军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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RNAi阻断GATA-3表达治疗小鼠过敏性鼻炎的实验研究
目的 探讨以GATA-3为基因治疗靶标,在体内实验阶段评估RNAi技术抑制Th2极化反应,阻止过敏性鼻炎发展的潜在治疗作用.方法 采用脂质体鼻腔给药系统,将在体外实验中获得的针对GATA-3基因抑制效果明显的特异性siRNA重组质粒载体Si338应用于小鼠过敏性鼻炎模型上,借助RT-PCR、ELISA、流式细胞术和HE染色分别检测鼻腔黏膜GATA-3的mRNA水平和相关炎症因子变化,以及Th1/Th2细胞亚群漂移和炎症细胞浸润的改变.结果 ① HE染色后,显微镜下观察到过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜水肿,上皮脱落,炎症细胞浸润增加和嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组,经RNAi治疗后,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数明显下降.② RT-PCR显示,siRNA质粒载体有效下调Th2极化条件下的GATA-3 mRNA含量.③流式细胞术检测显示,过敏性鼻炎小鼠脾脏中,Th1/Th2细胞亚群出现漂移,Th1细胞的相对数量明显减少,Th2细胞相对数量明显增加,RNAi治疗后,Th1/Th2比率出现逆转.④ ELISA显示过敏性鼻炎小鼠外周血中,IL-4与IL-5含量增高,Si338组IL-4含量明显降低.结论 在获得高效、特异性干涉序列基础上,针对疾病上游基因,诸如GATA-3,给予RNAi技术的靶向治疗能够显著缓解过敏性鼻炎动物模型中鼻黏膜的Ⅰ型变态反应.本研究为今后前瞻性地探索siRNA基因治疗过敏性鼻炎提供了具有潜力的研究思路和可行的实验方法.
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红色糖多孢菌ΔSACE_0065,ΔSACE_2559和ΔSACE_2565突变体构建及对孢子分化的影响
目的 构建红色糖多孢菌ΔSACE_0065、ΔSACE_2559和ΔSACE_2565三个突变体并研究其功能.方法 将待失活目的 基因的上下游同源片段依次连接到pUCTSR质粒Thio抗性基因(tsr)两侧,利用PEG介导的原生质体转化法将线性DNA同源片段转入红色糖多孢菌A226内,通过同源重组使目的 基因失活,后将构建出的三个突变株与出发菌株A226及ΔbldD突变株进行比较,观察孢子生长有无差异.结果 与结论 成功构建ΔSACE_0065、ΔSACE_2559和ΔSACE_2565三个突变株;与A226相比,ΔSACE_0065和ΔSACE_2559气生菌丝和孢子形成推迟,而ΔSACE_2565突变株的生长情况则无明显变化,提示红色糖多孢菌SACE_0065、SACE_2559基因参与其形态分化的调控.
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滤泡辅助性T细胞(TFH)在炎性肠病中的表达研究
目的 观察新型CD4+T辅助细胞亚群-滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,TFH)在炎性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)中的表达,探究其在IBD发病中的作用及机制.方法 用饮用葡聚硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)的方法建立IBD动物模型,密度梯度离心法分离小鼠脾淋巴细胞,采用不同荧光素标记的CD4、ICOS、CD40L、CXCR5抗体进行流式细胞染色,分析上述TFH的表面标记在DSS诱导IBD(DSS-IBD)模型中的变化;同时提取淋巴细胞RNA,用实时定量PCR检测TFH的特异性转录因子Bcl-6和效应分子IL-21的表达变化.结果 与结论与对照组相比,DSS-IBD模型动物CD4+ ICOS+,CD4+ CD40L+,CD4+ CXCR5+T细胞的比例,以及Bcl-6和IL-21在mRNA表达水平均显著下降,显示TFH亚群的功能调节失常可能是该类IBD的重要发病机制之一.
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弗氏志贺菌2a GadB蛋白的功能研究
目的 探究gadB基因的潜在功能及其对弗氏志贺菌2a 301株致病能力的影响.方法 利用λ-Red重组系统构建弗氏志贺菌2a 301株的gadB缺失突变株,随后进行基本的表型实验测评,并初步评价其毒力,后制备突变株和野生株全菌蛋白样品,利用双向电泳技术比较二者在蛋白表达谱上的差异.结果 成功获得gadB基因缺失株;生化实验发现缺失株不能利用甘油发酵;而豚鼠角膜实验发现突变株炎症反应稍轻于野生株;全菌蛋白表达谱中发现10个差异蛋白.结论 利用双向电泳鉴定到一些可能与GadB有关的蛋白,为gadB潜在功能的研究提供了线索.
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适用于显微镜下细胞连续观察的温度控制系统
目的 研制一种适合显微镜下使用的温度控制系统,以保证显微镜下对细胞进行长时间连续观测时的温度要求.方法 系统用透光性良好的氧化铟锡导电膜(ITO)作为加热元件,利用ITO导电薄膜自身温阻效应测量系统温度,辅以C8051F340单片机为控制系统核心,以改进的PID控温算法及脉宽调制技术(PWM)为依托,构成温度控制系统的核心.结果 与结论设计的温度控制系统无需额外温度传感器,结构简单,ITO膜表面温度分布均匀(1℃内),控温精度达±0.2℃;系统能够维持显微镜下BHK-21细胞保持良好的生存状态,可在显微镜下进行连续48 h观察,为细胞生物学动态行为特征研究提供一种技术手段.
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LC-MS-MS法测定人血浆中米格列奈浓度
目的 建立液质联用色谱法(LC-MS-MS)测定人血浆中米格列奈(mitiglinide)浓度.方法 空白血浆加米格列奈,用乙腈做为沉淀剂,取上清液用于LC-MS-MS分析.分析柱为日本资生堂CAPCELL PAK C18 MG,5 μm 150 mm×2.0 mm(ID)柱,流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵(0.1%氨水)分段洗脱(0~2 min 10∶90,2.1~8 min 90∶10,8.1~10 min 10∶90),流速为0.3 ml/min;质谱条件:电喷雾离子化电离源ESI负离子检测,喷雾电压(SP)4000 kV,鞘气(SGP)流速30 Arb,辅助气(AGP)流速0 Arb,毛细管温度(TEM)314℃;米格列奈和内标瑞格列奈的碰撞能量均分别为21 EV、23 EV;选择反应监测(SRM)分别测定米格列奈和内标瑞格列奈负离子m/z 314→189和m/z 451→379.2.结果 米格列奈在2.5~2000 μg/L检测浓度范围内呈良好线性关系(R>0.99),低定量限(LLOQ)为2.5 μg/L,绝对回收率在70%以上,高中低3种浓度的日内和日间RSD≤15%.结论 该方法操作简便、灵敏、准确,适用于临床米格列奈的血药浓度监测及其药动学研究.
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基于高内涵分析技术的新型PPARα/γ双重激动剂C333H和P633H的肝细胞毒性初步研究
目的 基于建立的高内涵细胞多参数毒性分析方法,观察新型PPARα/γ双重激动剂C333H和P633H的HepG2肝细胞毒性,并初步探查其可能的损伤机制.方法 在HepG2人肝癌细胞上,采用高内涵分析(HCA)技术,进行C333H和P633H的细胞毒性(细胞数量、核固缩、膜通透性、线粒体膜电位和细胞色素C),以及氧化应激和DNA损伤的多参数分析.结果 MTT法测得C333H和P633H抑制HepG2细胞增殖的IC50分别为(161.57±15.29) μmol/L和(101.08±17.58) μmol/L.HCA研究表明C333H在10~100 μmol/L,P633H在3~30 μmol/L显著降低膜通透性和线粒体膜电位;C333H在30~300 μmol/L、P633H在10~100 μmol/L浓度依赖性地降低细胞数量.至高浓度时,300 μmol/L C333H和100 μmol/L P633H进一步显著降低线粒体膜电位和细胞数量,显著增加核DNA及细胞色素C含量,显著减少核面积,此浓度下膜通透性和超氧化物歧化酶显著增加.结论 C333H在低于100 μmol/L,P633H在低于30 μmol/L时对HepG2肝细胞无明显的毒性反应;线粒体损伤、膜完整性破坏是两化合物引起细胞毒性反应的主要机制,其中线粒体损伤为毒性反应早期敏感性检测指标.此外,HCA法与MTT法在细胞增殖作用的分析上具有较好的一致性.
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亲水色谱-质谱联用(HILIC-MS)定量测定大鼠血浆中美金刚浓度及药代动力学研究
目的 建立灵敏、可靠的亲水色谱-质谱联用(HILIC-MS)方法测定大鼠血浆中美金刚的浓度.方法 血浆样品前处理采用蛋白沉淀,用HILIC-MS法测定.通过电喷雾电离源以选择离子监测(SIM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子分别为m/z 180(美金刚)和m/z 285(内标Ro 64-0802).色谱分离采用Amide-80柱(100 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水-甲酸(70∶30∶0.1,v/v/v,0.35 ml/min)为流动相.结果 美金刚的线性范围为2~500 ng/ml,相关系数r2为0.99882,定量下限为2 ng/ml,批内、批间精密度在3.9%和5.6%以内,准确度控制在84.9%~111.2%.结论 本方法通过HILIC技术,使美金刚保留时间增加,基质抑制降低并使检测灵敏度提高.该方法成功应用于大鼠血浆测定研究中.
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重大活动保障专用便携式现场卫生监督箱的研制
目的 研制一种重大活动现场卫生保障专用的便携式检测箱组,提高重大活动保障工作规范化水平.方法 总结多年工作经验,从实际工作流程需要出发,通过风险评估,得出现场需要检测的项目和工作内容,筛选项目方法,进行组合配套,并研发配套的专用计算机管理软件.结果 与结论研制的重大活动保障专用卫生监督箱满足工作人员执行相应卫生监督监测任务时对携行装备的全部需要,配套的专用管理系统可协助完成现场保障工作标准化业务流程.本研究对弥补重大活动卫生防病保障适用装备欠缺、规范卫生监督工作程序、提高卫生监督工作人员办公效率、提升军队卫生保障工作水平具有明显意义.
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咖啡酸苯乙酯靶向调控人结肠癌HT-29细胞FAK-ERK信号通路的研究
目的 探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对结肠癌HT-29细胞FAK-ERK信号转导通路中相关蛋白表达的作用,寻找其作用靶点,试图阐明CAPE抗肿瘤作用的分子机制.方法 用不同浓度CAPE处理HT-29细胞,利用Hoechst33258染色法和流式细胞术,检测细胞凋亡的发生.应用Western印迹法分析不同浓度CAPE对HT-29细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)蛋白表达的影响.结果 Hoechst33258染色发现CAPE作用后凋亡细胞数量增加.流式细胞仪细胞凋亡率分析显示,0,2.5,5.0,7.5和10 μg/ml处理HT-29 细胞24 h后,细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.Western印迹结果显示,在0~10 μg/ml范围内不同浓度CAPE作用于HT-29细胞24 h后,FAK、ERK蛋白表达随CAPE浓度的增加而下调.结论 CAPE可诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡,其作用机制可能与CAPE抑制FAK-ERK信号转导通路的激活有关.
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单兵操作野战快速固定及运送担架的仿真模拟研究
目的 设计并改进适合野战部队的可供单兵操作且能快速固定伤员并对伤员进行初救的担架.方法 应用铝钛合金和聚乙烯材料,根据中国人体型制作单兵操作野战快速固定及运送担架,并在模拟试验环境中记录不同天气(雨、寒冷)、不同环境(陆地、江河)下完成外固定操作的时间,并测量其强度.结果 一整套单兵操作野战快速固定及运送担架质量为5.5 kg,完成单例外固定操作的时间为水中1~2 min,干燥环境中0.5~1 min,担架能承受的大质量为250 kg.结论 单兵操作野战快速固定及运送担架总体性能达到指标,克服了传统担架质量大,携行不方便等缺点,达到了自身质量小,耗费人力少,操作简捷,可模块化拆卸等优点.
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大肠杆菌错配识别蛋白MutS的表达与活性鉴定
目的 构建表达错配识别蛋白MutS,并进行错配识别活性鉴定.方法 在大肠杆菌中表达MutS蛋白,并纯化获得目的 蛋白;利用凝胶滞缓实验对错配识别活性进行验证,并计算MutS蛋白降低的错配率.结果 纯化的MutS蛋白具有错配识别活性,并能降低DNA双链的错配率.结论 表达纯化的MutS蛋白在体外具有特异性识别、结合含有错配碱基DNA双链的生物活性,从而有助于合成生物学的发展.
