军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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卫生士官战现场急救院校训练评价指标体系设计与测试
目的 设计构建卫生士官战现场急救院校训练评价指标体系并开展实证研究,为战救训练提供理论指导及评价方法.方法 通过文献调研、系统分析及专家访谈等方法,将训练工作从体制、要素、管理及条件等方面进行分解,初步构建3级评价指标体系;运用德尔菲专家咨询法对评价指标进行进一步筛选和确定;运用层次分析法确定各级指标权重;开展实证研究验证评价指标体系的有效性及可行性.结果 形成了卫生士官战现场急救院校训练评价指标体系.结论 该研究构建的卫生士官战现场急救院校训练评价指标体系可对实际训练进行有效评估,并对准确把握训练进程,有效提升训练水平具有积极的推动作用.
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GP73及肿瘤相关巨噬细胞在肝癌组织中的表达及临床意义
目的 检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中高尔基体蛋白73(GP73)、CD68、CD206的表达情况,并探讨GP73与CD68、CD206的相关性及临床意义.方法 采用基于酪氨酸信号放大(tyramide signal amplifica-tion,TSA)技术的多标记免疫荧光染色方法,在129例包含肝癌及其癌旁正常组织的组织芯片(TMA)上同时区别标记GP73、CD68、CD2063种抗原及4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,并使用自动MSI系统(Vectra,PerkinElmer,Waltham,MA)定量分析三者表达的相关性,判断与肿瘤预后的相关性.结果 肝癌组织CD206的表达含量与GP73水平呈正相关(P<0.001),而CD68的表达与GP73无明显相关性(P=0.1414);低表达GP73的肝癌患者生存率与GP73高表达的肝癌患者差异无统计学意义(P=0.8078),低表达CD206的肝癌患者生存率高于CD206高表达肝癌患者(P=0.0445);GP73、CD206均高表达的患者生存率显著低于GP73、CD206低水平表达的患者(P=0.0243).结论 GP73含量与肿瘤相关巨噬细胞(TAM)富集程度呈正相关,且富集程度越高的肝癌患者生存率越低.
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IL-6通过JAK2/STAT3信号通路促进CD133-肺腺癌细胞(A549)获得干性特征
目的 研究白细胞介素6(IL-6)在成体肺腺癌A549细胞(CD133-细胞)干性转变中的作用及其机制.方法 CD133磁珠抗体分选成体A549细胞后,分别用浓度为0(对照)、10、20、40 ng/ml IL-6刺激24 h,采用克隆球形成实验检测细胞克隆球形成能力,通过Transwell迁移实验检测细胞的迁移能力,免疫印迹检测SOX2、磷酸化Janus激酶2(phosphorylated Janus kinase 2,p-JAK2)、磷酸化信号转导和转录激活子3(phosphorylated signal transducers and activators of transcription 3,p-STAT3)水平.结果 IL-6刺激可显著增加CD133-细胞的克隆球形成、迁移和SOX2的表达水平,显著上调p-JAK2的表达,且均呈一定剂量依赖性.IL-6刺激还可显著增加p-STAT3的表达,表达峰值出现在20 ng/ml组;40 ng/ml IL-6刺激时,p-STAT3表达水平低于10、20 ng/ml组,但仍显著高于对照组,与SOX2变化趋势一致.JAK2激酶抑制剂AG490可显著抑制IL-6诱导的STAT3磷酸化和SOX2表达升高.结论 在体外,IL-6可通过调节JAK2/STAT3信号通路促进CD133-肺腺癌细胞获得干性特征.
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A型肉毒毒素鼠源中和单抗的制备与鉴定
目的 制备并鉴定A型肉毒毒素(BoNT/A)鼠源中和单克隆抗体.方法 利用BoNT/AHc抗原免疫小鼠筛选得到的55株杂交瘤细胞培养上清,通过小鼠中和实验(MNA)选出中和活性较高单抗,进行抗体分型并扩增抗体可变区基因;利用BALB/c小鼠制备腹水,通过辛酸-硫酸铵以及Protein-G亲和层析纯化,并进行ELISA、SDS-PAGE、Western印迹、截短实验、BIAcore、中和活性及中和剂量分析.结果 筛选得到1株中和活性较高的小鼠单抗BAS51,其轻链为κ、重链为IgG1,获得轻、重链可变区序列;小鼠腹水效价为7.29×105,纯化抗体纯度>95％;BAS51与抗原BoNT/AHC亲和力常数为1.53×109 L/mol,可与HCC片段结合,为线性表位,中和活性为100 LD50/mg,中和剂量为66.7 LD50/mg.结论 得到1株具有较强中和活性的抗BoNT/A小鼠源单抗,为A型肉毒毒素中和抗体的研发奠定了基础.
