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STC-1蛋白对肾癌细胞生长平衡影响机制探讨
目的:研究斯钙素1(stanniocalcin1,STC-1)与缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)的相互作用,是否借助调节Ca2+水平参与肾癌细胞生长调控.方法:构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,使用不同浓度STC-1蛋白干预转染后的肾癌细胞(转柒组)和单纯肾癌细胞(非转染组).MTT法检测各组细胞增殖情况;RT-PCR及ELISA法检测细胞内HIF-1α、STC-1基因及蛋白表达;荧光分光光度计检测细胞内Ca2+水平.结果:非转染组和转染组肾癌细胞HIF-1α蛋白表达分别为8.3±1.2和15.1±0.9,t=24.18,P＜0.001;STC-1蛋白表达分别为7.2±0.9和10.8±1.1,t=8.90,P=0.003;提示转染HIF-1α的肾癌细胞内HIF-1α和STC-1表达显著提高.不同浓度STC-1溶液干预非转染组肾癌细胞24 h后,对照组HIF-1α蛋白表达为8.3±0.5,低剂量组为7.8±0.7,中剂量组为5.3±0.4,高剂量组为4.2±0.3,F=171.726,P＜0.001,对照组STC-1蛋白表达为7.1±0.4,低剂量组为6.8±0.3,中剂量组为4.1±0.2,高剂量组为3.3±0.4,F=257.174,P＜0.001;对照组细胞内Ca2+含量为95.7±8.6,低剂量组为60.3±5.5,中剂量组为48.6±6.3,高剂量组为33.7±4.2,F=198.931,P＜0.001,对照组细胞增殖活性为0.226±0.021,低剂量组为0.343±0.024,中剂量组为0.293±0.018,高剂量组为0.252±0.023,F=23.615,P＜0.001;不同浓度STC-1溶液干预转染组肾癌细胞24 h后,对照组HIF-1α蛋白表达为15.3±1.6,低剂量组为14.6±1.1,中剂量组为10.1±0.9,高剂量组为8.6±0.8,F=135.696,P＜0.001,对照组STC-1蛋白表达为11.2±0.4,低剂量组为10.9±0.5,中剂量组为7.4±0.7,高剂量组为5.6±0.8,F=105.101,P＜0.001;对照组细胞内Ca2+含量为65.5±6.7,低剂量组为40.1±3.4,中剂量组为30.7±4.6,高剂量组为17.7±3.3,F=136.621,P＜0.001;对照组细胞增殖活性为0.295±0.033,低剂量组为0.446±0.025,中剂量组为0.379±0.015,高剂量组为0.313±0.022,F=45.571,P＜0.001.提示STC-1蛋白可促进单纯肾癌细胞和转染后肾癌细胞的增殖,但对两种细胞的促增殖作用却随着STC-1剂量的增加而逐渐下降,此时细胞内HIF-1α、STC-1的表达及Ca2水平进行性下降.结论:STC-1蛋白可能通过调节HIF-1α和Ca2+的水平,促进肾癌细胞增殖,但该促增殖作用又因STC-1对HIF-1α的逐渐抑制而逐渐减弱,从而调控肾癌细胞的生长平衡.
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Cad11高和低表达肾癌细胞分选与Cad11对肾癌细胞迁移作用的影响
目的 分选Ⅱ型成骨细胞型钙黏附蛋白(cadherin-11,Cad11)高和低表达的肾癌细胞786-O细胞群,并证实Cad11在肾癌细胞786-O中的迁移作用.方法 将质粒pBMN-Ⅰ-GFP-Cad11转染于Phoenix细胞进行包装,之后感染786-O细胞,流式细胞仪分选后扩大培养建立786-LG细胞.将786-LG细胞经Cad11抗体2C7孵育后用BSA封闭,洗涤后加入标记APC的二抗,同时以786-LG细胞(未经任何处理)和786-LG细胞(只加入标记APC的二抗处理)作为阴性对照确定分选门,绿色荧光通道和红色荧光通道进行双参数分析,流式细胞仪分选技术筛选Cad11高和低表达的786-O肾癌细胞群,蛋白质印迹法检测分选细胞Cad11的表达.786-Cad11+和786-Cad11-细胞血清饥饿24 h后接种于内室(细胞数为1×104),每组设3个复孔,Transwell细胞迁移实验和细胞结晶紫染色计数穿过小室的细胞数目,以穿过膜的细胞数目评估Cad11对其肾癌细胞786-O的迁移作用.结果 成功构建786-LG细胞.流式细胞仪检测结果显示,786-LG细胞中Cad11阳性细胞亚群占细胞总数的75.98％.Cad11细胞群分选后,GFP+/APC+双阳性细胞和GFP+/APC-单阳性细胞分别占细胞总数的28.0％和20.1％.蛋白质印迹法检测结果表明,Cad11相对表达量786-LG细胞为0.25±0.02,786-Cad11+细胞为0.60±0.03,786-Cad11-细胞为0.10±0.01,差异有统计学意义,F=132.32,P＜0.001.与786-LG细胞相比,两个细胞亚群786-Cad11+和786-Cad11-中Cad11蛋白的表达量均有明显变化,前者蛋白表达量升高至2.41倍(P=0.007),后者蛋白表达量降低至0.41倍(P=0.004),差异均有统计学意义.Transwell迁移实验结果表明,786-LG细胞迁移数目为114.33±4.09,786-Cad11+细胞迁移数目为139.00±5.19,786-Cad11-细胞迁移数目为77.67±3.71,差异有统计学意义,F=49.65,P=0.000 2.结论 成功建立了高和低表达Cad11的786-O细胞模型,并证实Cad11的表达与肾癌细胞的迁移密切相关.
关键词： Ⅱ型成骨细胞型钙黏附蛋白 分选 肾癌细胞 迁移 -
蛋白激酶C抑制剂逆转肾癌多药耐药机制的探讨
目的探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂对肾癌细胞多药耐药(MDR)逆转作用的机制.方法应用荧光显色法、RT-PCR和Western blot方法,检测PKCα cDNA转染肾癌786-0细胞前后,细胞中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)表达的变化.采用MTT方法,分别测定阿霉素(ADM)与PKC激动剂以及与PKC抑制剂协同作用后,786-0细胞和肾癌转染细胞系PKCα/786-0耐药性的变化.结果RT-PCR结果显示,肾癌转染细胞系PKCα/786-0的MDR1表达水平高于肾癌786-0细胞.ADM与PKC抑制剂协同作用的PKCα/786-0细胞系耐药性明显降低.786-0细胞对ADM的IC50为7.8015e-7(5.7046e-7～1.0669e-6);PKCα/786-0对ADM的IC50为1.6588e-6(1.1621e-6～2.3677e-6).PKC激动剂佛波醇酯(PMA)联合ADM处理PKCα/786-0的IC50为2.6794e-6(2.0521e-6～3.4983e-6);PKC抑制剂Calphostin C联合ADM处理PKCα/786-0的IC50为9.2506e-8(5.9337e-8～1.4422e-7).结论PKC抑制剂可以逆转人肾癌细胞的多药耐药性,其途径可能与改变MDR1的表达有关.
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超声检查对肾细胞癌的诊断价值
目的 通过实验研究超声波技术在对肾细胞癌进行检测的准确率为今后进行肾癌诊断提供更加准确的技术,以及探讨超声波检测技术的诊断价值.方法 对入院的40例患者采用超声波检查确诊,和终的手术诊断结果进行对比,确定超声波诊断的准确率.结果 在该次超声波检测中确定为肾癌患者的有37例,检测准确率为92.5％,检测到患者的肿瘤大多都分布在肾脏的两侧,大部分患者的肾癌细胞是透明的,并且癌细胞的回声测试中低声的比例高,肾癌细胞的结果大多数是包球型的.结论 超声波技术对于肾癌细胞具有很强的诊断能力,对于肾癌的早发现早治疗发挥着重要的作用.
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MiR200对肾癌细胞纤维化影响的相关性分析
目的：研究MiR200对肾癌细胞纤维化的影响机制,为鉴定治疗靶标提供理论依据。方法整群选取2013年1月—2015年1月该院收治的51例肾癌患者病例资料,于实验室,建立肾癌细胞株模型,采用癌旁正常组织作为对照,应用细胞侵袭实验和Westermblot法检测靶基因蛋白表达方法进行试验。结果 MiR-200组在SN12-PM6和786-0平均穿膜细胞的个数差异有统计学意义(P﹤0.05),MiR-200组ZEB1蛋白表达下降,而在E-cadberin蛋白表达上升,经相关系数比较,MiR-200的表达与E-cadberin成正相关(r=0.824)而ZEB1成负相关(r=-0.762)。结论MiR-200能够调节皮脂纤维化的侵袭,降低ZEB1蛋白表达,从而E-cadberin蛋白表达上升。
关键词： MiR200 肾癌细胞 ZEB1 E-cadberin -
MiR200对肾癌细胞增殖的影响分析
目的：研究MiR200对肾癌细胞增殖的影响。方法整群选取2013年1月—2015年1月于齐齐哈尔医学院第三附属医院就诊的51例肾癌患者病理细胞和正常癌旁组织细胞，以及构建裸鼠肾癌模型，测量MiR-200在不同细胞中的表达量和肿瘤增殖情况。结果MiR-200在裸鼠的SN12-PM6和人的786-o 、A498表达中均低于正常组织的表达(P<0.05)，在48 h后能够抑制肾癌细胞增殖(P<0.05)，48~72 h抑制情况为显著(P<0.05)。结论 MiR-200在肿瘤细胞中呈低表达水平，能够抑制肾癌细胞增殖并能够抑制裸鼠肾癌细胞生长。
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CIK与树突细胞联合对肾癌细胞的杀伤研究
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突状细胞(DC)共同培养后CIK细胞的增殖活性、表型变化及对肾癌细胞株769-P的杀伤作用.方法 采集健康人的外周血单个核细胞(PBMC),置37 ℃、5%CO2培养箱2 h,收集非粘附细胞诱导分化成CIK,粘附细胞诱导为DC,在培养7 d后DC与CIK按1:40的比例混合培养,分别在3 d、6 d收集细胞同时以单纯CIK细胞为对照,运用LDH释放法检测对769-P细胞的杀伤活性.结果 DC-CIK共同培养后增殖速度明显快于单纯的CIK细胞,培养第10天时单纯CIK的CD3+ CD8+、CD3+ CD56+ 双阳性率分别为(50.4±1.8)%、(20.1±5.2)%,共培养3 d DC-CIK的CD3+ CD8+、CD3+CD+56的阳性率分别为(67.2±5.2)%、(37.9±4.1)%,6 d DC-CIK的CD3+ CD8+、CD3+CD56+的阳性率分别为(75.2±3.1)%、(48.3±2.9)%,表达差异具有统计学意义(P<0.05).在1:5～1:40靶效比范围内DC-CIK对肾癌细胞的杀伤活性高于单纯CIK细胞,且随效靶比增强杀伤活性增强(P<0.05).结论 DC-CIK的增殖活性和细胞毒活性均高于单纯CIK细胞.
关键词： 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 肾癌细胞 -
肾癌组织中Wnt5a的表达及其临床意义
目的 探讨Wnt5a在肾癌组织中的表达与病理意义以及对肾癌细胞增殖及侵袭潜能的影响,为寻找肾癌有效的治疗途径及预后判定指标提供依据.方法 对43例肾癌组织标本和11例正常肾组织标本中的Wnt5amRNA和Wnt5a蛋白表达水平进行检测,分析肾癌组织Wnt5a mRNA表达与临床病理特征的关系,及Wnt5a蛋白表达与预后的关系.结果 Wnt5a mRNA和Wnt5a蛋白在肾癌组织中的阳性表达率均显著高于正常肾组织(P＜0.05).肾鳞癌的Wnt5a mRNA表达水平明显高于肾腺癌(P＜0.01);低分化组显著高于高分化组(P＜0.01).Wnt5a蛋白阳性的肾癌患者2年生存率明显低于阴性患者(P＜0.01).结论 Wnt5a表达水平在肾癌细胞中明显增高,且与肾癌的细胞分化程度、组织类型及预后密切相关,提示Wnt5a可能参与肾癌的发生发展过程.
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斯钙素蛋白-1和缺氧诱导因子-1α的相互作用对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响
目的 研究斯钙素蛋白-1(STC-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)相互作用后的调钙功能对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响.方法 构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,采用不同浓度STC-1蛋白分别干预荷基因肾癌细胞和单纯肾癌细胞,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR和ELISA法检测细胞内HIF-1α和STC-1的基因及蛋白表达情况,荧光探针检测细胞内Ca2+变化,荧光分光光度计检测线粒体膜电位(Δψm),紫外分光光度计检测线粒体通透性转换孔(mPTP).结果 HIF-1α基因转染、STC-1干预及基因转染后再STC-1干预3种方式均可提高Δψm,降低细胞内Ca2+和mPTP水平,促进细胞增殖(P均＜0.05),以上结果可随着STC-1浓度的增加而逐渐增强,但细胞增殖率的升高趋势却逐渐减缓.结论 HIF-1α可能通过促进STC-1表达,下调Ca2+水平,从而稳定线粒体膜电势来参与肾癌细胞的恶性增殖,但此作用亦因外源性STC-1对HIF-1α的抑制而逐渐减弱.
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钙粘蛋白E在肾癌细胞中的表达
E钙粘蛋白是上皮型钙依赖性细胞粘附分子,它调节细胞-细胞之间的相互关系,在正常的细胞生长、增殖中起重要的作用.近来研究表明,E钙粘蛋白在抑制肿瘤的浸润转移方面也有一定的作用.本实验采用免疫组化染色和计算机图像分析对肾癌细胞中的E钙粘蛋白表达与肾癌发生、浸润和转移的相关性作了研究.
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益气解毒方对ACHN肾癌干细胞增殖及凋亡影响的实验研究
肾细胞癌(RCC)是一种常见的泌尿系恶性肿瘤,且发病率呈上升趋势.肾癌细胞对化疗和放疗不敏感,预后不佳.肿瘤干细胞在肿瘤组织中具有无限自我更新的特性,并产生不同分化程度的肿瘤细胞[1].有研究表明肿瘤干细胞与肿瘤的发生、发展、转移和复发存在联系[2,3].
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聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miRNA 纳米微粒抑制人肾癌细胞生长的研究
目的：探讨聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miRNA 纳米复合微粒在体外对人肾癌细胞增殖的抑制作用。方法运用二次超声乳化和溶剂挥发法制备聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miRNA 纳米粒；通过 MTT 法观察纳米微粒对肾癌细胞 A498增殖的抑制作用；并运用流式细胞术检测纳米微粒作用后 A498细胞的凋亡情况。结果制备的聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miR-NA 纳米粒外观呈圆型,平均粒径为280 nm,平均载药量为(0.515±0.023)%,平均包封率为50.2%。通过 MTT 实验证明纳米微粒可以较好的抑制人肾癌细胞(A498)的增殖,随着聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miRNA 纳米微球浓度的增加,药物作用时间越长,细胞增殖受到抑制的效果越明显。流式细胞术检测可见凋亡峰出现,细胞周期阻滞在 S + G2/ M 期。结论聚乳酸羟基乙酸 CXCR4-miRNA 纳米粒具有抑制肾癌细胞 A498增殖的作用,其效果与药物浓度及作用时间长短有关。
关键词： 肾癌细胞 趋化因子受体4-微小RNA 聚乳酸羟基乙酸 纳米粒 细胞凋亡 -
选择性环氧化酶抑制剂对肾癌细胞BCL-2表达的影响
目的:探讨环氧化酶抑制剂NS398对肾癌786-0细胞生长及bcl-2基因和蛋白表达的影响.方法:用不同浓度的NS398(0、50、100、150μmol/L)处理肾癌786-0细胞不同时间,采用MTT比色法分析细胞生长抑制率.用不同浓度NS398处理肾癌786-0细胞24h,RT-PCR检测bcl-2 mRNA表达的变化,Western blot检测bcl-2蛋白表达的变化.结果:随着NS398浓度及处理时间的增加,肾癌786-0细胞生长抑制率升高;随着NS398剂量的增加,bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平逐渐减少.结论:NS398可呈剂量和时间依赖性抑制肾癌786-0细胞的生长,呈浓度依赖性减少bcl-2 mRNA及蛋白的表达.NS398可能通过抑制bcl-2的表达,抑制肾癌786-0细胞的生长.
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人类斯钙素蛋白1对肾癌细胞中STC-1、HIF-1α及Ca2+影响的研究
目的:探讨STC-1、HIF-1α是否通过调节细胞内Ca2+含量参与到肾癌细胞的发生机制.方法:使用不同剂量外源性人类STC-1蛋白干预肾癌细胞(GRC-1),并设对照组;应用MTT法检测细胞增殖,RT-PCR检测细胞内HIF-1α、STC-1的表达,荧光探针检测细胞内Ca2+水平.结果:与对照组相比,外源性STC-1蛋白可刺激GRC-1细胞的增殖,但对增殖率的促进作用却随着外源性STC-1蛋白给药浓度的升高而逐渐降低(P＜0.05);外源性STC-1蛋白可降低GRC-1细胞内HIF-1α、STC-1的表达和Ca2+水平,此作用与STC-1浓度呈正相关(P＜0.05).结论:STC-1、HIF-1α可能通过相互之间的抑制作用和调节细胞内Ca2+水平参与到肾癌的发生机制中.
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细胞因子对肾癌细胞株786-0 Fas表达及其凋亡的调控
为研究细胞因子对肾癌细胞株786-0 Fas表达以及FasAb介导凋亡的影响,单独或联合应用IFN-γ,IFN-α,IL-2,TNF-α刺激786-0细胞株,并以Fas单克隆抗体(FasAb)诱导其凋亡.结果发现,IFN-α、IFN-γ均能显著上调786-0细胞的Fas表达(P＜0.01,P＜0.01)并促进FasAb诱导的凋亡(P＜0.01,P＜0.01);IL-2、TNF-α对786-0的Fas表达及FasAb诱导的凋亡均无影响;IL-2不能增强IFN-α、IFN-γ诱导的Fas表达,亦不能促进凋亡.TNF-α能增强IFN-α诱导的Fas表达并促进凋亡,但不影响IFN-γ诱导的Fas表达及其凋亡.结果表明IFN-γ、IFN-α可增强肾癌细胞株786-0的Fas表达,并促进FasAb介导的凋亡.但其对FasAb介导凋亡的敏感性并不完全取决于Fas表达水平.
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OPN反义真核表达载体的构建及其对肾癌细胞增殖侵袭的影响
背景与目的:骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的过表达和多种恶性肿痛的发展和转移密切相关,然而,在肾癌中OPN所扮演的角色尚未被清楚地阐明.为验证其作为肾痛基因治疗靶点的可行性,本研究通过构建获得OPN反义基因真核表达载体转染人肾癌ACHN细胞,观察其对人肾癌细胞增殖及侵袭的影响.方法:提取ACHN细胞总RNA,RT-PCR法扩增获得OPN目的片段,将其反向克隆到pcDNA3.1(-)质粒中构建OPN反义真核表达载体,并转染人肾癌ACHN细胞.采用半定量RT-PCR法和Western印迹法检测OPN mRNA及蛋白的表达情况;MTT法检测对细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡率的影响;软琼脂克隆形成实验和Transwell法分别检测细胞的增殖和侵袭能力.结果:RT-PCR检测OPN mRNA表达量结果显示,转染重组质粒细胞中的OPN mRNA的表达量为0.29±0.04,与转染空质粒细胞的0.86±0.05和未转染细胞的0.88±0.04相比,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法检测结果显示ACHN/OPN细胞的生长速度受到抑制;流式细胞检测结果显示ACHN/OPN细胞生长停滞于S期且凋亡率明显升高;软琼脂克隆形成实验及Transwell实验结果显示细胞的增殖和侵袋能力下降(P<0.05).结论:OPN在肾癌ACHN细胞的增殖和侵袭过程中发挥了重要作用,反义OPN基因能抑制肾癌细胞的恶性表型.
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稳定沉默CXCR4表达的肾癌A498细胞株的构建
目的 应用RNA干扰技术降低肾癌A498细胞株的CXCR4基因表达水平,并建立稳定转染细胞株.方法 针对CXCR4基因设计合成siRNA,转染肾癌A498细胞株,采用RT-PCR法检测CXCR4基因表达变化,根据有效干扰片段结果合成重组shRNA质粒,稳定转染至A498细胞系并进行G418抗性筛选细胞株.采用RT-PCR和Westen印迹法检测CXCR4 mRNA及蛋白表达水平,应用流式细胞技术检测CXCR4 shRNA诱导A498细胞凋亡的效应,Transwell试验检测细胞侵袭能力的改变.结果 将CXCR4重组shRNA质粒成功转染A498细胞后,肾癌细胞内可见绿色荧光,通过G418筛选,获得了CXCR4基因沉默的A498细胞系,RT-PCR及Western印迹检测证实该细胞系的CXCR4水平明显低于对照组的表达水平(P＜0.05).CXCR4 shRNA组细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均显著高于对照组(P＜0.05),Transwell体外侵袭实验显示CXCR4 shRNA能明显抑制A498细胞的体外侵袭力(P＜0.05).结论 成功构建稳定沉默CXCR4表达的肾癌A498细胞株,转染后的细胞凋亡率升高,体外侵袭能力降低,为后续研究奠定了基础.
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siRNA沉默表皮生长因子受体蛋白表达对肾癌细胞生物学行为的影响
目的 观察在siRNA沉默EGFR基因处理后肾癌细胞的生物学行为情况.方法 将肾癌细胞株ACHN分为3组,对照组不进行任何干预,阴性对照转染组使用加入非特异性转染试剂及siRNA干预,观察组使用加入特性性转染试剂及siRNA干预,分别检测3组细胞的EGFR表达量、增殖活性、生长曲线、迁移及侵袭活性.结果 经siRNA处理72 h后,观察组细胞EGFR表达水平明显低于阴性对照转染组和对照组;观察组细胞生长活跃能力显著低于对照组和阴性对照转染组,且在处理48 h后RNAi组细胞数显著低于对照组和阴性对照转染组(P＜0.05);较空白组和阴性对照转染组,观察组细胞生长受到显著抑制(P ＜0.05);12h时及24h时观察组细胞划痕距离显著高于对照组和阴性对照转染组(P ＜0.05);12h时对照组、阴性对照转染组穿膜细胞数差异无统计学意义(P＞0.05),观察组穿膜细胞数显著低于对照组和阴性对照转染组(P＜0.05).结论 采用siRNA沉默EGFR蛋白后,可有效改善肾癌细胞的增殖、生长、迁移及侵袭等生物学活性.
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HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达
目的 构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因(HABP1)干扰载体及表达载体,建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0.方法 合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列,与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1 (-)-HABP1-Flag,将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EFl-Puro载体上,组成重组表达载体pCDH-HABP1;酶切鉴定及DNA测序后,转染293T细胞,收集慢病毒颗粒感染786-0细胞,嘌呤霉素筛选稳定细胞系,western blot验证HABP1蛋白的表达水平.结果 构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1;与随机序列对照组比较,pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P＜0.05),pCDH-HABP1转染786-0细胞后,HABP1的表达水平(3.20 ±0.40)明显升高(t=10.34,P＜0.05).结论 成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体,且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1.
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抗P-糖蛋白单克隆抗体JSB-1和三氟拉嗪协同逆转人肾癌MDR的实验研究
目的为证明钙调蛋白的抑制剂三氟拉嗪和抗P-糖蛋白单克隆抗体(JSB-1)能协同逆转人肾癌的天然多药耐药(MDR)性.方法我们对经过病理证实36例肾透明细跑癌采用RT-PCR方法检测mdr-1表达水平,高表达的为耐药组,无或低表达的为敏感组,给予阿霉素与三氟拉嗪和JSB-1处理,并采用MTT法评价细胞毒作用,流式细胞仪检测细胞内ADR浓度聚集.结果三氟拉嗪(TFP)和JSB-1对肿瘤细胞无明显的细胞毒作用;但具有逆转肾癌对ADR的耐药,并且在耐药(P-gp过表达MDR)的肾癌细胞中,效果更明显(P＜0.01).结论三氟拉嗪和JSB-1可作为肾癌化疗的辅助用药,联合应用效果更佳,它的低毒副作用使其具有应用价值和可行性.