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WJBC株盖塔病毒基因组序列测定及与其他甲病毒的系统进化关系
目的 对WJBC株盖塔病毒(GETV)进行基因组序列测定,阐明其与已报道的GETV及其他甲病毒的关系.方法 将GETV基因组编码区分12段分别进行RT-PCR扩增,将扩增产物直接进行测序,非编码区采用RACE法进行扩增,扩增产物纯化后连入pGEM-T easy载体,经转化DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆鉴定后测序,应用DNAStar软件将测序结果拼接获得基因组序列.结果 与结论 GETV基因组核苷酸共11 696 nt,编码3721个氨基酸,非结构基因编码2468个氨基酸,结构基因编码1253个氨基酸,结构基因和非结构基因之间有44 nt的连接区为非翻译区.病毒基因组5′端和3′端分别有78、411 nt的非编码区.序列同源性分析结果表明,此株病毒与M1株盖塔病毒同源性高,两者核苷酸序列同源性为99.8%,氨基酸序列同源性为99.2%.
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血管平滑肌细胞钙化过程中DNA损伤响应分子p21、p53和c-abl的变化
目的 研究钙化发生过程中细胞DNA损伤响应分子表达水平的变化.方法 半定量方法测定钙化细胞中p21、p53、c-abl的mRNA水平,通过免疫印迹法检测p53和chk1磷酸化水平.结果 血管平滑肌细胞在10 mmol β-磷酸甘油酯的诱导下,随着时间的延长,在时间点2,4,6 d时,p21、p53、c-abl的mRNA水平上升,第8天后mRNA水平下降.在前6 d中,p53和chk1磷酸化呈逐步上升趋势.结论 在钙化过程的前期,p21、p53、c-abl的mRNA水平上升,p53和chk1磷酸化水平也呈上升趋势,这表明钙化的发生和DNA损伤响应分子有关.
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阿托伐他汀与脑超声波治疗对颈动脉脂肪斑块的干预
目的 探讨阿托伐他汀与脑超声波治疗对缺血性脑血管病(ICVD)颈动脉血管狭窄及颈动脉血管斑块形成的干预治疗效果.方法 将阿托伐他汀与脑超声波治疗设为研究组,即:口服他汀类药物20 mg每日1次,同时常规给予脑超声波(SUT-800型,超声输出频率800 kHz,声强0.75~1.25 W/cm2)治疗每日一次,每次30 min,10 d一个疗程,间隔1周再进行第2个疗程,6个月后巩固治疗一次,12个月观察疗效;单纯口服阿托伐他汀治疗为他汀组,即:仅口服阿托伐他汀20 mg每日一次,12个月后观察疗效;对照组,即:普通常规治疗,不用阿托伐他汀与脑超声波治疗.分析3个组治疗脂肪斑块效果.结果 3个组干预脂肪斑块差异显著,即研究组与他汀组,他汀组与对照组对照比较,研究组对脂肪斑块的干预效果显著高于他汀组,他汀组高于对照组(P<0.01).结论 阿托伐他汀与脑超声波治疗能明显消融或减少颈动脉脂肪斑块,控制血管狭窄,预防ICVD的发生.
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合成生物学技术在地雷检测中的应用
近年来,随着合成生物学技术的发展,许多基于合成生物学的生物传感器检测方法应运而生.其中基于合成生物学的地雷检测技术能够提供较高的检测特异性,并且使用安全,价格低廉.本文主要介绍一些利用合成生物学技术的方法,通过检测地雷泄漏物2,4,6-三硝基甲苯(TNT)来实现地雷的生物检测.
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炭疽芽孢杆菌S-层蛋白功能研究进展
炭疽芽孢杆菌是人畜共患病炭疽的病原菌.目前,对炭疽杆菌2个毒力大质粒(编码主要毒力基因的pXO1与编码合成荚膜基因的pXO2)的研究比较深入;炭疽杆菌细胞壁与荚膜间还存在一种蛋白性质的类晶体(paracrystalline)结构:S-层(surface-layer,表层)结构.炭疽杆菌的S-层蛋白主要为表面排列蛋白(surface array protein,Sap)和胞外抗原1(extracellular antigen 1,EA1),此外,在炭疽杆菌中还存在其他一些与S-层相关的蛋白,了解这些蛋白的相互作用及免疫机制对深入认识炭疽杆菌的致病机制具有重要意义.本文将就近年来关于炭疽杆菌S-层蛋白成分、与细胞壁的连接、S-层基因的调控、致病性及其与宿主免疫机制的关系等方面的研究进展做一简要综述.
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急性高空缺氧对高性能战机飞行员基本认知能力的影响
目的 探讨急性高空缺氧对高性能战机飞行员基本认知能力的影响,为保障和提高飞行员飞行能力提供相关依据.方法 将111名健康男性高性能战机现役飞行员随机分为3组,其中非缺氧组40名,缺氧组51名,恢复组20名,使用<基本认知能力测验>软件2.0版(中国科学院心理研究所研制)进行测试,对3组人员的测试结果进行统计学分析.结果 3组飞行员基本认知能力测验结果在知觉速度(F=3.21,P<0.05)和总分(F=3.39,P<0.05)上差异有统计学意义,其中缺氧组在知觉速度(P<0.05)和总分(P<0.05)方面比非缺氧组有明显降低,而恢复组总分(P<0.05)比缺氧组有明显增高.结论 本研究结果显示,急性高空缺氧对飞行员的认知能力有明显影响且主要表现在知觉速度方面,而及时恢复供氧可以得到有效改善,提示急性高空缺氧时应及时采取有效医学措施以恢复和保持认知能力和飞行能力.
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高级知识分子人群脂肪肝患病率与相关危险因素分析
目的 探讨高级知识分子人群中脂肪肝患病率及相关危险因素.方法 2009年5月对某单位927名高级知识分子进行健康体检,排除慢性肝炎、酒精肝等病例,根据彩超检查结果,分为脂肪肝组(234例)和正常对照组(223例),正常对照组入选时纠正了两组间年龄、性别差异.对两组检查当日空腹化验的谷丙转氨酶(ALT)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、体质量指数(BMI)结果进行分析.结果 该体检组人群脂肪肝患病率为25.2%,所选脂肪肝组血清GPT、FPG、TG、BMI的水平明显高于正常对照组(P<0.001).多因素分析显示,性别、空腹FPG、TG、GPT、BMI与脂肪肝密切相关.结论 脂肪肝与血清FPG、TG、GPT、BMI的异常密切相关.
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高压氧治疗一氧化碳中毒迟发性脑病40例临床观察
急性一氧化碳中毒迟发性脑病(delayed encephalopathy after carbon monoxide poisoning,DEACMP)是指一氧化碳中毒后,3%~30%严重中毒患者抢救苏醒后经2~60 d的假愈期,出现痴呆木僵、定向障碍、行为异常、震颤麻痹综合征、偏瘫、癫痫、感觉运动障碍等症状或体征;头颅CT或见:脑沟回变浅、脑皮质改变、脱髓鞘等.我院2007年2月至2011年4月收治一氧化碳中毒患者数百余例,重点对其中40例DEACMP患者进行了回顾性分析,探讨DEACMP患者高压氧(HBO)治疗疗效的影响因素及规律,从而提供更为科学的治疗.
关键词: 高压氧 一氧化碳中毒迟发性脑病 -
534例鼻骨骨折临床分析
外鼻突出于颜面部中央,易遭受撞击而发生鼻骨骨折,如不及时诊断和整复,常导致外鼻畸形、鼻功能障碍及影响面容的美观.我科自2009年6月至2011年6月收治鼻骨骨折患者534例,现将临床治疗体会报告如下.
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低PSA前列腺癌2例报告
自前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)被发现以来,血清PSA值已成为前列腺癌筛查重要手段之一.目前临床上多将血清PSA 4.0 ng/ml作为临界值,血清PSA>4.0 ng/ml时,将会对患者行进一步评估.但临床存在血清PSA低于临界值的前列腺癌患者,对这种类型患者的鉴别诊断尤为重要.现对我院泌尿外科收治的2例低PSA前列腺癌作一报道.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |