军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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TDCPP暴露对PC12细胞CaMK2及MAPK信号通路的影响
目的 研究磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(TDCPP)暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)[Ca2+]i稳态的影响及其潜在毒性作用机制.方法 建立PC12神经细胞体外培养模型,选用50μmol/L TDCPP分别暴露PC12细胞0~4 d以及分别以0、5、15、25、50μmol/L TDCPP暴露PC12细胞4 d,采用Fluo-3AM荧光探针法检测[Ca2+]i水平;采用Western印迹法检测钙依赖/钙调蛋白激酶2(CaMK2)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白及其磷酸化水平的变化.结果 PC12细胞内[Ca2+]i稳态遭到破坏,随暴露时间的延长,胞内[Ca2+]i水平呈增多的趋势(P<0.01),且随暴露剂量的增加,胞内[Ca2+]i水平增多,呈明显剂量效应关系(P<0.05).CaMK2和MAPK通路蛋白磷酸化水平增加,且CaMK2蛋白的磷酸化呈现明显的时间和剂量效应(P<0.01);c-Jun氨基端激酶(JNK)和p38蛋白的磷酸化水平变化趋势相似,呈现一定的时间和剂量效应,但细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)蛋白的磷酸化水平随暴露时间的延长无改变.结论 TDCPP的暴露可引起PC12细胞内[Ca2+]i超载,破坏其稳态;激活CaMK2,使其磷酸化增多;同时激活MAPK通路,从而造成PC12细胞生存率的降低,细胞凋亡率的增加.
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壳聚糖季铵盐-PLGA包载SAK-HV微球的初步评价
目的 利用壳聚糖季铵盐-PLGA包载SAK-HV蛋白,克服口服给药的生化屏障.方法 采用双乳剂法制备载SAK-HV/壳聚糖季铵盐-PLGA微球(SAK-HV/quaternized chitosan-PLGA microspheres).以高速离心法测定微球中药物的包封率和载药量.以激光粒度分析仪测定载药微球的粒径、多分散性指数(PDI)和电位.利用荧光显微镜分析微球形态.在模拟人工胃肠液中测定微球的体外释放并应用SDS-PAGE分析从微球中提取的SAK-HV的结构完整性.采用溶圈法测定从微球中提取出的SAK-HV蛋白的活性.结果 所制备的SAK-HV/壳聚糖季铵盐-PLGA微球包封率为(70.8±2.2)%,载药量为(1.1±0.02)%,粒径为(2.573±0.202)μm,PDI为0.386±0.048,电位为(26.667±2.483)mV.采用荧光显微镜观察其形态为球形,较完整均匀.在人工胃肠液中,4 h释放量分别为(36.9±0.8)%和(44.1±0.7)%.SDS-PAGE结果显示,从微球中萃取释放出的SAK-HV未发生蛋白质的不可逆聚集或断裂,具有良好的稳定性.此外,采用溶圈法测定从微球中提取出的SAK-HV溶栓活性保留较高,其活性占比为(60.6±2.1)%.结论 构建的壳聚糖季铵盐-PLGA微球具有作为口服递送SAK-HV蛋白的潜力,为后续口服给药实验研究奠定了基础.
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KPC1对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响
目的 探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制.方法 通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转染进肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721,筛选得到稳定过表达KPC1的肝癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬转敲低肝癌细胞系中的KPC1;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝癌细胞系中KPC1蛋白的表达水平,验证过表达和敲低KPC1的效果;CCK-8法检测KPC1对肝癌细胞系增殖能力的影响;Transwell法验证KPC1对肝癌细胞系迁移能力的影响;WB法检测扰动KPC1后p105蛋白表达水平的影响;Log-rank检验比较KPC1高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异.结果 过表达KPC1可显著抑制Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力;而敲低KPC1显著促进Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力.过表达KPC1抑制p105的表达水平、提升p50的表达水平;而敲低KPC1则促进p105的表达水平、抑制p50的表达水平.临床相关性分析显示KPC1在肝癌癌组织中下调表达,且与肝癌患者的不良预后显著相关.结论 KPC1通过抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力而发挥抑癌基因的功能.
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采用IP-XL/MS技术研究SGC7901胃癌细胞中EGFR信号通路动态变化
目的 研究胃癌细胞在表皮生长因子(EGF)刺激下表皮生长因子受体(EGFR)相互作用蛋白的时序性变化.方法 筛选高表达EGFR的胃癌细胞系;EGF刺激不同时间后,利用甲醛固定免疫沉淀联合质谱(IP-XL/MS)技术对胃癌细胞中EGFR相互作用蛋白表达谱进行无标定量,捕获EGFR网络的动态变化.结果与结论 8种胃癌细胞系中,SGC7901细胞表达EGFR量高. 4次生物学重复实验,共鉴定到3728个蛋白,625个EGFR相互作用蛋白,包括已知的相互作用蛋白( GRB2、CBL、SHC1 等) ,并发现59 个新蛋白( ANKFY、LGR4、SNX3、VPS26 A、ZFYVE20等). ANOVA检验分析得到406个响应EGF刺激的差异表达蛋白,根据动力学变化可分成5个簇,其具有不同的生物学功能,如蛋白转运、內吞、囊泡循环和蛋白酶体输运等,共同参与EGFR信号传递的动态调控,交叉调节多条信号通路.
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基底样乳腺癌预后标志物的基因表达谱分析
目的 分析基底样乳腺癌(BLBC)术后组织样本的基因表达谱数据,筛选与预后相关的基因.方法 从国际基因表达谱数据库GEO和EGA中检索并获取乳腺癌基因表达谱数据,按照PAM50分型得到BLBC样本,保留记录有生存信息且BLBC样本数量>20个的数据集,终保留了4个数据集,共447个BLBC样本.采用Lipták′s weighted meta-z检验分析基因与生存时间的关系,并对预后相关基因进行功能注释.结果 通过分析,所得238个基因与BLBC预后好有关,62个基因与BLBC预后差有关(|meta Z score|<3.09,P<0.01).基因功能注释发现,预后好相关基因显著富集在免疫应答功能,而预后差相关基因没有显著富集的基因功能.结论 分析得到的238个基因和62个基因分别与BLBC的预后好和预后差有关,可能成为BLBC新的预后标志物.
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人GATA1真核表达载体的构建及对乳腺癌细胞生长的影响
目的 构建人GATA1基因的真核表达载体,研究其对乳腺癌细胞生长的影响.方法 以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出GATA1编码序列,将其插入到pcDNA3.0-FLAG载体中;将重组质粒与空载体分别转染293 T细胞,Western印迹检测GATA1表达情况,并通过生长曲线研究GATA1对乳腺癌细胞生长的影响,细胞划痕实验检测GATA1对细胞迁移的影响.结果 双酶切实验以及测序结果表明,pcDNA3.0-FLAG-GATA1的真核表达载体构建成功;Western印迹发现,GATA1在293T细胞中成功表达;生长曲线实验得出,GATA1可促进乳腺癌细胞的生长,细胞划痕实验表明GATA1促进细胞迁移.结论 成功构建了pcDNA3.0-FLAG-GATA1的真核表达载体,并发现GATA1可促进乳腺癌细胞的生长和迁移.
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ABRO1基因敲除小鼠骨髓来源巨噬细胞的永生化及其LPS/TLR4通路活化的检测
目的 永生化ABRO1基因敲除(KO)小鼠骨髓来源的巨噬细胞系(BMDM),并确定缺失ABRO1对巨噬细胞LPS/TLR4通路活化的影响.方法 用pCDH-SV40LT-puro慢病毒分别感染野生型(WT)及ABRO1 KO小鼠的BMDM,连续传代培养>50代,得到永生化细胞系.利用MTS法和EdU掺入法检测细胞增殖,AnnexinⅤ/7-AAD双染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡.脂多糖(LPS)刺激细胞后,Western印迹法检测NF-κB及MAPK信号通路,并用流式微球阵列(CBA)检测细胞产生IL-6、TNF-α的水平.结果 成功构建了ABRO1 WT和KO的永生化BMDM(iBMDM).正常培养下,WT及KO iBMDM细胞增殖能力和细胞凋亡均无明显差异,但撤除血清后,KO iBMDM细胞凋亡明显高于WT.LPS刺激后,NF-κB、MAPK信号通路激活及IL-6、TNF-α的产生无明显差异.结论 ABRO1缺失不影响LPS/TLR4信号通路.敲除ABRO1促进血清撤除诱导的iBMDM凋亡.
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某驻训部队食堂即食食品菌落总数测定与分析
目的 测定某野外驻训部队食堂留样食品菌落总数,评价食品安全水平,探索并建立野外驻训条件下测定食品菌落总数的方法.方法 采集某驻训部队食堂食品留样,使用菌落总数测试片和便携式恒温培养箱,测定食品的菌落总数.结果 在60份食品中,菌落总数达到满意水平(<103 cfu/g)的食品占40%,超标食品(>105 cfu/g)占25%.三餐之中,晚餐的菌落总数显著高于早餐.依据加工方式分类,生食食品的菌落总数高.结论 该食堂食品安全水平较低.应加强卫生监督,以降低食堂即食食品菌落总数;同时,禁食未经过热加工的食品.
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人Cdc25 B基因启动子报告基因载体的构建及转录活性分析
目的 构建人细胞分裂周期25家族蛋白B(Cdc25B)基因启动子(promoter)荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc25B-promoter,并检测其转录活性.方法 应用欧洲启动子在线数据库(EPD)获得人Cdc25B基因5′端非编码区处包含转录起始位点在内的-2000~+100的DNA序列.以正常人全血基因组DNA为模板,利用PCR扩增该序列,并插入到pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体上.通过设计不同引物,进一步构建系列缺失体,共获得7个不同长度启动子序列的报告基因载体.将其与内参质粒pRL-TK瞬时共转染HeLa细胞,通过双荧光素酶报告基因活性测定实验检测不同缺失体的转录活性.利用定点突变及RNA干扰(RNAi)探究预测的转录因子对Cdc25B转录活性的影响.结果 构建的人Cdc25B基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc25B-promoter经酶切鉴定及测序结果比对完全正确,将其转染HeLa细胞后,检测到荧光素酶高表达(P<0.05).启动子系列缺失分析显示-160~-53片段包含基本核心启动子,与生物信息学的预测结果一致.定点突变及RNA干扰显示NF-YB转录因子对Cdc25B起正调控作用.结论 成功构建了7个具有转录活性的人Cdc25B启动子缺失片段,确定了NF-YB是Cdc25B转录的一个重要调控因子,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础.
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哈维弧菌抗体的制备及其在磁性免疫层析试纸条的应用
目的 建立快速检测哈维弧菌的免疫学方法.方法 以甲醛灭活的哈维弧菌菌体为免疫抗原,对新西兰大白兔进行免疫得到哈维弧菌多克隆抗体;将多克隆抗体用间接ELISA法对创伤弧菌、副溶血性弧菌等进行特异性检测;将哈维弧菌多克隆抗体与磁珠结合,并将多克隆抗体标记在磁珠上形成特异性磁纳米探针,再分别以哈维弧菌多克隆抗体和山羊抗兔IgG作为检测线T线和质控线C线,初步实现了双抗体夹心模式的磁性免疫层析试纸条,并对磁珠偶联抗体添加量进行优化.结果 经ELISA法检测,哈维弧菌多克隆抗体效价为1:80000;其特异性良好,即此多克隆抗体与不同致病类型的食源性致病菌无交叉反应;佳偶联抗体添加量为140μg;半定量检测时间为10 min,检测的准确性和灵敏度已达到优,通过单纯的肉眼观察,可实现5×104 CFU/ml哈维弧菌的检测.结论 成功制备高效价哈维弧菌多克隆抗体并与纳米磁性材料进行了结合,为深入研究哈维弧菌的免疫原性与免疫学快速检测方法提供了基础.
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东北地区3所空军青少年航空学校首届毕业生招飞定选淘汰异常谱分析
目的 分析东北地区3所空军青少年航空学校首届毕业生分流体检和定选体检结果,为进一步探索青少年航校培养模式、提高定选合格率提供科学依据.方法 整理2018年度东北三省3所空军青少年航校毕业生定选体检数据和年度分流体检数据,对整体体检情况、淘汰科室分布和淘汰原因进行分析,并对入校3年来的远视力变化进行统计分析.结果 3所航校之间淘汰率的差异经分析无统计学意义(P>0.05),各科淘汰的构成比差异经分析也无统计学意义(P>0.05);12项淘汰异常项目中眼科占8项;黑龙江省学生远视力前后差异有统计学意义(P<0.01),而吉林和辽宁省远视力前后差异无统计学意义.结论 空军青少年航空学校要制定统一并切实可行的干预措施,进一步加强近视防控,有必要将玻璃体和角膜检测纳入常规分流体检检测项目.
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60 Co-γ辐照条件下硫酸阿托品的稳定性研究
目的 探索在60 Co-γ辐照条件下不同因素(辐照剂量、初始浓度、N2/O2饱和及自由基清除剂等)对硫酸阿托品稳定性的影响.方法 分别配制不同准确初始浓度的硫酸阿托品溶液(10、50、100 mg/L、100 mg/L+N2饱和、100 mg/L+O2饱和、100 mg/L+10%乙醇及硫酸阿托品粉末)等,经不同辐照剂量(0.3、0.6、1、2.5、5、10 kGy)的60 Co-γ辐照后,利用HPLC测定溶液中剩余硫酸阿托品的含量.结果 (1)在相同辐照剂量下,初始浓度越大,稳定性越好;在相同初始浓度下,辐照剂量越大,稳定性越差;(2)N2/O2饱和并未显著改善硫酸阿托品的稳定性;(3)添加自由基清除剂乙醇后,硫酸阿托品的稳定性显著提高;(4)硫酸阿托品粉末状态非常稳定,即使在10 kGy辐照剂量下,降解不超过10%.结论 硫酸阿托品溶液对60 Co-γ辐照敏感,为了在辐照环境下尽量保持硫酸阿托品稳定性,可尝试将其制成粉末剂型.
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我国菌种保藏机构的现状与未来
我国是世界上物种多样性丰富的国家之一,其中丰富的微生物资源在很多领域发挥着重要作用.微生物具有生命活力,每一代生存时间一般很短,易在传代过程中发生变异甚至死亡.菌种保藏中心的任务是广泛收集各种有用的微生物菌种,选择适宜的保藏方法,使微生物在保藏和传代过程中免于变异、衰退、活力减弱及死亡的风险,保持菌种原有的生物学特性,达到保证研究、检验、交换和使用的目的.菌种的科学保藏和管理直接关系到微生物资源的保存和利用.该文对我国菌种保藏机构进行了概述,并分析了各国菌种保藏机构的特点.
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SERS-侧流免疫层析研究进展
基于表面增强拉曼散射(SERS)的侧流免疫层析检测(LFIC)新技术在分子诊断领域得到了越来越广泛的应用.SERS-LFIC利用高灵敏度和高特异性的SERS检测探针代替传统的胶体金,克服了传统胶体金侧流免疫层析技术定量不准确和灵敏度低的问题.该文从SERS-LFIC的方法和应用两方面进行综述,归纳了不同种类的SERS检测探针,评价了SERS-LFIC的灵敏性和特异性,并对其未来的研究方向进行了展望.
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细胞程序性坏死与心血管疾病研究进展
随着对细胞死亡过程的深入研究,人们不断发现新的细胞死亡形式.程序性坏死不同于被动坏死,是一种高度调节的细胞死亡形式.近年来不同类型的程序性坏死不断见于报道,认为其在心肌梗死、缺血再灌注损伤、心力衰竭、心肌病等心血管疾病的发病机制中发挥重要作用,该文对其在心血管疾病中的作用及研究进展作一综述.
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微重力环境人体健康效应研究进展
微重力环境是影响航天员航天飞行时身体健康的重要因素.已有研究表明航天员处于微重力环境下身体功能会发生变化,甚至出现生理不适或病征.这些变化或病征的分子机制一直备受航天医学界的关注.该文以人体九大生理系统为主线,从生理病征和分子机制两个方面系统总结了微重力环境对人体各系统的影响,展望了未来微重力环境健康效应的研究方向.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |