军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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干扰素α-2b缓释微球的制备及影响因素考察
目的:制备以明胶粉形式固化的干扰素α-2b(IFNα-2b)聚乙二醇/聚对苯二甲酸丁二醇酯共聚物(PEG/PBT)-乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释微球,并考察微球制备方法,基质材料,IFNα-2b存在形式[包括液态含人血清白蛋白(HSA),固态含HSA及液态不含HSA]及胶粉粒径对微球性质的影响.方法:将IFNα-2b溶于明胶溶液后,冷冻干燥,研磨制备胶粉,然后用S/O/O法、W/O/W法或S/O/W法制备微球;以粒径、包封率及释放为指标,考察微球的制备方法、基质材料、IFNα-2b形式及胶粉粒径对微球性质的影响;采用ELISA法测定IFNα-2b.结果:以液态不含HSA形式的IFNα-2b为原料药,胶粉粒径为14.5 μm,以PEG/PBT及PLGA( 9∶ 1)为混合基质材料,S/O/W法制备的微球为理想,该微球突释约为20%,体外可持续释放19 d以上,累积释放量可达80%以上.结论:微球制备方法、基质材料、IFNα-2b形式及胶粉粒径对微球性质影响很大;将IFNα-2b以胶粉形式固化后制备微球可增加其稳定性,利于其连续释放.本研究为蛋白多肽类药物微球的制备提供了新思路.
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人巨细胞病毒糖蛋白B抗原表位在大肠杆菌中的表达
目的:利用大肠杆菌表达人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白B抗原表位AD1和AD2,对表达产物进行纯化,通过ELISA方法检测表达产物与感染HCMV的人血清之间的特异结合反应,探讨其用于临床检测的可行性. 方法:以HCMV病毒基因组为模板,PCR扩增AD1和AD2基因,构建重组表达载体pET32-NusA-AD1和pET32-NusA-AD2,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中利用IPTG诱导表达,通过Ni柱亲和纯化获得NusA-AD1和NusA-AD2, ELISA方法检测NusA-AD1和NusA-AD2与感染HCMV的人血清之间的特异性结合反应.结果:可溶性表达并纯化得到融合抗原NusA-AD1和NusA-AD2.在8份已确定为HCMV IgG阳性人血清标本中,融合抗原NusA-AD1能够与5份血清发生反应,融合抗原NusA-AD2能够与6份血清反应.结论:NusA-AD1和NusA-AD2能够部分检测HCMV感染的人血清.
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咪唑啉受体抗血清选择性蛋白的表达、纯化及单克隆抗体制备
目的:表达和纯化咪唑啉受体抗血清选择性蛋白(imidazoline receptor antiserum-selected protein,IRAS protein),制备IRAS蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在大肠杆菌表达IRAS蛋白;金属镍螯合的Ni-NTA亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌IRAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株;以间接ELISA方法筛选分泌特异性IRAS单克隆抗体的杂交瘤细胞;采用蛋白免疫印迹、间接免疫荧光方法鉴定单克隆抗体的特异性.结果:成功表达并纯化了IRAS重组蛋白,纯度达到95%.共筛选出5株分泌IRAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水并纯化了IRAS的单克隆抗体,腹水中单克隆抗体效价分别为1∶ 8×106,1∶ 2×106和1∶ 5×106,属于IgG1亚型.该抗体能与原核及真核系统表达的IRAS重组蛋白发生特异性反应,间接免疫荧光显示IRAS蛋白主要定位于细胞质中.结论:建立了稳定分泌IRAS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,成功制备了特异性好的IRAS单克隆抗体,为研究IRAS的功能提供了有力的研究工具.
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胍丁胺-I1咪唑啉受体对μ-阿片受体脱敏和下调的影响
目的:观察胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体对阿片预处理引起的μ-阿片受体脱敏和下调的影响.方法:以CHO-μ和CHO-μ/IRAS (imidazoline receptor antisera-selected protein,咪唑啉受体抗血清选择性蛋白)细胞作为研究对象,用[35S]GTPγS和3H-二丙诺啡(diprenorphine)结合实验方法,确定胍丁胺-I1咪唑啉受体作用系统对μ-阿片受体脱敏和下调的影响.结果:在正常CHO-μ和CHO-μ/IRAS细胞中,μ-阿片受体的表达量和对配体的亲和力无显著差异;两细胞中μ-阿片受体对激动剂刺激的反应一致.阿片受体激动剂DAMGO[(D-Ala2,N-Me-Phe4,Gly5-ol)-脑啡肽(enkephalin),10 μmol/L]处理CHO-μ/IRAS细胞30 min μ-阿片受体出现脱敏,而胍丁胺(10 nmol/L~100 μmol/L)不影响μ-阿片受体脱敏过程.DAMGO(1 μmol/L)处理两细胞12 h后可出现μ-阿片受体的下调,胍丁胺(1~100 nmol/L)浓度依赖性地抑制CHO-μ/IRAS细胞中μ-阿片受体的下调,而相同浓度胍丁胺在CHO-μ细胞中无此作用.胍丁胺这一作用能被I1咪唑啉受体阻断剂依法克生(efaroxan,Efa)所阻断.结论:胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体可抑制DAMGO长期处理所致的μ-阿片受体下调,此作用可能与胍丁胺抑制阿片依赖有关.
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猪α1,3-半乳糖转移酶基因定向缺失质粒的构建
目的:构建猪α1,3-半乳糖转移酶(α1,3-galactosyltranferase, GGTA1 /α1,3-GT)基因的定向缺失质粒,用于GGTA1基因敲除.方法:以原代猪胚胎成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFFb)基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因同源长、短臂,将长臂段在NotⅠ位点插入PBSLoxPNEOLoxP质粒中PGK-NEO-PolyA序列的5′端,将短臂段在SalⅠ和XhoⅠ位点插入该质粒PGK-NEO-PolyA序列的3′端.结果和结论:成功构建了猪GGTA1基因的定向缺失质粒NEOSL /GT,为下一步获得GGTA1基因敲除猪打下了基础.
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糖尿病大鼠肾小管P选择素和MCP-1的表达及调节机制探讨
目的:观察糖尿病大鼠肾小管p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、NF-κB、Ⅰ-κB、P选择素和MCP-1表达的动态变化,探讨相互间关系及在糖尿病性肾病(DN)发生发展中的作用.方法:链佐星(链脲佐菌素)诱导大鼠糖尿病,并随机分为3 d、1周、2周、4周和8周组,每组设鼠龄匹配的正常对照组.免疫组化法检测肾小管P选择素、MCP-1、p38MAPK、NF-κB和纤连蛋白(FN);Western印迹测肾皮质Ⅰ-κB和p38MAPK蛋白;PAS染色,光镜观察肾组织形态;生化法测血糖和尿蛋白.结果:糖尿病3 d组可见肾脏指数大于正常组,出现蛋白尿.糖尿病1周组肾小管p38MAPK、NF-κB、P选择素和MCP-1表达明显增加,糖尿病2周组肾小管间质FN阳性表达增加,并且都随着糖尿病病程发展而增加,而肾皮质Ⅰ-κB蛋白从糖尿病1周开始逐渐减少.糖尿病4周,P选择素和MCP-1表达十分显著,并且与p38MAPK、NF-κB、FN、蛋白尿及肾脏指数呈正相关.结论:p38MAPK和NF-κB可能介导了糖尿病大鼠肾小管P选择素和MCP-1表达上调,并参与DN肾小管-间质病变的发病机制.
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CCR5拮抗剂TAK-779的合成工艺改进
目的:优化合成路线并合成小分子CCR5拮抗剂TAK-779. 方法:该优化后的合成路线以溴苯为起始原料,经傅克酰基化、还原、环合等反应得到目标化合物TAK-779. 结果与结论:目标化合物和中间体的结构经1H-NMR和FAB-MS确证.该路线优化了合成工艺,合成TAK-779总收率为17.3%.该路线收率高,原料易得,成本低廉,操作简单.
