军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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盐酸克仑特罗单克隆抗体的制备及特性鉴定
目的:制备抗盐酸克仑特罗(clenbuterol ,CL)的单克隆抗体并进行免疫学特性鉴定.方法:用重氮化法将盐酸克仑特罗偶联于载体牛血清白蛋白(BSA),形成的结合抗原BSA-CL作为免疫原免疫BALB/c小鼠,同时将CL与卵清白蛋白(OVA)偶联制备检测原(OVA-CL).应用杂交瘤技术建立分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水并进行纯化.用竞争性ELISA法测定抗体的亲和常数及交叉反应性.结果及结论:获得了18株稳定分泌抗盐酸克仑特罗单克隆抗体的杂交瘤细胞株,挑选其中E9-C11、C11-E3、E7-G8三株高亲和力的细胞株进行免疫学特性鉴定.三株抗体的亚类均为IgG1.细胞上清的间接ELISA效价分别为1:1 280、1:1 000、1:800,三株腹水效价都约为1×10-6.亲和常数分别为2.4×10-8mol/L、2.83×10 -8 mol/L 、3.28×10-8 mol/L .E9-C11单抗对CL的IC50为6.1035μg/L;对沙丁胺醇的IC50大于781.25 μg/L,交叉反应性小于0.78%;对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、莱克多巴胺及部分维生素和抗生素均无交叉反应性.蛋白免疫印迹分析证明三株单抗特异性均很高,可用于与其相关的免疫检测或应用研究.
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A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定
目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.
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CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定
目的:表达霍乱毒素B亚单位(CTB)和大肠杆菌突变的热稳定肠毒素(mST)的融合蛋白,并进行抗原性和免疫原性的分析.方法:通过连接肽(linker)将CTB基因和串连的mST连接,然后插入表达载体pET-22b(+),获得克隆,经IPTG诱导获得CTB-mST2融合蛋白.采用多因素正交优选法优化了培养基及培养条件,对表达产物进行包涵体复性后,经过亲合层析纯化得到融合蛋白,并对该融合蛋白抗原性和免疫原性进行了分析.结果与结论:构建了高效表达工程菌,经摇瓶培养,在优化培养基及培养条件下融合蛋白表达量可达320 mg/L,占总蛋白40%.融合蛋白免疫小鼠,可获得高滴度抗CTB和ST血清;将融合蛋白与灭活的O157∶ H7菌体组合免疫小鼠,可产生对O157∶ H7毒株攻击的保护力.本研究可为构建抗ETEC和EHEC复合疫苗提供依据.
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端粒酶为靶点的溶瘤病毒的抗肿瘤作用研究
目的:通过临床前体外实验研究观察溶瘤病毒CNHK300对各种乳腺癌细胞的特异性杀伤作用.方法:通过 TRAP-ELISA方法,确认各种乳腺癌细胞和正常成纤维细胞中的端粒酶活性.Western印迹检测腺病毒CNHK300 E1A在端粒酶阳性肿瘤细胞和阴性正常成纤维细胞中的表达差异.通过荧光显微镜观察病毒在细胞中感染和复制的过程.行病毒增殖实验,验证溶瘤病毒 CNHK300在端粒酶阳性乳腺癌细胞中选择性复制能力;MTT方法行细胞生长抑制实验,检测CNHK300对端粒酶阳性乳腺癌细胞的选择性杀伤能力.结果:各种乳腺癌细胞 MCF-7、BT-549和 SK-BR-3的端粒酶均为阳性,MRC-5和 BJ细胞的端粒酶均为阴性.CNHK300病毒的E1A可以选择性在端粒酶阳性的乳腺癌细胞株和转染 E1A的293细胞中表达,而在端粒酶阴性的正常成纤维细胞株中不表达.CNHK300病毒可以选择性在乳腺癌细胞中复制并杀伤肿瘤细胞,而在正常细胞中复制明显减弱,同时杀伤作用明显下降.结论:本研究证明,hTERT启动子可以用于调控腺病毒E1A选择性在端粒酶阳性肿瘤细胞中表达,并调控病毒在肿瘤细胞中选择性复制,后产生溶瘤作用.溶瘤病毒可能为肿瘤治疗提供一种新的有力武器.
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乙肝病毒外膜大蛋白检测的临床意义
目的:探讨乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)检测的临床意义.方法:随机选取203例乙肝患者血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV-LP、Pre-S1蛋白及HBV M,实时定量PCR方法检测HBV DNA.结果:LP的检出阳性率与HBV DNA的检出阳性率相关性具有统计学意义,且HBV DNA 拷贝数的对数值与HBV-LP 表达具有相关关系(r＝0.902);LP检出阳性率与Pre-S1蛋白检出阳性率差异具有统计学意义;不同HBV M模式检测LP检出阳性率差异不具有统计学意义,但26例HBeAg阴性患者血清LP检测为阳性.结论:血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性;血清中HBV-LP的检测是对HBV M检测的补充.
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人肿瘤转移相关基因mag-2的多克隆抗体的制备和鉴定
目的:制备和鉴定针对人肿瘤转移正相关基因mag-2蛋白产物的特异性多克隆抗体.方法:采用生物软件分析mag-2蛋白序列特性,预测特异性抗原表位,人工合成17肽抗原表位片段,将之与钥孔碱血蓝蛋白(KLH)耦联,采用背部皮下及皮内多点注射法免疫日本大耳白兔,收集分离血清,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价, Western印迹试验鉴定其特异性及其在多种肿瘤细胞中的表达.结果:成功免疫日本大耳白兔,ELISA结果表明得到的抗血清与免疫多肽有良好的结合,获得了高效价的多克隆抗体;Western印迹试验结果显示抗血清检测到的条带大小约为55×103,与mag-2理论蛋白产物相对分子质量相符;发现mag-2在多种肿瘤细胞中均有表达.结论:成功制备了mag-2特异性多克隆抗体,为深入研究mag-2基因在肿瘤转移中的作用提供了一个有用的工具.
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利用同源重组建立CHO高表达细胞株
目的:利用同源重组的方法,克服基因组位置效应,建立CHO高表达细胞株.方法:通过弱化筛选基因,构建了一系列弱化筛选基因的载体,大规模筛选CHO基因组,寻找转录活跃区,并在此基础上构建同源重组载体系统,包括标记载体pExplorer和打靶载体pTarget.结果:利用带有弱化筛选基因的标记载体pExplorer寻找到了基础转录水平较高,并且适于加压的细胞克隆,报告基因UK的表达量在加压后稳定在10 μg·ml-1·24 h-1·10-6细胞.然后通过载体pTarget实现了在CHO细胞中的同源重组.结论:通过同源重组的方法,有效地克服了基因组位置效应,为建立哺乳动物高表达细胞株提供了一个新的更加有效的途径.
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抗人BlyS嵌合抗体的研制及功能鉴定
目的:在具有中和功能的母本抗体基础上,进行人源化改造,获得具有相同功能的嵌合抗体.方法:本研究以一株具有中和活性的抗人BlyS鼠单抗(B20)为母本,将抗人BlyS鼠单抗B20的轻、重链可变区基因分别插入到含有人κ链和IgG1重链恒定区基因的真核表达载体中,构建了人-鼠嵌合抗体表达载体,转染真核细胞,通过ELISA、RT-PCR、免疫印迹、体外中和实验分别对嵌合抗体(CB20)进行检测.结果:RT-PCR结果显示,转染后细胞系有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录;ELISA、免疫印迹实验鉴定表明,该嵌合抗体与人BlyS特异性结合;体外中和实验表明,此抗体能中和BlyS对B淋巴细胞促增殖效应.结论:成功地构建人-鼠嵌合抗体CB20.
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兔全氟异丁烯中毒后血液学参数的变化
目的:观察大耳白兔吸入全氟异丁烯(PFIB)后其动脉血血气、血常规、空腹血糖,以及血清中炎症标志物乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶活力的变化规律,旨在发现对全氟异丁烯中毒早期诊断具有重要意义的诊断指标.方法:采用兔头部动态暴露装置,在PFIB 300 mg/m3条件下暴露20 min,经兔耳中央动脉连续采血进行分析.结果:在全氟异丁烯染毒前后,实验兔血常规、空腹血糖的变化不甚明显;在动脉血血气分析中仅发现雌性动物动脉氧分压在染毒后12和24 h出现轻微下降;雄性动物血清中乳酸脱氢酶(LDH)含量在染毒后即刻显著性升高,其血清中碱性磷酸酶(AKP)含量在染毒后12 h显著性升高.结论:血常规、空腹血糖在PFIB中毒后无明显变化,动脉血血气的改变对于PFIB中毒早期诊断的意义不大,而血清中LDH和AKP的含量变化对PFIB中毒早期诊断具有一定的参考价值.
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Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型关节炎症及血清抗体的动态变化
目的:制备Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA模型)并观察其关节炎症和血清中抗体的变化规律.方法:于第0天和第10天分2次多点皮内注射牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂以诱导大鼠CIA模型,应用足爪肿胀容积测定仪动态观察关节肿胀度,采用0～7级关节炎评分法进行关节炎评分,应用组织病理学、X线影像学动态观察踝关节组织的病理变化,应用ELISA方法动态检测血清中多种抗体.结果:CIA模型大鼠免疫后第12天即出现踝关节肿胀,第23天达高峰,持续至第72天(动物处死);X线检查显示:免疫后第30天,软组织明显肿胀,踝关节骨骼结构排列紊乱,间隙不清,可见囊性骨吸收和骨侵蚀;第60天后踝关节骨骼结构排列更加紊乱,骨质疏松和新骨形成并存,提示侵蚀性慢性关节炎.组织病理学观察显示,第72天踝关节滑膜炎性细胞浸润、滑膜增生,关节软骨及骨破坏,显示较明显的慢性关节炎症.血清中总IgG,IgM型类风湿因子(RF),IgG型RF和Ⅱ型胶原抗体于免疫后第15天均明显升高,以后维持在较高水平.结论:应用牛Ⅱ型胶原成功制备大鼠CIA模型,免疫后第12天即加强免疫之后即出现关节炎症的病理变化,至少可持续至第72天.
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血小板经不同活性基团mPEG修饰后功能变化的研究
目的:观察血小板经不同mPEG修饰后功能变化情况,并分析其原因.方法:分别用mPEG-BTC、mPEG-SPA对血小板进行化学修饰;流式法检测修饰前后血小板CD62P荧光强度变化;并对血小板的聚集、黏附及释放功能进行检测.结果:经mPEG-BTC、mPEG-SPA修饰后,血小板CD62P表达率由修饰前的(12.77±2.87)%分别降至0和(4.12±1.28)%;聚集能力由修饰前的(1.43±0.74)%分别升至(3.86±1.21)%和(3.84±1.12)%;黏附能力由修饰前的(30.2±5.59)%分别升至(45.5±2.72)%和(45.2±3.99)%;而血小板Ca2+释放能力修饰前后差异无统计学意义.结论:使用mPEG-SPA对血小板进行化学修饰可影响血小板的功能,是一种较为理想的修饰剂.
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自动化在线固相萃取HPLC/MS/MS法分析比格犬血浆中的葛根素含量
目的:建立自动化在线固相萃取HPLC/MS/MS法测定犬血浆中葛根素的含量,研究葛根素制剂在比格犬体内的药代动力学.方法:分析流动相为甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液(25:25:50,v/v/v),流速为0.2 ml/min,分析色谱柱为Grace Vydac C8柱.在线固相萃取流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液(5:95,v/v),流速为2.0 ml/min,固相萃取柱的填料为Zobax C18(50 μm).配有电喷雾离子源(ESI)的线性离子阱 LTQ 质谱仪用于定量分析葛根素,采用选择离子反应监测(SRM)方式,用于定量分析的离子反应分别为m/z 415.2→m/z 195.2(葛根素).结果:线性范围0.39～400 ng/ml(r2＞ 0.999) ,低定量限为0.39 ng/ml.日内、日间精密度(RSD%)分别小于7.6% 和6.4%,低、中、高3个浓度的QC样品准确度分别平均为 -0.51%,1.20%,-2.31%.单样品分析时间为6.5 min.结论:所建立的在线固相萃取HPLC / MS / MS 法样品处理简便、分析测试速度快、灵敏度高、线性范围宽、精密度和准确度满足药代动力学研究的需要,可用于非临床和临床药代动力学研究.
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利用双向启动子型RNA干涉载体构建随机RNA干涉文库的初步研究
目的:利用双向启动子型RNA干涉载体pRHU构建随机RNA干涉文库.方法:分别构建基于pRHU载体的绿色荧光蛋白EGFP和p53的干涉质粒,验证双向启动子型RNA干涉载体的可用性.设计合成满足pRHU载体特点的干涉文库随机模板,经PCR扩增克隆入pRHU载体,转化感受态细胞获取随机干涉文库.随机挑选20个菌落测序,评价随机文库质量.结果:双向启动子型RNA干涉载体pRHU能在哺乳动物细胞中对外源基因EGFP和内源基因p53进行有效的干涉,表明该载体是一个有效的干涉载体,可以用于构建随机RNA干涉文库.本研究采用的构建策略可在较短时间内,用50 μg pRHU载体获得4×106个克隆.随机挑选20个克隆测序结果表明均插入了GN17-19序列,并且不存在序列重复性.结论:采用本研究的构建策略可以简便快速地利用双向启动子型干涉载体成功构建随机RNA干涉文库,为进一步筛选功能基因奠定了基础.
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3种重要脑炎病毒的多重RT-PCR检测方法的建立
目的:建立针对西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equine encephalomyelitis virus,VEEV)和亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)的多重RT-PCR检测方法.方法:分别针对WNV的NS1基因、VEE的NSP2基因和HeV的G基因设计3对引物,建立了同时检测WNV,VEEV和HeV的多重RT-PCR方法.以不同滴度的病毒评估该检测方法的敏感性,同时以中国地区流行的与脑炎相关的黄病毒属和甲病毒属成员为模板验证该检测方法的特异性.结果与结论:所建立的3种病毒的多重RT-PCR方法可同时或分别特异扩增WNV,VEEV和HeV的454 bp,541 bp和723 bp基因片段,敏感度分别达到10 PFU/ml,100 PFU/ml和100 fg/ml;而对中国流行的与脑炎相关黄病毒和甲病毒如日本脑炎病毒、森林脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒的扩增均为阴性.结果表明所建立的多重RT-PCR敏感性和特异性良好,可用于3种脑炎病毒的快速鉴定和甄别.
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HPLC测定血浆和脑组织中文拉法辛的浓度
目的:建立测定血浆和脑组织中文拉法辛的方法.方法:血浆和脑组织样品均用液-液萃取法,正己烷:异戊醇(99:1)萃取.色谱柱Agilent Zorbax Eclipse×DB-C8(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相以乙腈:磷酸钾缓冲液(25:75);流速1.4 ml/min;室温;进样量20 μl;检测波长229 nm.结果:在0.25～32.00 μg/ml范围内,血浆中文拉法辛浓度与峰面积的线性关系良好(r=0.9999);在0.05～6.40 μg/ml,脑组织中文拉法辛浓度与峰面积也呈良好的线性关系(r=0.9994).血浆回收率为89.4%,血浆中文拉法辛浓度在0.5,4.0,32.0 μg/ml的日内变异系数(SD)分别为3.7%～5.5%,1.6%～5.2%和4.2%～5.7%,日间SD分别为6.5%,5.0%和2.0%,低检测浓度为0.15 μg/ml.脑匀浆回收率是93.3%,脑匀浆文拉法辛浓度在0.5,4.0,32.0 μg/ml的日内SD分别为2.2%～3.4%,1.3%～6.0%和0.6%～3.4%,日间SD分别为4.1%,3.4%和5.6%,低检测线为0.25 μg/ml.结论:建立了文拉法辛在血浆和脑组织中的高效液相色谱分离测定方法.该方法准确、重复性好、选择性强,适用于大鼠体内药代动力学研究和脑组织中药物浓度的测定.
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正常犬膀胱组织的显微傅里叶变换红外光谱分析
目的:观察正常犬膀胱组织的显微FT-IR光谱特征,探讨将显微FT-IR技术用于膀胱的组织病理学研究的可行性.方法:制备Beagle犬膀胱标本冰冻切片,在显微FT-IR光谱仪上分别测定黏膜层、黏膜下层及肌肉层的反射吸收光谱,观察不同层次犬膀胱组织的FT-IR光谱特征及其间差异.结果:按光密度值由高到低的顺序,3 302～2 875 cm-1及1 398～1 086 cm-1波数区段内依次为黏膜层、黏膜下层及肌肉层,1 669～1 548 cm-1波数区段内依次为黏膜下层、黏膜层及肌肉层.各层次间差谱的差异主要表现在酰胺Ⅰ、Ⅱ带两处,即黏膜层-黏膜下层的差值为负值,而黏膜层-肌肉层及黏膜下层-肌肉层的差值则均为正值.结论:显微FT-IR技术可以在原位从分子水平上反映正常犬膀胱组织化学组成及其各层次间的差异,有可能为膀胱的组织病理学研究提供一条新的途径.
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乳腺肿瘤CT灌注成像及其临床应用研究进展
CT灌注成像不仅能够反映组织的形态学特点,而且可以反映其血流动力学等方面的特征,在肿瘤性病变中应用广泛.在乳腺肿瘤中的应用虽处于起步阶段,但在乳腺肿瘤的诊断与鉴别诊断、治疗监测、疗效评价、预后评估等方面有较高的应用价值.本文就CT灌注成像技术的基本原理及其在乳腺肿瘤中的应用价值作一综述.
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非低氧刺激对HIF-1的调控作用
低氧诱导因子1(HIF-1)是组织细胞在低氧状态下诱导产生的主要调节分子,对维持细胞的氧平衡及在低氧状态下细胞的存活和代谢都具有重要作用.近研究发现,许多非低氧形式的刺激也可影响HIF-1的表达和活性.本文就体外物理因素(如高温、高氧、低温、辐射)和细胞因子等对HIF-1的调控进行综述,并对其可能的作用机制进行了探讨.
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纳米材料毒理学研究进展
纳米材料作为一种新型材料已被广泛应用于机械、电子、纺织、化工、环保、医药和军事装备等领域,同时其生物安全性问题也引起了人们的关注.有研究表明,纳米材料可以通过呼吸道、皮肤、消化道等途径进入人体,并导致机体不同水平的毒性损伤.本文归纳介绍纳米材料毒理学研究的现状,并分析提出了该研究领域中值得关注的问题,以期为纳米材料的生物安全性研究提供参考.
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细胞外RNA的研究进展
细胞外RNA是存在于细胞外以结合或游离形式存在的一类RNA分子,它不仅在生命过程中起着非常重要的作用,而且可以作为疾病诊断有力的分子标志.细胞外RNA主要包括细胞膜结合RNA、循环系统RNA和细胞外基质中的RNA.本文就细胞外RNA的发现、分类及应用前景进行了综述.
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星形胶质细胞影响神经突触可塑造的研究进展
星形胶质细胞(AS)是神经系统的重要组成部分,目前认为AS是构成突触结构的第三种成分.AS对突触的数量、形态结构、成熟过程以及突触传递都有影响.AS能够以多种方式和神经元相互作用,如通过谷氨酸-谷氨酰胺循环、细胞内Ca2+浓度的改变等环节影响神经元的生物活性,进而发挥对神经突触可塑性的影响.新研究表明,AS亦能够通过分泌多种介质,如谷氨酸、高半胱氨酸、D-丝氨酸、ATP、雌二醇、胆固醇、神经营养因子、凝血酶敏感蛋白和集聚蛋白等对神经突触可塑性发挥调节作用.
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辐射生物剂量计的临床应用与研究现状
简述了现行的辐射生物剂量计在临床应用中的优点和局限性,以及目前的研究进展.对近年来较受关注的可能成为生物剂量计的新指标和技术方法作一简介,并对其可行性和潜在应用价值进行了探讨.
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以胆酸为载体的肝靶向疗法
通过肝靶向给药技术将化学治疗药物选择性地投放于肝脏,能够减轻或避免其全身的毒副作用.胆酸是唯一的口服有效的小分子肝靶向载体,以胆酸为载体的肝靶向疗法为肝病及肝脏代谢性疾病提供了新的疗法.如胆酸-一氧化氮供体靶向偶合物能够选择性地将一氧化氮投放于肝脏,产生治疗肝硬化的作用;胆酸-脂肪酸靶向偶合物能够选择性地调节肝脏的脂代谢,具有治疗胆结石、脂肪肝和动脉粥样硬化的作用;胆酸-米非司酮偶合物能够选择性地作用于肝脏,产生特异性的降糖作用,而没有全身副作用.
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PCBP1:一种在多水平上参与基因表达调控的蛋白因子
多聚胞嘧啶结合蛋白1 (poly C binding protein-1,PCBP1),属于RNA结合蛋白亚家族,因其具有同RNA的多聚胞嘧啶(poly C)区域特异的结合活性而得名.目前该亚家族共有5个成员:hnRNP K(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K)、PCBP1、PCBP2、PCBP3和PCBP4.PCBP1蛋白在多个水平参与基因的表达调控,如转录、mRNA加工、mRNA的转运、mRNA稳定以及翻译水平调控等.本文对PCBP1基因的结构和生物学功能进行了综述.
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备用地下医院真菌污染状况调查及危害性分析
备用地下医院在平时处于备用状态,在战时主要用来接收部队伤病员.要使得地下医院在紧急启用时能迅速展开工作,了解地下医院污染状况,采取积极的预防及卫生保障措施很有必要,对进驻部队健康及储备物资安全具有特殊意义.现将备用地下医院真菌污染状况及危害性报道如下.
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卫生装备研究所的网络安全建设研究与实践
随着计算机的广泛应用和网络技术的飞速发展,计算机网络应用已经成为进行科研工作的重要手段之一.网络系统既要开放,又要安全,因此,如何实现网络的信息安全管理是网管人员面临的新任务.
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1例频发晕厥的门诊手术患者围手术期心理护理
门诊手术虽小,但作为躯体和心理的一种应激源,同样会使患者产生不同程度的紧张、焦虑心理.由于局部麻醉手术时患者意识清醒,因此其紧张、焦虑、恐惧情绪尤为突出,如不及时有效地进行心理护理,易导致患者术中或术后出现头晕、心慌、胸闷、心动过速、出冷汗,甚至休克等现象.
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适用于基因转染的细胞培养板的研制
目的:研制用于基因转染的细胞培养板.方法:用0.2%的明胶稀释LPEI, BPEI, Superfect,Lipofectamine 2000等转染试剂并将它们固定在96孔细胞培养板上.以绿色荧光蛋白(GFP)基因和荧光素酶基因(Luciferase)为报告基因检测培养板的转染效率,用MTT法检测转染24 h后的细胞毒性,将LPEI包被的培养板放置在37℃环境下进行稳定性研究.结果:所有试剂包被的培养板均有一定的基因转染效率,聚合物类试剂的效率高于脂质体类的Lipofectamine 2000.其中,LPEI包被的培养板的转染效率高、细胞毒性低.当LPEI的包被量为3.2 μg/孔时,293细胞在转染24 h后的荧光素酶活性达3.0×108 RLU/mg,细胞存活率为85%左右.LPEI包被的培养板在37℃保温14 d后基因转染效率无明显变化.结论:LPEI包被的转染平板具有转染效率高、细胞毒性低、稳定性好的优点.该平板具有操作简便、节省时间的优点,可用于进行大规模的基因转染研究.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
