首页 > 文献资料
-
室旁核注射Apelin-13加重大鼠缺血-再灌注胃黏膜细胞凋亡
目的 研究大鼠室旁核(PVN)注射Apelin-13对胃缺血.再灌注(GI-R)的损伤作用及其细胞机制.方法 PVN内微量注射Apelin-13,制备GI-R模型,用免疫组化方法检测胃黏膜细胞的凋亡、增殖及凋亡相关基因BCL-2和BAX的表达.结果 (1)注射0.2、1.0和5.0 μg Apelin-13到PVN,GI-R损伤显著加重,且有剂量-效应依赖关系;(2)与GI-R组相比,注射Apelin-13能明显增加GI-R后胃黏膜细胞的凋亡,减低胃黏膜细胞的增殖,同时可以增加促凋亡因子BAX蛋白的表达,明显降低抗凋亡因子BCL-2蛋白的表达.结论 室旁核内注射Apelin-13可促进胃黏膜细胞的凋亡、抑制其增殖,对GI-R损伤产生显著的加重作用.
-
Apelin-13减轻糖尿病小鼠主动脉损伤
目的 探讨apelin-13对糖尿病小鼠主动脉结构的影响及其机制.方法 对照组:8周龄C57/BL6j小鼠6只;糖尿病组:8周龄kkAy小鼠6只;apelin-13处理组:kkAy小鼠6只,皮下埋微量植渗透泵释放apelin-13[30Lg/(kg·d)].4周后取材,进行HE、Masson染色,光学显微镜下观察血管的形态学改变及胶原纤维的沉积情况,弹性蛋白染色观察血管弹力纤维板的形态学改变,免疫组织化学染色分析血管内信号蛋白转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平.结果 与正常对照组相比,糖尿病组小鼠血管壁中膜明显增厚,主动脉内胶原纤维含量明显升高(P＜0.05),弹力纤维排列紊乱、断裂,同时血管壁TGF-β1表达增强(P＜0.05),而apelin-13处理组小鼠血管壁中膜较糖尿病组明显变薄,血管间质内胶原纤维的含量较糖尿病组小鼠显著下降(P＜0.05),弹力纤维排列较整齐,血管壁TGF-β1表达也显著下调(P＜0.05).结论 外源性Apelin-13可能通过抑制TGF-β1以及平滑肌细胞增殖减轻糖尿病引起的主动脉纤维化以及血管中膜弹力纤维损伤.
-
Apelin-13对自发性高血压大鼠心肌肥厚的影响
目的：观察外源性Apelin-13对自发性高血压大鼠（ SHR）心肌肥厚的影响，并初步探讨其作用机制。方法将24只20周龄雄性SHR随机分为空白对照组（NTC）、硝苯地平组（NIF）、Apelin-13组（Apelin-13），每组8只。干预4周后，测定无创尾动脉血压及左室质量指数；超声心动图评估心肌肥厚和心功能；HE染色评价心肌细胞及排列情况；Western blot法检测心肌组织Apelin-13、APJ、ANP、IKBα和NF-κB蛋白表达。结果与NTC组和NIF组相比， Apelin-13组的收缩压（ SBP）、左心室重量/体重（ LVW/BW）、舒张期室间隔厚度（ IVSD）和心肌组织ANP降低（ P ﹤0.05），左室舒张末期内径（LVEDd）、左心室射血分数（EF）和左心室短轴缩短率（FS）升高（ P ﹤0.05）；Apelin-13组的心肌组织Apelin-13、APJ和IKBα蛋白表达升高（ P ﹤0.05），NF-κB蛋白表达降低（ P ﹤0.05）。HE染色提示NIF组和Apelin-13组干预后心肌细胞肥大改善、排列趋向整齐。结论 Apelin-13可以减轻SHR心肌肥厚和改善心功能，其机制可能与下调NF-κB信号通路相关。
-
2型糖尿病患者血浆apelin-13水平与胰岛素抵抗及高血压相关性的研究
目的 探讨2型糖尿病患者血浆apelin-13水平与胰岛素抵抗、高血压的相关性.方法 2012年11月至2013年1月期间,将诊治的30例单纯2型糖尿病作为观察I组,30例2型糖尿病合并高血压患者作为观察II组,同期30例健康体检者作为对照组,对3组血浆apelin-13、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IR),以及血压水平进行检测和比较.结果 与对照组相比,观察I组apelin-13水平明显升高,观察II组apelin-13水平明显降低(P＜0.05);与观察I组相比,观察II组apelin-13水平显著降低(P＜0.05);血浆apelin-13水平与FINS、IR及收缩压(SBP)呈负相关性.结论 血浆apelin-13水平在2型糖尿病患者中明显升高,在合并高血压的2型糖尿病患者中显著降低,并与FINS、IR、SBP呈负相关性.
-
急性脑梗死患者不同时期Apelin-13及应激相关蛋白水平的变化及其与预后的关系研究
目的 研究急性脑梗死不同时期的Apelin-13水平及其与热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)及临床预后的关系.方法 选取2015~2016年收治的急性脑梗死患者(观察组)与同期体检者(对照组)各60例,检测对照组与观察组不同时期(入院第1、3、7、15、30天)的Apelin-13、HSP-70、β-EP水平及其相关性,同时分析不同预后观察组的GCS、APACHEⅡ以及NHISS评分.结果 观察组患者不同时期的Apelin-13、HSP-70明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),β-EP则无显著差异(P>0.05).观察组患者的Apelin-13与HSP-70表现为负相关性(P<0.05),观察组Apelin-13以及HSP-70均与β-EP无明显的相关性(P>0.05).观察组不同预后患者的β-EP无显著差异(P>0.05),而Apelin-13、HSP-70、GCS评分、APACHEⅡ评分、NHISS评分均存在显著差异(P<0.05).结论 Apelin-13在急性脑梗死患者发病首日明显降低,之后逐渐升高,HSP-70则在发病首日升高,之后逐渐降低.预后较差的患者Apelin-13以及GCS较低,而HSP-70、APACHEⅡ评分、NHISS评分较高,可以用作急性脑梗死患者预后的判定指标.
-
Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化的影响
目的 观察Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响并探讨其可能机制.方法 用Apelin-13(10-8、10-7和106 mol/L)预处理HK-2细胞30 min后,用含D-葡萄糖(30 mmol/L)的培养基培养HK-2细胞48 h.免疫荧光检测HK-2细胞中间充质细胞的标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,透射电镜观察HK-2细胞的超微结构,Western-Blot检测上皮细胞的标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-SMA及自噬相关蛋白表达.结果 与对照组比较,高糖组的细胞呈现长梭形,细胞间隙明显增宽,E-cadherin蛋白表达显著性下调(t=4.751,P=0.011),而α-SMA蛋白表达显著上调(t=3.846,P=0.016),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t1=5.271,t2=4.695,t3=6.753,P1=0.009,P2=0.012,P3=0.002),p62表达显著降低(t=4.552,P=0.012).与高糖组比较,Apelin-13(10-7和10-6mol/L)+高糖与高糖组比较,明显抑制了细胞形态的变化,细胞形态大多数呈椭圆型,E-cadherin蛋白表达显著上调(t1=3.495,t2=4.124,P1=0.019,P2=0.013),而α-SMA蛋白表达显著下调(t1=4.014,t2=4.283,P1=0.014,P2=0.012),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t1=3.487,t2=4.059,t3=5.342,t4=4.271,t5=5.360,t6=5.851,P1=0.018,P2=0.014,P3=0.009,P4=0.011,P5=0.005,P6=0.004),p62表达显著降低(t1=4.342,t2=3.557,P1=0.012,P2=0.019).结论 Apelin-13抑制了高糖诱导的肾小管EMT,其机制可能与Apelin-13诱导肾小管上皮细胞自噬有关.
关键词： Apelin-13 高糖 上皮细胞-间充质细胞转分化 自噬 自噬相关蛋白 -
Apelin-13对离体大鼠心肌缺血再灌注影响的研究
目的：探究apelin-13对离体Wistar大鼠心脏缺血再灌注后的作用效果及机制。方法55只大鼠随机分为五组：正常组（N组）、apelin-13＋正常组（A组）、缺血再灌注组（I-R组）、apelin-13＋缺血再灌注组（A/I-R组）及经典后处理组（I-Post组）。N组持续正常液灌流150 min；apelin组给予含apelin-13（500 nmol/L）正常液持续灌注150 min；I-R组正常液稳定灌流30 min后，结扎前降支30 min，继以正常液再灌注90 min；A/I-R组给予含apelin-13（500 nmol/L）正常液再灌注20 min，继而以正常液灌流70 min；I-Post组再灌注前行经典后处理（30 s再通30 s缺血，共3次循环）。记录分析左心室发展压（LVDP）、再灌注心律失常（RA）、心肌梗死面积、各组 L 型钙通道蛋白α1c亚单位及钠通道蛋白Vα亚单位的表达水平。结果（1）与N组相比，给予apelin后（即A组）LVDP明显增高（P＜0.05），而进行缺血再灌注处理后LVDP均持续下降，但apelin-13及后处理均可减缓其降低，二者对LVDP的影响差异无统计学意义。（2）对RA的影响：A/I-R组较I-R组RA评分降低（P＜0.05），A/I-R组与I-Post组间RA评分差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）对心肌梗死面积的影响：A/I-R组心肌梗死面积较I-R组减小（P＜0.05），A/I-R组与I-Post组间心肌梗死面积差异无统计学意义（P＞0.05）。（4）组间心肌钠、钙通道蛋白表达无差异。结论在心肌缺血再灌注时apelin-13可减少再灌注损伤，改善缺血再灌注后心脏泵功能，减少再灌注性心律失常的发生，缩小梗死面积。apelin-13再灌注具有与经典后处理相似作用，但其作用机制并不是通过改变心肌钠、钙通道蛋白的表达来实现的。
-
Apelin-13对H9c2心肌细胞增殖及ERK1/2信号通路活化的影响
目的 分析Apelin-13对H9c2心肌细胞增殖及ERK1/2信号通路活化的影响.方法 体外培养后的H9c2心肌细胞分为对照组、Apelin-13组、U0126(ERK1/2抑制剂)组和Apelin-13+U0126四组.对照组:只使用10％的FBS和DMSO处理;Apelin-13组:在对照组基础上分别加入浓度为0.0001,0.001,0.01和0.1μmol/L的Apelin-13(n=5);U0126干预组:在对照组基础上加入浓度为10μmol/L的U0126;Apelin-13+U0126组:在对照组基础上分别加入0.1μmol/L的Apelin-13和10μmol/L的U0126.各组依次恒温培养24 h后,采用MTT法测定H9c2心肌细胞在490 nm处各组的光密度值(OD值,n=5)并计算其细胞增值率,采用Western blot法测定各实验组ERK1/2信号通路磷酸化水平.结果 与对照组比较,U0126干预组所测各细胞指标差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,Apelin-13组的干预显著升高各组H9c2心肌细胞的OD值,促进了H9c2心肌细胞的增殖,升高了心肌细胞的p-ERK1/2表达量;并且0.001～0.1μmol/L Apelin-13四组间,细胞增值率及p-ERK1/2表达量有显著的统计学差异,随Apelin-13剂量的增加,各组的OD值、细胞增殖率及p-ERK1/2表达量亦显著升高(P<0.05).与Apelin-13组比较,Apelin-13+U0126组H9c2心肌细胞的OD值、细胞增值率及p-ERK1/2表达量显著降低(P<0.05).结论Apelin-13促进了H9c2心肌细胞的增殖,并存在显著的剂量依赖性,Apelin-13通过ERK1/2信号通路调控了H9c2心肌细胞的细胞增殖.
关键词： Apelin-13 H9C2心肌细胞 ERK1/2信号通路 -
Apelin-13对糖尿病大鼠肝脏及骨骼肌糖脂代谢基因水平表达的影响
目的 观察外源性给予Apelin 13对糖尿病鼠肝脏及骨骼肌的葡萄糖及脂肪酸代谢基因表达的影响. 方法 40只雄性Wister大鼠,随机分成两组,对照组和实验组分别为8只及32只.实验组通过给予高糖、高脂饮食,联合低剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建2型糖尿病大鼠模型.将造模成功的糖尿病大鼠随机分成糖尿病模型组和Apelin 13给药组各14只.给药组大鼠腹腔注射Apelin-13,0.1μmol·kg-1d-1,对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积0.9％ NaCl溶液,持续给药10周.10周末,测定各组大鼠空腹血糖值后取材.实时荧光定量PCR检测肝脏组织中葡萄糖6磷酸酶(G6P)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、过氧化物酶体增殖物激活体-α(PPARα)、脂酰辅酶A合成酶长链家族成员1 (ACSL1)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)的基因表达水平;骨骼肌中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、过氧化物酶体增殖物激活体-α(PPARα)的基因的mRNA表达水平.结果 糖尿病模型组肝脏PPARα mRNA表达水平低于对照组[(0.309±0.073)和(0.971±0.028),P＜0.05],经外源性给予Apelin 13 10周干预后,PPARα mRNA表达水平[(0.663±0.085),P＜0.05)]较模型组有所升高,但低于对照组;糖尿病模型组肝脏ACSL1 mRNA表达水平低于对照组[(0.508±0.056)和(0.990±0.015),P＜0.05]经外源性给予Apelin 13 10周干预后,ACSL1 mRNA表达水平[(0.802±0.079),P＜0.05]较模型组有所升高,但低于对照组;糖尿病模型组肝脏CPT1 mRNA表达水平低于对照组[(0.398±0.118)和(0.987±0.015),P＜0.05],经外源性给予Apelin-13 10周干预后,CPT1 mRNA表达水平[(0.752±0.097),P＜0.05]较模型组有所升高,但低于对照组;模型组大鼠G6P mRNA表达水平均高于对照组[(1.727±0.005)和(1.002±0.005),P＜0.05],经外源性给予Apelin-13 10周干预后,G6P mRNA表达水平高于糖尿病模型组[(2.586±0.208),P＜0.05];模型组大鼠PEPCK mRNA表达水平高于对照组[(1.309±0.130)和(0.993±0.010),P＜0.05]和,经外源性给予Apelin-13 10周干预后,PEPCK mRNA表达水平[(1.842±0.234),P＜0.05]均高于糖尿病模型组;糖尿病模型组大鼠骨骼肌PPARα mRNA表达水平低于对照组[(0.477±0.118)和(0.993±0.013),P＜0.05],经外源性给予Apelin-13干预后,PPARα[(0.566±0.0780),P＞0.05]与糖尿病模型组比较差异无统计学意义,但低于对照组(P＜0.05);糖尿病模型组大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平低于对照组[(0.289±0.066)和(0.994±0.009) P＜0.05],经外源性给予Apelin-13干预后,糖尿病模型组大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达水平[(0.509±0.119),P＜0.05]较模型组有所升高,但低于对照组.结论 Apelin 13增加肝脏PPARα、ACSL1、CPT1基因表达,在一定程度上改善2型糖尿病鼠肝脏脂肪酸氧化代谢.Apelin-13增加G6P、PEPCK基因表达,促进肝脏糖异生,可能参与2型糖尿病的发生发展.Apelin-13增加骨骼肌GLUT4基因表达,在一定程度上改善糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢,可能参与骨骼肌氧化应激的调节.
-
Apelin-13对糖尿病大鼠心肌代谢的影响
目的 观察外源性给予Apelin-13对糖尿病大鼠心肌细胞代谢的影响. 方法 40只雄性Wister大鼠随机分成对照组8只,实验组32只.实验组通过高糖高脂饮食联合小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建2型糖尿病大鼠模型.造模成功的糖尿病大鼠随机分成糖尿病模型组14只,Apelin-13给药组14只.给药组给予Apelin-13 0.1 μmol·kg-1·d-1腹腔注射,对照组和糖尿病模型组给予0.9％氯化钠溶液等体积腹腔注射,连续给药10周.10周末,测定大鼠空腹血糖后取材.酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清、心肌游离脂肪酸(FFA),免疫组化法比较各组大鼠心肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达,实时荧光定量PCR检测心肌组织中过氧化物酶体增生物激活体-α(PPARα)、脂肪酸转运蛋白CD36、肉碱脂酰转移酶-1(CPT-1)等基因mRNA的表达. 结果 糖尿病模型组大鼠空腹血糖、血清FFA、心肌FFA水平升高(均P＜0.05),给予Apelin-13干预后,大鼠空腹血糖、心肌FFA水平较模型组下降,血清FFA水平下降不明显.糖尿病模型组和Apelin-13给药组心肌细胞PPARα、CD36、CPT-1 mRNA的基因相对表达水平较对照组升高(P＜0.05),经Apelin-13治疗后,给药组心肌细胞PPARα、CD36、CPT-1 mRNA的基因相对表达水平较糖尿病模型组下降(P＜0.05).心肌细胞GLUT4表达在糖尿病模型组(1.138±0.316)和Apelin-13给药组(4.631±1.832)较对照组(9.132±2.156)下降(F=65.507,P＜0.05),Apelin-13给药组较糖尿病模型组表达升高(P＜0.05). 结论 Apelin 13增加心肌葡萄糖转运蛋白4表达,增加游离脂肪酸的利用,同时能够有效地降低PPARα、CD36、CPT-1的表达,在一定程度上改善糖尿病大鼠心肌代谢.
-
2型糖尿病血清Apelin-13的变化水平与骨质疏松症的关系
目的 探讨血清Apelin-13的水平与骨密度(bone mineral density,BMD)等指标的关系,确定Apelin-13对2型糖尿病患者骨质疏松症的影响.方法 纳入2015年1月至2017年9月在我院就诊的152例2型糖尿病患者,将患者分为3组,其中骨质疏松组38例,骨量减少组50例,正常组64例.记录所有患者的临床资料,包括年龄、性别、身高、体重、体质量指数和疾病持续时间.收集血液样品用于测量Apelin-13、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen type-ⅠN propeptide,PINP)、Ⅰ型胶原羧基端肽(pyridinoline cross-linked carboxyterminal telopeptide of typeⅠcollagen,ICTP),并用双能X线吸收扫描仪测量患者的BMD.结果 Apelin-13水平在骨质疏松组明显低于骨量减少组和正常组(P<0.05),骨量减少组明显低于正常组(P<0.05).相关分析显示,Apelin-13水平与BMD和PINP呈正相关(P<0.05),与年龄、ICTP呈负相关(P<0.05).结论 本研究表明Apelin-13和BMD、ICTP与PINP之间存在密切关系.
-
Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响
目的 探讨apelin-13蛋白在体外对5-氮胞苷(5-Aza)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)向心肌细胞分化的影响.方法 采用组织块贴壁法培养hUC-MSCs,胰酶消化传代；取P2代细胞置于不同分化条件的培养液中分化培养14d,实验分为A、B、C、D组(apelin-13浓度分别为0、1×10-6、2×10-6和10×10-6mol/L),各组培养基中5-Aza浓度均为10×10-6mol/L.采用流式细胞仪检测hUC-MSCs表面免疫标记,MTT法检测细胞在570nm处的吸光度(A)值,RT-PCR检测肌钙蛋白T(cTnT)、GATA-4 mRNA表达水平,免疫组织化学染色法检测心肌细胞表面标志物cTnT的表达.结果 流式细胞仪鉴定结果表明,hUC-MSCs表达CD44、CD90、CD105、CD73、经典人类白细胞抗原Ⅰ类抗原(HLA-ABC),不表达CD34、CD45、经典人类白细胞抗原Ⅱ类抗原(HLA-DR).MTT检测显示,0、10×10-6mol/L apelin-13处理的hUC-MSCs在570nm处的A值分别为0.841 ±0.290、0.875±0.325,差异无统计学意义(P＞0.05).B、C、D组cTnTmRNA表达水平分别是A组的2.09±1.35、5.24±1.30、1.17±0.63倍,B、C、D组GATA-4 mRNA表达水平分别是A组的2.68±1.18、4.82±0.14、2.14±0.27倍；C组与B、D组比较,cTnT、GATA-4 mRNA表达差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色显示,诱导14d后C组细胞cTnT蛋白表达呈阳性.结论 10×10-6m01/L apelin-13对hUC-MSCs无毒性作用,一定浓度的apelin-13蛋白可增强5-Aza诱导hUC-MSCs向心肌细胞分化的效率,浓度为2×10-6mol/L时增强作用明显.
-
Apelin-13对压力超负荷大鼠心肌纤维化及TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白内源性配体-13(Apelin-13)对压力超负荷大鼠心肌纤维化的影响,探讨其可能的影响机制.方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(AOB组)、Apelin-13组、阻断剂组(SB431542组).假手术组游离但不结扎腹主动脉,其余3组于左肾动脉上方0.5 cm处行腹主动脉缩窄术建立压力超负荷模型,3d后各组给予相应药物干预.4周后取材,计算大鼠心脏指数(H/B)和左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI);Masson染色光镜下观察心肌组织形态学改变,测算心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);ELISA法测定血清转化生长因子-β 1(transforming growth factor-β 1,TGF-β1)浓度;Western-blotting检测TGF-β 1及Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维的蛋白表达量;RT-PCR检测心肌组织Smad3 mRNA、Smad7 mRNA的表达水平.结果 与Sham组相比,AOB组大鼠H/B、LVMI、CVF、血清TGF-β1均明显升高(P＜0.05),心肌组织TGF-β1、Ⅰ型胶原纤维、Ⅲ型胶原纤维及Smad3mRNA表达水平亦显著升高(P＜0.05);与AOB组相比,Apelin-13和SB431542干预组上述指标均明显下调(P＜0.05).Smad7 mRNA在各组间的表达呈相反趋势.结论 Apelin-13可通过部分抑制TGF-β1/Smads通路以减轻压力超负荷大鼠心肌纤维化.
-
内源活性肽Apelin-13对高血压大鼠心肌纤维化的影响及机制
目的：探讨内源性活性肽Apelin-13对高血压大鼠心肌纤维化(myocardial fibrosis，MF)的影响并初步探讨其机制。方法将40只8周龄雄性SD大鼠随机分组，对其中32只大鼠施行腹主动脉狭窄(abdominal aorta coarctation，AAC)术，8只施行假手术，将造模后成活的大鼠随机分成模型组、Apelin-13组(10μg/kg)，缬沙坦(valsartan，VST)组[5 mg/(kg·d)]。观察Apelin-13对高血压大鼠心脏功能及血流动力学指标的影响；ELISA法测定血清Ang(1-7)、AngⅡ的浓度；Western观察大鼠心肌转化生长因子β1(transforming growth factor beat 1，TGF-β1)、组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase， TIMP)、血浆纤溶酶原激活抑制剂-1(plasminogen activator onhibitor，PAI-1)、金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2， MMP-2)的表达水平；HE和Masson染色观察心肌组织胶原沉积情况，图像分析测量心肌组织胶原容积分数(collagen volume fraction，CVF)。结果心功能AAC组较假手术组、Apelin-13组、VST组明显降低(P＜0.05)，VST组较Apelin组减低(P＜0.05)。血清Ang-(1-7) AAC组较药物治疗组降低，Ang(Ⅱ)增加(P＜0.05)，Apelin组与VST组差异无统计学意义(P＞0.05)。Apelin-13组、VST组和AAC组中CVF及蛋白TIPM-1、TGF-β1、PAI-1的表达高于假手术组(P＜0.05)，且两种药物治疗组明显低于AAC组，Apelin-13组低于VST组(P＜0.05)，而MMP-2蛋白的表达低于假手术组。结论 Apelin-13可能通过抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统，进而抑制TGF-β1、PAI-1、TIMP-1和增加MMP-2的表达以改善高血压心肌纤维化。
-
Apelin-13侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究
目的 研究Apelin-13侧脑室注射对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制.方法 侧脑室埋管后,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,脑缺血2h后侧脑室注射给药.再灌注24 h后进行Zea-Longa神经功能评分;TTC染色法测定大鼠脑梗死面积;试剂盒测定大鼠脑组织内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性;Western blot法测大鼠脑组织Bcl-2、Bax和Caspase-3三种蛋白的表达水平.结果 Apelin-13(1.0 μg·kg-1)侧脑室给药能改善大脑的神经功能,减少脑缺血面积,降低iNOS活性,增加GSH-PX活性,增加Bcl-2的表达,减少Bax和Caspase-3的表达.结论 Apelin-13对缺血再灌注脑组织保护的可能机制包括降低NO水平,加强自由基清除,以及调节凋亡相关蛋白表达.
-
Apelin-13对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠脑组织脑源性神经营养因子及受体表达的影响
目的 观察Apelin-13对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠缺血区皮层脑源性神经营养因子(BDNF)和及其受体酪氨酸激酶B (TrkB)表达的影响.方法 采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血-再灌注损伤模型.SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和Apelin-13(0.1、1.0和10.0 μg/kg)处理组.缺血-再灌注损伤大鼠在缺血2h后再灌注24h,Apelin-13在再灌注前15 min进行侧脑室注射.采用实时定量PCR和Western blot检测BDNF和TrkB mRNA和蛋白的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑梗死侧皮层BDNF和TrkB mRNA和蛋白的表达显著性增加,BDNF mRNA相对表达量分别为(100.00±0.00)％和(138.54±7.63)％;TrkB mRNA相对表达量分别为(100.00±0.00)％和(121.74±8.73)％.BDNF蛋白相对表达量分别为(0.25±0.04)和(0.38±0.05);TrkB蛋白相对表达量分别为(0.23±0.03)和(0.36±0.04),差异均有统计学意义(t=9.45、10.79、10.37、8.76,均P＜0.05).与模型组比较,1.0和10.0 μg/kg Apelin-13处理组大鼠脑梗死侧皮层BDNF和TrkB的表达均显著性增加,BDNF mRNA相对表达量分别为(138.54±7.63)％、(158.69±11.37)％和(189.31±13.74)％;TrkB mRNA相对表达量分别为(121.74±8.73)％、(149.25±9.46)％和(166.41±13.74)％.BDNF蛋白相对表达量分别为(0.38±0.05)、(0.57±0.06)和(0.71±0.08);TrkB蛋白相对表达量分别为(0.36±0.04)、(0.51±0.07)和(0.68±0.07),呈浓度依赖性,差异均有统计学意义(F=8.84、11.12、9.72、10.48,均P＜0.05).结论 Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与上调BDNF及受体TrkB的表达有关.
-
血清Apelin-13预测功能性心肌缺血的价值
目的 探讨血清Apelin-13对功能性心肌缺血患者的诊断价值.方法 共纳入77例冠状动脉造影证实为冠状动脉临界病变患者,根据心肌血流储备分数(FFR)值将患者分为FFR＜0.80组(n=36)和FFR＞0.80组(n=41).检测所有患者入院24h内血清Apelin-13水平,比较两组患者Apelin-13值的差异性,判断其诊断功能性心肌缺血的临床价值.结果 血清Apelin-13水平值在两组患者中有明显差异[(31.822±6.703)ng/ml比(45.163±5.071)ng/ml,P＜0.01].ROC曲线分析提示,血清Apelin-13水平值在38.275 ng/ml时,预测FFR＜0.80的敏感度和特异度均为94.4％,曲线下面积0.94[95％可信区间(CI)0.870～1.007].结论 低血清Apelin-13水平与功能性心肌缺血患者相关,有一定的诊断价值.
-
Apelin-13对脑缺血再灌注损伤作用的初步研究
目的：研究Apelin-13对缺血/再灌注小鼠脑损伤的作用，并初步探讨其对自噬性细胞死亡的影响。方法：取健康雄性CD-1小鼠，随机分为假手术（sham）组、生理盐水（Saline）组、Apelin组；Apelin组和Saline组首先建立脑缺血再灌注（MCAO/R）模型，再灌注即刻给予同侧侧脑室注射Apelin-13或等量生理盐水，然后在再灌注48 h后，进行神经功能方面检测，同时利用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色评估脑梗死体积；缺血再灌注24 h和48 h后，采用West-blot法检测各组自噬相关蛋白LC3的表达情况。结果：Apelin-13可显著降低小鼠脑缺血再灌注后神经功能缺损症状，减少脑梗死体积，减低自噬相关蛋白LC3的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值。结论：Apelin-13对小鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用，抑制神经细胞的自噬性死亡可能是其作用机制之一。
关键词： Apelin-13 脑缺血再灌注模型(MCAO/R) 自噬 LC3 -
apelin-13侧脑室注射对脂多糖诱导小鼠发热的缓解作用
目的 探讨侧脑室注射apelin-13对小鼠体温的作用及对脂多糖诱导小鼠发热的解热作用.方法 小鼠随机分为对照组,脂多糖50、150 ng组,apelin-13 3、10 nmol组,脂多糖150 ng+apelin-13 3 nmol组和脂多糖150 ng+apelin-13 10 nmol组.药物或生理盐水以10 μL/min的恒定速度侧脑室注射,注射体积为4uL.给药后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 h分别监测记录各组小鼠的体温,计算各组小鼠在各时间点体温的变化.根据实验结果绘制温度变化曲线,并计算出曲线下面积(area under the curve,AUC).结果 与对照组比较,脂多糖150 ng组温度均显著升高(P＜0.05),引起发热效果明显,因此选择注射150 ng脂多糖作为模型组.侧脑室单独注射3、10 nmol apelin-13对小鼠温度变化没有明显影响.侧脑室注射3 nmol apelin-13在1.5h降低150 ng脂多糖引起的发热(P＜0.05);而10 nmol apelin-13在1.5、2.0、3.0h均降低150ng脂多糖引起的发热(P＜0.05).与脂多糖150 ng组比较,脂多糖150 ng+apelin-13 10 nmol组体温AUC显著减少(P＜0.05);脂多糖150 ng+apelin-13 3 nmol组体温AUC虽然减少,但是并不具有显著性差异.结论 中枢apelin-13对小鼠的体温没有影响,但侧脑室注射10 nmol apelin-13能够明显降低脂多糖引起的小鼠体温升高,具有缓解脂多糖诱导的小鼠发热作用.
-
Apelin-13促进脐带华通胶间充质干细胞分化成血管网
目的：探索apelin-13对干细胞定向血管网分化的调控作用。方法采用组织块贴壁法从人脐带华通胶组织中分离间充质干细胞，流式细胞仪检测其免疫表型。取第3代人华通胶间充质干细胞，分别接种于4个培养瓶中，记为A1、A2、A3、A4组，用诱导液诱导7 d，每天向4组中分别加入浓度0、1×10－6、10×10－6、100×10－6 mol/L的apelin-1320μL，倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况，并对其进行血管性血友病因子（vWF）抗体免疫荧光染色及CD31流式细胞学鉴定。使用水凝胶的三维培养基对诱导后的内皮细胞进行培养，并按照原A1、A2、A3、A4组的顺序重新依次编号为S1、S2、S3、S4组。每天分别向S1、S2、S3、S4组中加入浓度0、1×10－6、10×10－6、100×10－6 mol/L的apelin-1320μL。7 d后倒置显微镜下观察细胞的形态、生长情况及在三维培养基中形成血管样结构情况。结果人华通胶间充质干细胞可以诱导分化为vWF免疫荧光染色阳性的内皮样细胞。随着apelin-13蛋白浓度的增加，CD31阳性表达率也随之升高。显微镜下观察到内皮样细胞在水凝胶的三维培养基中能够形成血管样结构。结论证实apelin-13参与并调控人脐带华通胶间充质干细胞分化形成血管网。
