军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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基质细胞衍生因子-1对骨髓间充质干细胞迁移能力及其信号轴的影响
目的 利用基质细胞衍生因子-1(SDF-1α)腺病毒载体,观察其对骨髓间充质干细胞(MSC)体外迁移能力及迁移信号轴缺氧诱导因子-1(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/SDF-1α/趋化因子受体(CXCR4)的影响.方法 将前期构建的Ad-SDF-1α、阴性对照Ad-GFP及CXCR4抑制剂AMD3100转染MSC.转染后48 h观察Ad-SDF-1α的转染效果,Transwell小室检测处理后MSC的迁移能力,qPCR检测各组MSC HIF-1α/VEGF/CXCR4的mRNA表达,Western印迹检测各组HIF-1α/CXCR4的蛋白表达,ELISA检测各组培养基上清VEGF表达水平.结果 Ad-SDF-1α转染效果良好;其细胞迁移数量较其他组多(P<0.05),且Ad-SDF-1α组与Ad-SDF-1α+AMD3100组的细胞数量均较空白组多(P<0.05),抑制剂AMD3100组细胞数量明显低于其他各组(P<0.05);Ad-SDF-1α组及Ad-SDF-1α+AMD3100组的HIF-1α、VEGF及CXCR4 mRNA及蛋白表达水平显著高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);而Ad-SDF-1α+AMD3100组的HIF-1α、VEGF及CXCR4 mRNA及蛋白表达水平表达水平较Ad-SDF-1α组低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Ad-SDF-1α可提高MSC的体外迁移能力,同时SDF-1α基因能促进HIF-1α、VEGF及CXCR4表达,因此MSC迁移能力的提高是通过HIF-1α/VEGF/SDF-1α/CXCR4信号轴实现的.
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利用丙氨酸突变探究PSMα4结构与功能的关系
目的 探究金黄色葡萄球菌酚可溶性调控蛋白α4(PSMα4)氨基酸残基发生突变后,对其细胞毒、趋化等功能的影响.方法 利用人工合成将多肽PSMα4中的非丙氨酸残基进行丙氨酸扫描定点突变,比色法测定溶血活性,LDH试剂盒测定细胞HCMEC/D3和PMN裂解程度,圆二色性(CD)检测以比较其结构上的改变,荧光标记法检测PMN的趋化强度,后利用同源模拟初步预测了PSMα4的三维立体结构.结果与结论 PSMα4的I3、V4、I15、I17位氨基酸残基替换为丙氨酸后其细胞毒作用有所增强,结合CD的结果发现,细胞毒作用与其α螺旋程度呈正相关;PSMα4的第I7、I8、F18位氨基酸残基是影响其趋化作用的关键位点.
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IHFB蛋白全人源单克隆抗体制备及对铜绿假单胞菌生物被膜形成影响的研究
目的 探讨靶向铜绿假单胞菌IHFB蛋白的单克隆抗体对细菌生物被膜形成的影响.方法 以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板,利用PCR技术扩增Ihfb基因,进一步构建重组表达载体pET28a-Ihfb,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达IHFB蛋白,经Ni2+亲和树脂纯化获得IHFB蛋白;利用噬菌体抗体库技术筛选获得与IHFB蛋白特异性结合的全人源单克隆抗体,PCR扩增所获得抗体的重链VH和轻链VL基因并构建重组表达载体,继而转染至293E细胞中,收集胞外分泌蛋白,并利用Protein A树脂纯化单克隆抗体.利用ELISA实验检测抗体亲和力,利用铜绿假单胞菌生物被膜形成实验检测抗体活性.结果与结论 通过噬菌体展示技术筛选并获得了全人源抗IHFB单克隆抗体,命名为YG15;ELISA结果表明,YG15抗体与IHFB蛋白有较高亲和力( EC50为24.8 ng/ml),实验结果验证全人源单克隆抗体YG15可抑制铜绿假单胞菌生物被膜的形成.
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大肠杆菌htrA突变株构建及其在鼠疫拟菌颗粒疫苗制备中的应用
目的 基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗.方法 基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htrA基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至pET-28 a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入到BL-21大肠杆菌野生株和其htrA基因缺失突变株中构建F1-PA融合蛋白表达菌株;SDS-PAGE电泳分析F1-PA融合蛋白表达;镍柱亲和层析纯化包涵体蛋白,梯度稀释透析法复性F1-PA融合蛋白;乳酸乳球菌经热酸处理制备拟菌颗粒;革兰染色和透射电镜分析拟菌颗粒的形态;拟菌颗粒分别与F1-PA融合蛋白或F1蛋白共孵育制备拟菌颗粒疫苗.结果 F1-PA融合蛋白在大肠杆菌野生株和htrA缺失突变株中均以包涵体形式表达.拟菌颗粒对F1-Pa融合蛋白的吸附能力明显高于对F1蛋白的吸附能力.F1-PA融合蛋白在大肠杆菌htrA突变株中的表达量明显高于在野生株中的表达量.结论 大肠杆菌htrA突变株用于表达F1-PA融合蛋白优于野生株.借助于肽聚糖锚钩蛋白,可将鼠疫菌F1抗原结合到乳酸乳球菌拟菌颗粒上制备鼠疫拟菌颗粒疫苗.
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倒吊笔根的化学成分研究
目的 研究倒吊笔根的化学成分,并初步评价其单体的抗肿瘤活性.方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备高效液相色谱及重结晶等方法进行分离纯化,通过波谱数据和理化性质进行结构解析、鉴定.MTT法检测化合物体外抗肿瘤活性.结果 从倒吊笔根75％乙醇提取物三氯甲烷部位中分离鉴定了16种化合物,分别鉴定为:尿嘧啶(uracil,1),尿囊素(allantoin,2),喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(2,4(1H,3H)-quinazolinedione,3),色胺酮(tryptanthrin,4),槲皮素(quercetin,5),染料木苷(genistin,6),蒙花苷(linarin,7),豆甾醇(3β-hydroxysitost-5-en-7-one,8),5,6α-epoxy-5α-stigmastan-3α-ol(9),5,6β-epoxy-5β-stigmastan-3β-ol(10),桦木酸(betulinic acid,11),桦木酮酸(betulonic acid,12),齐墩果酸(oleanolic acid,13),3β-乙酰基-12-烯-11-酮(3β-acetoxy-urs-12-ene-11-one,14),3β,23-dihydroxyolen-12-en-28-oic acid(15),N-(2′-hydroxyeicoxyicosanoyl)-1,3,4-trihydroxy-2-aminoheptadec-5-ene(16).化合物13对人乳癌细胞株MCF-7、人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株HCT116、人宫颈癌细胞株HeLa的生长有一定的抑制作用,其IC50值分别为8.6、9.2、13.8、12.3μmol/L.结论 化合物1～10,13,15,16为首次从该植物中分离得到.化合物4,11,12,13在体外具有抑制肿瘤细胞生长的活性.
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带FLAG标签的CDK4真核表达载体构建及对喉癌细胞的影响
目的 构建带Flag标签的pcDNA3.0载体细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase,CDK4)的真核表达载体,验证该基因对喉癌Hep-2细胞增殖的影响.方法 以人乳腺文库为模板采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出CDK4的CDS区编码序列,应用双酶切将带Flag标签pcDNA3.0载体插入到PCR产物上,转化DH5α提取质粒,测序正确后转染喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CDK4基因的转录水平,蛋白质印迹鉴定目的基因蛋白表达,CCK-8法和克隆形成实验测定其对喉癌Hep-2细胞生长的影响.结果 pcDNA3.0-Flag-CDK4真核表达载体构建成功;提取质粒转染Hep-2细胞,qRT-PCR技术检测到该基因在Hep-2中转录水平明显增高;蛋白质印迹实验验证该基因蛋白成功表达;CCK-8法和克隆形成实验证明CDK4基因可促进Hep-2细胞增殖.结论 pcDNA3.0-Flag-CDK4真核表达载体构建成功并验证该基因促进喉癌细胞增殖,为进一步研究该基因在喉癌中的发生发展奠定了前期基础.
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Tim-3对巨噬细胞葡萄糖转运体1表达的调节机制研究
目的 探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(T cell immunoglobulin and mucin-domain containing molecule-3,Tim-3)对巨噬细胞葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)的表达及其对细胞功能的影响,并初步探索其影响机制.方法 使用Tim-3 siRNA敲低Raw264.7细胞系观察GLUT1蛋白的表达,随后使用不同浓度Tim-3融合蛋白、Tim-3激动抗体,阻断和激活小鼠源巨噬细胞系Raw264.7,在基因和蛋白水平观察GLUT1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Tim-3以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)4项指标的变化.结果 Tim-3敲低的Raw264.7细胞系GLUT1蛋白表达水平明显升高;激活、抑制巨噬细胞Tim-3信号能分别抑制和促进GLUT1、TNF-α的基因和蛋白表达以及GAPDH基因表达,但Tim-3的基因和蛋白水平以及GAPDH蛋白水平并无显著变化.结论 Tim-3负调控巨噬细胞GLUT1表达,进一步影响TNF-α分泌,参与TNF-α转录后调控的GAPDH可能参与其中的调节机制.
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辐射诱导树突状细胞促进Treg分化及肺上皮间充质转化
目的 探讨树突状细胞经60 Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例.通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达.结果 免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90％,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg;Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高.结论 树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT.
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人PGK1基因真核表达载体的构建及其功能检测
目的 构建带FLAG标签的人癌基因磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase1,PGK1)的真核表达载体,并验证其表达产物的生物学功能.方法 采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人PGK1基因,并将其克隆到真核载体pcDNA3.0-FLAG上,酶切鉴定和测序鉴定后,通过Western印迹检测其表达;将FLAG-PGK1载体转染乳腺癌细胞ZR75-1,利用乳酸试剂盒测定乳腺癌细胞外乳酸含量,并通过CCK8法和划痕实验测定乳腺癌细胞的生长和迁移.结果 从乳腺文库中,PCR扩增出约1260 bp DNA片段,克隆到pcDNA3.0-FLAG载体上,测序结果与目的序列一致.Western印迹检测到目的基因表达,且位置正确.乳酸含量测定结果显示,PGK1可促进细胞乳酸含量增加;细胞生长曲线结果显示,转染FLAG-PGK1的乳腺癌细胞生长较空载体生长快;细胞划痕实验表明PGK1促进细胞迁移.结论 成功构建了FLAG-PGK1的真核表达载体,其表达促进了乳腺癌细胞生长和迁移,同时也促进了乳酸的增加,为进一步研究PGK1在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.
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田鼠型鼠疫菌血液存活能力的改变对豚鼠毒力的影响
目的 探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因.方法 通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血清共孵育,分别测定了鼠疫菌在活性血清和补体失活血清中的存活能力.结果 田鼠型鼠疫菌在小鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力明显高于在豚鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力.在小鼠和豚鼠血清中鼠疫菌存活能力明显高于在两种动物补体灭活血清中的存活能力.结论 布氏田鼠型鼠疫菌在豚鼠血液中的存活能力下降导致了其对豚鼠低毒.在同一种动物血清中,灭活补体不仅不能使鼠疫菌血清存活能力提高反而使血清存活能力降低.
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创伤性脑损伤后抑郁研究进展
抑郁是创伤性脑损伤(TBI)较为突出的一种并发症.大量研究表明,TBI患者中抑郁的发生率高于一般人群.无论TBI还是TBI后抑郁,均严重影响患者日常生活,降低生活质量,增加社会负担.目前关于TBI后高发抑郁的机制研究得到广泛关注,该文对TBI后抑郁的流行病学特征、发病机制及治疗手段进行综述与分析.
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集束化护理管理在军事战伤后致严重压疮护理中的应用
现代军事战争以军事技术、武器装备和信息化程度的高科技含量以及诸兵种联合作战为特征,而且存在武器杀伤威力大、作用时间长、杀伤机制复杂等特点,因此其致残、致死率高. 相对一部分伤员经过积极救治后,即使存活也面临长期卧床的可能,其压疮不可避免. 压疮大大降低这些伤员的生活质量,严重时可继发感染引起败血症甚至危及生命. 解放军307医院心内科对收治的1例军事战伤后长期卧床的压疮患者采取集束化护理干预措施,取得满意效果,现将护理体会报道如下.
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军医大学战术战伤救治实战化训练的实践与思考
战术战伤救治是美军制定并投入实战的先进创伤管理指南,是实战化背景下,新型军事卫勤人员必须了解和掌握的战创伤处理原则和方法.海军军医大学聚焦我军医护人员战伤救治能力培养需要,举办战术战伤救治演练与考核.考核聚焦实战,围绕战术战伤救治理念进行科目设置,以培养和检验学员实战救治综合能力.该文介绍了此次考核的组训流程及科目设置,总结特点、分析存在问题并结合实践探讨经验.
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无源型低温血液运输箱的研制
目的 研制速冻箱及无源型血液运输箱,用于战时深低温保存红细胞的短途运输.方法 速冻箱采用深冷混合工质节流制冷机作为冷源,有效容积约为60 L.运血箱由填充相变介质HFC-4310 mee的不锈钢封装盒和保温箱组成,内部有效容积约为10 L.结果 速冻箱空载时,箱内温度从常温降至-80℃,所需时间约为70 min,箱内极限温度为-128℃,降温时间约180 min;负载后箱内温度降至-125℃,约需500 min.将封装盒从-125℃条件下速冻箱中取出移至运血箱中,随后从-80℃冰箱中取出冰冻红细胞(用水替代)15袋(500 ml/袋)放入运血箱,运血箱内温度维持在-65℃以下的时间可达到10 h.结论 研制的低温速冻箱及配套使用的相变材料运血箱可实现红细胞低温保存的短途便携运输.
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冷暴露机体肢端血氧饱和度作为寒冷损伤预警生物学指标的探索研究
目的 为维护寒区部队官兵作业能力,探索肢端血氧饱和度作为寒冷环境应激损伤实时有效预警技术指标的可行性.方法 利用环境模拟舱对大鼠施加1～3 h-15℃的寒冷刺激,观测冷应激大鼠后肢内侧体表温度、血管一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性、肢端血氧饱和度的变化,采用Pearson相关系数评价肢端血氧饱和度与冷应激反应的相关性.结果 大鼠接受1～3 h寒冷刺激后,后肢内侧体表温度、血管NOS活性及肢端血氧饱和度均明显下降,且肢端血氧饱和度与冷应激大鼠血管NOS活性、后肢内侧体表温度的变化密切相关.结论冷应激过程中大鼠肢端血氧饱和度与后肢内侧体表温度和血管NOS活性高度相关,可作为冷应激损伤的预警标志,对肢端血氧饱和度的监测可为冷应激损伤提供一种实时预警途径.
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基于虚拟现实技术的空间认知能力试验方法研究
目的 视觉空间认知能力可作为飞行学员评估预测飞行能力的重要参考指标,该文利用虚拟现实(virtual reality,VR)技术手段探索设计空间认知能力试验的新方法.方法 针对视觉空间能力试验的研究现状及存在问题,分析虚拟地理空间实验环境的空间认知特征,提出VR技术应用于试验研究的有利条件及应注意的问题,构建设计空间认知能力虚拟试验框架,撰写试验脚本,论述实施步骤及各步骤主要思路.结果与结论 基于VR技术的视觉空间能力试验方法可改善现行试验方法逐渐暴露的问题,虚拟情景试验将会推动空间认知能力试验研究的进展.
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我国军人心率变异性水平及变化规律分析
目的 检测我国军人日常心率变异性(heart rate variability,HRV)水平,分析其变化规律和特征,为提高部队健康保障提供科学依据.方法 将256名基层官兵根据年龄分为3组,利用心率变异分析仪采集5 min心电信号,分析比较HRV指标:全部窦性心搏RR间期标准差(standard deviation of all NN intervals,SDNN)、总功率(total power,TP)、低频功率(low frequency,LF)、高频功率(high frequency,HF)、低频功率与高频功率的比值(LF/HF).结果 经统计学分析发现,<20岁组与20～29岁组各指标的差异无统计学意义(P>0.05);而30～39岁组SDNN、TP、LF降低,HF、LF/HF升高(P<0.05).进一步与非军事人群比较,结果显示,<20岁组官兵的SDNN和LF/HF低于正常参考值(P<0.05);而20～29岁组官兵SDNN、TP、LF、HF较正常参考值有不同程度的升高(P<0.05);30～39岁组官兵LF高于正常参考值(P<0.01).结论 了解了我军基层官兵的HRV水平和变化规律,发现不同年龄段官兵的HRV特征各不相同,应建立更细致、更有针对性的健康保障措施.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
