首页 > 文献资料
-
甘草多糖对人外周血γδT细胞的免疫调节作用
目的:研究甘草多糖(Glycyrrhizae Radix et Rhizoma polysaccharide,GP)对人外周血γδT细胞增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的免疫调节作用.方法:采集正常人静脉抗凝血,加入淋巴细胞分离液,密度梯度离心法分离人单核细胞层,经IPP扩增后得到γδT细胞,采用不同质量浓度的甘草多糖(终质量浓度分别为25,50,100 mg·L-1).CCK-8法检测甘草多糖对γδT细胞增殖的影响,ELISA法检测甘草多糖对γδT细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,CCK-8法检测甘草多糖对γδT细胞杀伤功能的影响.结果:甘草多糖能促进γδT细胞增殖,呈剂量依赖关系；甘草多糖作用后,γδT细胞分泌的IFN-γ和TNF-α明显增多(P＜0.01),且呈剂量依赖关系；甘草多糖作用后,γδT细胞对肿瘤细胞HepG2的杀伤能力明显增强(P＜0.05).结论:甘草多糖能够促进人外周血γδT细胞增殖、分泌细胞因子及杀伤肿瘤细胞,这为研究甘草多糖的抗肿瘤及免疫调节机制提供了新的依据.
-
固本止咳中药对COPD小鼠肺组织γδT细胞及IL-17的影响
目的:观察固本止咳中药对COPD模型小鼠肺组织上皮细胞间γδT细胞及IL-17影响,探讨其治疗COPD的作用机制.方法:采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠模型,实验分为空白对照组、模型对照组、固本止咳中药组;运用HE染色对形态学进行观察,评价COPD小鼠模型;应用流式细胞术检测肺组织上皮间γδT淋巴细胞表达情况;并应用ELISA方法检测小鼠肺组织上皮细胞间淋巴细胞培养上清液IL-17分泌水平.结果:COPD小鼠模型形态学结果符合COPD临床病理形态学改变;模型对照组较空白对照组γδT淋巴细胞比例明显升高(P＜0.05);中药治疗组较模型对照组γδT淋巴细胞比例明显降低(P＜0.05).淋巴细胞培养上清液中IL-17含量与γ δ T细胞变化趋势同步.结论:固本止咳中药通过调节γδT细胞的生物活性,减少IL-17的分泌,从而减轻气道炎症,减少气道壁损伤-修复过程的发生,改善了呼吸道黏膜免疫功能.
-
自体ΥδT细胞联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床疗效观察
目的 比较自体γδT细胞联合化疗与单纯化疗后非小细胞肺癌患者的临床疗效.方法 48例非小细胞肺癌患者随机分为对照组(单纯化疗组24例)和研究组(自体γδT细胞联合化疗组24例),对两组患者的客观缓解率、生活质量、免疫功能、3年生存情况及不良反应情况进行比较.结果 研究组客观缓解率明显高于对照组(P＜0.05);研究组卡氏评分明显高于对照组(P＜0.05);两组患者治疗后CD3+、CD8+、CD56+均显著高于治疗前(P＜0.05);研究组3年生存率显著高于对照组(P＜0.05);研究组患者治疗后骨髓抑制及恶心发生率明显低于对照组(P＜0.05).结论 自体 ΥδT细胞联合化疗能改善NSCLC患者生活质量,提高机体免疫功能,降低化疗的副作用.
-
神经母细胞瘤患儿外周血γδT细胞比例及凋亡变化特点
目的 分析研究神经母细胞瘤(NB)患儿外周血中γδT细胞比例以及多种细胞因子水平变化情况,并进行γδT细胞的体外培养,分析其凋亡特点,探讨神经母细胞瘤患儿外周血γδT细胞的变化特点及临床意义.方法 通过流式细胞术检测NB患儿外周血中γδT细胞(CD3+、TCRγδ+)比例,并与健康儿童比较;通过luminex200液相悬浮芯片系统检测细胞因子表达;探索并优化γδT细胞体外培养条件(PAM+IL-2),培养过程中通过检测Annexin V分析细胞凋亡情况.结果 NB患儿外周血中γδT细胞比例明显升高,患者外周血中多种促生存细胞因子减少;同时我们在体外刺激γδT细胞增殖,发现γδT细胞凋亡增加.结论 NB患儿外周血中γδT细胞呈现病理性升高,并且细胞凋亡增加,其可能与外周血中促生存细胞因子减少相关,增加γδT细胞抗凋亡能力,对于其用于NB临床治疗具有重要意义.
-
添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系
目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案. 方法在固相化抗TCR γδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt`s淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性.结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与 IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P<0.05);而IL-2与 IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P<0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P<0.05).结论在用固相化TCR γδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前优化的γδ T细胞体外扩增培养方案.
-
伴侣素包含T复合蛋白1ε亚基（CCT5）是与人γδT细胞相关的自身抗原
目的：探讨CCT5与γδT细胞及自身免疫病的关系。方法 PCR扩增人CCT5的基因，表达并纯化CCT5重组蛋白；用3条CCT5蛋白的肽段免疫小鼠，制备并筛选抗CCT5的单克隆抗体；固相化CCT5重组蛋白，体外扩增人外周血单个核细胞中的γδT细胞；用制备的单抗通过ELISA检测正常人、类风湿性关节炎（ RA）及系统性红斑狼疮（ SLE）患者血浆中CCT5蛋白的含量；用流式细胞技术分析不同亚型γδT细胞的比例，并与血浆CCT5含量做相关性分析。结果 PCR扩增获得CCT5基因，目的片段长度为1750 bp；经SDS-PAGE分析可见重组CCT5蛋白分子质量约为65 ku，并获得了纯化。通过筛选，获得两株抗CCT5单克隆抗体对。重组CCT5蛋白能在体外扩增外周血γδT细胞；而血浆CCT5浓度与Vγ9和Vδ2 T细胞的比例呈显著正相关。在RA及SLE患者血浆中，可溶性CCT5的浓度显著低于正常对照（ P＜0.05）。结论 CCT5是与人Vγ9δ2γδT细胞识别的相关自身抗原，有助于我们深入了解Vγ9δ2γδT细胞在自身免疫病中的作用。
-
体外扩增γδ T细胞的肿瘤组织趋向性
目的 探查体外扩增的γδ T细胞向结直肠癌细胞迁移的能力.方法 采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs),并利用固相化抗T细胞受体(TCR)γδ抗体进行2周的体外扩增.对扩增的γδT细胞进行免疫荧光染色和流式细胞仪分析或流式细胞仪分选.采用Bioplex 200流体芯片系统分析细胞因子和趋化因子的表达.采用transwell小室进行趋化实验.结果 体外扩增的γδT细胞主要表达CCR5和CXCR32种趋化因子受体.4种结直肠癌细胞系和10种结直肠癌肿瘤组织中存在CCR5和CXCR3配体的表达.体外扩增的γδ T细胞在TCR激活的情况下可以大量产生Th1和Th2型细胞因子,进一步募集γδ T细胞.特别是其产生的干扰素γ(IFN-γ)能够提高结直肠癌细胞CXCR3配体的表达量,从而进一步促进γδ T细胞的趋近.结论 本研究结果为γδ T细胞过继免疫治疗结直肠癌提供了重要指征.
-
不同治疗剂量白细胞介素2对人外周血γδT细胞增殖和表型的影响
目的 研究治疗剂量范围内白细胞介素2(IL-2)对T细胞的增殖作用,特别是对人外周血γδT细胞数量和功能亚群的影响.方法 采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,在不同浓度IL-2作用下培养2周,利用免疫荧光染色和流式细胞术分析培养前后不同淋巴细胞的表型和比例,采用台盼蓝染色和血球计数法进行细胞计数.结果 Vδ1和Vδ2型γδT细胞的4个功能亚群中,CD27~+细胞(包括CD27~+CD45RA~+和CD27~+CD45RA~-)可以表达淋巴组织归巢受体CCR7,CD27~-细胞(包括CD27~-CD45RA~+和CD27~-CD45RA~-)不表达CCR7,具有分布于外周组织的潜能;各个γδT细胞的功能亚群均能表达活性相关受体,在丝裂原刺激下可以迅速产生不同水平的细胞毒作用相关效应分子.虽然高剂量IL-2对CD4 T细胞的增殖产生抑制作用,但对γδT的增殖反而有促进作用,增殖的γδT细胞以CD27~-CD45RA~-的效应细胞为主.结论 治疗剂虽范围内的IL-2具有刺激人外周血γδT细胞增殖的作用,在基于IL-2的抗肿瘤治疗中可能具有重要的牛物学意义.
-
一株健康人γδT细胞克隆的建立及鉴定
目的 建立健康人γδT细胞克隆并进行鉴定.方法 以<'60>Co照射的同种异体PBMC作为饲养细胞,以有限稀释法对经过阳性分选的γδT细胞进行克隆化.用流式细胞术及分子生物学检测鉴定所获克隆,以MTT掺入法对所获克隆进行增殖实验检测.结果 获得一株γδT细胞单克隆,为VγV82亚型,CD4分子和CD8分子表达均为阴性.进一步的研究发现表位肽EP6不仅能够特异性结合γ8T细胞单克隆,而且能够促进其增殖.结论 成功建立了健康人外周血γδT细胞克隆,为深入研究γδT细胞抗原识别机制、亚群及功能奠定了坚实的基础.
-
支气管哮喘大鼠γδT细胞分布和凋亡的变化
探讨γδT细胞在支气管哮喘外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的分布和凋亡状态.应用鸡卵清蛋白(OVA)致敏和刺激Wistar大鼠(每组10只),制作致敏大鼠哮喘模型,收集外周血单个核细胞(PBMC)和BALF,采用流式细胞术检测γδTCR+ T细胞百分率和CD28/γδTCR平均荧光密度比,并用免疫荧光法结合HE染色以及免疫组化法检测γδT细胞占淋巴细胞的百分率,用TENUL法检测淋巴细胞凋亡.哮喘组PBMC中γδT细胞占总T细胞或总淋巴细胞比例明显低于正常组(P＜0.05),CD28/γδTCR平均荧光密度比则无明显差别;BALF中γδT细胞占总T细胞或总淋巴细胞比例明显高于正常组(P＜0.01), CD28/γδTCR平均荧光密度比也有显著增加(P＜0.01);哮喘组PBMC和BALF中淋巴细胞凋亡指数明显低于正常对照组(P＜0.01).提示γδT细胞亚群参与了哮喘的发病过程.
-
头颈肿瘤浸润γδT细胞的数量及表型与临床分期相关
目的 研究头颈肿瘤中浸润的Foxp3+γδT细胞的数量与头颈肿瘤临床分期的关系.方法 用组织研磨法分离患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs),用密度梯度离心法分离患者外周血单个核细胞(PBMCs);用固相化anti-panTCRγδ单克隆抗体对TIL和PBMC进行2～4周的体外扩增,免疫荧光染色和流式细胞仪测定扩增前后的细胞;对头颈肿瘤组织芯片进行免疫组织化学染色.结果 15例头颈肿瘤组织标本TIL中γδT占CD3+T细胞的0.37%-12.35%,其中0.13%～34.38%为Foxp3+γδT.扩增后TIL中γδT占CD3+T细胞的20.38%～82.87%,且以Vδ1亚型为主.肿瘤组织芯片按照肿瘤TNM分期中的T分期分为4组,Foxp3+γδT细胞的比例随肿瘤分期的提高而增加.结论 现有证据证明了头颈肿瘤组织中存在Foxp3+γδT细胞的浸润,并提示肿瘤组织中调节表型T细胞的数量可能与头颈肿瘤的预后相关.
-
AIDS患者γδ T细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞
目的 建立自体人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的CD4+T细胞模型,检测获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者γδT细胞对自体HIV感染的CD4+T细胞的杀伤作用.方法 分离健康志愿者和未治疗的AIDS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选获得高纯度的CD4+T细胞,加入植物血凝素(PHA)和白细胞介素-2(IL-2)共同培养,建立自体HIV感染的CD4+T细胞模型.流式细胞术检测HIV-P24+ CD4+T细胞的比例.乳酸脱氢酶(LDH)法测定γδ T细胞的细胞毒作用.结果 培养到第10天时,HIV-P24+ CD4+T细胞的比例达到高值.AIDS患者的γδT细胞不仅能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞(细胞溶解率为71.1±97),而且对HIV也有一定的杀伤作用(细胞溶解率为24.2±18.2).而健康志愿者γδT细胞对自体CD4+T细胞没有杀伤作用(细胞溶解率为4.3±10.1).结论 AIDS患者γδ T细胞能够杀伤自体HIV感染的CD4+T细胞,为采用γδT细胞过继免疫治疗AIDS提供了依据.
关键词： γδT细胞 人类免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征 -
PKM2是TCRγδ的配体吗?
目的 检验M2型丙酮酸激酶(PKM2)是否是肿瘤细胞表面TCRγδ识别的配体.方法 用Western blot的方法验证OT3肽(合成的TCRγδ中δ链的CDR3区肽)与PKM2结合,用Western blot及免疫组化法观察PKM2在肿瘤细胞及组织中的表达,用流式细胞术及激光扫描共聚焦显微镜术验证PKM2在肿瘤细胞的定位,用固相化PKM2体外扩增γδT细胞和PKM2刺激γδT细胞分泌IFN-γ的实验检验PKM2的功能.结果 (1)PKM2可与OT3肽结合,肿瘤细胞总蛋白提取物中含有大量PKM2,提示以OT3为探针,从肿瘤细胞总蛋白提取物中钓取到PKM2是合理的,用此方法筛选OT3结合蛋白的方法是可行的;(2)PKM2普遍表达于肿瘤细胞及组织,但不表达于肿瘤细胞膜;(3)PKM2在体外不能扩增γδT细胞,无刺激γδT细胞产生IFN-γ的功能.结论 PKM2不表达于肿瘤细胞表面,对γδT细胞不具有刺激活化的功能,PKM2不具备TCRγδ的配体特性.
-
γδT细胞的扩增及其信号转导分子ζ链相关蛋白-70的免疫印迹检测
目的 检测人外周血γδT细胞的信号转导分子ζ链相关蛋白-70 (ZAP-70)的表达.方法 应用淋巴细胞分离液常规分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)刺激PBMC增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞；采用免疫印迹方法检测γδT细胞内的ZAP-70分子.结果 新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4.9％,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69.2％,免疫磁珠阳性分选后达99.3％.免疫印迹显示检测到γδT细胞内相对分子质量为70 000的ZAP-70分子的表达.结论 ZAP-70分子在活化增殖的人外周血γδT细胞内高表达.
关键词： γδT细胞 ZAP-70蛋白酪氨酸激酶 结核杆菌低分子多肽抗原 印迹法 蛋白质 -
3种分枝杆菌耐热蛋白抗原对人γδT细胞的刺激活性研究
目的 研究3种分枝杆菌耐热蛋白抗原体外对人γδT细胞的刺激活性. 方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用人型结核分枝杆菌H37Ra耐热蛋白抗原(H37Ra-HAg)、牛型结核分枝杆菌BCG耐热蛋白抗原(BCG-HAg)和耻垢分枝杆菌耐热蛋白抗原(MS-HAg)进行刺激并持续培养12d,采用流式细胞仪检测增殖细胞中γδT细胞数量及CD4+T细胞所占比例. 结果 H37Ra-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量均显著高于BCG-HAg、MS-HAg刺激组和IL-2对照组[((50.52±5.40)％v.s(7.31±3.15)％、(5.82±3.42)％、(5.56±2.68)％);(9.63±1.64)×106 v.s(0.69±0.36)×106、(0.57±0.22)×106、(0.34±0.18)×106))].BCG-HAg刺激组扩增细胞中CD4+T细胞的比例和数量均显著高于H37Ra-HAg刺激组和IL-2对照组[(73.56±7.12％、66.93±7.65)％v.s(23.18±6.29)％、(52.61±5.37)％;(4.75±0.86)×10 6、(3.28±0.59)×106 v.s(2.71±0.65)×106、(1.63±0.45)×106].而BCG-HAg刺激组和MS-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量和IL-2对照组相比并无显著性差异.结论 H37Ra-HAg具有促进γδT细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg具有促进CD4+T细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg无刺激γδT细胞增殖活性.
-
Toll样受体7激动剂对K562细胞抑制作用的研究
本研究旨在探讨Toll样受体(TLR)7激动剂gardiquimod对人慢性髓系白血病细胞K562的抑制作用.以异戊烯焦磷酸法扩增人外周血γδT细胞.用不同浓度的gardiquimod处理γδT细胞和K562细胞48 h,用MTT法检测细胞增殖情况.以流式细胞术检测gardiquimod处理前后K562细胞内TLR7表达、细胞周期及凋亡的变化.用CCK-8试剂盒检测γδT细胞对K562的杀伤活性.结果表明,gardiquimod 0.69- 11.0μg/ml可明显促进γδT细胞增殖,在5.5-11.0μg/ml浓度下抑制K562细胞增殖；gardiquimod处理K562细胞后未检测到凋亡,但细胞周期有明显变化,而且处理后的K562细胞更易被γδT细胞杀伤.结论:gardiquimod能够抑制K562细胞增殖,阻滞细胞周期,并增强其对γδT细胞杀伤的敏感性.
关键词： TLR7激动剂 gardiquimod K562细胞 γδT细胞 -
γδT细胞在获得性纯红细胞再生障碍性贫血发病机制中的作用
本研究检测获得性纯红细胞再生障碍性贫血(acquired pure red cell aplastic anemia,A-PRCA)患者γδT细胞亚群数量和功能变化,探讨γδT细胞在A-PRCA发病机制中的作用.对11例经骨髓涂片和活检确诊的A-PRCA患者,给予环胞菌素A和雷公藤多甙治疗;采用流式细胞术检测免疫抑制剂治疗前后患者T细胞亚群和γδT细胞水平;分离患者外周血中单个核细胞并置于含有10% FCS,PHA 10μg/ml,rIL-2 50 U/ml的RPMI 1640培养液培养2周,然后用TCRγδ磁珠分选出γδT细胞,在体外与正常人骨髓共同培养,观察对红系、粒系集落生长的影响.结果显示,治疗前组外周血CD3+/CD8+细胞数较正常对照组升高,CD4+/CD8+比例倒置(P＜0.05);治疗前组患者γδT细胞水平有明显升高(P＜0.05).治疗后,有效组CD3+/CD8+细胞数下降(P＜0.05),CD4+/CD8+比值上升(P＜0.01);γδT细胞水平较治疗前有明显降低(P＜0.05).从患者外周血分离的γδT细胞体外能抑制正常骨髓红系CFU-E和BFU-E生长,并随浓度的增长抑制作用越明显,而在不同的浓度梯度下对粒系生长无明显影响.结论:A-PRCA患者γδT细胞亚群增高,其在PRCA的发病机制中起了一定作用;体外分离培养的患者γδT细胞可抑制正常红系集落生长,对粒系集落生长影响不明显;环胞素A治疗A-PRCA有较好疗效.
关键词： 获得性纯红细胞再生障碍性贫血 细胞免疫 γδT细胞 -
一种简单快速扩增和获取外周血γδT细胞的方法
本研究目的是建立一种简单快速的扩增人外周血γδT细胞的方法,以便用于γδT细胞的生物学特性和临床过继性免疫治疗的研究.取人外周血5-10 ml,分离获取单个核细胞,用结核杆菌低分子多肽抗原(MTb-Ag)刺激细胞增殖,通过荧光单克隆抗体TCRγδ-PE染色及流式细胞仪检测γδT细胞所占比例,用MTT试验检测细胞毒活性.结果表明:MTb-Ag能特异地刺激外周血单个核细胞中的γδT细胞增殖,γδT细胞可达69.2%,对K562细胞具有较高的杀伤活性.结论:本方法是一种简单、快速、特异的体外扩增和获取人外周血γδT细胞的方法.
-
蛋白激酶Cθ在γδT细胞表达L-选择素中的调控作用
目的 探讨蛋白激酶Cθ(PKCθ)信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素(CD62L)中的凋控作用.方法 用结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)刺激人外周血单个核细胞(PBMC)并培养6～8 d,获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞(MtbAT),作为γδT细胞来源,分别加佛波醇酯(PMA)、PMA+离子霉素(IMN)培养3、6、12、24 h,或用培养8 d的MtbAT细胞分别加入Mtb-Ag、Rot-tlerin+Mtb-Ag、PMA、Rottlerin+PMA刺激4 h,收集细胞用荧光抗体染色后,流式细胞术(FCM)检测CD62L在γδT细胞表而的表达.结果 体外激活培养6～8 d的γδT细胞表面CD62L的表达率为75.0%～87.0%.PMA刺激γδT细胞3～12 h时CD62L表达逐渐下调,表达率为42.3%～23.5%;但在刺激后24 h时,又明显回升至53.2%.而PMA+IMN刺激3、6 h时,γδT细胞CD62L表达也下调,表达率分别为52.1%、39.3%;但在刺激12 h和24 h时CD62L表达率分别为52.9%和35.3%.在PMA刺激γδT细胞同时加入Rottlerin,则CD62L的表达率(47.9%)明显高于PMA单独刺激组(31.8%);MtbAT用Mtb-Ag再刺激4 h后,γδT细胞CD62L的表达率由70.0%降为54.8%,而在Mtb-Ag再刺激时加入Rottlerin,则CD62L表达率增加到63.1%.结论 γδT细胞在PMA或Mtb-Ag刺激后CD62L的表达下调可被PKCθ特异性抑制剂部分阻断,表明CD62L在γδT细胞表面的表达可能与PKCθ信号转导途径的调控相火.
-
产生IL-17的γδT细胞在沙眼衣原体呼吸道感染早期促进中性粒细胞的募集
目的 探讨沙眼衣原体呼吸道感染早期产生IL-17的γδT细胞对中性粒细胞募集的影响及其机制.方法 WT(C57BL/6)与TCRδ-/-小鼠鼻腔吸入3×103 IFU(inclusion-forming units)沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm),建立沙眼衣原体小鼠肺炎模型.分离感染不同时间点小鼠肺组织单个核细胞,流式细胞术检测肺组织CD11b+Gr1+中性粒细胞(PMN)百分率;细胞内因子染色检测γδT细胞IL-17的合成;RT-PCR检测小鼠肺组织IL-17及KC(中性粒细胞趋化因子)、IL-6 mRNA表达.结果 一定剂量的Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织γδT细胞分泌大量IL-17,与未感染组比较,感染后第3天小鼠肺组织CD3+γδT+细胞分泌的IL-17显著增加(P<0.001),并且持续到感染的第7天(P<0.05);TCRδ-/-小鼠Cm呼吸道感染后第3天肺组织IL-17 mRNA的表达以及PMN百分率显著低于WT鼠;进一步研究显示TCRδ-/-小鼠在感染后第3天及第7天中性粒细胞趋化因子KC和IL-6在小鼠肺组织的表达显著降低.结论 产生大量IL-17的γδT细胞可能通过上调KC和IL-6的表达在沙眼衣原体呼吸道感染中发挥PMN募集作用.
