Nrf2／ARE 通路在抗病原生物感染中的作用研究进展

氧化应激反应是病原生物感染并致病的重要环节，病原生物感染可诱导宿主细胞产生大量的活性氧（ ROS）或直接激活Nrf2/ARE通路，产生一系列保护性蛋白，保护宿主细胞抵抗氧化应激损伤。转录因子NF-E2相关因子2（ Nrf2）是宿主细胞调节抗氧化应激的一种关键转录因子，可与抗氧化反应元件（ ARE）相互作用，诱导抗氧化酶/Ⅱ相解毒酶基因的表达，从而在细胞保护防御中发挥重要作用。 Nrf2的表达活性与病原生物感染密切相关，对Nrf2/ARE通路在抗病原生物感染中的新研究进展进行了综述。

特异性抗原融合蛋白结核病疫苗研究进展

结核病是一种严重危害人类健康的重大传染病，由于BCG预防效果不佳，研制新型结核病疫苗迫在眉睫。研究开发新型结核病疫苗应根据机体抗结核杆菌感染的免疫应答特点、结合BCG的不足来开展。新型结核病疫苗主要分为三类：重组BCG或重组结核菌；重组痘病毒或重组腺病毒载体疫苗；蛋白抗原亚单位或重组融合蛋白抗原亚单位疫苗。由于蛋白亚单位疫苗可以不受机体已被分枝杆菌刺激的影响，能特异性地诱导CD4＋Th1细胞和CD8＋细胞毒性T细胞活化，并且使用安全性好，而备受研究者的青睐。目前主要是以BCG或重组BCG初次免疫，然后选择亚单位疫苗加强免疫作为结核病疫苗序贯免疫策略。然而，单个蛋白制成亚单位疫苗，其免疫效果有限，因此将多个具有保护效果的抗原或多肽表达成融合蛋白，联合适当的佐剂，制成融合蛋白亚单位疫苗。目前，已有一些融合蛋白亚单位疫苗进入临床试验阶段，更多的融合蛋白正处于研究阶段。

实验动物的质量管理与控制

我国通过建立的实验动物法律法规、管理制度、技术标准、许可证制度、动物质量检测体系等一系列措施，加大了对实验动物的管理力度。目的是提高和保证实验动物质量，提高实验动物科技水平和生命科学研究水平。同时，随着管理力度的加大和人们认识水平的提高及动物环境设施的改善，动物的福利也得到了很大的改善和提高，更有利于提高动物试验结果的准确性和可信性。

益生菌治疗溃疡性结肠炎的研究现状

大量动物试验和临床研究显示，肠道菌群的改变在溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）的发病机制中起重要作用，缓解肠道菌群失调是治疗UC的新策略。其中，在临床上应用益生菌（Probiotics）防治UC，实验研究显示其可能是通过生物拮抗作用、改善肠黏膜屏障功能及调节肠道黏膜免疫等机制参与防治UC。就常见益生菌、益生菌治疗UC的机制以及其疗效等研究现状进行了综述。

梅毒螺旋体外膜蛋白Tp92及其同源蛋白的研究进展

梅毒是由梅毒螺旋体（ Tp）引起的一种严重危害人类健康的慢性感染性疾病，由于Tp目前尚不能体外人工培养，从而限制了对Tp致病机制的深入研究。 Tp对宿主靶细胞的早期黏附定植是其后续病程发展的关键，而早与宿主细胞直接接触的Tp外膜及外膜蛋白就成了关注的焦点。随着Tp全基因组序列的解析和分子生物学技术的发展， Tp外膜蛋白的筛选、鉴定及功能研究取得了一定进展。 Tp92是首个在感染了梅毒的兔调理素抗毒血清中通过差示免疫筛选方法筛选出来的Tp外膜蛋白，序列高度保守，具有较强的抗原性，与其他螺旋体属及许多革兰阴性菌的外膜蛋白均具有较高的同源性，其在Tp的致病过程及机体的免疫应答中可能发挥着重要作用。就目前Tp外膜蛋白Tp92及其同源蛋白的研究进展进行了综述。

噬菌体展示技术在疫苗研究中的应用进展

噬菌体是一种以细菌为宿主的具有严格宿主特异性的病毒，近年来由于分子生物学和基因重组技术的长足发展，藉助噬菌体的基本特性创立和发展了噬菌体展示技术，此项技术将外源肽或蛋白与特定噬菌体衣壳蛋白融合并展示于噬菌体表面。利用这项技术制作的疫苗具有安全可靠、稳定性高、免疫效果好等优点，因此，在新型疫苗的研制上具有很大的应用价值。就噬菌体展示技术及其在疫苗研究中的优势、预防性疫苗与治疗性疫苗的研究进展予以综述。

人乳头瘤病毒l6型E6-E7融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

目的：构建人乳头瘤病毒l6型（HPV16）E6-E7融合蛋白真核表达载体，为研究其基因疫苗免疫活性奠定实验基础。方法 PCR扩增HPV16 E6-E7基因片段，将其连接到真核表达载体pcDNA3．1（＋），构建真核表达载体pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7，双酶切及测序鉴定。将质粒转染HeLa细胞，RT-PCR鉴定E6-E7基因在HeLa细胞中的表达。提取质粒免疫小鼠，利用免疫组化方法检测在其肌肉组织中的表达。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7；在转染pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7的细胞中检测到HPV16 E 6-E7基因。在免疫该质粒的小鼠肌肉组织中可以检测到该质粒的蛋白表达。结论成功的构建的了真核表达载体pcDNA3．1（＋）/HPV16 E6-E7，该载体能在HeLa细胞内以及小鼠骨骼肌细胞内有效表达。

潍坊市2012年疑似预防接种异常反应监测分析

目的：分析潍坊市2012年疑似预防接种异常反应的发生特征，评价AEFI监测系统的运转情况。方法通过AEFI监测系统，收集2012年AEFI个案数据，采用描述性方法对AEFI监测系统运转进行评价，对AEFI病例进行流行病学分析。结果全市AEFI监测系统共收到个案1058例，其中≤1岁占77．32％，男女性别比为1．39∶1。报告的AEFI中，国家免疫规划疫苗占84．31％，其中83．18％发生在接种后≤1 d；一般反应占98．20％，预防接种异常反应占1．42％，其中过敏性皮疹占0．85％，卡介苗淋巴结炎占0．47％。估算全市国家免疫规划疫苗常见预防接种异常反应报告发生率为0．27/105～5．33/105。所有AEFI病例均已痊愈。2012年全市12个县（区、市）均有AEFI数据报告，48 h内报告率、调查率均为100．00％。结论潍坊市AEFI监测敏感性和监测质量尚需提高。AEFI 常发生在小年龄儿童、NIP疫苗接种后≤1 d，此为监测重点。

絮状单位测定与小鼠体内中和试验法检测TAT 效价的比较

目的：为了更好地进行生产质量控制，快速准确地测定破伤风抗毒素（ TAT）效价，以统计分析絮状单位测定法（体外法）和小鼠中和试验法（体内法）测定TAT效价的相关性。方法对2010-2013年破伤风抗毒素生产过程中的原料血浆、原液的絮状单位值与小鼠中和效价进行了统计分析和比较。结果体外法和体内法检测TAT原料血浆和原液效价的相关系数分别为r血浆＝0．7943，P＜0．001和r原液＝0．9016，P＜0．001，均呈显著性正相关。结论体外法可指导或替代体内法TAT效价测定应用于生产过程中间品的质量控制。

广西桂林市1999-2008年甲型副伤寒病带菌者菌株的耐药性分析

目的：了解甲型副伤寒病后带菌者菌株对常用抗生素耐药情况，指导临床合理规范用药。方法随访桂林市1999-2008年发病的甲型副伤寒病患者，采集其3次粪便标本培养甲型副伤寒菌，对培养出的菌株进行18种抗生素的耐药检测。结果328名既往甲型副伤寒患者中检出恢复期病例20例，检出带菌6例，恢复期带菌率30．0％，95％CI（12．0％，54．0％），恢复期带菌者发病时用药不规范。病后3个月至9年的既往甲型副伤寒患者308例，检出慢性带菌1例，慢性带菌率为0．32％，95％CI（0．1％，5．6％）。所有菌株对喹诺酮类药物敏感率不高，对萘啶酸耐药率为100％。对氨卞西林、一代头孢、氨曲南、链霉素、磺胺等药物不同程度中介或耐药。慢性带菌者的菌株除萘啶酸耐药外，对其他抗生素均敏感。结论治疗甲型副伤寒患者时应做到抗生素的规范、合理使用，以减少病后带菌发生。

火箭免疫电泳法检测 ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量和分子大小的初步验证

目的：对火箭电泳法用于检测ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量和多糖分子大小进行验证。方法用化学法和火箭电泳法分别检测ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量和多糖分子大小，统计学分析两种方法的检测结果。结果两种方法的检测结果差异无统计学意义。结论火箭电泳法可以用于检测ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量和多糖分子大小。

细胞工厂培养轮状病毒基因重配株 Ls（G3型）条件的优化研究

目的：以细胞工厂代替转瓶培养轮状病毒基因重配株Ls的可行性研究。方法采用细胞工厂与相应的转瓶培养工艺作对比，比较两种容器内细胞生长状态与病毒收获液滴度，并对细胞工厂培养条件进行了优化。结果以相同浓度接种细胞时，细胞工厂4 d长成单层，转瓶却需要7 d，经细胞仪计数后单位面积内细胞密度相当；以相同MOI接种病毒后，转瓶内的病毒于第7天病毒滴度达到峰值，细胞已完全脱落；细胞工厂于第3天病毒滴度达到峰值，并实现了3次收获。细胞工厂每次收获的病毒液滴度都稳定在一定范围，与转瓶相当。另外，细胞工厂培养条件优化结果表明，Vero细胞佳接种浓度为3．0×104细胞/cm2，接种病毒的适MOI为0．02～0．04。结论使用细胞工厂培养Ls株病毒不仅提高了效率，而且减少了培养空间，可替代转瓶规模化生产轮状病毒疫苗。

不同表型的结核分枝杆菌诱导 U937细胞凋亡率差异分析

目的：利用流式细胞技术检测耐多药结核分枝杆菌（ Multidrug resistant mycobacterium tuberculosis ， MDR-TB）临床分离株和结核分枝杆菌一、二线药物敏感株分别感染U937细胞后的凋亡率及其时相性变化。方法用两组细菌分别感染U937细胞，在感染后2、4、8及12 h用流式细胞技术检测各组感染U937细胞的凋亡率，并分析其时相性变化。结果结核分枝杆菌MDR株和敏感株均能诱导U937细胞凋亡，两组细胞凋亡率比较差异有统计学意义（P＜0．01），MDR株诱导U937细胞凋亡率显著低于敏感株诱导的凋亡率，且在诱导后2、4、8及12 h各时间点的凋亡率都显著低于敏感株组，诱导早期凋亡率升高显著，特别是诱导后2 h凋亡率升高显著，4 h以后凋亡率升高逐渐变慢。结论结核分枝杆菌临床分离株感染U937细胞后能快速诱导其凋亡，凋亡率与诱导菌株的耐药表型相关，敏感株诱导的凋亡率显著高于MDR株，诱导早期凋亡率升高显著，4 h以后凋亡率升高减慢。

人乳头瘤病毒疫苗临床血清学 ELISA 检测方法比对研究

目的：为保证人乳头瘤病毒疫苗临床血清抗体检测的准确性和有效性，对ELISA检测方法进行了比对研究。方法采用编盲的200对血清，分别在两个不同实验室使用ELISA法进行HPV16、HPV18型抗体检测，并对结果进行统计学分析。结果两个实验室对免前、免后血清的16、18型抗体检测结果，阴阳性符合率均大于93％，统计学分析显示两个实验室的检测结果差异无统计学意义。免后血清HPV16型抗体几何平均效价比值为1．10， HPV18型比值为1．17，均在预先设定的范围内。结论该方法在两个不同实验室的检测结果一致性良好，可用于HPV疫苗临床血清学样本的检测。

破伤风杆菌产毒培养基主要原材料的替代研究

目的：探索用干粉状的肝浸粉、胰酪胨、月示胨代替传统破伤风杆菌产毒培养基中使用的猪肝水透析外液、胰酶酪蛋白消化液、浓胨水，以满足规模化生产的需求。方法与传统的破伤风杆菌产毒培养基同时用于破伤风类毒素的生产过程，由小批量生产逐步转化到规模化批量生产，经多批次试验，以检测不同组分制备的培养基各生化指标和接种细菌后培养的产毒水平进行比对。先确定肝浸粉可以取代猪肝水透析外液，在此基础上筛选出代替浓胨水的月示胨，再以待用的胰酪胨配合肝浸粉、月示胨制备多批次不同生产量的破伤风杆菌产毒培养基。结果经过多批次小批量扩大到批量规模化生产的试验，用肝浸粉、胰酪胨、月示胨配制的破伤风杆菌产毒培养基与传统工艺制备的破伤风杆菌产毒培养基相比较，无统计学意义（P＞0．05）。结论肝浸粉、胰酪胨、月示胨可以替代传统破伤风杆菌产毒培养基中的猪肝水透析外液、胰酶酪蛋白消化液、浓胨水，适用于破伤风类毒素的规模化生产。

连云港市戊型肝炎流行趋势分析

目的：分析连云港市戊型肝炎流行特征和变化趋势，为今后制定控制策略提供科学依据。方法采用 Excel 2007和SPSS13．0软件，用描述流行病学方法进行分析。结果2004-2012年连云港市戊肝发病率呈上升趋势，年均发病率为3．26/10万，市区发病率高于郊县；病毒性肝炎型别构成中，戊肝的比例逐年上升；发病以中老年为主，45～65岁占52．26％，男性发病率高于女性（5．54∶1），职业构成以农民、工人和离退休人员为主；一年四季均有病例发生，3月、7月出现二个发病小高峰。结论应将戊肝作为该市重点控制的疾病，采取对重点人群预防接种、疫情监测、卫生宣教和饮食、饮水和环境卫生管理等综合性防控措施。

阿拉斯加幼儿在接种甲肝疫苗后17年内长期存在免疫原性

疾病控制和预防中心推荐所有一岁儿童和高危人群接种HAV疫苗。该疫苗高度有效，但保护力持续时间仍然未知。我们报道了幼儿接种HAV疫苗后17年内的抗体浓度，结果表明，保护性和抗体水平在超过七年的时间仍然维持在稳定水平。

Rv1894 c是一种新型氮酸酯单加氧酶，为结核杆菌毒力所必需

结核病很难治愈，需要至少6个月的使用多种抗生素的治疗。少数菌体能够耐受抗生素，在感染对象肺部长期存在，但细菌生存仍然需要一些代谢活动。我们在豚鼠（其可利用缺氧，并且发生的坏死性肉芽肿在组织学上与人类的相似）体内研究缺氧诱导的Rv1894 c基因对结核杆菌毒力的作用，并发现该基因对整个杆菌的生长和生存都是必要的。其特征在于该基因所编码的酶的功能是一种氮酸酯单加氧酶，其可在缺氧代谢过程中防止有毒产物堆积，并可对转录阻遏物KSTR进行负调控。未来的研究将侧重于开发靶向Rv1894 c及其同源物的小分子抑制剂，其目标是杀死持续存在的细菌，从而缩短治疗肺结核所需的时间。

在6或9月龄初次投递麻疹疫苗后5～10岁儿童中体液和细胞免疫

背景：鉴于婴儿麻疹死亡率高，故人们考虑在＜12月龄就开始接种是否能提供持久的免疫力。
　　方法：70名儿童在6、9或12月龄初次接种麻疹疫苗，在5～10岁时对麻疹特异性免疫应答进行了评估。

新型蛋白用于梅毒诊断的前景

梅毒是一种由苍白密螺旋体苍白亚种引起的性传播疾病，虽然青霉素可以有效地治疗这种疾病，但其仍然在世界范围内流行，部分原因是由于目前诊断检测的不足。在这里，我们报告了三种新型诊断候选蛋白的可溶性重组型变体Tp0326、Tp0453和Tp0453-Tp0326嵌合体。通过对感染的初期、中期和潜伏阶段的血清样本（ n＝169）中这些重组蛋白的特点进行筛选来评估它们的敏感性。通过筛检用标准诊断测试法确定的假阳性进行特异性评估（n＝21），还有来自潜在交叉感染患者的样本（钩端螺旋体、莱姆病螺旋体、幽门螺杆菌、EB病毒、乙肝病毒、丙肝病毒或巨细胞病毒）（n＝38），和来自未感染个体的样本（ n ＝11）。 Tp0326、Tp0453和 Tp0453-Tp0326嵌合体的敏感性分别为86％、98％和98％，特异性分别为99％、100％和99％。在直接比较时，用Captia 梅毒（梅毒螺旋体）-G 酶免疫测定法（ Trinity Biotech公司）筛检相同的血清样品，发现其灵敏度为98％，特异性为90％。特别是在分类分析假阳性样品时，Tp0453和嵌合型表现出优异的精度（100％，而Captia检测为43％）。这些调查结果确定作为新型的梅毒特异性诊断候选蛋白，Tp0453和Tp0453-Tp0326嵌合体的性能优于目前所用的诊断梅毒的酶免疫试验，且能够准确地检测感染的各个阶段。

缺失编码 tRNA 修饰酶 GidA 和 MnmE 的基因后沙门菌的毒力特性

沙门菌是一种重要的食源性致病菌，引起全世界范围内的主要公共卫生问题。我们之前的研究已显示，在体内和体外感染模型中，葡萄糖抑制性分隔基因的缺失显著地改变了沙门菌的毒力。在大肠杆菌中，GidA和MnmE通过一种后转录机制修改tR-NA而改变了某些细菌因子。因此，我们假设，在沙门菌中GidA和MnmE通过一种相似的机制共同调节毒力基因。为了验证我们的假设，并且检验GidA和MnmE在调节沙门菌毒力方面的相对作用，我们构建了沙门菌的gidA和mnmE单突变株和gidA和mnmE双突变株。体外试验数据显示，和野生株相比，突变株在生长特性、动力性、胞内复制和侵入T84肠上皮细胞等方面都有所降低。体内试验数据表明，和感染野生株的小鼠比较，突变株的炎症性细胞因子和趋化因子明显减少，而且肝脏和脾脏的组织病变严重程度明显降低。同样，在突变株感染的小鼠中观察到LD50明显增高，用突变株免疫过的小鼠可免受致死剂量的沙门菌野生株的攻击。HPLC分析揭示了gidA和／或mnnE 的缺失改变了tRNA的修饰。总的来说，数据说明GidA和MnmE结合在一起并且通过一种后转录机制修饰tRNA从而调解沙门菌的致病机制。

结核新疫苗 MVA85A 在接种过 BCG婴儿中的安全性和效力

基础BCG接种抗婴儿结核病的保护作用是不完全的。为提高BCG的保护效力，设计了用痘病毒安卡拉表达抗原85A（MVA85A）的新疫苗。我们的目的是评估MVA85 A的安全性、免疫原性和抗婴儿结核病与结核分枝杆菌感染的效力。

脑膜炎球菌疫苗的开发

诺华疫苗公司为预防侵袭性脑膜炎球菌性疾病进行了长期的研究与开发。从初的获得单价C群脑膜炎球菌性糖结合物疫苗即Menjugate溍的许可证，这一应对在英国出现的有毒C群ST-11株的疫苗到近期开发出的获得了四价脑膜炎球菌 ACWY糖结合疫苗，Menveo溍的许可证，诺华公司承诺开发更有效的控制脑膜炎球菌性疾病的疫苗。 Menveo疫苗是目前在50多个国家被批准用于青少年和成人的疫苗，并且从Ⅲ期临床研究结果显示，人们对这种疫苗具良好耐受性，并且在出生后2个月开始接种的婴儿中就具有高度的免疫原性。控制脑膜炎球菌病的圣杯（“holy grail”）是一种能够抵抗B群细菌的具有广谱保护作用的疫苗，更可取的是一种能够保护包括婴儿在内的所有年龄人群的疫苗。由于B群脑膜炎球菌荚膜的免疫原性不佳，所以过去40多年人们的努力集中在细菌表面表达的保守蛋白的鉴定上。它们可激发杀菌抗体。诺华公司研究人员已着手解决这一问题，他们借助于基因组技术鉴定满足这些标准的蛋白，这一工艺目前称作“反向疫苗学”。这项工艺技术已经使多组分 MenB 疫苗（4C MenB）研制成功，这项MenB疫苗是由4种主要的免疫原性组分［3种亚荚膜MenB 蛋白加外膜囊泡（ OMVs）］所构成。它们本身提供多种亚荚膜抗原，其中一种优势免疫抗原就是PorA。所有这些抗原都能诱导针对抗原的杀菌抗体，而这些抗原在决定脑膜炎球菌的活存、功能与毒力方面都是重要的。4C MenB疫苗的Ⅱ期临床研究结果表明，这种疫苗在抵抗脑膜炎球菌参考株方面具有高度免疫原性，对从临床研究中获取的接种疫苗后的人体血清也通过许多不同的B群菌株进行了检测，以期支持脑膜炎球菌抗原分型系统（ MATS ）的开发，这是一种预测疫苗株覆盖方面的工具。这篇综述的意图是根据Menveo和4C MenB疫苗临床开发项目的主要临床资料作一较为宽泛的介绍。

孟加拉高砷低砷区儿童对口服灭活霍乱疫苗的特异免疫应答及其EPI疫苗

背景：对口服灭活全菌体霍乱毒素B （ CTB ）亚单位霍乱疫苗Dukoral溍和国家免疫接种体系中的3种儿童疫苗的免疫应答，在生活于孟加拉高砷和低砷污染区的儿童中进行了比较，并对他们的血清补体因子C3和C4水平进行了评估。

在老年人群中比较高剂量三价流感疫苗和常规剂量疫苗的效力

背景：开发高剂量三价流感疫苗以提高老年人群的流感疫苗抗体应答，可能会影响这一人群与流感相关的发病率和死亡率。
　　方法：在≥65岁的老年人中进行Ⅲb阶段、多通道、随机、双盲的有对照试验，比较高剂量（ HD ）三价灭活流感疫苗［60μg血凝素（HA）／株］和常规剂量（ SD）（15μgHA／株）的应答情况。在2009-2010流感季节完成了安全性评估［严重不良事件（SAE）］、免疫原性（血凝素抑制效价）和相对效力这一季节性与H1N1的大流行相一致。

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《微生物学免疫学进展》稿约

《微生物学免疫学进展》关于稿件优先数字出版的启事

病毒样颗粒抗原的表达、纯化、组装和鉴定

病毒样颗粒（ Virus-like particles，VLPs）是由一种或多种病毒结构蛋白组装成的的颗粒，具有与病毒颗粒相似的外部结构和抗原性，但不含病毒基因。以预防乙型肝炎病毒、乳头瘤病毒和戊型肝炎病毒感染为目的的三种VLP 疫苗已被批准在人体应用。可采用细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞、植物细胞系统表达VLP抗原。表达的VLP抗原可经裂解、粗提、浓縮和精制四个基本步骤纯化。解聚/重组装处理可能增强VLP抗原的效力和稳定性。在研制和生产VLP疫苗的过程中要对VLP抗原的品质、含量、效力和纯度进行检测。