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灭菌生物指示剂与指示微生物
生物指示剂是一类用于确认灭菌设备性能、验证灭菌程序和监控灭菌效果的微生物制品.本文综述了生物指示剂中指示微生物的选择标准,主要菌株及应用情况.同时,对生物指示剂的选择进行分析,为生物指示剂得到更好地应用、发展提供参考.
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白天鹅气雾剂防治烧伤的临床研究
本制品是根据微生态学原理,利用微生物间的拮抗作用,由BS224活菌体制成的生物制品,喷涂于创面,利用微生物拮抗作用,达到防治各种致病菌感染的目的.经由上海长海医院等多家医院临床研究,进一步考察该制品疗效、不良反应和适应症.
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枯草芽孢杆菌BS224菌株抑菌作用的初步研究
目的 研究枯草芽孢杆菌BS224菌株抑菌物质的产生及作用机制.方法 分别取发酵后离心所得上清液和菌体破碎液以杯碟法测抑菌活性.结果 2500rpm～4000rpm离心所得上清液与菌体破碎液抑菌圈半径有显著差异.结论 枯草芽孢杆菌BS224菌株抑菌物质大多外分泌于发酵液中,以2500rpm～4000rpm离心可获取抑菌物质.
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β-甘露聚糖酶产生菌DY-14的发酵优化及分离纯化
利用单因素实验和正交分析方法得到枯草芽孢杆菌DY-14发酵产酶的佳培养基组分及条件:以魔芋粉为碳源(3%),蛋白胨为氮源(1.5%),初始pH 8.0,摇瓶装液量10 mL/100mL,接种量1%,37℃培养24h,终产生的β-甘露聚糖酶活力可达3216 U/mL.DY-14发酵液经 (NH4)2SO4盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤,得到了电泳纯的β-甘露聚糖酶.
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加压CO2在生理盐水中的杀菌效果研究
CO2是一种天然、安全的杀菌剂,它的临界温度和临界压力分别为31.1℃、7.13MPa,加压CO2杀菌技术是利用高于或接近于临界温度和临界压力的CO2对食品进行杀菌.使用这项技术处理生理盐水中的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌.选择不同的压力(1MPa、3MPa、5MPa和7.5MPa)、时间(15min、30min、45min 和 60min)、 温 度(25 ℃、35℃、45℃和55℃),研究影响杀菌效果的因素.结果表明随着压力、时间和温度提高,加压CO2的杀菌效果逐渐提高;加压CO2对3种菌的杀菌效果为:大肠杆菌大于枯草芽孢杆菌大于金黄色葡萄球菌;对革兰氏阳性菌的杀菌效果不如革兰氏阴性菌好.
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有机番茄生产中"10亿芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂"的应用效果
在有机番茄生产中,由于禁止使用化肥和化学农药,番茄生长发育状况常常不如使用化肥和化学农药的常规番茄生产,终导致产量明显减少.针对这一问题,以"10亿芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂"为研究对象,开展了该制剂在有机番茄生产中应用的可行性评价.通过育苗期-田间滴灌综合应用,以株高、根长、单株果穗数和产量为评价指标,评价了该制剂对番茄生长发育状况的影响.研究结果表明,育苗阶段喷灌使用该制剂(200倍水稀释液)三次后,番茄幼苗长势健壮,根系较对照发达;番茄移栽定植后,滴灌应用该制剂两次,1 kg/666.7 m21次,番茄植株的株高达到70.7 cm、根长达到25.9 cm、单株果穗数为8.07个/株,与对照相比,增长率分别为3.06%、5.28%和10.10%;产量达到6030 kg/666.7 m2,显著增产5.9%;并且对番茄根腐病防治效果显著,防效达到66.7%.本研究结果表明,"10亿芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂"通过育苗期-田间滴灌综合应用能显著改善番茄植株生长发育状况和提高产量,具有良好的应用价值,为有机番茄高产提供了重要技术支撑.
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培养基反浇法和贴膜法计数结果差异
仪器和材料：菌种
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、缺陷假单胞菌
试剂和培养基
胰酪胨大豆肉汤培养基、营养肉汤培养基、营养琼脂培养基、改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、生理盐水。 -
微波消毒口腔石膏模型的实验研究
目的 评价微波消毒法对口腔石膏模型的消毒效果.方法 用细菌定量检测和基因扩增荧光定量技术,对微波照射消毒口腔石膏模型的效果进行了观察.结果 用输出功率120 W微波炉对染菌口腔石膏模型进行照射消毒.照射5 min,可完全杀灭污染在口腔石膏模型上的枯草芽孢杆菌,并可完全灭活污染在口腔石膏模型上的乙型肝炎病毒DNA.结论 普通家用微波炉在满功率条件下照射5min,可有效杀灭污染在口腔石膏模型上的细菌和病毒.
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60味中药提取物抗菌活性的研究
目的：体外观察60味中药的240种提取物对9种常见病原菌的作用，并对其中抑菌效果明显的提取物进行低抑菌浓度检测。方法：采用纸片扩散法对240种提取物进行初步的抗菌活性筛选，并采用液体培养基法（2倍稀释法）测定活性提取物的低抑菌浓度（MIC）。结果：共有104种提取物对1种或多种细菌显示较强的抑制作用，其中丹参等11味中药的20种提取物对3种常见菌体现了强抑制作用（MIC <0.2 mg·mL-1）。结论：丹参、蛇床子、蓼蓝、蒲公英、桑叶、甘草、姜黄、紫草、半边莲、野菊花和密蒙花等11味中药的乙醇、丙酮、正己烷提取部位对枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有强抑制作用。
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枯草芽孢杆菌的基因组重排初步研究
目的:获得产高活性豆豉溶栓酶的枯草芽孢杆菌突变株.方法:用紫外诱变得到突变株,观察诱变效应,筛选透明圈直径与菌落直径比值大(HC值)的突变株,进行原生质体融合,筛选酶活高的菌株.结果:紫外诱变得到2株HC比值大的菌落;当溶菌酶为100 mg·L~(-1),处理时间为45 min进行原生质体融合时,效果好;当PEG为40%时,原生质体融合率大;后筛选出酶活可达2 013 U·mL~(-1)的突变株.结论:通过紫外诱变和原生质体融合,得到高活力的菌株.
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枯草芽孢杆菌ge25菌株发酵及其抑菌活性成分的初步研究
人参是我国传统名贵中药材,病害问题严重影响人参的产量和品质.在前期分离到对多种人参致病菌有理想抑菌活性的内生枯草芽孢杆菌ge25菌株基础上,研究采用盐析和酸沉淀法从LB和Landy发酵液中制备蛋白粗提物和脂肽粗提物,用人参黑斑病菌检测粗提物的抑菌活性及其对高温和蛋白酶消解的稳定性;研究发现,LB发酵物中的抑菌成分主要是蛋白类物质,不耐高温和蛋白酶K;Landy发酵物中的抑菌成分主要是脂肽类物质,其对高温和蛋白酶K稳定.原位酸水解-茚三酮显色和TLC-生物自显影分析发现,脂肽粗提物中至少含有1种抗菌环肽.鉴于源自ge25菌株的脂肽类物质的高稳定性及理想的抑菌活性,对其开展深入研究将有助于推动人参病害的生物防治.
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内生细菌BZJN1的鉴定及对白术根腐病的生物防治研究
该研究从白术体内分离得到一株细菌BZJN1,经生理生化检测及分子鉴定证明其为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis.菌株BZJN1可以显著抑制白术角担菌菌丝生长,抑制率超过70％.显微观察对峙区域发现角担菌菌丝生长畸形、菌丝顶端或中部膨大呈球形,原生质泄露.其发酵滤液在3％,6％的浓度下对角担菌菌丝生长抑制率达到22.7％,38.7％.田间防效试验证明,药后10 d,BZJN1生防菌剂在1×109 cfu·mL-1处理防效高,达到了75.27％.药后20 d,1 ×109 cfu·mL-1的处理防效为72.37％,和化学药剂相当.所有BZJN1的处理对白术有一定促生效果,1×109 cfu·mL-1处理,增产达到14.1％.
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D-氨基酸在生物膜分散中的作用研究进展
细菌能粘附于物体表面而形成生物膜,生物膜的存在极大的增加了细菌的耐药性,常规抗生素难以清除生物膜.近年来,科学家发现枯草芽孢杆菌生物膜成熟后期能自发分泌具有分散作用的D-氨基酸,这些D-氨基酸也能分散葡萄球菌和铜绿假单胞菌的生物膜.D-氨基酸对人体无毒,有望成为控制生物膜感染的新措施.
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病原体重组枯草芽孢杆菌疫苗的研制现状
枯草芽孢杆菌是一种新型疫苗载体,它可以表达细菌、病毒和吸虫等病原体的多种蛋白,本文拟就这方面的研究现状进行综述.
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枯草芽孢杆菌孢子悬液保藏期的验证
药品微生物检验是评价药品质量的重要手段之一。《中国药典》2005年版增加了对药品进行无菌检查和微生物限度检查时需进行方法学验证和对培养基进行灵敏度检测的要求，通过检测实验菌株在试验系统中生长能力，判断实验体系的适用性。在上述检测过程中，标准实验菌株的纯度、生物学特性的变异都会影响检验结果。因此，在药品微生物实验室中，如何评估保藏菌株在使用过程中的死亡、衰退和变异，保持实验菌株的原有生物学特征等问题就变的尤为重要[1]。对药品微生物实验室中标准菌种保藏的研究分为两个方向[2]：一是为基层单位寻找简单、实用和经济的方法；二是为科研机构寻找能确保长期稳定保藏的方法。
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天然海水高盐条件对海绵相关细菌抗菌活性及次级代谢产物的影响
海洋微生物生活在高盐、高压、低温、低光照、寡营养、弱碱性的海洋环境中，因而形成了独特的生理特征和代谢机制，可产生与陆生微生物结构与活性迥然不同的次级代谢产物，如生物碱、萜类、环肽类和聚酮类等[1-2]，成为海洋药物的重要来源之一。从海洋放线菌中分离得到的salinisporamide A 已经完成了 I 期临床研究，用于治疗多发性骨髓瘤[3]。以从海洋真菌 Aspergillus sp. CNC-139中获得的化合物为模板合成的 plinabulin（NPI-2358）已经进入II 期临床研究，用于治疗非小细胞肺癌[4]。来自于卡纳里水域深海沉积物中的链霉菌 NTK937产生的 caboxamycin是一种新型的苯并噁唑抗生素，显示出较强的抗菌活性，对革兰阳性菌枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）IC50仅为8μmol/L[5]。海洋是一个特殊的生态系统，据文献报道，通过模拟海洋环境的拟生态培养，可以诱导海洋真菌产生新的活性代谢产物[6-9]。同时有研究表明，高盐条件造成的极端环境（如高渗透压和营养剥夺等）可以激活生物体内的沉默基因或次级代谢产物合成酶，进而使海洋等来源的耐盐真菌产生新的活性化合物[10-11]。另据文献报道，培养基盐度对海洋真菌的活性物质具有显著影响，其生物活性和活性物质的种类和产量可能有较大的差别[12-13]。但是，应用天然海水培养基探讨海洋来源细菌的抗菌活性、次级代谢产物的 HPLC化学指纹的报道较少，本实验室曾研究报道天然海水对海绵相关细菌的抗菌活性有影响[14]。另有文献对细菌 HPLC 化学指纹研究进行了报道[15-17]，此外，有文献报道天然海水可影响细菌的生长[18-19]。本文以海绵相关细菌为主要研究对象，初步开展了相关探索，以期获得具有良好抗菌活性且次级代谢产物丰富的菌株。
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介绍一种接触病历夹前后洗手法
医务人员进行各项操作后,对各项医疗器械都进行终末消毒,但往往忽略了对病历夹的消毒.有研究表明未经消毒过的病历夹染菌率达100％,表皮葡萄球菌检出率达54.79％,枯草芽孢杆菌检出率达17.93％,病室病历夹上细菌种类与医院内获得性感染的细菌大致相同[1].医护人员在翻阅完病历后直接为患者进行处置时,将病历上的细菌带给患者,可能引起院内感染.泉州市第一八零医院烧伤整形科自2008年1月起采用免洗手消毒液在接触病历前后进行手消毒,取得满意效果,现报道如下.
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3种细菌气溶胶特性实验研究
目的 了解金黄色葡萄球菌、黏质沙雷菌和枯草芽孢杆菌芽孢的耐冲击能力和耐雾化能力的强弱,观察3种细菌的空气生物学特性.方法 使用AGI-30型全玻璃液体冲击采样器(AGI-30)对3种细菌进行耐冲击实验,在12.5 L/min的气流冲击5、10和15 min后测定采样液中细菌滴度和终末采样液体积,采用校正存活率评价3种细菌的耐冲击性.用DV40型气溶胶发生器对3种细菌进行耐雾化实验,分别测定不同雾化时间后的菌液浓度,计算雾化后细菌存活率,评价3种细菌的耐雾化性能.结果 采样冲击实验表明,金黄色葡萄球菌的存活率高,但是在冲击过程中其存活率不稳定,枯草菌芽孢经过15 min的冲击后,存活率为60%,黏质沙雷菌的存活率为72%.在耐雾化能力方面,不同时间的雾化过程中,枯草菌芽孢的存活率高,经过60 min的雾化后,存活率为83.56%;黏质沙雷菌的相对存活率为40%,金黄色葡萄球菌在雾化过程中存活率状态不稳定.结论 金黄色葡萄球菌耐冲击能力强,但存活率低、稳定性较差;枯草菌芽孢耐雾化能力强,但耐冲击性能差,且其特性不适宜作为生物气溶胶的模式菌.3种细菌中,黏质沙雷菌适于作为生物安全装备生物学评价的指示微生物.
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可见分光光度法对3种细菌计数的研究
目的：建立枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、藤黄微球菌的快速计数方法。方法：采用可见分光光度法进行细菌计数方法研究，考察菌液浓度与吸光度之间的关系。结果：枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、藤黄微球菌菌液的吸光度与其菌液浓度对应在0.68×108~10.88×108、0.80×108~12.80×108、0.89×108~14.30×108浓度范围内线性关系良好（r2分别为0.9999、0.9998、0.9998，n=5），相应菌落计数结果稳定。结论：可见分光光度法可用于3种细菌菌液的快速计数，可以提高药品微生物检定工作效率。
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沙漠枯草芽孢杆菌PJS产生的环脂肽类抗生素研究
目的 分离鉴定枯草芽孢杆菌PJS发酵液中的环脂肽类抗生素PJS-0.方法 采用溶剂萃取、薄层色谱(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)等分离方法对菌株PJS发酵产物的活性组分PJS-0进行分离;并通过紫外(UV)、质谱(MS)和核磁共振波谱(NMR)联合分析对其结构进行鉴定.结果 从塔克拉玛干沙漠来源植物内生枯草芽孢杆菌PJS的发酵液中分离得到一个环脂肽类抗生素:PJS-0,经结构鉴定为Mojavensin A.结论 本文首次从陆生芽孢杆菌中分离得到Mojavensin A,并首次用ESI+-MS/MS对其氨基酸序列进行鉴定.
关键词： 塔克拉玛干沙漠 枯草芽孢杆菌 环脂肽类抗生素 Mojavensin A 结构鉴定
