首页 > 文献资料
-
涎腺黏液表皮样癌组织SEMA3A与SEMA3B及p53表达临床意义
目的 信号素蛋白SEMA3A和SEMA3B是多种肿瘤的预后决定因素,但在黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)中研究少见.本研究旨在探讨MEC组织SEMA3A、SEMA3B和p53的表达及与临床病理学特征的关系及其预后意义.方法 收集1992-08-19-2016-11-07石河子大学医学院第一附属医院(52例)、新疆维吾尔自治区人民医院(19例)MEC石蜡组织标本71例和石河子大学医学院第一附属医院MEC癌旁正常涎腺组织(normal salivary gland,NSG)石蜡标本35例;采用免疫组化法检测SEMA3A、SEMA3B和p53蛋白表达,x2检验分析其与临床病理学特征之间的相关性;生存分析采用Kaplan-Meier法,Cox比例风险回归模型分析影响患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)的因素.结果 MEC组织SEMA3A、SEMA3B和p53阳性表达率分别为33.80％ (24/71)、28.17％(20/71)和57.75％ (41/71),与NSG组织91.43％(32/35)、85.71％ (30/35)和5.71％(2/35)比较,差异均有统计学意义,均P＜0.01.MEC组织SEMA3A表达与年龄(x2=4.589,P=0.032)、淋巴结转移(x2=4.095,P=0.043)和临床分期(x2 =4.377,P=0.036)有关;SEMA3B表达与性别(x2=7.848,P=0.005)、年龄(x2=4.228,P=0.040)、肿瘤大小(x2 =11.146,P=0.001)、淋巴结转移(x2=6.376,P=0.012)、T分期(x2=12.138,P=0.007)、N分期(x2=6.464,P=0.039)和临床分期(x2=7.360,P=0.007)有关;p53表达与肿瘤大小(x2=7.832,P=0.005)和临床分期(x2=8.910,P=0.003)有关.相关性分析显示,MEC组织SEMA3A与p53表达呈负相关(P＜0.01,r=-0.474),SEMA3B与p53表达无相关性,P＞0.05.Kaplan-Meier单因素生存分析显示,SEMA3A、SEMA3B、p53表达(x2=6.553,P=0.010;x2 =3.960,P=0.047;x2=9.448,P=0.002)、性别(x2=6.502,P=0.011)、淋巴转移(x2=8.928,P=0.003)、肿瘤大小(x2 =8.524,P=0.004)、T分期(x2=10.8,P=0.013)、N分期(x2=11.771,P=0.003)和临床分期(x2=10.667,P=0.001)是影响患者PFS的相关因素;Cox多因素回归分析显示,性别(HR=0.256,95％ CI为0.08～0.813,P=0.021)和T分期(HR=2.051,95％CI为1.006～4.182,P=0.048)可作为预测MEC患者PFS的独立因素,SEMA3A、SE-MA3B和p53表达与患者PFS无独立相关性,P＞0.05.结论 SEMA3A、SEMA3B和p53在MEC发生发展中起重要作用,其可作为辅助判断MEC无进展生存期的参考指标,性别和T分期为判断MEC无进展生存期的独立因素.
-
转染外源SEMA3B对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响
目的:构建pcDNA-SEMA3B真核表达载体,研究其对非小细胞肺癌细胞株NCI-H1299细胞生物学行为的影响.方法:利用限制性内切酶酶切和基因重组技术构建重组pcDNA-SEMA3B质粒;导入非小细胞肺癌NCI-H1299细胞、筛选稳定细胞株,Western Blot检测蛋白表达,克隆形成描绘细胞增殖的影响.结果:筛选的稳定表达细胞内SEMA3B蛋白的表达水平增高;SEMA3B高表达的NCI-H1299细胞克隆形成显著减少(p＜0.01).结论:转染外源SEMA3B在NCI-H1299细胞中表达并抑制非小细胞肺癌细胞生长,为深入研究其功能提供了条件.
-
SEMA3B基因在不同病理类型肺癌细胞株中的表达及意义
目的:探讨SEMA3B基因在不同病理类型来源肺癌细胞株中的表达及意义.方法:采用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real Time RT- PCR)和琼脂糖凝胶电泳方法,检测来源于不同病理类型肺癌细胞株中SEMA3B基因的表达水平.结果:在不同病理类型的细胞株中SEMA3B - mRNA均较正常肺癌组织显著低表达；在大细胞肺癌细胞株H 1 299、腺癌细胞株PC7、鳞癌细胞株LK2或LC/Sq1细胞中SEMA3B均表达缺失.结论:SEMA3B低表达或表达缺失可能是肺癌发生的机制之一,深入分析SEMA3B在肺癌细胞中与其它信号通路间的相互作用,将有利于我们阐明肺癌的发生.
-
SEMA3B在胃癌中的表达和临床意义
目的 探讨SEMA3B在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法应用Western Blot及RT-PCR方法检测60例胃癌患者癌组织和正常胃粘膜组织的SEMA3B蛋白及mRNA表达量变化.结果胃癌组织中SEMA3B mRNA 表达量明显高于胃正常黏膜(0.18±0.04 vs 0.36±0.08,P=0.009＜0.05).结论 SEMA3B在抑制胃癌的发生发展过程中具有重要作用.
-
单细胞克隆形态结合SEMA3B检测分离胃癌中致瘤成分的研究
目的：探讨单克隆形态结合SEMA3 B检测分离胃癌中的致瘤成分。方法采用克隆的形态并分类，计算克隆形成率；采用Western blot 法检测不同克隆细胞中SEMA3B的表达，并观察各组克隆细胞的体内成瘤能力。结果 SGC－7901细胞可形成3种克隆形态，分为Holoclone 型、Paraclone型和Meroclone型，总克隆形成率为（10．20±1．07）％；Western blot法检测发现SEMA3B在Holoclone型中表达强，并且Holoclone型克隆细胞具有很强的体内成瘤能力。结论本研究为探寻SEMA3B在胃癌中成瘤和增殖的作用提供了理论依据。
-
胃癌中SEMA3B基因表达与其启动子区甲基化的关系
SEMA3B 为一候选肿瘤抑制基因，在多种恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。目的：初步探讨DNA 甲基化调控机制对胃癌中SEMA3B 基因表达的影响。方法：以real-time PCR 检测6株人胃癌细胞株（SGC7901、AGS、MGC803、BGC823、MKN45、HGC27）、正常人胃黏膜上皮细胞株GES-1和41例胃癌组织及其相应癌旁非癌组织中的SEMA3B mRNA 表达。以甲基化特异性PCR 检测SEMA3B 基因启动子区甲基化状态，并分析其与胃癌临床病理特征的关系。以去甲基化药物5-Aza-dC（10μmol/ L）处理上述细胞株72 h，观察SEMA3B 基因甲基化状态和mRNA 表达变化。结果：6株胃癌细胞和胃癌组织中的SEMA3B mRNA 表达分别显著低于GES-1细胞（ P <0.001）和相应癌旁非癌组织（P <0.01）。6株胃癌细胞SEMA3B 基因启动子区均发生甲基化，GES-1细胞则未发生甲基化。胃癌组织SEMA3B 基因甲基化率显著高于相应癌旁非癌组织（67.6%对32.4%，P <0.01），甲基化状态与胃癌分化程度和淋巴结转移相关（P <0.05）。经5-Aza-dC 处理后，5株胃癌细胞SEMA3B 基因甲基化程度下降，伴mRNA 表达上调。结论：SEMA3B 基因启动子区高甲基化可能是其在胃癌中表达下调的原因之一，并参与了胃癌的发生、发展。SEMA3B 有望成为胃癌诊断和预后评估的分子标记物以及表观遗传学治疗靶点。
-
肺癌SEMA3B基因的表达及其临床意义
目的探讨新型候选抑癌基因SEMA3B在肺癌组织中的表达及其与肺癌发生、发展的关系.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测52例肺癌组织及远癌正常肺组织SEMA3B基因产物的表达水平.结果肺癌组织中SEMA3B的表达率为51.9%(27/52)明显低于远癌正常肺组织100.0%(52/52),P＜0.01.淋巴结转移组的表达缺失率64.3%(18/24)显著高于未转移组29.2%(7/24),TNMⅢ期表达缺失率72.7%(16/22)高于Ⅰ、Ⅱ期25.0%(4/16)、35.7%(5/14),P＜0.05;表达异常与肺癌癌瘤类型、大小、部位、患者的年龄、性别及吸烟与否均无明显关系(P＞0.05).结论 SEMA3B表达异常可能在中国人群肺癌发生、发展及预后中起重要作用.
关键词： SEMA3B 肺癌 逆转录-聚合酶链反应 -
SEMA3B、SEMA3F基因在鼻咽癌细胞中突变和表达的研究
背景与目的:鼻咽癌 ( nasopharyngeal carcinoma,NPC) 致病的分子机理至今仍不清楚 , 但高频的杂合性缺失和功能学证据均表明染色体 3p21.3区段中存在着与鼻咽癌相关的抑癌基因 . SEMA3B和 SEMA3F基因是定位于 3p21.3的两个 semaphorin家族成员 , 近被鉴定为抑癌基因 . 本研究通过对 SEMA3B和 SEMA3F基因在鼻咽癌中的突变和表达检测 , 探讨 SEMA3B和 SEMA3F基因与鼻咽癌发病的关系 . 方法:采用 PCR-直接测序方法 , 在 21例散发性 NPC组织和 2例 NPC细胞株 ( CNE2,SUNE1) 中对 SEMA3B和 SEMA3F基因的编码区、拼接位点和部分调控区进行突变检测 ; 利用半定量 RT-PCR方法 , 检测 SEMA3B和 SEMA3F基因在鼻咽癌中的表达。结果：在鼻咽癌中未发现SEMA3B或SEMA3F基因具有体细胞突变，但在SEMA3B基因中发现两个导致氨基酸改变的单核苷酸多态性Thr415Ile和Ile242Met。在Thr415Ile多态位点中，可导致SEMA3B基因功能缺陷的Ile等位基因频率在鼻咽癌患者中占有较高比例（64％，27/42）。SEMA3BmRNA在6例鼻咽非癌组织中正常表达，但在76％（16/21）的鼻咽癌组织中表达下调或缺失；SEMA3FmRNA的表达水平在鼻咽癌和非癌组织中无明显差异。结论：SEMA3BmRNA在鼻咽癌中发生高频表达缺失说明该基因失活与鼻咽癌密切相关，SEMA3B基因可能是定位于染色体3p21.3区域的与鼻咽癌发生相关的抑癌基因。
-
SEMA3B基因真核表达载体的构建及对肺癌细胞恶性生物学行为的影响
目的 构建抑癌基因SEMA3B真核表达载体pcDNA3.1-SEMA3B,并检测其对肺癌A549细胞恶性生物学行为的影响.方法 应用PCR扩增SEMA3B全长cDNA片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-SEMA3B.克隆PCR、双酶切法、基因测序验证过表达载体构建成功.将pcDNA3.1-SEMA3B真核表达载体和空载体pcDNA3.1分别转染入A549细胞中,应用qRT-PCR、Western blot检测SEMA3B mRNA、蛋白表达水平的变化;MTS法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期;克隆形成实验检测细胞集落形成能力.结果 SEMA3B基因扩增片段与预测片段一致,克隆成功,且测序鉴定证实真核表达载体构建成功.转染pcDNA3.1-SEMA3B真核表达载体可上调SEMA3BmRNA、蛋白表达水平,且可抑制A549细胞的增殖,诱导凋细胞亡,细胞被阻滞在G1期,抑制细胞集落形成能力.结论 成功构建了SEMA3B基因真核表达载体,抑癌基因SEMA3B在肺癌恶性生物学进程中可能发挥重要作用.
-
Semaphorin3B在肿瘤中的研究进展
SEMA3B是近年发现的一种抑癌基因.早期研究中人类SEMA3B蛋白多的是其在神经系统中表达,在神经系统的发育及轴突引导作用中特征性变化而被发现.近期研究认为SEMA3B涉及多种生物学途径,与NRP1和NRP2受体结合使VEGF作用下调,从而抑制肿瘤的血管形成;还可通过介导p53或上调IGFBP-6而抑制抗细胞凋亡通路.目前,SEMA3B基因在肿瘤发生发展中的作用机制研究尚不明确,需要进一步深入研究.
-
SEMA3B对人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞Akt磷酸化调控作用的实验研究
目的:研究SEMA3B作为潜在的肺癌治疗药物诱导细胞凋亡作用的机制.方法:将pcDNA3.1/pcDNA3.1-SEMA3B质粒转染至Cos7细胞,400μg/ml G418筛选后建立稳定表达SEMA3B的Cos7细胞系.利用含有SEMA3B-Cos7细胞的培养上清液、特异性siRNA、实时定量PCR和蛋白免疫印迹方法,检测SEMA3B蛋白对Akt磷酸化及下游基因表达的影响及分子机制.结果:在细胞培养上清及细胞裂解液中稳定表达SEMA3B的Cos7细胞模型建立;利用含有SEMA3B蛋白的Cos7培养上清液及对照组培养上清液处理NCI-H1299细胞24小时后,含有SEMA3B蛋白组可显著降低H1299细胞内pAkt-ser473的蛋白表达及下游基因MDM2 mRNA表达,增加Caspase3 mRNA表达;特异性siRNA阻断IGFBP6表达,可部分消除SEMA3B抑制Akt磷酸化的作用,并影响其对MDM2和Caspase3的作用.结论:SEMA3B是通过IGFBP6介导其抑制Akt磷酸化作用及其下游基因表达,而发挥诱导非小细胞肺癌细胞凋亡的作用,进一步提示在非小细胞肺癌中SEMA3B的抑癌作用及其潜在的治疗药物价值.
