军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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椒苯酮胺对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用
目的 观察椒苯酮胺(piperphentonamine,PPTA)对大鼠脑缺血再灌注损伤后的保护作用,并探讨其作用机制.方法 随机将SD大鼠分为假手术组、模型组、PPTA组(2.5,5,10 mg/kg)和阳性对照依达拉奉组(6 mg/kg).采用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)2 h再灌注模型,缺血1 h后静脉注射给药,复通灌流24 h后,采用Zea-Longa法进行神经功能缺陷评分,检测大鼠脑组织含水量,TTC染色法测定梗死体积及脑组织中SOD、MDA、GSH、NO、NOS生化指标.结果 与模型组相比,PPTA组神经功能评分减低,梗死体积减少,脑组织中SOD、GSH活力增加,NOS活力降低,MDA和NO含量减少.其中以高剂量(10 mg/kg)组改变为明显.结论 PPTA 可能通过抑制脂质过氧反应和清除氧自由基等机制,发挥神经保护作用.
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生物素化标签真核表达载体的构建及其在蛋白检测中的应用
目的 构建生物素化标签真核表达载体,利用生物素化蛋白检测快速、灵敏、简便的特点,对传统的Western印迹和pull down技术进行改进和优化.方法 利用pCI neo载体骨架构建生物素化真核表达载体.将红色荧光蛋白插入表达载体,用辣根过氧化物酶标记的链亲和素对融合蛋白进行Western印迹检测;将萤火虫荧光素酶插入表达载体,利用pull down技术定量分析生物素化效率;将丙型肝炎病毒NS4B蛋白插入表达载体,通过pulldown技术研究丙型肝炎病毒NS4B蛋白的蛋白质问相互作用.结果 构建的生物素标签真核表达载体能使目的 蛋白生物素化.报告基因定量分析结果表明目的 蛋白生物素化效率达72%.将该载体表达的融合蛋白应用于Western印迹和pull down技术中可实现无需特异性抗体的一步法快速检测.结论 将生物素化标签真核表达载体用于Western印迹和pull down技术,建立了快速、灵敏、简便的融合蛋白质检测新方法,为生命科学领域提供了一种有利的研究工具和通用技术平台.
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造血干细胞移植患者人巨细胞病毒糖蛋白gB的基因多态性分析
目的 阐明造血干细胞移植患者人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)糖蛋白gB的基因多态性.方法 提取追血干细胞移植患者外周血标本DNA,采用巢式PCR对DNA进行扩增,利用Ras Ⅰ与Hinf Ⅰ对扩增片段进行分型,并对不同型别的扩增片段进行序列测定和序列同源性分析.结果 60.3%(38/63)的患者为HCMV核酸检测阳性,在28例PCR检测强阳性的病例标本中,gB-1型占60.7%(17/28),gB-2型占17.9%(5/28),gB-3型占21.4%(6/28),未见gB-4型.gB-1和gB-2型之间的核苷酸同源性较高,在98%以上,而gB-3型与gB-1型(或gB-2型)相比,核苷酸同源性仅为81.2%～84.3%,并且缺失6个核苷酸,即在蛋白质水平上缺失2个氨基酸.结论 我中心造血干细胞移植患者HCMV病毒感染较为复杂,存在变异较高的gB-3型,但以gB-1型为主.
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纳米活性炭吸附丝裂霉素C腹腔化疗的生物发光成像研究
目的 用小动物生物发光成像技术(简称活体成像技术)对纳米活性炭(activated carbon nanoparticles,ACNP)吸附丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)所组成的新型淋巴靶向制剂卡波霉素(carbomycin,CBMC)的体内抗胃癌作用进行初步评价.方法 将包含有荧光素酶基因的pCIBAP-Luc载体传染病人胃癌BGC-823细胞系,经G418抗性筛选获得稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;将持续表达荧光素酶的肿瘤细胞对6组裸鼠进行腹腔种植;1周后裸鼠腹腔形成肿瘤灶,将6组动物分剐腹腔给予生理盐水、ACNP、MMC、CBMC低剂量、CBMC中剂量和CBMC高剂量药物.分别于给药后7,14,21 d用IVIS活体成像系统动态监测肿瘤生长情况.结果 体外影像结果显示,表达荧光素酶的细胞数量与其发光强度呈正相关;裸鼠活体成像结果显示,成功建立了高表达荧光素酶的腹腔胃癌移植模型;MMC组和3个剂量的CBMC组均较生理盐水组显著抑制肿瘤的生长;单独使用ACNP没有抗肿瘤作用;在含相同MMC药量的情况下,与MMC组相比,CBMC组能够显著抑制肿瘤的生长.结论 活体成像技术可动态监测胃癌腹腔肿瘤灶的生长发展过程,是评价抗肿瘤药物CBMC的一种新的有效手段;CBMC裸鼠腹腔化疗能有效抑制胃癌细胞的生长,具有良好的临床应用前景.
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伊马替尼和十字孢碱对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响
目的 探讨伊马替尼(STI571)、十字孢碱(STS)对非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响.方法 经STI571和STS处理后,通过Western印迹检测A549细胞内凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)的变化,然后利用膜联蛋白(annexin)V-FITC PI凋亡试剂盒,借助流式细胞仪,检测A549细胞凋亡;利用Hoechst染色检测A549细胞凋亡现象并通过免疫荧光技术检测细胞内AIF和线粒体的变化.结果 Western印迹检测结果显示,STI571和STS处理能够提高AIF在A549细胞内以相对分子质量为57×103的形式表达;流式细胞仪检测结果显示,STS处理组膜联蛋白V FITC染色的细胞数随着STS处理时间的增加呈现先增后降的趋势,溴化乙锭PI染色的细胞数随着处理时间增加到20 h呈现增多的趋势;STI571处理组膜联蛋白V FITC的染色结果和溴化乙锭的染色结果与对照组相比,变化均不显著;STI571与STS共同作用组膜联蛋白V FITC染色细胞数少于STS单独处理组结果,溴化乙锭染色的细胞数明显多于STS单独处理组;Hoechst染色结果显示,STS处理组和STI571、STS共同处理组细胞核内染色质发生凝集;间接免疫荧光结果显示,AIF发生聚集且细胞内线粒体染色亮度减弱.结论 STS和STI571处理能够引起细胞内AIF分布形式上的变化,STS可引起A549细胞发生细胞凋亡,STI571处理不能引起细胞发生凋亡,但能引起细胞内AIF发生聚集并对STS引起的细胞凋亡有促进作用.
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基于P2P和C/S集成模式的机构知识共享平台的研究与实现
本文通过分析目前存在的几种主流知识共享模式,提出了一种符合机构知识共享需求的P2P和C/S相集成的模式,并对利用Java语言实现的机构知识共享平台原型系统进行了介绍.随后对该平台的概念模型和系统架构进行了说明,论述了网络拓扑、全文检索、知识管理规则、导航方法等平台实现中的关键技术.实际使用表明,该平台能够实现机构内部各类知识的深度和准确的共享,并能将机构内的知识合理、有序地展示给机构内用户.
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内含子序列对CART基因转录调控作用的初步研究
目的 研究内含子序列对可卡因-苯丙胺调节转录肤(cocaine-and amphetamine-regulated transcript.CART)基因转录水平的调控作用.方法 分别以HeLa细胞和人源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的基因组DNA为模板,PCR扩增CART内含子Ⅰ(Intron)、CART截短内含子Ⅰ(去除NRSE基序,NBSEnon Intron)序列,克隆入载体 pGL3-Basic-CART32,构建pGL3-Basic-CART32-Intron、pGL3-Basic-CART32-NRSEnon Intron 荧光素酶报告载体.经质粒酶切和DNA测序进行鉴定.将报告载体瞬时转染入NT2/CloneD1细胞系,进行荧光素酶活性的分析.取1×107NT2/CloneD1细胞,采用抗NRSF和抗IgG抗体进行染色质免疫共沉淀,分析NRSF与CART内含子区NRSE的体内结合情况.结果 构建的pGL3-Basic-CART32-Intron、pGL3-Basic-CART32-NRSEnon Intron报告载体经酶切和测序鉴定正确.pGL3-Basic-CART32-Intren荧光素酶活性相对pGL3-Basic-CART32下调57.9%(P<0.05),pGL3-Basic-CART32-NBSEnon Intron相对pGL3-Basic-CART32-Intron上调53.8%(P<0.05).在NT2/CloneD1细胞中,CART内含子区NRSE调控元件能与NRSF蛋白结合.结论 研究结果表明,CART内含子序列对CART基因转录发挥负调控作用,内含子中的NRSE序列参与介导了其时CART基因的转录负调控作用.
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秀丽隐杆线虫双突变株系hif-1(ia04);glb-13(tm2825)的制备与鉴定
目的 以秀丽隐杆线虫为模式生物研究珠蛋白(globin)13(lgb-13)的生理作用,以回交2次的glb-13(tm2825)突变株系和hif-1(ia04)构建线虫双突变株系hif-1(ia04);glb-13(tm2825).方法 glb-13(tm2825)与野生型N2株系交配获得glb-13(tm2825)的雄虫,再与N2的雌雄同体线虫进行交配,回交2次后,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体.使用hif-1(ia04)和野生型线虫N2进行交配得到hif-1(ia04)的雄虫,然后再与glb-13(tm2825)雌雄同体线虫交配,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体.结果 获得hif-1(ia04);glb-13(tm2S25)双突变株系.结论 通过线虫交配回交可以使突变株系线虫保持稳定性状,而突变株系之间的交配可以制备出双突变株系,为深入开展glb-13的功能研究奠定了物质基础.
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新的M家族芋螺毒素的克隆及进化分析
目的 从中国南海芋螺中寻找新的M家族芋螺毒素.方法 应用3'RACE及巢式PCR进行基因克隆,将得到的目的 基因连接入pGM-T载体、转化并测序,用进化分析软件对得到的新序列进行进化分析.结果 从6种芋螺毒腺管中获得8个新的M家族芋螺毒素前体肽序列,其成熟肽含有15～21个氨基酸残基.结论 这些新的M族毒素与已报道的M家族毒素序列同源性较低,是Mini-M家族的新成员.
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p53K370位乙酰化调控紫外线诱导的p53活化及细胞凋亡反应
目的 探讨p53 K370位乙酰化修饰反应在紫外线B(UVB)诱导p53活化及细胞凋亡反应中的作用.方法 体外培养野生型和p53基因缺陷型小鼠胚胎成纤维细胞(wt-MEFs和p53-/-MEFs).以UVB为刺激源,双荧光素酶报告基因法分析wt-MEFs细胞中p53的转录诱导活化情况;Western印迹检测UVB诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应及p53总蛋白表达情况;构建p53点突变体K370R并在p53-/-MEFs细胞中比较UVB诱导wt-p53和p53 K370R的转录活化情况及野生型和突变体蛋白介导细胞凋亡反应的差异.结果 UVB刺激wt-MEFs细胞后p53转录激活活性呈剂量和时间依赖性明显上调;同样条件下UVB能够有效诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应;p53 K370位突变后并不影响UVB刺激作用下p53的蛋白质稳定性,但其转录激活活性显著下降;同时K370位突变后能够有效抑制UVB诱导的细胞凋亡反应.结论 p53 K370位乙酰化修饰反应在UVB诱导的p53活化及细胞凋亡反应中具有重要作用.
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1-磷酸鞘氨醇促进大鼠血管平滑肌细胞迁移的实验研究
目的 探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠血管平滑肌细胞(rat vascular smooth muscle cells,rVSMc)迁移的作用机制,为肿瘤血管新生和心血管疾病发生机制的研究提供新的思路.方法 体外分离培养、鉴定rVSMc细胞,建立低氧培养箱和氯化钴诱导的细胞低氧模型,应用RT-PCR方法对rVSMc细胞的SIP受体表达水平进行检测,运用微孔隔离室穿越方法研究SIP对rVSMc细胞迁移的作用,并用S1P受体阻断刺加以证实.结果 与结论 rVSMc细胞表达SPK1和S1P受体rS1P1、rS1P2和rS1P3,低氧状态下rVSMc细胞SPK1的表达和活性均高于对照,S1P主要通过与rS1P2受体结合促进rVSMc细胞的迁移.
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新型抗uPAR人源化抗体的表达和活性检测
目的 制备抗尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)人源化抗体并初步检测它们与抗原的亲和能力.方法 通过计算机辅助设计的结果,合成新型抗uPAR抗体的轻链和重链可变区基因序列,通过重叠PCR方法,拼接成完整的轻链和重链基因并克隆入pIRES双向表达载体.瞬时转染293T细胞,收取细胞上清,rProtein A亲和层析法纯化目的 抗体,并进行SDS-PAGE和免疫印迹鉴定,采用Biacore3000技术检测抗体与抗原的结合能力.结果 成功构建5种表达载体S1～S5,纯化的抗体在还原SDS-PAGE中表现为相对分子质量约为25×103和55×103两条带;免疫印迹分析表明,该人源化抗体可与羊抗人IgG特异性结合.Biacore3000实验结果表明,S2、S4和S5抗体与抗原具有良好的亲和活性,且素和活性分别为1.74×10-8,1.49×10-8和1.05×10-8 mol/L.结论 成功构建并表达了5种抗uPAR人源化抗体,其中S2、S4和S5具有良好的抗原结合能力.
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高效液相色谱法定量测定巴戟天中菊淀粉型寡糖的含量
目的 研究建立菊淀粉型寡糖的高效液相色谱(HPLC)测定方法,定量测定巴戟天中菊淀粉型四、五、六、七寡糖的含量.方法 提取巴戟天寡糖,直接分析.色谱柱:Click Maltose 4.6 I.D.×100 mm,流动相:乙腈-水,流速1.0 ml/min,100 ELSD9型蒸发光散射检测器(ELSD),进样量20 μl,用外标法测定巴戟天寡糖中四～七糖的含量.结果 建立了测定巴戟天寡糖中四～七糖含量的方法.四～七糖的线性范围分别为四糖11～90.72 μg,r=0.9996(RSD=2.2%);五糖5.67～90.72 μg,r=0.9992(RSD=1.56%);六耱9.6～48.78 μg,r=0.9998(RSD=3.2%);七糖6.8～33.6 μg,r=0.9984(RSD=2.7%).结论 本方法可以作为新药巴戟天寡糖的质量控制方法.也可用于巴戟天药材的质量控制.
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慢性湿疹小鼠模型的建立
目的 建立小鼠背部慢性湿疹模型.方法 用0.5%、1.0%和2.0%3个不同浓度的2,4-二硝基氯苯(DNCB)反复刺激小鼠背部皮肤,比较不同浓度DNCB刺激局部皮肤产生的皮损炎症程度及组织病理切片炎症细胞数量的差异.结果 小鼠背部皮损炎症程度及组织病理炎症细胞数量各组间均有统计学意义.结论 0.5%DNCB反复刺激小鼠背部皮肤可建立慢性湿疹模型.
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一种热稳定人成纤维细胞生长因子突变体原核表达及活性鉴定
目的 原核系统可溶性地表达一种热稳定性的人角质细胞生长因子-2(human keratinocyte growth factor2,hKGF-2)并鉴定其生物活性.方法 通过重叠PCR方法进行定点突变,从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2突变体的核酸序列并克隆至原核表达载体pBV220进行诱导、表达和纯化.分别检测重组KGF-2及其突变体重组蛋白的生物活性和室温条件下的稳定性.结果 KGF-2及其突变体具有相同的促Hep-2细胞的增殖能力.室温状态下48 h内,rhKGF-2出现明显降解现象而rhKGF-2突变体几乎没有出现降解,表现出强的热稳定性.结论 KGF-2突变体具有天然KGF-2的生物活性,但其热稳定性明显优于天然KGF-2蛋白,为进一步研究KGF-2的结构和功能奠定了一定的基础.
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乙型肝炎病毒与宿主天然免疫间的相互作用
天然免疫是机体对抗病原体的第一道防线.病原体入侵后,通过相应的配体受体反应及信号转导,导致机体合成一系列细胞因子,建立广泛的防御机制.其中干扰素是起关键作用的细胞因子,它抑制病原体复制,防止病原体扩散,并影响机体的生理状态.乙型肝炎病毒(HBV)的感染也引起宿主的天然免疫反应,对HBV的复制发挥了不容忽视的抑制作用;另一方面,HBV时天然免疫也有抗击机制,保护病毒自身的生存和复制.HBV与机体天然免疫间的相互作用是非常复杂的.尽管目前对于HBV天然免疫的研究还存在诸多疑问,但在许多方面已取得一定进展.本文将阐述乙型肝炎病毒感染天然免疫方面的研究进展,重点讨论干扰素的作用及病毒对它的拮抗.
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斑点金免疫渗滤技术及其在检测中的应用
斑点金免疫渗滤技术是胶体金免疫技术与固相膜相结合发展起来的一项快速检测新技术,由于其具有简便、快速、经济、结果直观等特点而得到广泛的发展和应用,且有广阔的商业前景.本文综述了斑点金免疫渗滤技术的原理、制备过程及其在快速诊断中的应用,并对该技术的优缺点及发展趋势进行了讨论.
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小鼠尾静脉注射的操作体会
由于小鼠体型小,生长繁殖快,成本低,易于控制,因此常被用作医学实验动物。但由于小鼠尾静脉细,穿刺难度大,很大程度上制约了实验的成功与否。本实验室经过长期的动物实验,掌握了单人小鼠尾静脉注射技术,保证了实验的顺利完成。
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57例糖尿病患者经颅多普勒超声检测结果分析
据2001年中华医学会糖尿病分会的调查,糖尿病合并脑血管病者高达12.2%.大昔的病例对照和前瞻性流行病学研究表明,糖尿病是缺血件脑卒中的独立危险因素.与非糖尿病人群相比,糖尿病患者脑卒中的死亡率、病残率、复发率均明显升高,且病情恢复慢.为了分析糖尿病对脑血管的影响,我们采用经颅多普勒超声(TCD)方法检测了57例糖尿病患者的脑血管情况,包括血液流变学参数及频谱形态等,旨在探讨TCD检测在分析糖尿病因素所致脑血管病变的临床应用价值.
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高尿酸血症与代谢综合征的相关性研究
目的 研究高尿酸血症与代谢综合征之间的相关性.方法 将某部参加查体的干部按是否罹患代谢综合征及患有代谢综合征因素的多少分组,经过统计分析,研究高尿酸血症与代谢综合征之间的相关性.结果 代谢综合征组的年龄、体质量、体质量指数、血清尿酸水平、收缩压、舒张压、空腹血糖、甘油三酯均高于非代谢综合征组,随着患有代谢综合征组分的增多,血尿酸的平均水平也逐渐增高,差异有统计学意义.结论 高尿酸血症与代谢综合征密切相关,临床治疗代谢综合征时应注重包括高尿酸血症在内的多重危险因素的综合防治.
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低敏减压法固定经口气管插管与传统固定法的比较
目的 比较低敏减压法和传统方法固定经口气管插管的效果.方法 将120例经口气管插管患者随机分为试验组和对照组各60例,试验组采用3M胶布联合康惠尔渗液吸收贴固定经口气管插管(即低敏减压法),对照组采用普通白色医用胶布固定(即传统法),对气管插管移位和面部皮肤损伤进行分析比较.结果 试验组气管插管移位、面部皮肤损伤率明显降低,结果有统计学意义.结论 3M胶布联合康惠尔渗液吸收贴固定气管插管安全可靠,不易脱出,能降低患者面部皮肤损伤风险,减少再插管痛苦.
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美国生物防御2010年发展态势分析
本文分析了美国生物防御领域2010年年度进展及发展态势,包括重要文件传递了政府高度关注生物威胁的信息,投入大量经费加强生物防御能力建设,通过开发前沿技术强化了生物威胁的应对能力,以及不断寻找目前生物防御的不足之处以利于进一步改进.
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TXT2DNA:基于DNA序列的文本编、解码及比对软件系统
TXT2DNA是由我们实验室新近设计完成的一个能够将汉字等文本信息编码为DNA序列并可将后者解码还原为文本信息,同时可提供基于DNA序列比对技术的文本数据分析软件系统.TXT2DNA通过建立包括汉字字符在内的多种语言字符与DNA序列之问的唯一对应关系,为每个字符分配Unicode(唯一序列码),实现从文字字符到DNA序列的编码与解码功能,进而实现了DNA与汉字字符的互通.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