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基因芯片技术分析siRNA抑制多效生长因子表达后Pten-/- MEF241细胞基因表达谱的变化
目的:应用基因芯片技术,分析siRNA抑制Pleiotrophin基因表达后,Pten-/- MEF241细胞基因表达谱的变化.方法:选用Agilent公司的小鼠oligo芯片,分别提取siRNA抑制Pleiotrophin基因表达前后Pten-/-MEF241细胞的RNA,反转成cDNA,进一步荧光标记后进行芯片杂交,杂交结果经扫描及软件分析,后Ration值为cy3/cy5(即实验组/对照组).差异基因筛选标准为正标Ratio(Cy3/Cy5)≥2同时反标Ratio(Cy3/Cy5)≤0.5.部分上调及下调基因的表达水平用RT-PCR及Northern杂交进行了验证.结果:siRNA介导Pleiotrophin基因沉默后,表达上调2倍以上的基因有240个,下调0.5倍以上的基因有129个.其中,上调10倍以上的基因有与DDK综合征相关的Schlafen家族成员Slfn2、3、4,基质蛋白金属酶Mmp3、10、13,白介素IL-1a、IL-f6等;下调5倍以上的基因有钙结合蛋白S100a8、视黄醇结合蛋白Rbp4、二肽酶Dpep1等.RT-PCR及Northern杂交验证结果与芯片结果吻合.结论:应用基因表达谱芯片成功分析了RNAi抑制Pleiotrophin基因表达后Pten-/- MEF241细胞基因表达谱的变化,挑选并鉴定出一批有意义的基因,为后续的深入研究提供了基础.
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奥沙利铂长循环热敏脂质体的包封率测定及体外释放考察
目的:建立奥沙利铂脂质体的包封率和含量测定方法,并对其体外释放进行考察.方法:采用逆相蒸发法制备奥沙利铂脂质体,用葡聚糖凝胶G-50柱分离载药脂质体和游离药物,以水为洗脱液,RP-HPLC法测定包封率,采用透析法考察脂质体在37℃和41℃的体外释放规律.结果:柱层析分离方法的药物回收率为99.25%,柱加样回收率为100.37%;药物含量测定方法的工作曲线为A =3E+06c-3290.8(n=5),r=0.9999,线性范围0.0201~2.0100 mg/ml,方法回收率为100.70%;脂质体在41℃条件下的释放规律符合一级动力学过程.结论:本方法简便、灵敏、准确,可以用于测定奥沙利铂脂质体的含量和包封率,所制得的脂质体具有明显的热敏释放特征.
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空间信息技术在传染病流行病学调查中的应用研究
目的:建立一种基于移动设备的传染病流行病学数据采集、管理与分析应用平台,实现空间信息技术在传染病现场流行病学调查中的应用.方法:以北京市为例,系统收集包括北京市18个区县在内的传染病发病情况以及相关的影响因素资料,经过整理分析后建立数据库.以eMbedded Visual C++作为系统开发软件,以移动式设备作为系统应用平台,构建北京市传染病发病情况以及相关数据的地理信息系统,将建立的数据库与北京市数字地图相关联,用户通过对地图的操作,实现对传染病流行病学资料的空间查询、分析和管理.结果:建立的北京市传染病流行病学地理信息系统具有空间数据管理、信息咨询、全球卫星定位查询等七大功能,包含了北京市18个区县的地理环境、气象、人口、交通状况信息以及与传染病相关的发病情况、媒介宿主和医学动物的分布、医疗卫生机构的分布等方面的信息,用户通过点选、圆选、多边形选等方式可在数字地图上实现对数据的空间查询.结论:本系统的建立为我国开展现场流行病学调查提供了一种新的思路.
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吗啡依赖模型大鼠脑cDNA文库的构建
目的:构建吗啡依赖模型大鼠脑cDNA文库.方法:建立大鼠吗啡躯体依赖模型后,取鼠脑进行总RNA的抽提、mRNA的纯化,以mRNA为模板合成第一链cDNA后用LD-PCR方法合成双链cDNA,用限制性内切酶SfiⅠA、B分别双酶切双链cDNA与pTRG载体,连接后的cDNA文库转化XL1-Blue MRF′ Kan 超级感受态并收菌,完成cDNA文库构建.结果与结论:PCR结果显示,cDNA片段连接效率>90%,cDNA插入片段在1 kb左右.吗啡依赖大鼠脑cDNA文库总容量为3.05×106,满足下一步细菌双杂交文库筛选要求.
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胞红蛋白(CGB)与金属硫蛋白(MT2)相互作用的研究
目的:胞红蛋白(CGB)是新近发现的在脊椎动物多种组织中广泛表达的携氧珠蛋白,在肝纤维化过程及缺氧/缺血条件下表达增高,可提高细胞抗氧化损伤能力,但其在细胞保护中的作用机制仍不清楚.由于蛋白质功能的发挥在很大程度上是通过蛋白质-蛋白质相互作用实现的,本研究拟通过研究与功能已知蛋白之间的相互作用,阐明CGB发挥保护作用的分子机制.方法:采用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库,获得与CGB相互作用的阳性克隆并测序、BLAST比对鉴定获得的cDNA序列;随后采用酵母回转实验、免疫荧光共定位及免疫共沉淀实验对蛋白之间的相互作用进行验证.结果:筛选获得的阳性克隆cDNA序列与人金属硫蛋白Ⅱ(MT2)存在100%序列相似性,并且MT2与CGB在酵母和COS7细胞中均存在相互作用.结论:由于MT2为生物体内广泛存在的抗氧化和清除自由基的应激相关蛋白, CGB可能与MT2一起协同调节细胞氧化还原反应能力,进而从抗氧化损伤的角度发挥细胞保护作用.
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重楼甾体总皂苷对血小板聚集的直接诱导作用及初步机制研究
目的:确定重楼甾体总皂苷(TSSP)体外直接诱导血小板聚集作用并对其可能的机制进行探索.方法:比浊法测定血小板聚集,透射电镜观察血小板形态学改变.结果:体内外血小板聚集模型研究表明,TSSP体内给药能够增强ADP诱导血小板聚集.体外能够直接诱导血小板聚集,并呈剂量效应关系.电镜观察TSSP能够直接激活血小板引起变形释放等反应.肾上腺素能够增强TSSP诱导的血小板聚集,该增强作用能被酚妥拉明所拮抗.蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂过钒酸钠能够增强TSSP诱导血小板聚集.结论:本研究表明,TSSP中含有参与止血作用的药理活性成分.
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曲古抑菌素A抑制肿瘤细胞增殖及提高p21基因表达
目的:探讨组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人肿瘤细胞的杀伤作用和机制.方法:选用3种人肿瘤细胞株,即白血病细胞株HL-60、非小细胞肺癌细胞株A549、乳癌细胞株MCF-7,采用MTT法检测TSA作用后肿瘤细胞的增殖状态;用流式细胞仪定量分析肿瘤细胞增殖周期的改变;用半定量RT-PCR法测定细胞周期相关基因p21的表达.结果:TSA能有效抑制肿瘤细胞的增殖,呈剂量依赖性;在接近各细胞IC50浓度的TSA作用下,可使肿瘤细胞主要阻滞在G2/M期,而S期细胞明显减少;TSA作用48 h内即可引起细胞周期相关基因p21的表达显著增强.结论:TSA在体外能有效抑制多种人肿瘤细胞的生长,具有广谱抗肿瘤效应;其抗肿瘤生长机制可能是通过细胞周期阻滞和上调p21基因表达水平实现的.
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医用外科口罩生物防护效果测试平台的建立和应用
目的:为评价医用外科口罩性能的优劣而建立医用外科口罩的生物气溶胶防护效果的测试方法.方法:选择适当微生物作为指示生物,进行气溶胶的发生、采样、培养,根据医用外科口罩细菌的过滤效率而检测其防护性能和安全性.结果与结论: 建立了针对医用外科口罩防护性能的生物学测试平台,在此基础上,依据YY0469-2004《医用外科口罩技术要求》,对多家的送检产品进行了检测,结果发现产品质量良莠不齐,产品的合格率并不高.这种测试平台针对医用外科口罩防护性能的优劣,统一了评价标准,筛选了合格产品,满足了对医用外科口罩防护性能和安全性的检测和评价.
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系统生物技术——组学时代的代谢工程
高通量实验技术的广泛应用产生了海量数据,利用生物信息学工具整合这些数据,加深了人们对细菌生理活动规律的认识,系统生物学应运而生.系统生物学的出现使代谢工程从局部通路水平上升到整体水平,代谢工程也因此进入了新的发展阶段--系统生物技术时代.系统生物技术通过整合各个层次组学数据,建立数学模型,或通过比较不同菌株或同一菌株在不同条件下基因组、转录组、蛋白组或代谢组的差异以阐明生命活动规律,在此基础上,对影响表型的靶基因进行改造,得到符合预期的表型.随着新的高通量实验技术的不断运用以及生物信息学的发展,系统生物技术必将取得更大进步.
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水甘油通道蛋白与甘油运输研究进展
水甘油通道蛋白是一类既可以运输水分子,又可以运输甘油等小分子物质的水通道蛋白.人类的AQP3、7、9和10属于这个类别,它们调节的甘油运输对于机体物质代谢具有重要的生理意义.本文从水甘油通道蛋白的基本情况、成员、功能以及与疾病的关系等方面阐述了水甘油通道蛋白研究方面的新进展.
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酪氨酸激酶类受体C-Met抑制剂研究进展
酪氨酸激酶类受体C-Met及其配体肝细胞生长因子(HGF)与肿瘤的发生、发展及预后密切相关,是肿瘤治疗的重要靶标.寻找高效C-Met抑制剂是目前抗肿瘤药物研究的热点之一.本文综述了这一领域的新研究进展.
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非经典分泌蛋白研究进展
在哺乳动物中,绝大多数细胞外蛋白的分泌是通过内质网/高尔基体依赖的分泌途径,也称作经典分泌途径来实现的.但是越来越多的细胞外蛋白被发现不依赖内质网/高尔基体分泌途径却可以分泌到细胞外.这些非经典分泌蛋白是生命过程中的重要分子,对分析和解决生物医学问题具有重要意义.
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Eph家族蛋白的神经生物学功能研究进展
Eph家族蛋白在发育胚胎和成年个体的神经系统中均发挥着极其重要的生物学功能.在发育个体中,Eph家族蛋白在神经元网络形成、轴突路径导引、皮质细胞迁移、嗅觉和听觉等诸多个体发育过程中均起着关键作用.而在成年个体中,Eph家族蛋白的正向和反向信号途径能够调节不同类型的神经突触可塑性并且干扰部分Eph家族蛋白,能够影响到模型动物的学习与记忆能力,因而Eph家族蛋白参与了学习与记忆过程.Eph家族蛋白能在某些细胞株上调节Tau蛋白的磷酸化,并且还以趋化因子的形式在成体中继续发挥着重要的功能,它们的异常可能参与了多种脑疾病的机制.而磷酸化Tau等蛋白沉积与部分中枢神经系统退行性病变(如阿尔茨海默病)发生密切相关,其严重后果之一就是患者认知功能障碍.这提示,Eph家族蛋白可能通过参与学习与记忆功能、影响Tau蛋白沉积并可能以趋化因子的形式等机制参与中枢神经系统退行性病变,因而对该类疾病防治研究可能具有潜在价值.
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抗血管生成肿瘤疫苗研究进展
研究发现,肿瘤的生长和转移依赖于血管的生成,如果抑制肿瘤新生血管的形成就可以有效抑制肿瘤细胞的生长和转移.越来越多的证据表明,以血管相关抗原为靶点的疫苗可以引发机体产生特异性细胞或体液免疫反应,抑制血管的形成,从而起到阻止肿瘤细胞生长和转移的作用.目前,针对肿瘤血管生成的疫苗治疗已成为肿瘤研究的热点及肿瘤治疗的新策略.本文就目前所进行的抗肿瘤血管生成的疫苗研究情况作一综述.
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原发性痛经的治疗药物和治疗靶点研究进展
原发性痛经是妇女常见的一种疾病,其发病机制复杂,可能与内分泌失调、子宫收缩异常以及子宫缺血、缺氧等原因有关.目前,原发性痛经的治疗药物主要以非甾体抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)及选择性COX-2抑制剂为主.但这些药物存在消化系统和心血管系统等不良反应,限制了其在临床的广泛应用.因此近年来人们开始重视研究开发新的高效低毒的原发性痛经治疗药物.本文对近年来原发性痛经治疗药物及治疗靶点的研究进展作一综述.
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炎性体研究进展
半胱天冬酶-1(caspase-1)活化导致白细胞介素(IL)-1β和IL-18等炎症细胞因子的切割和分泌,在机体天然免疫中起着重要作用.而caspase-1活化受到胞内多蛋白复合物--炎性体的调控.通过分析缺少炎性体组分的基因敲除小鼠,已经鉴定了多种感受不同外界信号刺激的炎性体.本文对目前已经鉴定的炎性体的组成、激活、调控及其生物学作用等方面研究进展作一综述.
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自分泌运动因子受体及其配体系统的研究进展
自分泌运动因子受体(autocrine motility factor receptor,AMFR)属于泛素蛋白酶体系统蛋白,其配体除自分泌运动因子(autocrine motility factor,AMF)外还包括神经白细胞素(neuroleukin,NLK)、磷酸己糖异构酶(phosphohexose isomerase,PHI)和成熟因子(maturation factor,MF)等.AMFR及其配体系统具有广泛的功能,如刺激细胞运动,作为神经营养因子营养及保护神经元,调节能量代谢和介导细胞的分化等.本文主要就AMFR及其配体系统的结构特点及在肿瘤及神经系统中作用的研究进展作一综述.
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急性重度有机磷农药中毒致急性心肌梗塞1例
1 临床资料患者为女性,53岁,自服"乐果"150 ml,于服药约30 min后被送往当地医院,给予清水20 000 ml洗胃,用阿托品、氯解磷定等药物治疗,但病情逐渐加重,于服药后19 h转送至我院.入院时,患者呈浅昏迷状态,简易呼吸器辅助通气,血压152/100 mmHg,双侧瞳孔等大等圆,直径约6 mm,对光反射迟钝,脉搏113次/min,体温38.5°C.
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乳腺癌眼内转移的彩色多普勒超声诊断
乳腺癌是目前女性恶性肿瘤发病率高的疾病之一.随着临床诊治水平的不断提高,乳腺癌患者的生存期已显著延长,而相应地发生远处转移的概率也在提高.乳腺癌转移常见于淋巴、肝脏、肺脏、胸壁、骨骼等,而眼内转移的较少见.本文通过在4 000余例乳腺癌患者中发现的4例乳腺癌眼内转移病例,探讨彩色多普勒超声在乳腺癌眼内转移诊断中的价值.
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HPLC测定河套大黄中土大黄苷的含量
河套大黄为蓼科植物河套大黄Rheum hotaoense C.Y.Cheng et T.C.Kao的干燥根及根茎,为甘肃及西北地区常见的大黄属栽培植物[1].土大黄苷具有抗菌、改善微循环、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抑制过敏反应、调控机体免疫防御系统、抗血栓以及抗氧化等作用[2].
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基于形状因子分析的重叠细胞自动判别技术研究
重叠细胞的判别在细胞计数和参数测量中有非常重要的意义.本文根据重叠细胞的形态特征,提出根据形状因子来判断细胞是否重叠.首先研究了形状因子的计算方法,对重叠细胞形状因子的阈值P0进行了探讨和实验,得出P0=0.5:当PE≤P0,认为目标存在细胞重叠;PE>P0,认为目标不存在细胞重叠.实验结果证明本技术能检测出不同形状的重叠细胞,准确率为95%.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |