军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域的鉴定
目的:鉴定端粒单链结合蛋白hPOT1核定位结构域.方法:通过hPOT1的不同长度缺失突变体与EGFP绿色荧光蛋白融合,转染细胞后用荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位.结果:确定了hPOT1进核序列是定位于第355~375位氨基酸之间的富含碱性氨基酸序列,其中R372,R373影响hPOT1的细胞核内定位.结论:鉴定出hPOT1的核定位结构域,该结构域影响了hPOT1不同形式剪接体蛋白的细胞内分布.为进一步研究hPOT1在端粒末端调控中的作用提供了线索.
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我国SARS病毒BJ01株基因组亚cDNA克隆的构建与鉴定
目的:构建我国SARS病毒BJ01株基因组全序列的亚cDNA克隆,为进一步构建该毒株的全长感染性cDNA克隆奠定基础.方法:根据BJ01株病毒基因组序列中含有的特异酶切位点,利用DNAstar软件设计7对引物,然后通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的7个cDNA片段,并分别将其克隆至pGEM-T Easy或Topo载体.结果与结论:已构建出SARS-CoV BJ01株基因组的7个亚cDNA克隆,经酶切鉴定和序列测定表明,所获得的cDNA克隆为BJ01株病毒的特异序列.
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糖多孢红霉菌λC3-SRR突变体的构建及其产物鉴定
目的:构建糖多孢红霉菌KR6酶域基因失活突变体,探讨SRR氨基酸相应9核苷酸去除突变体与合成酮内酯类化合物3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B的关系.方法:以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板,用重叠PCR技术扩增出缺少SRR氨基酸相应9核苷酸的KR6酶域DNA片段,并克隆到载体pWHM3上,构建了同源重组质粒pWHM3-SRR.将pWHM3-SRR质粒转化糖多孢红霉菌λC3菌株,筛选出质粒整合到染色体上红霉素合成基因位点的整合体λC3-A、B和C.λC3-A在无硫链丝菌肽(Thio)的R3M斜面上生长两代后,制备的原生质体涂R3M平皿,挑选出不能在含Thio的R3M斜面上生长、发酵液也无抑制枯草芽孢杆菌活性的突变菌株λC3-SRR.结果:部分基因组DNA序列分析表明,糖多孢红霉菌λC3-SRR染色体上SRR氨基酸相应9核苷酸已经敲除,Zabspec Fab质谱分析证实λC3-SRR菌株合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B.结论:糖多孢红霉菌KR6酶域SRR氨基酸相应9核苷酸敲除的λC3-SRR突变菌株可以合成3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B,SRR为KR6酶域上NADPH 2′-磷酸结合位点.
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传染病员救护车负压净化系统研究
目的:研制具备负压净化功能的救护车,用于运送非典型肺炎一类的急性传染病员.方法:救护车病室自成一区,采用负压净化系统对周围环境进行防护,负压范围为-30~-80 Pa,负压净化系统由负压净化装置和监测报警装置组成.通过以CO2气体为模拟污染源,对救护车病室内气溶胶颗粒的流向与分布进行测量.结果:CO2为替代污染气体的扩散范围以病室中部区域为主,在病室前部和后部得到了有效的抑制.结论:传染病员救护车负压净化系统能够有效抑制急性传染病员在运送途中对沿途周围环境的污染与病毒的传播.
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重组CPTα的亲和纯化及其单克隆抗体的制备
目的: 制备抗A型产气荚膜梭菌毒素α(CPTα)单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性.方法:利用工程菌株E.coli M15/pQE30-CPTα表达的重组A型CPTα带有6个组氨酸(6×his)标签的特性, 经Ni-NTA螯合亲和层析方法纯化后,用纯化的重组CPTα免疫BALB/c鼠,以常规杂交瘤细胞融合技术、HAT选择性培养和间接ELISA进行筛选,并分析其亚类及中和保护作用.结果: 获得一株能稳定分泌抗CPTα的mAb杂交瘤细胞株4E2,其分泌抗体亚类为IgG1.该mAb与重组CPTα和天然CPTα均可发生特异性反应,并可保护小鼠抵抗2倍小致死剂量CPTα的攻击,属中和性抗体.结论: 应用纯化的重组CPTα成功地获得了特异性的中和抗体mAb 4E2,为A型CPTα诊断抗体和治疗性抗体的研制奠定了基础.
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大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体在CHO细胞中的共同稳定表达
目的:建立共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的哺乳动物细胞表达系统.方法:采用脂质体介导的方法,将编码大鼠μ阿片受体和人咪唑啉-1受体的基因导入CHO细胞中,以放射配体-受体结合试验分析受体的表达水平,用cAMP积累试验分析表达受体的功能.结果:在共同稳定表达大鼠μ阿片受体及人咪唑啉-1受体的CHO细胞中,表达的μ阿片受体对3H-二丙诺啡(diprenorphine)的Kd和Bmax值分别为(0.24 ± 0.02)nmol/L和(1.83±0.13)pmol/mg蛋白;表达的咪唑啉-1受体对3H-可乐定的Kd和Bmax值分别为(3.72±0.25)nmol/L和(43.59±6.83)fmol/106细胞.表达的μ阿片受体抑制福司科林(forskolin)刺激下cAMP的积累,表达的咪唑啉-1受体抑制吗啡慢性处理、纳洛酮催促引起的cAMP超射.结论:首次建立了共同稳定表达μ阿片受体和咪唑啉-1受体的细胞模型.
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人β-防御素3基因在COS-7细胞中的表达
目的:构建人β-防御素3(hBD3)的真核表达载体,建立稳定表达hBD3的细胞株.方法:用EcoRⅠ酶切含有hBD3全长基因的pGEM-hBD3重组质粒,获得其编码区全长序列,将其连接入EcoRⅠ预处理过的pcDNA3中,转化大肠杆菌,酶切鉴定筛选出插入方向正确的转化子.采用脂质体转染法将重组pcDNA3-hBD3真核表达载体导入COS-7细胞, 用G418进行抗性筛选,用RT-PCR和Western印迹检测目的基因hBD3的mRNA和蛋白表达水平.结果与结论:构建的pcDNA3-hBD3真核表达载体转染COS-7细胞后可稳定表达hBD3的mRNA和蛋白,且蛋白主要以分泌形式存在于培养上清中.
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人CD20胞外区与噬菌体pⅢ融合基因在E.coli中的可溶性表达
目的:克隆人CD20胞外区基因(cdw)和丝状噬菌体(M13K07 )G3蛋白N端结构域(pⅢN1)基因,并在大肠杆菌中进行高效融合表达.方法:利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD20胞外区基因和pⅢN1基因,然后将二者融合克隆入pTIG-Trx表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达.结果:可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约25%,表达产物可被抗CD20分子的单克隆抗体识别.结论:成功地表达并鉴定了人CD20胞外区蛋白,为利用噬菌体抗体库进行抗CD20抗体的筛选奠定了基础.
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电磁脉冲对离体角膜上皮细胞损伤的实验研究
目的:探讨电磁脉冲(EMP)辐射对离体培养兔角膜上皮细胞的损伤作用.方法:6×104 V/m场强的EMP重复照射离体培养的角膜上皮细胞5次,应用原子力显微镜和生化检测仪,对辐射前后的细胞膜状态及上清液多种离子浓度进行检测.结果:EMP照射后角膜上皮细胞膜表面出现多处大小不等的凹陷和穿孔.培养细胞上清多种离子浓度在照射后不同时间均有明显变化,其中K+,Ca2+,Fe2+浓度在照射后24 h明显升高.结论:细胞膜是EMP作用于细胞的敏感靶部位,细胞膜穿孔是EMP非热效应的损伤作用机制之一.
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脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达
目的: 克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物,利用PCR技术扩增得到aroB基因,将其克隆入pGEM-Teasy载体中,以双脱氧法进行测序,然后再克隆入高效原核表达载体pBV220,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroB基因的克隆和表达重组子,经SD序列调节后,aroB基因获得高效表达,SDS-PAGE图谱显示新增38.8×103蛋白带,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为5.4.结论: 实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础.
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p185HER-2蛋白胞外区的表达及其结合肽的筛选
目的:构建p185HER-2蛋白胞外区的原核表达载体,实现p185HER-2蛋白胞外区的表达.以纯化p185HER-2蛋白胞外区为靶,从噬菌体肽库中筛选其结合肽,用于肿瘤导向治疗.方法:从含有HER-2全长cDNA的质粒psv2-cerbB-2中克隆了人p185HER-2蛋白胞外区cDNA,将此cDNA克隆到pET-30a+表达载体中,构建p185蛋白胞外区的表达载体.表达的p185HER-2蛋白胞外区通过Zn2+螯合层析柱进行纯化.以纯化的p185HER-2蛋白胞外区为靶,通过淘洗方法进行噬菌体肽库筛选.结果与结论:构建了p185HER-2蛋白胞外区的原核表达载体,实现了p185HER-2蛋白胞外区的高表达.通过Zn2+螯合层析柱实现一步纯化,p185HER-2蛋白胞外区的纯度达到95%.从噬菌体随机环七肽库中找到了一组具有核心序列p185HER-2蛋白胞外区结合肽.这些p185HER-2蛋白胞外区结合肽有可能成为肿瘤治疗的新的候选分子.
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NMDA受体NR1a与NR2A亚单位重组体在HEK-293细胞的功能表达
目的:建立表达大鼠NMDA(N-methyl-D-aspartate)受体NR1a与NR2A亚单位重组体的细胞模型,研究其生物学及药理学特性.方法:利用脂质体转染方法将大鼠NR1a与NR2A亚单位重组体共转染到HEK-293细胞中,在细胞培养48~72 h后,利用膜片钳全细胞记录技术,观察和分析L-谷氨酸诱发的NMDA受体电流.结果:向转染后的HEK-293细胞表面喷射NMDA受体激动剂L-谷氨酸可在38%细胞上诱发出瞬时内向电流,该电流可被NMDA受体选择性拮抗剂D-AP5(50 μmol/L)完全阻断.L-谷氨酸诱发的电流具有快速失敏的动力学特征和内向整流特性,衰减时间常数(τ值)为(53±9)ms(n=20).L-谷氨酸诱发电流的EC50值为(8.5±0.5)μmol/L.结论:成功地将NR1a与NR2A亚单位转染入HEK-293细胞并形成NMDA受体的功能性表达,为进一步深入研究NMDA受体不同亚单位组成与其功能的关系及其药理学特性奠定了基础.
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抗T-2毒素单克隆抗体的制备及特性
目的:建立敏感、特异和快速的针对T-2毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒.方法:利用B细胞杂交瘤技术,建立抗T-2毒素的单克隆杂交瘤细胞株.结果:用T-2-羊免疫球蛋白(T-2-GIgG)偶联物免疫8~10周龄雌性BALB/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经过3~4次亚克隆建立了2个稳定分泌抗T-2毒素抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A7和6E4.将上述2株杂交瘤细胞分别注入BALB/c小鼠腹腔,获得含抗T-2毒素单克隆抗体的腹水,并将腹水用饱和硫酸铵法进行纯化,得到2A7和6E4单克隆抗体.两株单克隆抗体的Ig亚类为IgG1, 腹水中抗体的滴度分别为6.4×106和1.1×107,参考工作浓度分别为1.0×106和3.2×106.纯化后2A7抗体的IgG含量为16.4 g/L,亲和常数为8×10-8mol/L.2A7抗体与其他结构类似物无交叉反应,具有较高的特异性.结论:制备了具有高特异性和亲和力的抗T-2毒素单克隆抗体,初步建立了针对T-2毒素的ELISA检测方法.
