PI3K/AKT信号通路在口腔疾病中的研究进展

PI3K/AKT信号通路是体内能够调节细胞生命活动的信号转导通路之一,主要功能有诱导干细胞的分化转移、促进细胞增殖、抑制凋亡,调控组织炎症、肿瘤生长侵袭等过程.通过调节下游信号通路上蛋白因子的表达来发挥作用,与多种疾病的发生及进展过程相关.本文就PI3K/AKT信号通路的功能特点及其在口腔疾病中的作用作一综述.

半夏泻心汤对H2O2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨半夏泻心汤对H2O2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制.方法 大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,300 μM H2O2干预RIN-m5F细胞,测定半夏泻心汤佳浓度,后随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、Western blot检测各组蛋白表达.结果 半夏泻心汤含药血清佳浓度为10％(P＜0.05);与模型组比较,半夏泻心汤含药血清可显著降低RIN-m5F细胞凋亡率(P＜0.05),下调Caspase-3、Bax的表达(P＜0.05),上调Bcl-2、PAKT的表达(P＜0.05).结论 半夏泻心汤含药血清可抑制RIN-m5F细胞凋亡,其机制可能与PI3K/AKT通路的活化有关.

丹蒌片通过PI3K/Akt信号通路抗动脉粥样硬化机制研究＊

目的：观察丹蒌片对动脉粥样硬化兔血脂、炎症因子及PI3K/AKT信号通路的影响，并探讨丹蒌片抗动脉粥样硬化的机制。方法：雄性日本大耳白兔24只，随机分为正常对照组、模型组、丹蒌片组，每组8只。正常对照组饲喂普通饲料，其余各组高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型；除高脂饲料喂养外，丹蒌片组（0.5 g·kg-1·d-1）胃饲相应药物。连续给药9周后处死，测各组血脂、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）的含量；HE染色观察主动脉病理学改变；Western blot检测主动脉中PI3K和p-AKT的蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较，模型组中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL）及IL-6、TNF-α的浓度均显著升高（P<0.01），主动脉组织中PI3K、p-AKT的蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组相比，丹蒌片组血脂及IL-6、TNF-α水平明显降低（P<0.05或P<0.01），PI3K、p-AKT的蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论：丹蒌片具有降低兔血脂、炎症因子，抗动脉粥样硬化的作用，其作用机制可能与激活PI3K/AKT信号通路相关。

紫草素通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡

目的 通过研究紫草素诱导Ishikawa细胞凋亡的过程中对PI3K/AKT信号通路的影响,探讨紫草素通过PI3K/Akt信号通路诱导子宫内膜癌细胞凋亡的机制.方法 Ishikawa细胞体外培养,经0.3 μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、0.7μg·mL-1紫草素处理细胞后,倒置显微镜观察不同时间Ishikawa细胞生长变化;RT-PCR及Western-blot检测相关蛋白的表达.结果 随着紫草素作用浓度的增加及干预时间的延长,Ishikawa细胞数量逐渐减少;紫草素作用于子宫内膜癌Ishikawa细胞48 h后,pAkt、Bcl-2的蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),而Akt的蛋白表达含量与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 紫草素能够抑制Ishikawa细胞的生长,且呈浓度依赖性;紫草素诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡是通过抑制PI3K/Akt信号通路中Akt的磷酸化,从而对Akt下游靶蛋白Bax上调和Bcl-2下调,发挥了诱导细胞凋亡的作用.

柴桂温胆定志汤对脑卒中患者抑郁情绪及认知功能的影响

目的:观察柴桂温胆定志汤治疗脑卒中后老年患者认知障碍和抑郁情绪的疗效,并探讨其作用机制.方法:选取2015年3月至2017年3月衡水市人民医院收治的诊断为"中风"的老年患者150例,随机分成对照组和观察组,每组75例.2组均予常规治疗,观察组在此基础上加服柴桂温胆定志汤,评估治疗前后2组的术后恢复质量评估量表(PQRS)评分、简易智力状态量表(MMSE)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分,以及不同时间点脑脊液中PI3K、AKT、pAKT、Bcl、Bax的水平.结果:2组治疗前PQRS评分及MMSE评分,差异无统计学意义(P>0.05),但治疗后3 d和1周的上述评分均比治疗前低,但观察组降低更显著,差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,2组的HAMD评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,2组的HAMD评分均降低,但均为观察组的变化更显著,差异有统计学意义(P<0.05).与治疗前比较,2组治疗后任意时间节点的PI3K、pAKT、bcl水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05),而bax水平则升高,差异有统计学意义(P<0.05),但是,各个时间中PI3K/AKT信号通路标志性蛋白浓度的变化趋势,对照组比观察组更明显,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后有效率观察组和对照组分别是90.15％,79.89％,差异有统计学意义(P<0.05).结论:柴桂温胆定志汤对老年脑卒中患者认知功能的恢复以及抑郁情绪的舒缓作用显著,其可能与介导PI3K/AKT信号通路的激活有关.

姜黄素对兔颈动脉斑块稳定性及EPCs活力的影响

目的:观察姜黄素对颈动脉斑块稳定性及内祖皮细胞(EPCs)的影响.方法:将30只新西兰兔随机分为空白对照组、模型组及姜黄素组,各10只,其中空白对照组予普通饲料喂养,模型组予喂养高脂饲料,姜黄素组予喂养高脂饲料+100 mg/d姜黄素.连续喂养12周后HE染色法观察3组西兰兔主动脉内膜斑块厚度、外周血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平以及利用MTT法测定人纤维EPCs细胞迁徙及增殖活性.结果:1)血脂水平:与空白组比较,模型组及姜黄素组TC、TG及LDL-C均升高(P＜0.05),HDL-C降低(P＜0.05),其中姜黄素干预后上述指标有明显改善(P＜0.05).2)形态学变化:空白对照组颈动脉壁厚薄均匀,结构均匀,模型组及姜黄素均出现动脉管腔狭窄,动脉内膜增厚,其中姜黄素组较模型组改善.3)EPCs增殖情况:与空白组比较,模型组及姜黄素OD值均降低(P＜0.05),与模型组比较,姜黄素OD有所上调(P＜0.05).4) EPCs迁徙能力:空白对照组各时间点划痕愈合率均显著高于其余2组(P＜0.05),其中姜黄素组各时间点划痕愈合率均高于模型组(P＜0.05).结论:姜黄素由明显抗动脉粥样硬化作用,其作用机制可能与促进EPCs增殖及迁徙有关.

健脾养正消癥方通过激活PI3K/AKT信号通路减轻顺铂所致的肾毒性作用

目的:探讨健脾养正消癥方对顺铂肾毒性的防护作用及可能机制.方法:40只BALB/C小鼠,随机分为荷瘤组,顺铂组,健脾养正消癥方组,健脾养正消癥方和顺铂(联合用药)组,每组10只,按组别ig给药5d后,将BALB/C小鼠右腋下注射H22腹水瘤,形成荷瘤小鼠模型并一次性注射顺铂20 mg· kg-造成肾损害.造模后10 d,观察小鼠肾脏指数,血肌酐(SCr),血尿素氮(BUN),肾组织病理变化;并通过TUNEL,Western blot法检测健脾养正消癥方对顺铂损伤小鼠肾组织中凋亡及PI3K/AKT信号通路相关分子蛋白表达的影响.结果:与荷瘤组比较,顺铂组小鼠肾脏系数,SCr,BUN显著升高(P＜0.05),肾脏病理损伤明显,肾小管凋亡细胞增多,肾组织p-PI3K,p-AKT表达下调,Caspase-3表达上调(P＜0.05);与顺铂组比较,联合用药组肾脏指数降低,SCr,BUN下降(P＜0.05),肾脏病理损害减轻,肾小管凋亡细胞减少,肾组织p-PI3K,p-AKT表达上调,Caspase-3表达下调(P＜0.05).结论:健脾养正消癥方能明显减轻顺铂引起的肾毒性,其作用机制与激活PI3 K/AKT信号通路,减少细胞凋亡有关.

