无明胶布氏菌活疫苗冻干稳定剂的筛选

目的：为皮上划痕人用布氏菌活疫苗筛选存活率高、无明胶冻干稳定剂。方法以冻干活菌存活率为指标，对甘油、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、乳糖、谷氨酸钠、甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和硫脲等10种稳定剂通过单因素筛选法，筛选出冻干存活率高的4种单因素稳定剂成分；将4种单因素稳定剂成分进行正交试验优化，筛选出优稳定剂组合。结果单因素试验结果显示，甘油、葡萄糖、谷氨酸钠和硫脲4种稳定剂成分冻干后活菌存活率较高，对布氏菌活疫苗具有良好保护效果。通过正交试验筛选出优稳定剂配方中四组分的质量分数分别为甘油1.5%、葡萄糖5%、硫脲1.5%、谷氨酸钠1.0%，该配方的冻干存活率可达81.5%。结论无明胶冻干稳定剂对布氏菌活疫苗具有较好的保护作用。

I型干扰素免疫应答作用机制研究进展

I型干扰素( IFN-Ⅰ)是机体固有免疫应答的一类重要的细胞因子，具有广谱的抗病毒及抗肿瘤等作用。近年来IFN-Ⅰ成为病毒学、疫苗学及肿瘤学等研究的热点，对干扰素诱导基因( ISGs)的功能研究进一步揭示了其抗病毒以及抗肿瘤的作用机制。麻疹病毒、流感病毒和肠道病毒71型等病毒均可通过与IFN-Ⅰ或其上、下游调节因子结合阻断IFN-Ⅰ信号通路，从而逃逸IFN-Ⅰ的抗病毒作用，这对病毒性疾病的防治是新的挑战。近期研究发现IFN-Ⅰ是疫苗诱导抗体产生的必要信号，同时参与调节T、B细胞的活化过程，在免疫应答过程中发挥关键作用。对IFN-Ⅰ免疫应答作用机制研究进行了综述。

聊城市2004-2013年流行性乙型脑炎流行病学特征分析

目的：分析2004-2013年聊城市流行性乙型脑炎(简称乙脑)流行病学特征,为预防控制乙脑策略提供流行病学参考依据。方法收集中国疾病预防控制信息系统2004-2013年聊城市乙脑报告病例信息,采用描述流行病学方法分析其流行病学特征。结果聊城市2004-2013年共报告乙脑病例232例,平均年发病率为0.40/10万,其中2013年发病率达到1.34/10万；95.69%的病例集中在8-10月,9月份为发病高峰；年平均发病率居前3位的为临清市、东昌府区和高唐县；病例主要集中在15岁以下(123例),占总病例数的53.02%；2006年以来≥15岁病例所占比例(46.98%)呈逐渐增加趋势；职业分布以农民(36.64%)、散居儿童(28.45%)、学生(22.41%)为主。结论聊城市乙脑发病总体呈下降趋势,但2013年呈高水平流行,威胁依然存在,预防控制策略应采取以接种疫苗为主的综合措施。乙脑发病年龄明显后移,建议结合发病情况制定成人乙脑防控策略。

梅毒螺旋体遗传物质和致病机制的研究进展

梅毒螺旋体( Treponema pallidum,Tp)是慢性全身性性传播疾病梅毒的病原体。由于Tp不能持续体外培养,阻碍了对Tp结构及其致病机制的深入研究。目前,Tp( Nicholes株)基因组测序的完成以及分子生物学技术的发展,为Tp的研究提供了机遇。就Tp的遗传物质和致病机制的研究进展进行综述。

细菌性肠道传染病疫苗血清学评价研究进展

对于痢疾、伤寒、副伤寒和霍乱等肠道致病菌引起的肠道传染性疾病，其感染途径相同，感染机制相似，均能诱发肠道局部黏膜免疫反应。预防上述几种传染性疾病的疫苗，传统的评价方法是分析其肠黏膜分泌型IgA抗体水平。随着对上述几种肠道传染性疾病免疫学机制以及对感染者血清抗体水平与其肠黏膜抗体水平之间关系的深入研究，评价疫苗效力的方法逐渐改为测定血清抗体。对上述几种传染性疾病的感染机制以及血清学评价方法进行了综述。

人凝血酶原复合物生产过程中凝血因子活化分析

目的：通过比较以组分Ⅲ沉淀和血浆为原料制备人凝血酶原复合物( Prothrombin complex concentrates,PCC)过程中凝血因子活化情况,为选择适PCC制备原料提供数据支持。方法分别对以组分Ⅲ沉淀和血浆为原料制备PCC过程中中间品的活化的凝血因子活性和人凝血酶活性两个项目进行检定,分析凝血因子的活化情况。观察以组分Ⅲ沉淀为原料制备PCC过程中添加肝素能否抑制PCC中凝血因子的活化。结果以组分Ⅲ沉淀为原料制备的PCC中间品活化的凝血因子活性和人凝血酶活性两个项目均不合格。以组分Ⅲ沉淀为原料制备PCC生产过程中添加肝素后,PCC中间品的活化的凝血因子活性和人凝血酶活性均不合格。以血浆为原料制备的PCC中间品活化的凝血因子活性和人凝血酶活性两个项目均合格。结论组分Ⅲ沉淀为原料制备PCC会增加凝血因子活化的风险,新鲜冰冻血浆可作为制备PCC的原料。

清远市2009-2012年疑似预防接种异常反应监测分析

目的：了解广东省清远市疑似预防接种异常反应( AEFI)的发生特征，评价AEFI信息管理系统运转情况及预防接种安全性。方法采用描述流行病学方法对清远市2009-2012年报告的 AEFI 数据进行统计分析。结果2009-2012年清远市共报告AEFI 553例，年均发生率为7.6/10万，以一般反应为主(72.33%)；AEFI监测县区覆盖率、48 h内及时报告率和调查率、个案调查表完整率等运转指标均明显提高；发生时间以3、9、11月份居多(占40.87%)，人群以≤2岁婴幼儿为主(占60.58%)，接种后1 d内发生AEFI占85.90%；发生率较高的疫苗主要为23价肺炎球菌多糖疫苗、甲型H1N1流感病毒裂解疫苗、b 型流感嗜血杆菌结合疫苗、麻疹风疹联合减毒活疫苗、吸附白破联合疫苗、吸附百白破联合疫苗(占46.84%)。结论清远市AEFI集中在小年龄组及接种早期。疫苗的安全性和预防接种服务质量良好。 AEFI监测的完整性和敏感性逐年提高。为减少预防接种后不良事件的发生，提高AEFI监测敏感性，须进一步规范预防接种工作，提高预防接种质量，加强AEFI监测。

2010-2012年度季节性流行性感冒疫苗对6~59月龄儿童保护效果的病例对照研究

目的：评价2010-2012年度季节性流行性感冒疫苗(流感疫苗)对儿童的上市后保护效果。方法选择2010-2012年度6~59月龄的实验室诊断流感病例为病例组,在儿童预防接种信息系统中随机选择健康儿童为对照组,进行1∶2匹配的病例对照研究,采用条件Logistic回归计算保护效果。结果研究中共纳入1255组研究对象。2010-2011和2011-2012年度,流感疫苗对6~59月龄儿童完全免疫的保护效果分别为73.2%(95%可信限(CI)：52.2~85.0)和52.9%(95%CI：42.1~61.7),对6~35月龄儿童的保护效果优于36~59月龄儿童,完全免疫的保护效果优于部分免疫。流感疫苗的保护效果从1~3月的68.9%(95%CI：57.5~77.2)衰减至4~6月的48.4%(95% CI,33.8~59.7)。结论流感疫苗对6~59月龄儿童具有一定的保护效果,儿童接种疫苗后可以减少52.9%~73.2%的流感病例,建议儿童每年及时进行全程免疫。

白喉毒素无毒突变体CRM197基因的克隆与表达

目的：构建白喉毒素(Diphtheria toxin)无毒突变体CRM197(Cross-reacting materials 197)的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法以白喉杆菌(ATCC39255)基因组DNA为模版,采用聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction, PCR)扩增 CRM197基因,插入表达载体 pET11b 中,构建重组原核表达质粒 pET11b-CRM197。经双酶切及测序鉴定正确后,重组质粒被转化入大肠杆菌Rosetta 2(DE3) pLysS, IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,结果表明与预期一致；表达的重组蛋白相对分子质量约58000,并可与鼠抗CRM197单克隆抗体特异性结合。结论已成功构建了重组原核表达载体pET11b-CRM197,重组的CRM197蛋白在大肠杆菌中得到了表达,为以该重组突变体作蛋白载体制备结合疫苗奠定了基础。

脑膜炎球菌疫苗血清学评价的相关研究进展

研究证明，脑膜炎球菌荚膜多糖、多糖蛋白结合物以及外膜蛋白等物质都能够诱导产生抗体，帮助保护机体抵御脑膜炎球菌疾病。阐述了脑膜炎球菌疫苗研制过程中特异性抗体的检测方法以及在疫苗效果评价中的意义，指出在脑膜炎球菌疫苗的效果评价中，抗体含量以及功能性抗体活性的检测是重要指标，为疫苗的市场应用提供了依据。

PolyI∶C联合BCG-CpG复合佐剂对结核亚单位疫苗免疫效果的影响

目的：探讨聚肌胞苷酸(Poly I ∶ C)联合BCG-CpG复合佐剂(BCG-CpG-DNA+Al,简称BC02)对结核亚单位疫苗的免疫效果是否有增强作用。方法 BALB/c小鼠分成5组,3组分别免疫含有不同剂量poly I ∶ C (10、25、50μg/剂)的结核亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)3针,间隔10 d；2组分别免疫 PBS或(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02作为对照。末次免疫后第7 d,分离脾淋巴细胞,进行抗原特异性的IFN-γ ELISPOT检测、ELISA检测和淋巴细胞增殖检测以评价细胞免疫应答。豚鼠分成4组,1组免疫含有50μg poly I ∶ C/剂的新亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)3针,间隔10 d；3组分别免疫(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02疫苗、生理盐水和BCG作为对照。末次免疫30 d后,每只豚鼠皮下攻击250 CFU结核分枝杆菌。41 d后,解剖豚鼠,进行肝、脾、肺脏器综合病变评分和脾菌计数以评价保护力。结果含不同剂量poly I ∶ C的( Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞分别经Ag85b和ESAT6-CFP10多肽刺激后,分泌IFN-γ的抗原特异性T细胞频数、IFN-γ分泌量和细胞增殖指数均较(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02)组大幅度提高,且应答强度与poly I ∶ C呈现较为明显的量效关系。(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)组豚鼠脏器综合病变指数(27.5±20.4)和脾菌分离数[(4.22±0.59) log10 CFU]均低于(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02组[35.8±27.3,(5.19±0.66) log10 CFU],其中脾菌分离数的差异有显著统计学意义(P=0.0030)。结论 Poly I ∶ C佐剂对结核亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02诱导的细胞免疫应答和抗结核保护力均有一定的增强效果。

汉坦病毒感染对Ⅰ型干扰素应答的调节机制

汉坦病毒主要感染人内皮细胞，细胞在病毒感染早期诱导生成的Ⅰ型干扰素( IFN-Ⅰ)可阻断汉坦病毒的复制，但不同的病毒蛋白和不同型别的汉坦病毒在IFN应答的调节机制上可能有所不同。就汉坦病毒感染对IFN应答的调节机制进行了综述。

口服结核Ag85 A-CD226 DNA疫苗在小鼠脾与肠道的表达水平检测

目的：了解结核 Ag85A-CD226 DNA 疫苗经灌胃方式接种小鼠后在脾淋巴细胞与肠道的表达情况。方法将构建的pcDNA3.1-Ag85A-CD226、pcDNA3.1-Ag85A和pcDNA3.1-CD226真核表达质粒转化DH5α感受态大肠杆菌,扩增并提取纯化质粒,用脂质体包裹制成DNA疫苗。经灌胃方式将制备的DNA疫苗接种C57BL/6小鼠,设置Ag85A-CD226疫苗组、Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组。采用间接免疫荧光法检测Ag85A和CD226在肠道的表达。采用流式细胞术检测脾CD4+T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的CD226表达。结果 CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD4+T细胞和NK细胞的表达均明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)；CD226在Ag85A-CD226疫苗组脾脏CD8+T细胞的表达明显强于Ag85A疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),与CD226疫苗组相比虽有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。 CD226在Ag85A-CD226疫苗组小肠派氏淋巴结表达明显强于Ag85A疫苗组、CD226疫苗组、pcDNA3.1质粒组和生理盐水对照组,差异具有统计学意义( P<0.01)。 Ag85A只在Ag85A-CD226疫苗组和CD226疫苗组小肠固有层表达,且在Ag85A-CD226疫苗组的表达明显强于CD226疫苗组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 Ag85A-CD226 DNA疫苗接种后,CD226在脾淋巴细胞和肠道表达增强,Ag85A 在肠道表达增强,CD226的表达增加会增强Ag85A在肠道的表达水平。

肠道病毒EV71 IgM抗体参考品的建立

目的：建立肠道病毒EV71 IgM抗体检测用参考血清盘。方法通过收集手足口病感染早期患者的咽拭子和血清，对咽拭子病毒进行分离、鉴定、基因分型，通过血清中和试验及酶联免疫吸附试验(捕获法)的验证，确定EV71 IgM抗体阳性样品，组建EV71 IgM抗体参考血清盘，并经3家实验室对该参考血清盘进行协同标定和确认。结果12名患儿的咽拭子中均分离到EV71病毒，在RD细胞上引起细胞病变。通过套式PCR扩增、序列测定后进化树分析确认均为流行的C4基因亚型。每名患儿的双份血清均可中和EV71病毒，抗体效价为1∶512~1∶2048。通过捕获法进行EV71 IgM抗体检测结果均为阳性。以此12份样品为原料制备EV71 IgM抗体阳性参考品，同时以12份EV71 IgM抗体阴性血清制备阴性参考品，建立了由12份阳性参考品、12份阴性参考品、1份低检出限参考品和1份精密性参考品组成的肠道病毒EV71 IgM抗体参考血清盘。通过3家实验室协同标定，各实验室间差异均无统计学意义。结论建立了EV71 IgM抗体检测参考血清盘，为相关检测试剂的质量控制和评价提供了参考标准。

黄病毒属病毒E蛋白结构和功能研究进展

黄病毒属病毒是单股正链RNA病毒，病毒基因组编码至少三种结构蛋白(衣壳蛋白C、膜蛋白M和包膜蛋白E)和七种非结构蛋白。其中E蛋白是病毒的重要抗原成分，包含有中和抗原表位和型特异性抗原表位，决定了病毒的细胞嗜性和毒力，与病毒的吸附、穿入、致病等作用密切相关，并且具有血凝活性，能刺激机体产生中和抗体和血凝抑制抗体。研究E蛋白的结构与功能对于深入了解黄病毒致病机制和免疫应答特点，研发疫苗和特异性抗病毒药物均有重要的指导意义。为此，综述了近年来黄病毒E蛋白有关结构与功能的研究进展及其生物学意义。

用基于狂犬病病毒的疫苗感染和激活B细胞

复制缺陷型狂犬病毒( RABV)可快速和有效激发在小鼠体内由T细胞依赖和非T细胞依赖机制产生的病毒中和抗体滴度,因此有望用于研制狂犬病毒暴露后疫苗。为了促进这种早期有效的B 细胞激活,我们假设,活 RABV 研制的疫苗可直接感染B细胞,从而活化大量的抗原提呈细胞( APCs), APCs可在早期启动并且共同刺激CD4+T细胞。在本报道中,我们用活RABV研制的疫苗载体有效感染来自出生早期的小鼠和人类的B 细胞。与感染模型或用灭活RABV疫苗处理细胞相比较, B细胞感染导致了B细胞激活和抗原呈递早期标志的明显上调,包括CD69,MHC-Ⅱ,小鼠B细胞内的CD40或HLD-DR,人体B细胞内的CD40。此外,原始B细胞感染活RABV后,表达的卵清蛋白可以早刺激初始CD4+OT-Ⅱ T细胞使其激增并分泌IL-2,说明B细胞被活RABV疫苗载体感染和激活的功能结果。我们认为这种可直接刺激B细胞的活RABV疫苗是通过诱导早期保护性T细胞依赖性B 细胞应答而起作用的,设计活的RABV疫苗去感染和激活B细胞,研制单剂狂犬病毒暴露后疫苗是一种前景很好的发展策略,这种疫苗产生的早期保护性抗体滴度是很重要的。

常规接种卡介苗（BCG）引起免疫应答的非特异效应

BCG是世界范围内常接种的疫苗之一,它除了对结核病( TB )有预防作用外,研究表明,接种BCG还具有许多额外、有益的非特异性免疫效应,包括在高死亡地区降低由非TB引起的婴儿和儿童的整体死亡率。接种BCG引起的抗体应答,为研究BCG影响非相关抗原引起的免疫应答提供了机会。本研究比较了常规接种对已接种BCG和没有接种BCG的婴儿的抗体应答水平的影响。已接种BCG的婴儿来自于出生后就接种BCG的相关研究组,没接种BCG的婴儿来自于接种门诊。所有婴儿依澳大利亚国家免疫计划接受BCG常规接种。后一组婴儿免疫接种后(6个月),对抗肺炎链球菌抗体( anti-Pn Ps )、抗 B 型流感嗜血杆菌抗体( anti-Hib)、抗破伤风类毒素抗体( anti-TT)和抗乙肝表面抗原抗体( anti-HBs)进行了为期4周的检测。总共有127位父母同意他们的婴儿参加本次研究,有108位进行了后的分析(其中56位已接种BCG,52位没接种BCG),结果发现,已接种BCG的一组,其anti-Pn Ps IgG(针对所有血清型)、anti-Hib IgG和anti-TT IgG的几何平均浓度( GMC )高于没有接种BCG的一组。对于血清型9V (P<0.01)和18C ( P=0.04),其差异具有统计学意义。而 anti-HBs IgG,比较几何平均浓度( GMC),发现已接种BCG的一组要低于没有接种BCG的一组( P=0.03)。两组中大多数婴儿的抗体水平高于保护值。刚出生的婴儿接种BCG影响后来常规接种的抗体应答。本研究为资源匮乏的国家引入肺炎结合疫苗和新型结核病疫苗提供重要启示。

肺炎球菌表面蛋白A不影响小鼠对百白破疫苗的免疫应答

肺炎球菌表面蛋白A( PspA)是一种抗肺炎链球菌的构成蛋白疫苗的很有希望的候选物。之前我们已经表明,全细胞百日咳疫苗( wP )对于PspA是一种很好的佐剂,在小鼠中诱导抗肺炎球菌感染的保护性应答。在巴西, wP 与白喉、破伤风类毒素( DTPw)及氢氧化铝(明矾)佐剂一起施用于儿童。在小鼠中P spA5-DTP 。的单一皮下注射剂量(配方包含得自进化支5的PspA和新一代DTPw,并含有低剂量的百日咳杆菌脂多糖和明矾)诱导高水平的全身P spA5抗体,并针对两种不同的呼吸道致命性肺炎球菌菌株攻击提供保护。在这里,我们评估针对了小鼠接种P spA5-DTP 。后对P spA5的黏膜免疫应答,以及对 DTP 抗原的免疫应答。 P spA5-DTP 。于小鼠皮下免疫,在呼吸道中诱导了高水平的抗-PspA5 IgG而不是IgA。另外观察到,接种后小鼠与对照组小鼠在受到攻击后,细胞涌入呼吸道黏膜的情况没有差异。接种DTP 。或P spA5-DTP 。的小鼠中循环的抗百日咳、抗破伤风和抗白喉抗体的水平是等价的。 DTP 。和 P spA5-DTP 。诱导的抗体在中和Vero细胞中白喉毒素的细胞毒时显示出相似的能力。此外,与P spA5组合丝毫不影响小鼠对百日咳杆菌和破伤风毒素的预防。我们的研究结果支持联合P spA-DTP疫苗的方案。

I期随机非盲临床试验评估肠病毒EV71疫苗的安全和免疫原性

背景；亚太地区已经暴发了大规模的EV71病毒感染。该病毒感染有严重的并发症，包括脑炎和脊髓灰质炎样麻痹，心肺衰竭等，终导致死亡。因此迫切需要一个有效的针对EV71病毒的疫苗。

