微生物学免疫学进展杂志
Progress in Microbiology and Immunology 미생물학면역학진전
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兰州地区无偿献血人群血清TTV-DNA的检测
为了解兰州地区人群TTV的感染状况,作者采用套式PCR法,以TTV-DNA的0RF1中的一段309 nt的序列为扩增序列,对36份兰州地区无偿献血人群血清DNA进行扩增,将扩增阳性片段测序并进行序列同源性比较,结果发现兰州地区无偿献血人群TTV感染率为52.7%.10份兰州序列之间的同源性为88.6%～95.4%,兰州序列与日本TA287株的同源性为88.1%～93.3%,表明兰州地区无偿献血人群TTV感染非常普遍,兰州地区TTV流行株存在变异,至少有基因亚型存在.
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应用Vero细胞法测定重组减毒绿脓杆菌外毒素A的残余毒力
绿脓杆菌外毒素A(ETA)有ADP-核糖基转移酶的活性,在真核细胞中通过催化ADP-核糖基团从NAD+转移到EF-2(延长因子2),使蛋白质合成终止,致细胞死亡,其作用机制、机理与白喉毒素相同.本文应用Vero细胞法测定了绿脓杆菌外毒素A的毒性,发现Vero细胞对绿脓杆菌外毒素A的敏感度高达3.O×10-5mg/ml,且精密度高,准确性好,是一种有效、可行的绿脓杆菌外毒素毒力的测定方法.对3批经基因工程减毒后样品的残余毒力进行了测定,发现样品基本无细胞毒性,毒力比原毒素低2×1015倍.
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应用双抗体夹心ELISA法定量检测人源破伤风毒素单克隆抗体中的IgG含量
采用山羊抗人IgG作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG作为标记抗体,建立一种双抗体夹心法用于定量检测人源破伤风毒素单克隆抗体的IgG含量.以纯化的IgG作标准,用平行线法测得亲和层析纯化的人源破伤风毒素单克隆抗体G2的含量为O.512μg/ml,与分光光度法测得的结果基本一致.因而样品检测采用纯化G2作参考标准,制作标准曲线,测定了已知样品和未知样品的抗体含量.结果表明本法重复性好,特异性强,可定量测定培养及纯化样品中人源单克隆抗体的含量.
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甲型肝炎病毒Vero细胞适应株的选育研究
将甲肝患者粪便中分离的甲型肝炎病毒在Vero细胞中进行适应性培养,选育高滴度适应株应用于甲肝灭活疫苗研究.在Vero细胞上连续传代,测抗原滴度和感染性滴度,满意后按WHO推荐的甲型肝炎灭活疫苗规程进行灭活疫苗试制研究.经Vero细胞14次适应性传代后,病毒抗原滴度可高达1:2560,感染性滴度为8.23LogC-CID5o/ml.试制的灭活疫苗HPSEC检测在280 nm时仅有一个高峰,SDS-PAGE电泳,在22kD、26kD和33kD处有三条蛋白带,和HAV VP3、VP2和VP1的位置相同.ICR小鼠效力试验表明疫苗剂量1600 EU/ml与Merck疫苗50U效果相似.通过研究获得了Vero细胞甲肝病毒适应株YN5株,初步证明可作为甲型肝炎灭活疫苗的候选毒株.
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不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗小鼠免疫原性对比试验
试验中以小鼠为动物模型,对不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗进行免疫效果观察.3种福氏2a痢疾结合疫苗和3种宋内氏痢疾结合疫苗分别皮下免疫NIH小鼠,同时设置O-SP(O-特异性多糖)对照组,免疫3针,在不同免疫针次间采血,用ELISA测定抗体滴度.单独使用福氏2a O-SP和宋内氏O-SP免疫后,小鼠血清中几乎没有抗LPSIgG抗体产生,而用结合疫苗免疫后,小鼠血清中产生了抗LPS IgG抗体,且第二次、第三次免疫后,小鼠血清中抗LPS IgG抗体水平有显著升高,表明结合疫苗具有加强免疫应答效应.三种不同的痢疾结合疫苗相比较,F2a-O-SP-rEPA结合疫苗较F2a-O-SP-TT结合疫苗和F2a-0-SP-DT结合疫苗的小鼠抗LPS IgG抗体水平高,S-O-SP-rEPA结合疫苗较S-O-SP-TT结合疫苗和S-O-SP-CRM9,结合疫苗的小鼠抗LPS IgG抗体水平高.以rEPA作为载体的痢疾结合疫苗比DF,TT作为载体的痢疾结合疫苗的免疫原性要强.
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炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞IgG关系的研究
炭疽疫苗是预防炭疽流行和炭疽生物恐怖的重要手段.已有动物实验表明,炭疽活疫苗的保护力优于以保护性抗原为主要成份的无细胞疫苗,但两类现行疫苗都有待重新评价和改进.炭疽疫苗的效力必须用适当的实验室方法进行检测与分析才能了解其性质和细节.试验中力图探寻炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞抗体水平的关系.用"皮上划痕人用炭疽活疫苗"免疫家兔,以特定制备的炭疽芽胞抗原用ELISA法检测血清抗炭疽芽胞IgG抗体水平,并用强毒炭疽杆菌攻击进行效力试验.免疫家兔血清几何平均抗芽胞IgG滴度在免疫后一个月内持续升高,14d达到206,28d时达到776,这时其抵抗20MLD毒菌攻击的保护率为80%,符合中国生物制品规程要求的保护力.一个月后抗体水平开始下降,42d时滴度降至223.实验所揭示的炭疽减毒活疫苗诱导的家兔抗芽胞IgG抗体与抗炭疽保护力之间的关系,既为评价现行疫苗提供了资料,也为研制新型疫苗建立了参考性指标.
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不同防腐剂对绿脓杆菌菌体疫苗凝集价、免疫原性和保护力试验的影响
将甲醛、苯酚、叠氮钠、氯仿、硫柳汞、苯甲醇作防腐剂分别加入绿脓杆菌菌体疫苗中,并用本菌抗血清定期检测疫苗的滴度.在此基础上,进一步进行CMCC(B)-10118和CMCC(B)-10123疫苗的免疫原性和免疫保护性试验,结果显示,加入甲醛防腐剂的疫苗凝集滴度是稳定的,而加入硫柳汞、叠氮钠等防腐剂则有显著影响,特别是对CMCC(B)-10115和CMCC(B)-10123疫苗的影响大,凝集滴度从1:2560～1:5120降到1:20.不同防腐剂的CMCG(B)-10118和CMCC(B)-10123疫苗的家兔和小鼠试验表明,防腐剂对疫苗的免疫原性影响不大,对5LD5o剂量活菌攻击的免疫保护作用未见差别.苯酚和苯甲醇等对人体毒性小,可用作疫苗防腐剂,而对人体毒性大的甲醛适用于检定用抗原的制备.
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HIV-1跨膜蛋白gp41的截短及表达
将HIV-1跨膜蛋白gp41进行截短,在大肠杆菌中进行表达并纯化.PCR扩增gp41的部分编码基因,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用EcoR I和Sa1 I切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T3上,导入宿主细胞BL21(DE3),用IPTG诱导表达,表达产物用亲和层析进行纯化并作相应鉴定.截短的HIV-1跨膜蛋白gp41能直接在大肠杆菌内进行表达,利用亲和层析能方便地将目的蛋白进行纯化,为跨膜蛋白的进一步应用打下基础.
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重组人IFNα1c/86D/22R/27F在大肠杆菌中的表达及活性研究
利用重组PCR点突变技术将人IFNα1c/86D的第22、27位的Ser编码序列突变为Arg和Phe,DNA测序正确,并在大肠杆菌BL21中表达,表达量为19%.采用CM-Sepharose、DEAE-Sepharose FF纯化后Western Blot检测为单一条带.细胞病变抑制法测定其比活为3.51×107 U/mg,较IFN α 1b(1.55 107U/mg)略高.抗A549细胞的增殖活性与IFN α 1b相当.
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重组质粒二级结构对丙型肝炎病毒E2蛋白基因表达的影响
将含HCV/E2基因的重组质粒pUC18/HCV-E2的BamHI酶切基因片段和Nco Ⅰ+HindⅢ酶切基因片段分别克隆到原核表达载体pRSETHis中,构建两株重组HCV/E2重组表达质粒pRSET·C/E2和pRSET·A/E2.在诱导表达中pRSET·A/E2的外源基因获得了高效表达,而pRSET·C/E2的外源基因完全未得到表达.
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重组百日咳毒素S1亚单位的纯化及免疫原性
将重组百日咳毒素S1亚单位基因的质粒在DH5α和TOP10两株大肠杆菌中进行表达,并对表达产物进行了初步纯化.粗制的rS1免疫家兔所得血清,用HP-PT及1B7-PT包被的ELISA测定效价,并做被动免疫保护试验.抗PT的抗体滴度为1:32 000.该抗rS1血清在小鼠被动免疫保护试验中,对百日咳杆菌18323毒株进行脑腔攻击的被动免疫保护作用达到100%.证明rS1亚单位具有良好的抗原性和免疫原性,并与天然S1具有相同的抗原表位.
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人免疫球蛋白稳定性的两种试验方法结果比较
通过检测人免疫球蛋白制品中抗-HBs含量的变化情况,采用留样观察法和加速试验法对不同温度条件下的人免疫球蛋白有效期进行预测.结果表明,与常规留样观察法相比,加速实验法推测出的药物有效期出现一定的偏差,所以应用于人免疫球蛋白稳定性观察仅能提供参考性数据.人免疫球蛋白的有效期确定应以常规留样观察法测得的结果为可靠的依据.
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关于幽门螺杆菌疫苗及其相关性研究的报告
幽门螺杆菌感染是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素,并且与胃癌的发生有关.本文报告了幽门螺杆菌疫苗及其相关性研究的成果,包括细菌的分离培养、毒力基因分型、抗原的纯化及单克隆抗体的研制、动物模型的建立及其基因工程株的构建等.
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SARS的病理特点
SARS的病理很有特点:第①周机体动员了非特异性免疫机制,第②周病毒溶解细胞反应破坏了大量免疫细胞,迟发型变态反应引起重症患者的非心源性肺水肿,第③周病情好转后部分患者可引起肺硬变和肺心症.
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SARS冠状病毒分子病毒学特性研究概况
SARS冠状病毒是导致重症急性呼吸综合征(SARS)的病原体,是新发现的一种新型冠状病毒.近期全球众多知名实验室对SARS冠状病毒开展了多学科、全方位的研究探索.本文就SAR冠状病毒分子病毒学研究概况作一综述.
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组分疫苗研究进展
相对于全细胞疫苗,组分疫苗是以病原微生物的部分或某一特定成分为目标,通过纯化、改造而成.组分疫苗是目前疫苗开发的一个主要方向,也是疫苗研究的一个热点,本文试图通过对组分疫苗的发展历史、现状以及趋势的分析,为新疫苗的开发提供一些思考.
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生物恐怖袭击与免疫预防
生物战及生物恐怖袭击是反科学、反人类、反社会的行为,因此受到各国政府乃至全人类的反对.美国发生"9.11"事件后又继之出现炭疽生物恐怖袭击事件,全世界对之极为关注.本文对相关的基本概念,生物战及生物恐怖袭击的历史,生物武器研究现状,生物武器预防用疫苗的研制状况及要求等有关问题作了概要介绍.
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中国疫苗应用现状与发展趋势
本文从不同角度和层面对中国疫苗应用现状与发展趋势进行了分析和比较.随着现代生物技术的发展,疫苗产品一直在更新换代,从我国正在研究和使用的疫苗来看,理论研究有一定的差距,应用研究与国际先进水平差距不大.我国正在使用的疫苗,正在更新换代的疫苗和正在研发的新疫苗,代表着我国现实状况疫苗发展的趋势.
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痢疾疫苗的现状与发展趋势
本文对细菌性痢疾疫苗的现状作了简要的论述,特别是对研究痢疾疫苗的思路与手段作了一些介绍,提出了一些看法,可供探讨.
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当归多糖对免疫细胞增殖作用的实验研究
探讨当归多糖对免疫细胞的直接和间接作用.用MTT法分别检测当归多糖(PCA)对PBMC的直接作用、PGA PBMC培养液对PBMC的间接作用;用流式细胞术检测PCA作用于健康人PBMC后各种免疫细胞表型的改变;检测PCA注射BALB/c小鼠后脾细胞增殖变化和巨噬细胞的吞噬能力.当归多糖对PBMC具有直接的抑制作用,而当归多糖PBMC培养液可促进PBMC增殖.PCA注射BALB/c小鼠后脾细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力均得到了不同程度的增强.研究结果为进一步阐明当归多糖的免疫机理提供了理论依据.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 |
| 2010 | 01 02 03 04 |
| 2009 | 01 02 03 04 |
| 2008 | 01 02 03 04 |
| 2007 | 01 02 03 04 |
| 2006 | 01 02 03 04 |
| 2005 | 01 02 03 04 |
| 2004 | 01 02 03 04 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