黄芩苷对溃疡性结肠炎模型大鼠炎性反应、凋亡的影响及与PI3K/AKT通路的关系

目的:观察黄芩苷对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠免疫炎性反应的影响,以及与PI3K/AKT通路的关系.方法:采用TNBS法制备大鼠UC模型,随机分为正常组,模型组,黄芩苷高、中、低剂量组,阳性对照组(柳氮磺胺吡啶,SASP组).给药10d后,留取结肠组织标本,采用ELISA方法观察UC模型大鼠结肠组织白介素-6(IL-6)的表达水平,采用Western blot法观察结肠组织环氧合酶-Ⅱ(COX-2)、凋亡蛋白人凋亡相关因子配体(FasL)、天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)以及β连环蛋白(β-catenin)的表达水平、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白和丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白表达水平,结果:与模型组比较,黄芩苷低、中、高剂量组干预后能剂量依赖性地抑制IL-6的分泌,黄芩苷中、高剂量组能显著降低IL-6表达水平(P＜0.05);与模型组比较,黄芩苷各剂量组和SASP组的PI3K和AKT蛋白的磷酸化水平降低,黄芩苷高剂量组优于模型组(P＜0.05);黄芩苷能降低结肠组织COX-2、β-catenin、Caspase-9、FasL的表达水平(P＜0.05).结论:黄芩苷能够抑制肠道免疫反应,减少肠上皮细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关.

片仔癀对人骨肉瘤MG63细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的作用研究

目的:研究不同浓度片仔癀对人骨肉瘤MG63细胞增殖的影响以及PI3K/Akt信号通路的作用机制.方法:①不同浓度片仔癀作用于骨肉瘤MG63细胞,用MTT法检测其对MG63细胞增殖的抑制作用.②流式细胞仪检测其作用于MG63细胞后细胞的周期变化.③Western Blot法检测MG63细胞增殖过程中PI3K/Akt信号通路的关键蛋白PI3K、Akt、P-Akt的含量.结果:片仔癀能够抑制MG63细胞的增殖,呈剂量依赖性.片仔癀能使细胞在G2期的阻滞增加,降低PI3K/Akt信号通路中关键蛋白PI3K、Akt、P-Akt的表达,有剂量依赖性.结论:片仔癀可以通过降低PIK/Akt信号通路中关键蛋白PI3K、Akt、P-Akt的表达,有效抑制骨肉瘤MG63细胞的增殖.

针刺治疗对卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨针刺与药物治疗对卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响.方法:50只SPF级雌性SD大鼠随机取10只为正常组,其余40只连续5 d腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg,建立卵巢早衰动物模型.将造模成功的35只大鼠随机分为模型组(9只)、药物组(9只)、针刺Ⅰ组(9只)、针刺Ⅱ组(8只).正常组、模型组不干预;药物组采用乙烯雌酚灌胃治疗,每天1次;针刺Ⅰ组和针刺Ⅱ组分别取不同腧穴进行针刺治疗,每天2次,均治疗4周.治疗结束后,采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assav,ELISA)试剂盒检测各组血清雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)水平,卵巢组织进行病理苏木精-伊红(HE)染色以及RNA和蛋白提取,分别检测雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptor beta,ERβ)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase/serine/threonine kinase,PI3K)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,PKB,Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR) mRNA的表达量.结果:大剂量短期内给予环磷酰胺可以建立卵巢早衰动物模型,成功率为87.5％.与正常组比较,模型组大鼠阴道细胞涂片呈雌激素缺乏征象,早期卵泡减少,卵泡结构破坏,成熟卵泡数目减少,血清E2水平明显降低(P＜0),05),P、FSH和LH水平升高(均P＜0.05),与雌激素相关的ERβ、PI3K、Akt和mTO)R mRNA表达量均降低(均P＜0.05);与模型组相比,药物组和针刺组成熟卵泡有所增加,血清E2水平明显升高(均P＜0.05),FSH含量下降明显(均P＜0.05),相关信号通路的PI3K、Akt和mTOR mRNA表达量呈升高趋势(均P＜0.05);针刺组与药物组各指标组间比较差异无统计学意义(均P＞0.05).结论:针刺治疗卵巢早衰具有一定的优势,并且取得与雌激素相当的治疗效果,作用机制可能与上调PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因和蛋白表达水平有关.

通心络对高脂血症兔血管内皮功能的保护作用及机制研究

目的 探讨通心络对高脂血症兔血管内皮功能的影响.方法 将48只新西兰兔随机分为对照组、模型组、通心络低、中、高剂量组和阿托伐他汀组,每组8只.对照组给予普通饲料,模型组及药物干预组给予高脂饮食建立高脂血症模型.造模同时分别给予各药物干预组通心络胶囊0.15、0.3、0.6 g/kg,阿托伐他汀2.5 mg/kg灌胃,每日1次,连续4周.生化法检测各组血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)水平变化,ELISA法和硝酸还原酶法检测血清内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平,HE染色观察动脉形态学变化,离体血管环检测主动脉内皮舒张功能,采用蛋白免疫印记(Western blot)检测动脉PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和ET-1水平升高(P＜0.01),NO水平及主动脉舒张率下降(P＜0.01),颈动脉组织PI3K、p-AKT蛋白表达量下调(P＜0.01);与模型组比较,通心络高剂量组和阿托伐他汀组血清TC、TG、LDL-C水平降低,通心络中剂量组血清TG、LDL-C水平降低(P＜0.05,P＜0.01);通心络高、中剂量组和阿托伐他汀组血清ET-1水平下降,NO水平及主动脉舒张率升高(P ＜0.05,P＜0.01),颈动脉组织PI3K、p-AKT蛋白表达量上调(P ＜0.05,P＜0.01).结论 通心络能够改善高脂血症兔的血管内皮依赖性舒张功能,具体机制与其激活PI3K/AKT信号转导通路相关.

中医药干预PI3K/AKT信号通路抗肝纤维的研究进展

肝纤维化是多种致病因素导致肝脏的反复慢性肝损伤,是多种慢性肝病共同的病理变化.肝星状细胞(HSC)的活化而导致细胞外基质(ECM)的沉积是肝纤维化的发病基础.磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶(PI3K/AKT)信号转导通路在调控HSC的活化、增殖及凋亡等方面发挥着重要作用.近年来"靶向"中药逐渐成为研究的热点,本文以中医药干预PI3K/AKT信号通路抗肝纤维化为综述,旨在指导肝纤维化治疗的用药.

Objective To investigate the role and molecular mechanism of membrane-associated guanylate kinase inverted 3 (MAGI3) in glioma cell proliferation.
Methods The expression levels of MAGI3 and PTEN were assessed in glioma samples by Western blotting. MAGI3 was stably transfected into C6 glioma cells to obtain C6-MAGI3 cells. Then, the proliferation, the expression levels of MAGI3 and PTEN, and Akt phosphorylation were evaluated in C6 and C6-MAGI3 cells. Xenograft tumor models were established by subcutaneous injection of C6 and C6-MAGI3 cells into nude mice, and the growth rates of xenografts in the mice were compared. The potential role of MAGI3 expression in PI3K/Akt signaling activation was further investigated by examining the correlation between MAGI3 expression and the expression of PI3K/Akt signaling downstream target genes in a glioma dataset using gene set enrichment analysis (GSEA).
Results Expression levels of MAGI3 and PTEN were significantly downregulated in gliomas. Overexpression of MAGI3 in the glioma C6 cell line upregulated PTEN protein expression, inhibited the phosphorylation of Akt, and suppressed cell proliferation. MAGI3 overexpression also inhibited the growth of C6 glioma tumor xenografts in nude mice. Analysis based on the GEO database confirmed the negative correlation between activation of PI3K/Akt pathway and MAGI3 mRNA levels in human glioma samples.
Conclusion The loss of MAGI3 expression in glioma may enhance the proliferation of glioma cells via downregulation of PTEN expression, leading to the activation of the PI3K/Akt pathway. MAGI3 is a potential glioma suppressor.

异硫氰酸苯乙酯通过PI3K-NF-κB-MMP-9途径抑制结肠癌SW480细胞的迁移和侵袭

目的 观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制.方法 体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10,30和50 μmol/L PEITC作用24h,MTr法检测细胞的增殖;伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响.荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性,RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达情况;Westem blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、mTOR磷酸化,以及NF-κB核转位情况.荧光素酶报告基因分析NF-κB的活性.后,建立裸鼠异种移植瘤动物模型,观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用.结果 PEITC能在不影响细胞活性的条件下显著抑制SW480细胞侵袭和迁移(P＜0.05),也能抑制MMP-9的酶活性以及mRNA表达(P＜0.05).同时PEITC能抑制PI3K的表达以及抑制Akt和mTOR磷酸化(P＜0.05),上调PTEN表达.PEITC也能抑制NF-κB核转位,并能降低其活性(P＜0.05).此外,PEITC也能抑制裸鼠异种移植瘤的生长(P＜0.05).结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/Akt和NF-κB通路发挥作用.

Ghrelin抑制棕榈酸诱导的大鼠内皮细胞凋亡及机制

目的 探讨ghrelin对棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡的作用及其与PI3K/Akt通路的关系.方法 大鼠主动脉内皮细胞在含0.3 mmol/L棕榈酸的DMEM培养基中孵育,培养基中加ghrelin及PI3K/Akt的阻断剂LY294002,流式细胞仪Annexin V/PI法检测凋亡,分光光度计检测caspase-3活性,Western blot检测总Akt及磷酸化Akt.结果 棕榈酸作用下大鼠主动脉内皮细胞凋亡率为30.30％±1.98％,显著高于对照组(5.01％±0.52％)(P＜0.01)；Ghrelin及棕榈酸共同作用下内皮细胞凋亡率为10.03％ ±0.90％,显著低予棕榈酸组(P＜0.01).Ghrelin引起Akt活化,PI3K/Akt阻断剂LY294002能阻断Akt活化并减轻ghrelin对内皮细胞凋亡的抑制作用.结论 Ghrelin能够抑制棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡,可能部分是通过PI3K/Akt通路起作用.

胸腺素β4通过提高Akt磷酸化促进局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质eNOS和CD31表达

目的 探讨胸腺素β4(Tβ4)对局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质血管再生影响及其机制.方法 用线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型.将大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(IR组)、Tβ4组(IRT组)、Tβ4+LY294002组(IRTL组)、0.9％氯化钠注射液组(IRN组),缺血2h后把IR、IRN和IRT组分为3和7d两亚组.Western blot检测Akt磷酸化水平和eNOS蛋白表达;免疫组化检测Tβ4和CD31蛋白表达;荧光定量PCR检测eNOS、SDF-1及CXCR4mRNA表达;Longa法检测神经功能.结果 与IRN组相比,IRT 3 d Tβ4蛋白表达显著增多(P＜0.o1);与IRN组比较,IRT 3和7 d Akt磷酸化水平和eNOS蛋白显著增高(P＜0.05),但IRTL组与其比较p-Akt和eNOS蛋白表达显著减少(P＜0.01);与IRN组比较,IRT 3和7 d eNOS、SDF-1和CXCR4mRNA表达显著升高(P＜0.05);与IRN组比较,IRT 3和7d组微血管密度显著增高(P＜0.05),大鼠神经功能缺损在第7天改善明显(P＜0.05).结论 Tβ4可能通过提高局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质Akt磷酸化水平、eNOS基因和蛋白的表达,促进大鼠大脑皮质缺血半暗带血管再生和神经功能恢复.

PI3K/Akt通路介导TRPV1抑制离体小鼠心脏缺血再灌注后的细胞凋亡

目的 研究瞬时受体电位香草酸亚型I(TRPV1)对离体小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡的影响及与PI3K/Akt通路的关系.方法 TRPV1基因敲除(TRPV1-/-)和野生型(WT)小鼠各54只,均各随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)和LY294002处理组(LY).建立Langendorff离体心脏灌注模型,检测心功能;灌注结束后,TTC染色法检测心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、Akt和p-Akt的蛋白表达水平.结果 I/R后,TRPV1-/-小鼠较WT小鼠的LVDP明显降低(P＜0.001),LVEDP明显升高(P＜0.001),同时心肌梗死面积和心肌凋亡细胞明显增加(P＜0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt表达水平下降(P＜0.001).LY294002阻断PI3K后,与相应的I/R组相比,WT小鼠心肌梗死面积明显扩大(P＜0.001),心肌凋亡细胞明显增加(P＜0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt蛋白表达水平降低(P ＜0.001).结论 TRPV1可能通过PI3K/Akt通路抑制离体小鼠心脏缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡.

肝细胞生长因子减轻皮质神经元的缺氧/复氧损伤

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对缺氧/复氧诱导大鼠皮质神经元凋亡的保护.方法 分离培养SD大鼠皮质神经元,经HGF(15、30和60μg/L)预处理后经缺氧/复氧诱导凋亡,用MTT比色法检测细胞存活率;用Hoechst 33258染色法和流式细胞仪检测神经元的凋亡;用比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)和caspase-3活性变化.结果 与正常对照组相比,缺氧/复氧组神经元的细胞存活率显著下降,细胞凋亡率和caspase-3活性升高(均P<0.05);而HGF预处理12 h可显著逆转缺氧/复氧所致的细胞存活率降低、凋亡率增加、LDH活性上升、caspase-3活性升高的改变(均P<0.05),且这些效应与HGF剂量正相关.此外,HGF的抗凋亡效应可被PDK/Akt通路抑制剂LY2941XE阻断.结论 HGF减轻缺g/复氧所诱导的神经元凋亡可能与其激活神经元的PI3K/Akt信号通路、减少caspase-3表达有关.

PI3K/AKT信号通路在急性白血病中调控机制的初步研究

本研究探讨PI3 K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOX01基因在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中与正常人中表达的差异,以期查明PI3 K/AKT通路在白血病中是否存在通路失调.随机收集16例骨髓标本,其中白血病12例(AML 6例,ALL 6例),正常骨髓标本4例.用实时定量RT-PCR方法检测PI3K/AKT通路中的PTEN、CCND1、mTOR、RICTOR、FOX01基因的表达变化；以管家基因GAPDH为内参,按2 -△△Ct法计算目的基因相对表达量.结果表明:PTEN、mTOR、RICTOR在AML、ALL中总体呈低表达趋势,PTEN在12例标本中有10例低表达,mTOR在12例标本中9例低表达,RICTOR在12例标本中7例低表达；FOXO1,CCND1在AML、ALL中则呈高表达趋势,FOXO1在12例标本中有9例高表达,CCND1在12例标本中7例高表达.结论:PI3K/AKT信号通路基因在白血病细胞中被激活.

异硫氰酸苯已酯抑制骨髓瘤细胞Notch信号表达的研究

为了研究异硫氰酸苯已酯(phenylhexyl isothiocyanate,PHI)在体外对骨髓瘤细胞RPM18226增殖抑制的分子机制,用不同浓度PHI与RPMI8226细胞共同孵育,用MTT比色法检测PHI处理后细胞增殖抑制;用DAPI染色现察PHI处理后细胞凋亡;Westem blot检测PHI处理后瘤细胞Notch1、Jagged2、BCL-2和P-Akt蛋白表达变化.结果显示,PHI在一定浓度范围内能抑制瘤细胞增殖,诱导瘤细胞凋亡,其抑制效应具有时间和浓度依赖性.PHI可以下调瘤细胞中Notchl和Jagged2蛋白的表达并呈时间和浓度依赖性,同时降低BCL-2和p-Akt的表达.结论:PHI在体外能够抑制骨髓瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡;细胞凋亡的发生与PHI抑制Notch信号及其下游靶基因p-Akt和BCL-2的表达有关,PHI可能成为新一代的Notch信号抑制剂,是一种潜在的骨髓瘤治疗药物.