19月龄儿童再次接种卡介苗的免疫学效果

背景：卡介苗诱导重要的非特异性免疫效应，在几内亚比索进行了随机临床试验，卡介苗再次接种是与入学前接种百白破联合疫苗的幼儿和没有补充微量营养素( MN )的幼儿显著增加的存活率相关。在该项试验中，卡介苗再接种与那些未接受营养补充的儿童的明显地提高了活存率相关联。在这项试验中，作者对卡介苗再接种的效果作了评估。

加单磷酰类脂A佐剂的呼吸道合胞病毒病毒体疫苗的效力与安全性

在婴儿以及免疫功能低下的成人和老人中，呼吸道合胞病毒感染仍然是一个严重的健康问题，没有有效的可利用的疫苗的原因是由于存在一些障碍：非复制性呼吸道合胞病毒疫苗可引起过度的Th2型应答，增强了疫苗接种者自然感染呼吸道合胞病毒而引起的呼吸系统疾病。作者以前发现含有Toll样受体4配体单磷酰类脂A的重组呼吸道合胞病毒病毒体可加强疫苗诱导的免疫应答，并且使免疫应答倾向于Th1型应答，也就不会引起呼吸系统疾病，由于黏膜免疫接种是诱导呼吸道合胞病毒特异性的全身与黏膜抗体应答的有吸引力的方法，并且TLR配体可以增强这种应答，作者通过鼻内接种途径免疫小鼠和棉鼠研究了含有单磷酰类脂A的呼吸道合胞病毒病毒体疫苗的有效性和安全性。在小鼠中发现在鼻内投递加有单磷酰类脂A的呼吸道合胞病毒病毒体后提高了全身性IgG抗体和局部分泌性IgA抗体的水平，并且使活病毒攻击后肺部的病毒滴度明显降低。此外，与福尔马林灭活的呼吸道合胞病毒疫苗诱导的应答比较，上述病毒体疫苗诱导的应答更加倾向于Th1型应答。上述加有佐剂的呼吸道合胞病毒病毒体诱导的抗体应答以及Th1/Th2细胞因子应答同活的呼吸道合胞病毒感染所致应答是可比拟的。福尔马林灭活的呼吸道合胞病毒诱导的血清IgG在攻击时可抑制病毒释放，同时该疫苗诱导倾向于Th2型免疫应答。在棉鼠模型中，病毒体疫苗加单磷酰类脂A免疫时观察到类似的全身性抗体应答和抑制肺部病毒的释放，但黏膜分泌性IgA应答只有小幅度加强。重要的是，用病毒体加佐剂单磷酰类脂A进行鼻腔免疫与活病毒感染一样，没有导致接种疫苗的动物在活病毒攻击时引发呼吸系统病症的任何征象，而在其他方面可比的条件下，肌肉注射福马林灭活的呼吸道合胞病毒疫苗会诱发严重的肺部免疫病理学改变。总之，这些资料表明，黏膜投递呼吸道合胞病毒病毒体加单磷酰类脂A佐剂有望成为抵御呼吸道合胞病毒的一种安全有效的疫苗。

重组伴侣蛋白60外膜蛋白免疫诱导抗脑膜炎奈瑟菌的杀菌抗体应答

得自脑膜炎球菌定植个体的血清以及得自脑膜炎球菌性疾病患者的血清都含有针对奈瑟球菌热休克蛋白/伴侣蛋白60( Chp60)蛋白的特异性抗体。在这项研究中，作者用含在生理盐水中的重组Chp60、与氢氧化铝吸附的Chp60、含在脂质体中的Chp60以及含在去污剂微粒中的Chp60免疫小鼠，加或者不加单磷酰类脂A 佐剂。结果表明能够诱导高度而且水平类似的(P>0.05)的抗体，这种抗体能够识别外膜上的Chp60。 FACS分析和免疫荧光试验测定表明Chp60是在脑膜炎球菌表面表达的。免疫印迹测定证实小鼠抗Chp60血清能够识别脑膜炎球菌菌体裂解物中的相对分子质量为60000的蛋白，然而，用人热休克蛋白60进行的交叉反应也能观察到这种结果。通过比较菌株的翻译蛋白序列，发现在细菌性分离物基因组序列库中脑膜炎球菌有40种不同的等位基因，其中作者选择的得自定植个体和病人的13株分离物就有另外的5种新的等位基因。通过对所有菌株的非丰腴翻译氨基酸序列进行比较，显示出在脑膜炎球菌Chp60蛋白之间有≥97%的同一性，在作者测定的13株菌株中，这种蛋白以高度的和类似的水平进行表达。抗同源性菌株MC58的杀菌性抗体(平均交互滴度32~64)则由接种含在脂质体中的Chp60、含在去污剂微粒中的Chp60以及吸附于氢氧化铝的Chp60而诱导出来。杀伤活性也受到加入单磷酰类脂A 以及所采用的投递配方的影响。抗 Chp60抗血清的生物学活性不能明显地延伸到异源性脑膜炎球菌菌株。因此，为了提供广谱的覆盖率，基于Chp60的疫苗还需鉴定多种蛋白和特异性杀菌性表位。

婴幼儿初免和加强免疫接种四价脑膜炎球菌蛋白结合疫苗后B淋巴细胞应答

四价脑膜炎球菌多糖-CRM197蛋白结合疫苗对婴幼儿有免疫效果。我们评估了婴幼儿初免和加强免疫该疫苗后的记忆性B 淋巴细胞应答和抗体应答水平。5个月龄的婴幼儿初免疫苗后,有25%的婴幼儿体内可以检测到血清特异性记忆性B 淋巴细胞,69%的婴幼儿体内可检测到针对A群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度( hSBA ≥4),超过95%的婴幼儿体内可以检测到针对其他群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度。12个月龄的婴幼儿在进行加强免疫前,针对 A 群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度( hSBA ≥4)检测值的比率为5%,针对其他群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度检测值的比率在44%~70%之间。而在进行加强免疫一个月后,超过50%的婴幼儿体内可以检测到记忆性B淋巴细胞,91%的婴幼儿体内可检测到针对A群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度( hSBA ≥4),超过99%的婴幼儿体内可以检测到针对其他群脑膜炎球菌的保护性抗体滴度。这些数据表明,两次初免之后抗原特异性抗荚膜记忆性B淋巴细胞数量不多。而针对C 群脑膜炎球菌荚膜多糖和CRM197蛋白等这些抗原的记忆性B淋巴细胞数量在5个月龄时多,且与12个月龄时的抗体持久性有明确但不明显的关系(P≤0.02)。尽管之前有研究表明婴幼儿在初免之后可以通过检测记忆性B 淋巴细胞数量来预测抗体持久性和记忆效应,但这可能在婴幼儿中不适用于所有抗原。

乙肝病毒样颗粒在初始树突细胞进入I类和II类MHC抗原提呈通路

病毒样颗粒( VLP s )代表了有效地引发机体免疫的病毒蛋白的高密度展示方式,由乙肝病毒外膜蛋白组成的病毒样颗粒可以诱导机体的细胞免疫和体液免疫应答。然而,研究表明乙肝病毒外膜蛋白VLP s可以破坏树突细胞的功能。作者研究了乙肝病毒外膜蛋白VLP s和树突细胞亚类的相互作用及抗原在树突细胞中通过主要组织相容性I类和II类抗原呈递途径的提呈状况。在体外试验针对 CpG的应答中,乙肝病毒外膜蛋白VLP s降低了浆细胞样树突细胞的α-干扰素的产生,但是在体内给予CpG情况下,不会损坏普通树突细胞或浆细胞样树突细胞的表型。为了评估细胞免疫应答,制造了含有卵白蛋白( OVA )模式表位的乙肝病毒外膜VLPs,OVA 抗原表位(257~264)和 OVA (323~339)分别是通过MHC I类和II类抗原呈递途径提呈的。乙肝病毒外膜蛋白VLP-OVA (157~264)在体内能被CD8+树突细胞交叉提呈,但不会被CD8-树突细胞提呈。因此,乙肝病毒外膜蛋白VLP s可在原发树突细胞和启动的细胞毒细胞以及协助性T细胞中通过MHC I和MHC II类抗原呈递途径进行提呈。

评估HP V疫苗接种在德国的长期影响

在德国,疫苗接种常务委员会( STIKO )已于2007年3月建议12~17岁的女孩接种疫苗预防致癌的HP V16/18型。我们为人乳头瘤病毒感染的自然史和传播建立了一个动态数学模型来评估接种对宫颈癌发病率和死亡率及其前期,以及肛门生殖器疣的影响。我们专注于对自然史模型各个阶段的流行病学数据进行广泛的模型校准,以及对德国宫颈癌筛查的方式具体执行。我们的模型预测：首先在未来30年中,宫颈癌的发病率和死亡率将大幅减少,这主要是由于20世纪90年代增加了筛选对象的参与而不是接种HP V疫苗,紧接着由于接种疫苗而使发病率和死亡率进一步降低。在接下来的100年里,即使疫苗接种率只有50%(正如目前在德国观察到的),HPV疫苗将预防大约37%的子宫颈癌病例。在我们的模型中考虑交叉保护效果,二价疫苗进一步减少所有宫颈癌病例约为7%,四价疫苗约5%。如果中度至高度的疫苗接种覆盖率在女孩中没有实现,男孩接种疫苗是唯一合理的。德国应该实施策略以增加HP V疫苗接种在女童中的覆盖率,从而更好地利用疫苗已经证实的益处。

温度变化触发脑膜炎奈瑟菌的免疫逃逸

脑膜炎奈瑟菌有好几种策略来逃逸补体介导的杀死作用，而这些使其有能力引起败血症和脑膜炎。这种脑膜炎球菌主要是人咽喉部的专性共栖菌，但它为什么进化了精巧的机制来逃逸宿主的免疫力尚不清楚。此文作者阐述了脑膜炎球菌免疫逃逸和对环境温度升高引起的补体增多发生抵抗的机制。作者在荚膜生物合成、H因子结合蛋白表达和脂多糖唾液酸化所需基因的5'非翻译区，鉴定了3个独立的RNA热传感物，它们是脑膜炎球菌抗免疫杀死必需的成分。因而升高的温度(发生在炎症期间)成了脑膜炎球菌的危险信号从而提高其抗人免疫杀死的防御力。病毒病原体如流感病毒的感染导致咽喉部炎症，伴随发热和征募免疫效应物。免疫防御的温度调节作用可在与其他病原体共感染期间向脑膜炎球菌提供适应力方面的益处，并会促进其他共栖微生物毒力的显现。

包含艰难梭菌毒素A和B非毒性域及鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白的重组融合蛋白疫苗

艰难梭菌是一种芽胞杆菌,可产生毒素介导性疾病。艰难梭菌表达2种主要毒力因子,即毒素A (TcdA)和毒素B(TcdB)。在人类和动物研究中结果表明,人类抗这些毒素的免疫力与抗艰难梭菌感染( CDI)明确相关,已知TcdA和TcdB的受体结合域( RBDs)是具免疫原性的。在本项研究中,我们检测了鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白( FliC )亚单位D1作为先天免疫激动剂,在小鼠模型中作为重组融合疫苗表达的靶向 TcdA 和 TcdB 的 RBDs 的免疫佐剂特性。经腹腔免疫的小鼠在血清中出现了明显的抗TcdA和抗TcdB的IgG。在能够密切体现人类疾病的CD1小鼠模型中进行了重组疫苗(加或不加佐剂)的保护效力测定。用相当于2个剂量的加有铝佐剂的类毒素A和类毒素B疫苗腹腔免疫C57 BL/6小鼠,并用艰难梭菌 VP I10463株进行经口饲攻击,结果表明,与单纯用铝佐剂免疫的小鼠比较,免疫疫苗的小鼠能够防止腹泻和死亡,2组之间差异具有显著的统计学意义(P<0.001)。这些结果证实了以蛋白为基础的靶向艰难梭菌RBDs的重组疫苗在伤寒沙门菌鞭毛的辅助下,能够在CD1小鼠模型中当用同源性菌株攻击时,能够产生高度的保护作用,应该进一步进行临床前研究。

WHO关于轮状病毒疫苗的意见书

此文介绍了轮状病毒性疾病的病原体以及单价或五价轮状病毒疫苗的免疫程序、免疫效果、安全性、成本效益和WHO对疫苗接种的建议。

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