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基于LoxP-Cre系统的Ronin基因造血系统条件性敲除小鼠模型的构建及鉴定
目的 建立Ronin基因造血系统条件性敲除的小鼠模型.方法 基于LoxP-Cre系统设计基因敲除策略,获得Roninflox/+(flanked by loxP)小鼠,分别与Vav-iCre+小鼠、Roninflox/+小鼠交配繁殖得到Roninflox/+Vav-iCre+小鼠和Roninflox/flox小鼠,再将后两种小鼠交配获得Roninflox/flox Vav-iCre+小鼠.提取鼠尾组织DNA,PCR扩增后鉴定基因型,提取小鼠造血相关组织蛋白,Western印迹检测Ronin表达情况.结果 Roninflox/+Vav-iCre+小鼠与Roninflox/flox小鼠交配所得子代共51只小鼠中,Roninflox/flox Vav-iCre+基因型小鼠仅1只,实际出生数量远低于理论值,且小鼠出生1周内死亡.Roninflox/+Vav-iCre+基因型小鼠可正常存活,其造血相关组织中Ronin表达低于野生型小鼠.结论 该研究构建了造血系统特异缺失Ronin基因的小鼠,为研究Ronin在早期造血调控中发挥的作用提供了动物模型.
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去泛素化酶OTUB1影响p97/NPL4复合体形成调控肿瘤发生
目的 探讨去泛素化酶卵巢肿瘤蛋白(OTU)域所含泛素乙酰结合蛋白1(OTU domain containing ubiquitin aldehyde-binding protein 1,OTUB1)调控p97/含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)泛素化参与肿瘤发生的机制.方法 通过生物信息学分析和免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、免疫荧光、CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法等分子生物学及细胞生物学方法,分析和检测OTUB1在肿瘤中的表达情况,OTUB1与p97的相互作用,OTUB1对p97蛋白水平、泛素化修饰水平的影响,OTUB1对核蛋白定位同系物蛋白4(nuclear protein localization 4 homolog,NPL4)和p97复合体形成的影响,以及敲低OTUB1对细胞增殖能力的影响和对p97抑制剂的应答机制.结果 癌基因组图集(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析发现OTUB1在多种肿瘤中异常表达,Co-IP结果显示,OTUB1与p97存在相互作用,在细胞中过表达野生型OTUB1后p97泛素化水平下调,而过表达OTUB1活性缺失突变体则p97泛素化水平无变化;敲低OTUB1后p97泛素化水平上调,且p97和NPL4相互作用减弱.敲低OTUB1细胞增殖能力减弱,使用p97抑制剂处理后细胞生长不再受明显调控.结论 OTUB1与p97相互作用并调控p97的泛素化和p97与NPL4复合体的形成,进而调控肿瘤发生.
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基于转录组大数据的抗辐射损伤化合物筛选
目的 利用基于网络的细胞反应印记整合文库(LINCS)计划的小分子化合物扰动不同细胞系的转录谱数据,结合辐射损伤的转录谱特征,寻找具有抗辐射损伤潜能的化合物,并推荐它们在特定细胞系上的实验剂量.方法 经过一系列数据处理步骤,构建了30722个小分子扰动的转录反应表达谱数据集,以及反映细胞辐射损伤特征的转录谱特征集.计算小分子化合物扰动的转录谱在辐射损伤特征集上的富集分数及P值,按照一定的筛选规则,得到具有辐射损伤防治效果的化合物列表,并依据一定规则获取其在特定细胞系上的佳细胞实验剂量.结果 建立了一套基于转录组数据的筛选抗辐射损伤化合物的筛选方法,经过筛选获得有潜在抗辐射损伤作用的287个小分子化合物,经文献调研发现其中14个已报道具有抗辐射损伤功能,雌激素类化合物在筛选结果中显著富集.结论 基于转录组大数据的筛选方法能有效缩小抗辐射损伤化合物的实验范围,提高抗辐射损伤药物的发现速度.该方法基于公开数据,无需进行湿实验,具有成本低,速度快的优势,且具有开放性,可进一步增加数据,扩大筛选范围,提高筛选质量.
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乳酸脱氢酶B基因的克隆及其活性分析
目的 构建带Flag标签的乳酸脱氢酶B(lactate dehydrogenase B,LDHB)基因的真核表达载体,鉴定其表达产物的生物学活性.方法 采用PCR技术从人乳腺文库扩增LDHB基因,将其克隆到pCDH-EF1-MCS-T2A-puro载体中,酶切和测序验证后,转染人胚肾293 T细胞,通过蛋白质免疫印迹鉴定其表达;转染人肝癌HepG2细胞,采用酶和底物反应的方法检测乳酸含量,并通过生长曲线研究LDHB对肝癌细胞生长的影响.结果 将人乳腺文库扩增得到约1000 bp的cDNA片段克隆到pCDH-EF1-MCS-T2A-puro载体上,测序结果与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,LDHB基因表达成功;乳酸含量测定结果显示,LDHB促进了肝癌细胞乳酸的生成;还可促进肝癌细胞的生长.结论 成功构建了pCDH-Flag-LDHB真核表达载体,表达的LDHB具有生物学活性,为进一步研究LDHB在低氧和肿瘤发生发展中的功能奠定了良好基础.
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成纤维细胞生长因子FGF13A的亚细胞定位研究
目的 探究成纤维细胞生长因子FGF13A蛋白的亚细胞定位并确定其核仁定位信号(NoLS).方法 利用丙氨酸替换FGF13A蛋白中可能的核仁定位信号中的氨基酸,将各突变体与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达;各融合蛋白表达质粒转染人胚肾细胞系HEK-293细胞和人膀胱癌细胞系5637细胞;转染48 h后通过激光共聚焦显微镜观察细胞内绿色荧光的分布确定融合蛋白的亚细胞定位.结果 FGF13A-EGFP蛋白定位于细胞核仁,FGF13B-EGFP蛋白定位于胞质;FGF13A蛋白N端的62个氨基酸是其核仁定位的关键序列;FGF13A蛋白的55 KKRRRRR61为其核仁定位信号的核心序列,将55 KKRRRRR61突变为55 AAAAAAA61后,FGF13A蛋白失去其核仁定位能力,而只突变其中单个(M1:55 KKARRRR61)或部分(M2:55 AARRRRR61、M3:55 KKAARRR61和M4:55 KKRRAAA61)氨基酸,并不影响FGF13A的核仁定位.结论 成纤维细胞生长因子FGF13A定位于细胞核仁,其核仁定位信号位于蛋白N端,核心序列为55 KKRRRRR61.这一发现为进一步研究FGF13A的生物学功能奠定了基础.
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IL-10参与调控巨噬细胞的极化
目的 研究白细胞介素10(IL-10)在骨髓单个核细胞向巨噬细胞分化以及在巨噬细胞极化中的作用.方法 分离野生型及IL-10表达缺陷小鼠的骨髓单个核细胞,巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导细胞分化为巨噬细胞.流式细胞仪检测细胞的增殖、分化、凋亡以及脂多糖(LPS)刺激后巨噬细胞的极化;定量PCR检测细胞周期调控相关分子及炎性相关分子的表达.结果 骨髓单个核细胞诱导5～7 d,流式细胞仪检测结果显示,IL-10的表达缺陷不影响细胞向巨噬细胞的分化.相比野生型,IL-10缺陷细胞数量虽略有增加,但差异不显著.流式细胞仪检测结果及定量PCR结果进一步证明,IL-10表达缺陷不影响细胞增殖和凋亡.IL-10缺陷细胞分化7 d后CD86的表达显著高于野生型,LPS刺激后CD86表达均升高,但IL-10缺陷巨噬细胞的表达显著高于野生型.LPS刺激6 h,IL-10缺陷巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和IL-18的表达水平显著高于野生型巨噬细胞.结论 IL-10不影响单个核细胞的增殖分化,但参与调控巨噬细胞的极化.
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MLN4924与5-氟尿嘧啶协同杀伤人结肠癌HCT116细胞的研究
目的 探讨MLN4924与5-氟尿嘧啶(5-FU)单用及联用对人结肠癌HCT116细胞活力的影响及其发挥作用的可能途径.方法 细胞活力实验检测两药单用及联用对HCT116细胞活力的影响;应用中效原理计算两药联合应用的联合指数,判断药物联用的效果;将HCT116细胞分为对照组、MLN4924组、5-FU组及联用组,药物作用后,流式AnnexinⅤ-FITC/PI双标法检测各组细胞凋亡情况;蛋白质印迹实验检测各组细胞Cleaved PARP、Cleaved caspase3的表达水平.结果 随着MLN4924和5-FU浓度的增加,HCT116细胞活力逐渐降低;MLN4924与5-FU联用时,抑制效果明显强于单药作用(P<0.001),各联合用药组的联合指数均<1,提示两药联用起协同效果;与对照组相比,单用及联用均可显著促进HCT116细胞的凋亡(P<0.001),且联用效果显著优于单用(P<0.01);与流式AnnexinⅤ-FITC/PI双标法检测细胞凋亡的结果相一致,联用组Cleaved PARP、Cleaved caspase3蛋白表达较对照组及单用组明显升高.结论 MLN4924与5-FU通过促进细胞凋亡而发挥协同抑制人结肠癌HCT116细胞活力的作用.
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环肽化合物NW-G01的抗癌活性研究
目的 鉴定环肽化合物NW-G01对肿瘤细胞增殖与凋亡的调控作用.方法 利用显微拍照法检测细胞的形态变化,克隆形成实验检测肿瘤细胞的克隆形成能力,MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术测定细胞凋亡率.结果 显微拍照法和MTT实验检测结果表明,NW-G01能抑制多种肿瘤细胞的增殖,其抑制效果具有时间依赖性和浓度依赖性.NW-G01对胃癌细胞SGC-7901的克隆形成能力具有显著抑制作用,并能降低细胞中S期细胞的比例,阻断细胞周期的进程.此外,流式细胞术检测结果表明,NW-G01能剂量依赖性地诱导SGC-7901细胞凋亡.结论 环肽化合物NW-G01能抑制肿瘤细胞增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡,在细胞水平具有显著的抗癌活性.
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心肌缺血和低氧模型大鼠心肌组织琥珀酸受体表达的变化
目的 利用心肌缺血、低氧模型大鼠,检测大鼠心肌组织琥珀酸(盐)受体(GPR91)表达的变化,以分析心肌缺血、低氧与GPR91表达的关系.方法 分别制备大鼠冠状动脉结扎所致心肌缺血模型、模拟高原环境所致心肌低氧模型.前者由结扎大鼠心脏左冠脉前降支诱发,包括假手术组、左冠脉结扎12 h组和24 h组,每组6只,记录各组大鼠心电图,以氯化三苯基四氮唑染色法显示心肌组织梗死程度并计算梗死比例,自动生化分析仪检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)以及心肌肌钙蛋白T(cTn-T)的含量变化,对制备模型加以鉴定;后者利用专用低压舱模拟高原低氧环境诱发,设正常气压组、低气压环境生存1、3、5和7d组,每组6只,检测大鼠血清中LDH、CK及cTn-T含量的变化.分别以实时荧光定量PCR法和Western印迹法,检测上述各组大鼠心肌组织GPR91 mRNA和蛋白的表达水平,每组动物检测3只.结果 与假手术组大鼠比较,冠脉结扎12和24 h组大鼠的心电图均表现为ST段弓背型抬高,心肌梗死面积比例分别为(23.18±3.46)％及(34.85±2.22)％(P<0.05),血清中LDH、CK及cTn-T的含量均明显增加(P<0.01);与正常气压组比较,低压环境生存1、3、5和7 d组大鼠血清LDH、CK及cTn-T的含量升高明显(P<0.01).GPR91表达检测结果显示,冠脉结扎12、24 h组大鼠心肌组织mRNA和蛋白水平均出现上调(vs假手术组,P<0.01、P<0.05);低压1、3、5和7 d组大鼠心肌GPR91的mRNA表达明显增加(vs正常气压组,P<0.05),其蛋白表达增加以7 d组为明显(vs正常气压组,P<0.05).结论 大鼠心肌在缺血、低氧过程中,反映心肌组织受损的血清学指标LDH、CK及cTn-T含量明显增加,与此同时,心肌组织GPR91的mRNA及蛋白表达显著上调.提示GPR91具有心肌缺血、低氧防治的潜在靶点意义.
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基于蒙特卡洛模拟的肺癌患者体内光子能谱和散射次级电子能谱研究
目的 放射治疗是恶性肿瘤的重要治疗手段,且治疗的精准度越来越高.针对患者的个体化生物特征,设计更精准的个体化放疗方案已引起研究人员的重视.该文研究放疗中高能光子束进入患者肿瘤及正常组织后光子能谱和散射次级电子能谱规律,为放射生物剂量个体化计算奠定理论基础.方法 将患者的CT图像序列经重采样,体元尺寸为2.54 mm×2.54 mm×2.5 mm,并将体元的CT值转换成材料的元素组成密度.利用蒙特卡洛模拟方法计算各受照射体元的光子能谱和散射次级电子能谱,并分析能谱规律.结果 能谱在250～300 keV达到峰值,平均能量范围为900～1150 keV,不同入射深度处的光子能谱具有较好的一致性.散射次级电子能谱可分为两种类型:①高密度区域(肿瘤组织),散射次级电子平均能量较高(平均能量约为909.58 keV)且能谱存在展宽;②低密度区域,散射次级电子平均能量较低(平均能量为536 keV)且能谱无展宽.结论 该研究给出了肺癌患者体内光子能谱和散射次级电子能谱的具体分布规律和表达,为在细胞及DNA层面研究放射生物剂量计算模型奠定了基础.
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活/死菌检测方法的研究进展
细菌活性检测在细菌生物学研究、消毒灭菌评价、卫生安全监测、食品卫生控制等领域具有重要意义.实际研究中多表现为活/死菌区分检测,检测方法通常基于细菌的可培养性、可转录性、代谢活性以及细胞膜完整性这4个细菌活性评价标准.该文综述了目前常见的活/死菌检测方法的原理、特点及应用实例,并对比了各种方法的优缺点.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
