军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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rhEGF涂膜剂制备及其促进乳猪皮肤芥子气中毒创面愈合的实验研究
目的:观察重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor, rhEGF)涂膜剂对皮肤创面的保护作用和药物缓释的治疗意义及其对促进芥子气皮肤中毒乳猪模型创面愈合的影响.方法:选用断乳乳猪制作芥子气皮肤中毒模型,采用自身空白对照,比较rhEGF涂膜剂对两组创面形态、愈合时间、组织结构、超微结构的影响,应用免疫组化检测染毒后6 h,24 h IL-6和IL-8表达.结果:治疗组愈合时间(8.75±1.39)d,明显早于对照组(17.38±1.92)d,P<0.001;治疗组组织学和超微结构恢复明显优于对照组;染毒后6 h在对照组表皮、毛囊上皮及动静脉和淋巴管内皮细胞有IL-6和IL-8表达,至24 h达高峰,表达量明显高于治疗组.结论:rhEGF涂膜剂能有效抗炎和保护芥子气染毒皮肤创面并使药物缓释,促进芥子气皮肤中毒创面的愈合.
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131Ⅰ治疗Graves'病后甲状腺γ射线的体外测定和分析
目的:了解Graves'病患者服用放射性131I治疗后24 h内甲状腺对131I的吸收情况.方法:Graves'病患者18人,根据服用的131I剂量分为A组(小剂量组),服用131I剂量平均在162.8 MBq(4.4 mCi); B组(大剂量组),服用131I剂量平均在255.3 MBq(6.9 mCi),空腹服用131I后行1,2,4,8,12,24 h 6个时间点的甲状腺体外γ射线剂量率的测定.结果:空腹服用131I后1 h γ射线剂量率快速增高,2~12 h为高峰持续期,随后缓慢下降,B组的高峰出现时间较早,曲线波动明显高于A组(P<0.001),但两组的曲线形态大致相同.结论:Graves'病患者服用131I后1h是甲状腺快速吸收和浓聚期,12h后缓慢代谢和释放,不同的个体甲状腺吸收131I的过程有所差异.
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高功率微波对兔眼辐射损伤的研究
目的:采用高功率微波(HPM)辐照青紫蓝兔,长期动态观察角膜、晶状体及视网膜的病理变化,探讨HPM对视觉系统的影响.方法:6种功率密度的HPM辐照35只青紫蓝兔,并于照射后30,90,180和360 d应用裂隙灯、检眼镜、光镜和电镜观察角膜、晶状体和视网膜的病理变化.结果:眼部各组织对HPM辐射损伤以晶状体为敏感,角膜次之,视网膜轻微.辐照后30 d,晶状体上皮细胞以变性为主.照后90~360 d,晶状体囊膜增厚,上皮细胞增生,晶状体后皮质水肿、空泡形成,白内障发生.损伤具有剂量-效应相关性.结论:HPM可导致晶状体后皮质混浊、白内障发生,辐射功率与病理改变呈正相关.
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BioSun:计算机辅助分子生物学实验设计的软件系统
论述了我们自行研究与开发的分子生物学实验辅助设计的生物信息学软件系统BioSun.该系统运行于Windows环境,其主要功能有:可视化的序列编辑、可接收多种序列格式(EMBL, GenBank和FastA)的数据库管理系统、多种方式的序列比较、多种方式的抗原表位预测、基于多种算法的RNA二级结构预测、酶切位点分析及酶切图谱制作、PCR实验辅助设计、辅助寡核苷酸微阵列的探针设计、辅助cDNA微阵列的引物设计和原核系统外源基因高效表达设计等.BioSun系统使用图形用户界面方式,可实现对图形与文本文件的灵活管理,具有操作灵活、功能多样等特点,可用于分子生物学实验的辅助设计,对加快实验进程和提高实验的成功率具有重要意义.
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cDNA-RDA技术分离新的肝硬化相关基因片段
目的:分离在肝硬化组织上调表达的新基因,以阐述肝硬化发生的分子机制.方法:利用优化的代表性差异分析方法分析正常肝脏及肝硬化组织表达基因的差异.两轮杂交后的产物克隆到T载体中,斑点杂交筛选阳性克隆以获得差异表达基因片段,并进一步以半定量RT-PCR鉴定.结果:上调表达的克隆包括与一些序列和功能完全未知的基因同源的cDNA以及未曾报道过的在肝脏病变中发生表达变化的已知基因--钙结合酪氨酸磷酸化调节蛋白、雌激素应答B盒蛋白等.结论:利用优化的代表性差异分析方法成功分离获得在肝硬化组织中上调表达的基因片段,其中一些新基因的克隆及其在肝硬化发生中的作用有待进一步研究.
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γ射线对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响及其意义
目的 检测不同剂量γ射线照射对肺成纤维细胞中Smad通路信号转导的影响并探讨其意义.方法:进行大鼠肺成纤维细胞的原代分离培养,应用3,5和8 Gyγ射线照射,通过免疫组织化学、免疫印迹和免疫共沉淀等方法检测照射后Smad3,4和7蛋白的表达部位和表达水平的变化及Smad3与Smad4相互作用的变化. 结果:3,5和8 Gyγ射线照射后,Smad3,4和7蛋白表达水平无显著改变,Smad3与Smad4复合物的形成增加,部分大鼠肺成纤维细胞中Smad3和Smad4主要表达于细胞核. 结论:一定剂量的γ射线能促进大鼠肺成纤维细胞中Smad3与Smad4的相互结合及核转位,对Smad通路具有活化作用.
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Sanger测序法确证硫代修饰反义脱氧寡核苷酸的序列
目的:建立一种简便、可靠的硫代修饰反义脱氧寡核苷酸序列确证方法,为反义药物的质量控制及新药研究与开发奠定基础.方法:选择含有待测反义脱氧寡核苷酸序列在内的一段靶基因为模板,以待测序的硫代修饰反义脱氧寡核苷酸作为下游引物,同时在其上游设计一条引物,进行PCR扩增,使待测序的反义序列以修饰形式掺入到PCR扩增产物中;以上述掺入反义序列的PCR扩增产物为模板,利用Sanger双脱氧链终止测序法对其进行自动序列分析.结果:该方法可对不同长度硫代修饰的反义序列进行测定,并且可有效地检测出合成过程中产生的突变和缺失序列,与质谱法相比,仪器和试剂更普及,方法易于掌握且测序成本低,用样量少.结论:该方法可用于硫代修饰反义脱氧寡核苷酸药物的序列确证.
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KGF-2与PRO2605蛋白相互作用的初步研究
目的:利用酵母双杂交系统筛选KGF-2的相互作用蛋白,为阐明其分子作用机制提供有益线索.方法:通过聚合酶链反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF-2 cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-KGF-2,并对其自身转录激活活性进行鉴定,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库,挑选双阳性克隆.将KGF-2和候选蛋白分别克隆至哺乳动物细胞双杂交的BD、AD质粒中,共同转染COS-7细胞,通过CAT分析验证KGF-2和候选蛋白之间的相互作用.结果:VDNA序列分析和同源检索显示所获候选蛋白为PRO2605.以KGF-2和PRO2605 cDNA共转化酵母宿主Y190后可激活报道基因,但共转染COS-7细胞后,CAT分析结果阴性.结论:KGF-2和PRO2605在酵母体内存在相互作用,但在COS-7细胞中未能检测到两者的相互作用.
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人细胞周期相关激酶(CCRK)启动子的分析和特征研究
目的:分析人CCRK基因启动子、启动子的核心序列及与其表达相关的转录因子.方法:采用5′-RACE技术鉴定人CCRK基因的转录起始点;对启动子区3′端3个截短片段255 bp(-367/-128),210 bp(-322/-128)和160 bp(-272/-128)进行删除分析,双荧光素酶分析测出的小活性片段作为核心启动子的上游位点.通过生物软件MatInspector V2.2分析核心启动子区域,寻找并推测重要的转录因子,并对其核心序列进行定点突变分析,再通过电泳迁移率(EMSA)实验加以鉴定.结果:采用5′-RACE技术,得到的PCR产物直接测序,定位-242 "T"为转录起始点;通过启动子3′端小片段删除分析,255,210和160 bp均无活性,由此判断3′端255个核苷酸不存在核心启动子序列,并定位一段74 bp的区域为核心启动子(-441/-367)区域.通过MatInspector软件分析,发现在这段核心启动子区域内有3个重要的结合位点:Delta EF-1,NF-κB和Sp1.对这3个结合位点的核心序列进行定点突变后瞬时转染U373,经双荧光素酶分析发现Delta EF-1的活性明显升高,NF-κB没有变化,Sp1的活性降低但不太明显.进一步通过电泳迁移率(EMSA)实验鉴定,Delta EF-1和NF-κB能与U373核蛋白形成特异性的DNA-蛋白质复合体,表明Delta EF-1和NF-κB两个转录因子与人CCRK基因表达相关.结论:对人CCRK启动子的特性研究,为今后认识该基因的转录调控机制打下了基础,为揭示恶性神经胶质瘤的发生机制及防治措施的研究提供了新的思路.
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应用肿瘤相关寡核苷酸芯片筛选乳癌差异表达基因
目的:应用寡核苷酸芯片技术研究乳癌基因表达谱.方法:根据文献获取目的基因,查询相应基因mRNA序列,通过计算机设计并合成探针,将探针点样于经化学修饰的载玻片上,制备含288种基因的肿瘤相关基因寡核苷酸芯片.提取乳癌与相应正常乳腺组织总RNA,通过逆转录制备荧光标记的cDNA探针并与芯片杂交,经洗片后扫描获取图像,计算机分析比较乳癌组织与正常乳腺组织的差异表达基因.结果:检测16例乳癌组织与正常乳腺组织标本,有10例基因表达存在明显差异,其中表达增高的有6种,表达降低的有4种.结论:乳癌组织与正常乳腺组织存在部分差异表达的基因,乳癌的发生发展与这些基因密切相关;寡核苷酸芯片技术在乳癌相关基因的研究中具有重要意义.
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钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32的重组表达及纯化
目的:构建L32-pQE32重组质粒,诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32,对重组蛋白进行纯化.方法:采用PCR法从钩端螺旋体DNA中获取编码LipL32的基因片段,构建重组克隆载体pGEM-T/L32和表达载体L32-pQE32,转化受体菌E.coli DH5α和E.coli M15,IPTG诱导表达重组LipL32蛋白.Ni-NTA亲和层析纯化重组LipL32蛋白.结果: 扩增出约750 bp的LipL32成熟蛋白基因,LipL32基因插入pQE32表达载体,表达产物6个组氨酸与LipL32蛋白的融合蛋白相对分子质量约为31 000,与预期大小一致.Western印迹显示能与钩体抗血清特异结合.结论:LipL32蛋白能在大肠杆菌中表达,Ni-NTA亲和层析可有效纯化重组LipL32蛋白,重组LipL32蛋白具有结合活性.
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Smad4诱导大规模染色质伸展结构域定位
目的:了解Smad4能否调节大规模染色质结构改变并对其功能区域进行定位.方法:将Smad4及其缺失突变体与pRC-lac 载体上lac的阻遏物融合并在AO3-1细胞中表达.该细胞株由CHO细胞衍变而来,整合有256个拷贝串联排列的lac操纵基因.在lac操纵子基因上游含有DHFR基因, 可用甲氨蝶呤(MTX)进行基因共扩增.在细胞中lac阻遏物识别和结合lac操纵子基因.用抗lac阻遏物抗体进行免疫组化试验,荧光显微镜下观察染色质结构的改变.结果:野生型Smad4(1~552 aa)有一定的诱导染色质伸展能力,且不依赖于TGF-β.N端区域(1~150 aa)、中间连接区域(130~325 aa)没有诱导大规模染色质伸展活性.C端区域(260~552 aa)有一定的诱导染色质伸展能力,而C端缺失38个氨基酸残基的区域(260~514 aa)能强烈地诱导大规模染色质伸展.结论:Smad4诱导大规模染色质伸展结构域位于260~514位氨基酸之间,C端38个氨基酸对Smad4诱导大规模染色质伸展有抑制作用.对Smad4诱导大规模染色质伸展活性特性的研究为揭示Smad4在肿瘤发生发展中的作用机制提供了新的途径.
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用核糖体RNA ITS区序列寡核苷酸探针鉴定临床常见真菌
目的:建立一种快速鉴定临床常见真菌菌种的方法.方法:选取真菌核糖体RNA的ITS区为靶基因,设计通用引物和种特异性探针,将3个属的6种临床常见真菌(白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉和黄曲霉)的种特异性探针加尾后固定于硝酸纤维素膜上;用标记生物素的真菌通用引物扩增11种医学真菌DNA,产物与固定在膜上的探针杂交.结果:通用引物可以扩增所试11种医学重要真菌的DNA,扩增片段长度约为560 bp.6种真菌扩增产物只与其对应的探针杂交.结论:此方法快速、简便、特异,适合常规实验室开展.
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基于IRES序列的抗体定点整合载体构建和表达
目的:比较不同全功能抗体基因之间的表达量.方法:构建了基于FLP-IN/FRT-pcDNA5和ECMV-IRES的抗体双表达载体,把抗HBsAg抗体轻链、重链基因克隆到该表达载体上进行表达.结果与结论:在CHO细胞中瞬时表达时没有检测到抗体表达,但在用抗性筛选到的克隆中有稳定的表达,各克隆之间表达量差异小于40%,为各种不同基因工程抗体表达量的筛选和优化提供了方法.
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重组肉毒毒素E(BoNT/E)重链C端的表达、纯化及其抗原性分析
目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素E重链C端(BoNT/EHC2)保护性抗原片段,为BoNT/E的抗体制备和检测方法的建立奠定基础.方法:采用PCR扩增BoNT/EHC2基因,插入表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3)pLysS获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/EHC2的抗原性.结果:表达工程菌pET28a-EHC2/BL21(DE3)pLysS于37℃用0.2 mmol/L IPTG诱导6 h,表达的目的蛋白可以达到全菌蛋白的37.9%.经过固定化金属螯合亲和层析一步纯化,rBoNT/EHC2的纯度可达95%以上.Western印迹和间接ELISA显示其具有良好的抗原性.结论:首次克隆、表达并纯化了BoNT/EHC2片段,并可被抗天然BoNT/E马血清所识别,为制备相应的抗体及建立快速检测方法做好了准备.
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几种性传播疾病病原体检测芯片的制备
目的:为了同时多样本检测和鉴别淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体3种重要的性传播疾病病原体,制备了寡核苷酸检测芯片.方法:针对3种病原体和荧光素酶基因设计特异的引物和寡核苷酸探针,采用硫代和氨基双功能探针修饰技术制备寡核苷酸芯片,以荧光标记多重不对称PCR技术为基础,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对性传播疾病病原体的检测.结果:对10种与待检病原体无关的菌及定量有限稀释的荧光素酶和3种病原体基因质粒模板进行芯片检测,结果表明芯片对待检病原体特异,其检测4种基因的灵敏度均为5×103拷贝质粒.对24份性传播疾病患者标本进行芯片检测,沙眼衣原体感染率为100%,与淋病奈瑟球菌混合感染率为83.3%(20/24),与传统PCR诊断结果完全一致.在24份标本中,淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体三重感染病例芯片诊断为3例,混合感染率为12.5%(3/24);而传统PCR诊断为4例,混合感染率为16.7%(4/24),两种方法的符合率为75%.结论:该芯片是一种可靠检测3种病原体的方法,它可快速提供有关患者混合感染的情况,因而为指导个性化治疗提供及时可靠的诊断依据.
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登革病毒衣壳蛋白与葡萄球菌核酸酶融合蛋白在大肠杆菌中的表达
目的:实现登革病毒衣壳蛋白C与葡萄球菌核酸酶SN融合蛋白在大肠杆菌中的表达.方法:利用基因重组技术将通过BamHⅠ连接在一起的CSN基因克隆入表达载体pLEX,转化大肠杆菌GI724并以色氨酸诱导表达,用SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定表达的融合蛋白,采用TDA显色法检测融合蛋白中SN的活性.结果与结论:成功构建重组表达载体pLEX-CSN并在大肠杆菌中获得表达,表达的融合蛋白相对分子质量约27 000,可被抗登革病毒C蛋白抗体识别,并具有SN的生物活性.为探讨登革病毒衣壳蛋白靶向性抗病毒作用奠定了基础.
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抗人TNF-α单链抗体rScFvH22原核表达及纯化
目的:应用PET32-c原核表达载体快速、高效地表达及纯化单链抗体.方法:将单链抗体H22基因克隆到PET32-c原核表达载体中,通过酶切及测序鉴定正确后,进行原核诱导表达和纯化,并检测纯化后单链抗体的功能.结果:DNA琼脂糖凝胶电泳表明,单链抗体基因克隆成功;SDS-PAGE结果表明,单链抗体得到成功表达和纯化;ELISA和Western印迹结果表明,单链抗体H22能够特异性结合人TNF-α.结论:成功地表达及纯化抗人TNF-α单链抗体rScFvH22.
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抗A型肉毒毒素人源单链抗体的表达、纯化及结合活性分析
目的:实现特异性抗A型肉毒毒素人源单链抗体(ScFv)的表达与纯化,并进行结合活性分析.方法:克隆单链抗体基因ScFv(VH-Linker-Vk),利用pET22b表达载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG化学诱导,固相亲和层析纯化蛋白,ELISA测定其特异结合活性.结果:pET22b可稳定表达人源单链抗体基因,表达产物占全菌蛋白的25%,表达蛋白全部以包涵体形式存在于胞内.经IMAC纯化,蛋白纯度大于95%.竞争性ELISA测定结果表明,重组抗毒素在体外具有良好的活性,可竞争肉毒马血清与肉毒毒素结合.结论:采用原核表达系统可实现抗A型肉毒毒素人源单链抗体的高效表达,重组人源单链抗体具有抗原特异结合活性.
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遗传修饰小鼠模型在功能蛋白质组学研究中的应用
功能蛋白质组学是蛋白质组学研究的重要分支,其研究与发展对获得蛋白质的功能信息具有重要作用.各种遗传修饰小鼠模型是研究功能基因组学的有力工具,在功能蛋白质组学的研究中,这项技术的应用也日益广泛.本文综述了利用肝脏、神经系统、心脏疾病的小鼠模型进行蛋白质组学研究取得的有意义的结果.
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红细胞血型抗原化学修饰的研究进展
采用化学修饰方法制备免疫原性低的红细胞,有可能成为目前解决临床输血反应的一个发展方向.本文综述了mPEG化学修饰红细胞血型抗原采用的工艺以及化学对修饰对红细胞形态、结构和功能影响的研究进展.
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TGF-β超家族分子在软骨内成骨中的作用
转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族分子包括TGF-β、骨形态发生蛋白(BMP)等30多个成员.它们在软骨组织分布广泛,在软骨内成骨的各个阶段皆具有重要功能.TGF-β分子可以促进软骨细胞细胞外基质合成,抑制软骨细胞的肥大分化和矿化.BMP分子可以诱导间充质细胞分化为软骨细胞,促进合成细胞外基质,抑制软骨细胞的终末分化.另外,TGF-β、BMP分子可以和IHH-PTHrP信号通路相互作用协调软骨细胞分化,BMP和FGF分子相互拮抗控制软骨细胞增殖、IHH分子表达和软骨细胞的终末分化.但是,TGF-β超家族分子在软骨内成骨中的详细作用机制仍需进一步的研究来阐明.
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表达序列标签拼接及验证研究进展
后基因组时代已经来临,基因组序列注释是其主要目标之一.本文就查找EST同源序列方法、各类拼接软件优缺点、现有转录组数据库和预测的蛋白质组数据库、全长cDNA判断方法及ORF选择等方面进行综述,并讨论基因预测方面的困难和不足及任务的长期性.
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GADD45基因--一种可能的新的生物剂量计
本文介绍了GADD45基因的辐射敏感性特征及其在细胞周期阻滞方面起的重要作用,并对国外近期研究做了简要介绍和分析,指出该基因有可能成为一种新的生物剂量计.
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激光安全标准的研究进展
本文简述了激光安全标准的定义及激光损伤阈值的研究进展,介绍了国内外激光安全标准协会、主要的激光安全标准及相关的研究进展,探讨了我国未来激光安全标准研究的发展方向.
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Acrp30生物学功能及调控的研究进展
Acrp30是脂肪来源的血浆蛋白,其生理学功能包括调节糖、脂代谢,提高胰岛素敏感性,抗动脉粥样硬化等.新近的研究表明,Acrp30有抗炎保肝的效果,有可能成为一种新的肝病治疗药物.Acrp30表达调控是与代谢相关的多种因素综合作用的结果,其中肾脏在Acrp30生物降解和清除中起重要作用,但目前Acrp30在体内的作用机制还有待于进一步研究.
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一种基于Red的在大肠杆菌中修饰染色体和BAC的新型重组工程系统
近5年来兴起了一种新型的基于λ-噬菌体Red重组系统的重组工程技术,它将缺陷型λ-噬菌体整合入大肠杆菌染色体上,使3种重组酶蛋白Exo、Beta和Gam的表达受到严格的调控.Red重组工程技术不受酶切位点的限制,只需用35~50 bp长的同源臂就能得到很高的重组效率.运用这种技术能在大肠杆菌体内通过同源重组对大肠杆菌染色体、BAC质粒等复杂DNA片段上的基因进行突变、敲除、替换等修饰;此外可运用该技术中缺口修复的方法构建质粒.Red重组工程技术有远大的应用前景,将极大地推动功能基因组研究的进展.
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多羟基二苯乙烯类化合物生物活性及其构效关系研究进展
多羟基二苯乙烯类化合物具有广谱的生物活性,目前已明确的生理活性有:抗过敏、抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抑制过敏反应、调控有机体免疫防御系统、抗血栓、清除自由基、抗血小板聚集、抗白血病、降血脂、降血糖等.本文综述了此类化合物的结构与生物活性的研究进展.
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胆囊切除术致胆汁瘘4例教训分析
胆汁瘘除因介入治疗、各种肝穿刺术、胆囊穿刺置管等原因所致外,绝大多数是胆道手术所引起的并发症,常与术后膈下感染有关;其次为手术中未发现肝外胆管或其他变异肝管的损伤,胆囊管残端结扎不牢等[1].
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术中放射治疗的护理配合
术中放射治疗是术中在直视下将放射源直接对准肿瘤区,在不损伤正常组织的情况下,给靶区以高剂量均匀的照射,进而控制局部肿瘤的发展,提高患者生存率的综合性治疗手段,其在临床应用中需要多科室的密切配合,而护理方面的配合在该项治疗的全过程中占有非常重要的地位[1,2].现将我院1991~2003年进行的7例术中放射治疗护理配合的经验报告如下.
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LDRD胸片心脏成像特点浅析
低剂量数字化X射线机(lowdose direct digital radiographic device, LDRD,北京航天中兴医疗有限公司产品),由于其价格低廉,性能优越,有4种机型可满足不同的要求,对广大中小医院极具吸引力。LDRD成像是逐行扫描后重建所得,具有不同时相成像的特点。在胸部摄片时,由于心脏的不停跳动,势必使心脏成像具有与传统X线摄片不同的特点,但目前有关报道较少,现将我院所做LDRD胸片心脏成像特点报道如下。
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |