 摸索了不同的发酵条件以确定佳的发酵工艺,采用稀释复性-离子交换色谱-分子筛相结合的方法对其进行复性和纯化. 结果得到的蛋白经HPLC检测纯度在95%以上,比活性的达到2.0×106 U/mg,末端的15个氨基酸序列和Western blot的结果与要求相符.结论 中试工艺简单、迅速,所需设备廉价,有利于大规模生产.
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苦瓜中黄酮类化合物的提取及抗氧化性研究
目的 对苦瓜中黄酮类化合物的提取及其抗氧化性进行研究.方法 提取采用正交实验法,抗氧化性研究采用烘箱储藏法.结果 苦瓜总黄酮类化合物的提取佳工艺条件为乙醇体积分数90%,提取时间3 h,固液比1 g:60 mL,提取温度70℃,提取率可达为7.128%.抗氧化性结果显示:提取物的加入量对猪油的自氧化有量效关系.结论 苦瓜中提取的黄酮类化合物对猪油的氧化有明显的抑制作用,且随加入量的增多,抗氧化能力增强.
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重组人血管生长素包涵体复性条件研究
目的 摸索重组人血管生长素(rhANG)复性影响条件,以提高rhANG的复性效率.方法 超声波破碎菌体,变性萃取rhANG包涵体.分析rhANG包涵体起始浓度、氧化型、还原型谷胱甘肽比例、盐酸胍和添加精氨酸对复性的影响.结果 在0.1 mol/L Tris-HCl pH 7～8,还原型、氧化型谷胱甘肽比率为5,盐酸胍为0.2～0.5 mol/L,起始蛋白质浓度0.1～0.2 mg/mL时,rhANG蛋白复性率为60%;0.5 mol/L L-精氨酸有助于复性.结论 初步优化rhANG包涵体复性参数,为rhANG的放大制备创造了条件.
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利血平提取工艺的中试研究
目的 进行从催吐萝芙木根粉中提取利血平的中试规模的研究.方法 催吐萝芙木根粉经浸提、大孔树脂吸附和洗脱、沉淀生物碱、去除胶质、粗结晶、重结晶,制得利血平晶体.结果 利血平总提取率平均为0.035%,测定结果表明,利血平质量符合《中国药典》标准.结论 此提取工艺优于传统的苯提取法,适合于工业化生产.
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生化药物在治疗骨关节炎中的应用及兔膝骨关节炎造模方法
骨关节炎(OA)是多种因素相互作用的结果,其发病机制是1个复杂的过程,且尚不明确,因此选择1种合理的OA造模方法是必不可少的.此文综合国内外相关文献,介绍玻璃酸钠注射液等生化药物在OA治疗中的作用及研究中兔膝OA模型的建立方法.
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靶向脂质体在癌症治疗中的应用
脂质体作为药物载体问世以来,一直在癌症肿瘤治疗方面引起人们的关注,此文对近年来国外在此方面的研究进展,尤其对当前较热门的脂质体肿瘤靶向给药及其触发释药的机制作一介绍.
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脂必妥对大鼠实验性高脂血症的作用
目的 研究脂必妥对大鼠实验性高脂血症的调血脂作用.方法 采用喂养法建立动物模型,给予不同剂量的脂必妥,4周后取血测定血脂含量.结果 脂必妥可明显降低血清总胆固醇和甘油三酯的水平,显著提高血清高密度脂蛋白胆固醇.结论 脂必妥对大鼠实验性高脂血症有明显的调血脂作用.
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冰冻红细胞制备方法的改进
目的 建立1种冰冻红细胞佳制备方法,用于稀有血型血液的长期保存.方法 以甘油为保护剂,低温保存红细胞,使用前水浴解冻,用不同浓度的洗涤液洗涤去除甘油,以红细胞回收率、游离血红蛋白含量、残余甘油量、体外溶血试验和无菌试验为质量控制项目.结果 储存6 d内的全血或悬浮红细胞,10 mL/min、150次/min水平摇摆条件下分2次加入57.1%的甘油溶液,中间静置平衡10 min,使甘油浓度达到40%(w/v),-80℃保存.数周后,42℃水浴解冻,15 mL/min、150次/min水平摇摆条件下分别用9% NaCl溶液、羟乙基淀粉40氯化钠溶液、0.9% NaCl溶液洗涤去除甘油,再用0.9% NaCl溶液混悬.18袋制品各项质量指标好于原传统方法,且均符合国家要求,临床使用效果良好.结论 此法优于传统方法,可在实际中应用.
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胸腺五肽鼻喷雾剂的研制
目的 研究胸腺五肽鼻喷雾剂的制备方法并建立质量控制方法.方法 确定处方组成及制备工艺.采用紫外分光光度法测定胸腺五肽的含量.结果 胸腺五肽平均回收率为100.06%,RSD=0.13%(n=5);含量测定方法可行.结论 该制剂制备工艺简单,质量控制方法可靠,质量稳定.
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玻璃酸钠对氯霉素溶液在眼部吸收进入血液循环的影响
目的 研究玻璃酸钠对氯霉素溶液在眼部吸收进入血液循环的影响.方法 用高效液相色谱法测定氯霉素溶液滴眼后的血浆药物浓度.结果 血浆氯霉素浓度均低于0.4 μg/mL.滴眼后30 min内,含玻璃酸钠的氯霉素溶液的血浆药物浓度更低.结论 玻璃酸钠可延缓氯霉素溶液滴眼后的吸收.
| 年 | 期数 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