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贝氏柯克斯体34×103重组外膜蛋白的免疫保护性
目的:原核细胞表达贝氏柯克斯体34×103外膜蛋白基因,评价34×103重组外膜蛋白的免疫保护性.方法:用PCR从我国贝氏柯克斯体分离株的基因组中扩增34×103外膜蛋白基因,用该基因与原核表达质粒重组,构建重组表达质粒;用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌细胞内表达重组蛋白.用重组蛋白皮下接种免疫BALB/c小鼠2次,在加强免疫后的第28天,用ELISA法检测小鼠的血清特异性抗体水平以及作体外脾淋巴细胞增殖试验检查小鼠的特异性细胞免疫水平;用10 ID50贝氏柯克斯体腹腔注射攻击免疫小鼠,攻击后第7天病理学检查小鼠脏器的组织病变和染色镜检脾脏的贝氏柯克斯体.结果:SDS-PAGE和免疫印迹分析证明重组质粒转化的大肠杆菌产生了34×103重组蛋白,重组蛋白能与贝氏柯克斯体感染小鼠血清发生特异性反应.ELISA法检测出免疫小鼠血清中有高滴度的抗重组蛋白抗体,免疫小鼠的体外淋巴细胞增殖水平显著高于非免疫小鼠.组织病理学检查发现免疫小鼠的肺、肝、脾无明显病变,仅个别小鼠脾脏存在少量柯克斯体,而非免疫小鼠的肺、肝、脾病变十分明显,脾脏肿大并含有大量的柯克斯体.结论:重组34×103外膜蛋白具有的免疫保护性,能够诱导机体产生有效的抗贝氏柯克斯体的体液和细胞免疫应答.
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MGMT与恶性肿瘤
O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)是细胞中一种重要的DNA损伤修复酶,它在抵御烷化剂所致的细胞突变和死亡中起重要作用.本文综述了近年来关于MGMT的新研究,内容包括MGMT的基因结构与功能,MGMT的分布及其影响因素,MGMT与肿瘤发生、发展及治疗的关系.
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组装抗病毒疗法:抗病毒感染的新策略
组装抗病毒疗法(PATs)是近年来新兴的基于细胞内免疫的抗病毒感染策略.目前PATs已在抗病毒(如小鼠白血病病毒、人乙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒)感染等领域进行了深入研究.本文综述了PATs的发展历程和研究现状,并对现存的问题和应用前景进行了分析和展望.
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基因工程双特异性抗体构建模式研究进展
为了增强抗体的效应功能,人们尝试多种方法改造抗体分子,双特异性抗体是改善抗体治疗效果的发展方向之一,现已成为抗体工程研究领域的热点.随着分子生物学技术的迅速发展,出现了基因工程双特异性抗体的多种构建模式,并且有多种基因工程双特异性抗体制剂已经用于肿瘤的临床诊断和治疗试验.本文对基因工程双特异性抗体的构建模式按照双特异性微抗体、双链抗体、单链双特异性抗体和多价双特异性抗体4类进行了综述.
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抑制NF-κB激活的策略
NF-κB是一个广泛存在于哺乳动物细胞中的转录因子.它可以参与机体的炎症反应、免疫反应、细胞分化与凋亡及其他应激反应.NF-κB启动基因的表达涉及到IKK的激活、IκB磷酸化和泛素化、IκB裂解、NF-κB向核内的迁移、NF-κB与DNA的结合等过程.NF-κB的过度激活会引起一系列的疾病,如哮喘、类风湿性关节炎、肠炎等,利用药物或通过转基因方法来抑制以NF-κB为核心的信号转导途径可能会成为防治某些疾病的途径.
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电喷雾质谱技术在手性识别中的应用
本文综述了近年来电喷雾等软电离质谱技术用于手性识别的研究进展.其研究方法主要分为对映体标记法、离子-分子反应法以及动力学方法等3类.通过综述对质谱技术用于手性识别的不足之处以及未来主要发展趋势进行了讨论.
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一种大鼠脊髓背根神经节细胞培养模型的建立
神经细胞形态万千、功能各异,而要研究其在整体中的功能,单靠简单的胚胎及新生动物的原代神经元或传代的杂交神经胶质瘤细胞是行不通的.脊髓背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)是躯体和内脏感觉信号中枢途径的第一站,其初级感觉神经元是伤害性感觉信息从外周到中枢的重要传导站,该部位的受体、递质及离子通道现已成为痛觉研究和新型镇痛药开发的重要靶位[1].而DRG小细胞上河豚毒素(tetrodotoxin, TTX)不敏感钠通道在慢性痛中的改变及其离体后的可检测性的发现,实现了人们能够用离体单细胞的离子通道来研究痛觉的长久梦想[2].
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大肠杆菌外膜表达金属硫蛋白增强重金属镉吸附能力
随着工农业的不断发展,重金属污染日益严重,尤其是土壤和水源中重金属可在农作物和水生动植物中产生累积效应,对人类健康构成潜在威胁.与其他污染物有所不同的是重金属不能被化学或生物降解,因此对它的治理更加困难和复杂.传统上对重金属污染的治理主要采用物理、化学或机械的方法,这些方法不仅造成人力、物力和财力上的极大消耗,而且效果也不明显.随着生物工程技术的发展,生物治理重金属污染具有极大的潜力和广阔的应用前景,越来越引起人们的广泛关注.
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恶性肿瘤和血液病患者的优势菌群与耐药性监测分析
医院感染(nosocomial infection)是在医院或其他医疗保健机构内发生的各种感染,包括细菌性和真菌性医院感染.近年来,随着科学技术的飞快发展,各种先进诊疗技术层出不穷,新型抗生素亦应运而生.但是,随之出现的负面效应也呈现出越来越多的趋势,尤其是介入性诊断和治疗手段逐年增多,临床上广谱抗生素和免疫抑制剂的滥用,导致耐药菌株逐年增多,体内正常菌群发生了很大变化[1,2].很多体内的条件致病菌转变成致病菌,这在血液病和恶性肿瘤等免疫力低下的患者中表现尤为突出.因此,临床微生物工作者应积极做好医院感染病原学诊断和医院感染监测工作,定期将医院感染的优势菌群和耐药性监测情况反馈到临床一线,指导临床医师合理使用抗生素,减少耐药菌株的产生和传播,控制医院感染的发生.我们对我院恶性肿瘤和血液病患者发生医院感染的优势菌群和耐药性情况进行了监测,现报告如下.
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新药沙纳唑质量标准中含量限度的制定
恶性肿瘤是威胁人类生命的严重疾病之一,对肿瘤的治疗以手术、放疗和化疗三大手段为主.在放疗过程中由于患者白细胞数量下降等机体自身功能的低下常常不得不暂停治疗,待白细胞数目回升到一定水平才能再行治疗.这种状况影响了放疗效果,因此,国内外学者研究出一种放射增敏剂,在放疗前使用,使肿瘤细胞对射线的敏感性提高,照射低剂量可以达到高剂量的效果,而机体本身的各项功能不会下降过多,可使放疗持续下去,提高放疗效果.
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原发性肝癌血供分型与其病理分化程度关系的研究
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在我国是发病率居第3位的恶性肿瘤,每年确诊患者达 11万之多 ,预后甚差[1].HCC的血供特性对影像诊断和手术方案的选择具有十分重要的意义.
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一种电镜下观察贴壁培养细胞原位形态的新方法
1 材料和方法1.1 可拆卸的96孔培养板使用丹麦Nunc公司的96孔可拆卸酶联板(拆卸为8条,每条12孔),订购货号437915.因为该酶联板不是无菌级的,不能直接应用于细胞培养,又不能耐受高压灭菌,故采用高剂量放射线(如放射性钴源)照射灭菌,随后按照无菌级别处理,接种细胞.
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泡囊短波单胞菌所致肺部感染一例报告
泡囊短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis)是一种较罕见的非发酵性病原性假单胞菌,其致病力较强,可以引起中枢神经系统感染或菌血症[1,2].近期我们发现了一例泡囊短波单胞菌所致M2型急性髓性白血病患者肺部感染的病例,经检索中国生物医学期刊数据库,尚无泡囊短波单胞菌导致肺部感染的报道.现报告如下.
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3种基于PCR的荧光标记方法的比较研究
目的:荧光标记物是目前杂交型基因芯片所检测的主要目标底物,本实验比较了3种基于PCR的荧光标记方法在基因芯片检测中的应用效果.方法:荧光分子标记的引物或荧光分子修饰的核苷酸可以在PCR反应中通过Taq,Pfu等DNA聚合酶掺入到PCR产物中,在此过程中,荧光分子又可以通过不同的方法掺入到PCR产物中.方法1:直接将荧光分子化学合成在引物的5′端;方法2:在PCR反应体系中加入荧光分子修饰的核苷酸单体,由DNA聚合酶将其掺入PCR产物中;方法3:对PCR产物通过非模板依赖性的酶促加尾反应在其3′端随机加入荧光修饰的核苷酸.本实验优化了3种荧光标记方法,并以检测CYP3A4基因外显子5中4个核苷酸位点的探针微阵列为例,比较了检测效果.结果:在各自优化的实验条件下,从扩增、标记效率以及芯片杂交的信号强度、背景、分辨率等方面进行比较,3种方法得到的荧光标记样品无明显区别,但后两种方法操作过程复杂,使用成本高,对反应条件苛刻.结论:3种基于PCR扩增的荧光标记方法均可以提供优质的荧光标记探针或样品(底物),在实际应用中,各自有不同的特点及适用范围.
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试论全维战斗力医学--从军事医学的本质到军事医学的转型
以战斗力系统中重要、易损的军人为保障对象的军事医学,实质上保障的是战斗力.军事医学以战斗力的保持、再生与提高为根本目的,军事医学本质上是战斗力医学.军事医学发展与转型的根本动因是战斗力的发展与转型,新军事变革及全维卫勤呼唤全维战斗力医学;医学模式对军事医学也有重要影响,生物心理社会医学模式要求军事医学的内涵实现由生物单维向生物心理社会全维的扩展.全维战斗力医学是针对全维战场环境对军人全维健康的威胁,注重维护军人军事作业能力,以全时域军人健康的保持、恢复与促进为目标,以军队战斗力的全维保护为目的医学科学理论与技术,是新军事变革时代的军事医学.全维战斗力医学的领域较传统军事医学有较大扩展.对于中国特色的军事医学变革,全维战斗力医学概念的提出是有益的理论探索.
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军事医学战略决策若干理论问题探讨
本文探讨了军事医学战略决策相关的一些重要理论问题,研究提出了:未来战争人员伤亡仍将惨重,大规模毁灭性打击的可能仍然存在,精神性卫生减员将增加,两栖作战时的伤亡更加严重,战争"零伤亡"仅是绝对优势方的理想,次生核化生灾难在常规局部战争中难以避免;武器装备发展对军事医学提出更高要求,现代防空作战的卫勤保障面临困难,非接触式作战和非线式作战改变传统卫勤模式,反恐怖战争卫勤保障是军事医学的新任务,防生物危害与生物安全问题凸现;战伤早期救治仍是战时卫勤的重点问题,战伤早期救治研究的项目布局至关重要;民力资源利用和信息基础设施建设是军事医学战备建设的重要内容.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |