军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人β-防御素3在感染皮肤组织中表达的研究
目的:探讨人β-防御素3(human β-defensin 3,hBD3)在感染皮肤组织中的表达情况.方法:取烧伤患者感染皮肤组织和正常皮肤组织,提取总RNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western印迹法检测hBD3的mRNA和蛋白表达水平.结果与结论:感染皮肤组织中hBD3的mRNA和蛋白水平均显著高于正常皮肤组织.感染皮肤组织中hBD3表达增强.
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基于生物信息学分析的人ID4基因启动子表达载体的构建及鉴定
目的:基于生物信息学分析构建人ID4基因启动子表达载体,以其作为研究ID4基因启动子表达调控分析的工作基础.方法:在分析人ID4基因启动子结构和调控元件的基础上,据UCSC基因组生物信息学中人ID4基因转录起始点(TSS)上游启动子区-643 bp及5'非翻译区(5'-UTR)+164 bp序列设计并合成引物,进行PCR扩增;以PCR产物作为模板经巢式PCR扩增了TSS上游启动子区-621 bp片段,将PCR产物回收、纯化后再连接到pGEM-T Easy载体上并转化至DH5α感受态大肠杆菌中构建成pGEM-T Easy-人ID4基因启动子重组质粒.转化产物经半巢式PCR及酶切鉴定,对得到的阳性克隆进行测序.结果与结论:成功构建出含有糖皮质激素受体、cAMP结合蛋白及雌激素受体反应调控元件序列的人ID4基因启动子表达载体.该表达载体的构建为进一步研究人ID4基因的启动子活性及表达调控奠定了基础.
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基于登革2型病毒PrM基因的新型脱氧核酶对病毒RNA降解作用的初步观察
目的:针对登革2型病毒(DEN2)PrM基因设计新型脱氧核酶并观察其抗病毒作用.方法:根据脱氧核酶(DRz)裂解RNA靶位的特异性,选择DEN2 PrM基因中符合5'…R↓Y…3'(R=A/G,Y=U/C)特征且其二级结构中以未配对与配对碱基的磷酸二酯键为靶位,设计合成DEN2特异性脱氧核酶,筛选具有裂解PrM RNA活性的DRz.观察DRz与靶序列浓度比、Mg2+浓度及反应时间对DRz裂解效率的影响.结果与结论:体外裂解实验显示,在所设计合成的8个脱氧核酶中,DRz614对登革病毒的PrM RNA靶序列具有裂解活性,降解效率高达82%.本研究为进一步探讨新型抗登革病毒策略奠定了基础.
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共轭亚油酸对肥胖大鼠肝脏脂质代谢酶及PPARγ基因表达的影响
目的:通过研究共轭亚油酸(CLA)对高脂高糖诱导的肥胖大鼠肝脏脂质代谢酶及PPARγ基因表达的影响,探讨CLA影响肝脏脂质代谢的可能机制.方法: 成年雌性Sprague-Dawley大鼠35只,按体重随机分为基础对照组、肥胖对照组和共轭亚油酸低、中、高剂量组(分别为0.4,0.8,1.6 g/kg).除基础对照组喂饲基础饲料外,其余4组喂饲高脂高糖饲料,5周后灌胃共轭亚油酸,灌胃1个月后处死动物,测定大鼠体重、血脂水平,并应用RT-PCR方法检测大鼠肝脏组织过氧化物酶体增殖物活性受体γ(PPARγ)和脂肪酸合成酶(FAS),乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA的表达水平.结果:CLA各剂量组体重增加值与肥胖对照组相比差异有统计学意义(P＜ 0.01);CLA高剂量组大鼠血清甘油三酯水平与肥胖对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);CLA各剂量组脂体比与肥胖对照组相比差异有统计学意义(P＜ 0.05);CLA可增加肥胖大鼠肝脏组织PPARγ、FAS和ACC mRNA的表达水平.结论:CLA可通过激活PPARγ,增加FAS和ACC mRNA的表达来调节肝脏脂质代谢平衡.
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色谱保留时间预测模型在肽段鉴定结果验证中的应用
目的:解决肽段色谱保留时间预测模型在肽段鉴定结果验证中应用的实际问题.方法:本文基于Krokhin等提出的改进模型,利用3次样条平滑的方法估计肽段的实验色谱保留时间;然后利用迭代算法同时完成参数估计和异常值排除;后利用迭代得到的模型和残差范围进行肽段鉴定结果的过滤.结果:对两批不同物种的实验数据,本文方法与直接进行线性回归的方法相比,可以在保证几乎不损失阳性肽段鉴定结果的情况下排除更多的假阳性结果.结论:本文对肽段色谱保留时间模型在肽段鉴定结果中应用的实际问题提出了系统的解决方法.
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螺旋CT多平面重建对周围型肺癌血管集束征的显示及诊断价值
目的:探讨螺旋CT多平面重建对周围型肺癌血管集束征的显示及其诊断价值.方法:分析39例经病理及临床证实的周围型肺癌的螺旋CT表现,利用三维成像软件以多平面重建法进行重建,观察肿块血管集束征的显示情况并与横断面图像及肿瘤大小、临床分期进行比较.结果:3D CT能充分显示周围型肺癌血管集束征的情况,其分度与肿瘤的大小、分期有着密切的关系.结论:螺旋CT多平面重建技术能充分显示周围型肺癌的形态特征,血管集束征对周围型肺癌的诊断有重要价值,与肿瘤的大小及分期有着密切的关系,对病灶的分期、预后的判断亦有一定的参考价值.
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Z24系列化合物一般毒性的比较研究
目的:对具有较强抗肿瘤活性的Z24系列化合物进行一般毒性的比较研究,从中选出毒性较低的候选新药做进一步开发.方法:采用急性毒性上下法和MTT比色法比较5种Z24系列化合物的体内外急性毒性,利用HepG2细胞长期蛋白合成抑制试验评价Z24的长期毒性潜能.结果:Z24系列化合物的急性经口毒性LD50为232.0～＞2 000 mg/kg,SU5416的毒性低,Z24次之;对CHL细胞的体外细胞毒性IC50为0.019～0.071 mmol/L,Z24的毒性低.体外染毒6周后Z24对HepG2细胞的24 h半数蛋白合成抑制浓度(PI5024h-6w)明显低于染毒前PI5024h,提示Z24具有潜在的长期毒性.结论:将5种化合物的前期药理学和药效学试验结果与本研究的毒理学结果比较,确定Z24是该系列化合物中具开发前景的候选新药.
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东部马脑炎病毒E2基因与GM-CSF共表达质粒的构建及其免疫原性初步研究
目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4+/CD8+淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价.
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α-酮戊二酸钠对CHO-hGPCRc细胞内游离钙离子浓度的影响
目的:研究α-酮戊二酸钠对CHO-hGPCRc细胞内钙离子浓度的影响,并分析其变化的原因,从功能上进一步鉴定人源G蛋白偶联受体hGPCRc表达细胞的可靠性.方法:将重组表达质粒pcDNA3.1(+)-hGPCRc转染入CHO-K1细胞,经G418 (800 μg/ml)作用7～10 d,挑选、扩增阳性克隆,得到CHO-hGPCRc细胞,再以RT-PCR检测所得细胞内hGPCRc mRNA的表达;然后用不同浓度的α-酮戊二酸钠诱导该细胞,通过激光扫描共聚焦显微镜观察Fluo-3标记细胞内钙离子变化,以及细胞外钙离子对其影响.结果:(1)RT-PCR结果表明,所得CHO-hGPCRc细胞能够稳定表达hGPCRc的mRNA;(2)α-酮戊二酸钠可引起细胞内钙离子浓度的变化,表现为钙波动幅度明显增加,并呈浓度依赖性;(3)α-酮戊二酸钠引起的细胞内钙波动,不是细胞外钙离子内流所致,而是细胞内钙库动员的结果.结论:α-酮戊二酸钠为hGPCRc的特异性配基,CHO-hGPCRc细胞能够稳定表达具有功能活性的hGPCRc受体,为进一步开展hGPCRc研究奠定了基础.
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2例急性放射病患者网织红细胞变化分析
目的:分析2例急性放射病(ARS)患者的外周血细胞和网织红细胞等参数的变化,探讨其在ARS救治中的临床价值.方法:用Sysmex-2000i 型自动血细胞分析仪连续测定2例ARS患者的白细胞计数(WBC),红细胞计数(RBC),血小板计数(Plt)等血象指标,以及网织红细胞计数(RET)、网织红细胞绝对数、未成熟网织红细胞指数(IRF)、高荧光网织红细胞比率(HFR)、中荧光网织红细胞比率(MFR)、低荧光网织红细胞比率(LFR)6项网织红细胞参数.结果: 2例ARS患者WBC在受照后初期一过性升高,淋巴细胞计数明显下降,RET和RET绝对数降低,HFR和IRF均为0.造血干细胞移植后HFR和IRF早恢复,先于WBC升高1 d,先于RET、RET绝对数升高2 d,先于Plt升高3 d.结论:受照初期WBC、淋巴细胞计数以及RET和RET绝对数等与受照剂量有关.WBC升高结合HFR、IRF值的变化可以用于早期判断ARS患者造血干细胞移植是否成功.
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HLA-B*2705-β2 m-多肽复合物的制备及纯化
目的:制备并纯化HLA-B*2705-β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2m)-多肽复合物.方法:将pET21a-HLA-B*2705和pET21a-β2m质粒在宿主菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达,高效表达的HLA-B*2705蛋白与β2m,在HLA-B*2705限制性抗原肽[来源于人类免疫缺陷病毒(HIV)gp120蛋白的九肽NH2-GRAFVTIGK-COOH]存在的情况下,通过稀释复性折叠成HLA-B*2705-β2m-多肽复合物单体,经Western印迹鉴定,分子筛纯化.结果:成功地制备出HLA-B*2705-β2m-多肽复合物.结论:HLA-B*2705-β2m-多肽复合物的成功制备及纯化,为进一步研究HLA-B*2705与NK细胞Ig样受体(killer Ig-like receptor,KIR)之间的相互作用奠定了基础.
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转录因子Sp1对肺癌细胞LKB1-VEGF通路调控作用研究
目的:通过构建LKB1基因获得性肺癌细胞模型,了解转录因子Sp1对LKB1-血管内皮生长因子(VEGF)通路的调控作用.方法:应用巢式PCR(nPCR)方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1真核表达载体;Western 印迹检测LKB1在A549细胞中的表达;siRNA技术干扰Sp1的表达;RT-PCR联合ELISA方法检测VEGF的变化;SEAP检测系统检测Sp1的转录活性.结果:成功构建LKB1基因稳定表达细胞模型;LKB1蛋白下调VEGF表达和Sp1转录活性;siRNA介导的Sp1沉默伴随VEGF表达下调.结论:转录因子Sp1参与LKB1基因对VEGF的表达调控.
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青岛市幽门螺杆菌耐药性研究
目的:通过对青岛地区幽门螺杆菌(HP)临床分离株的培养,分析青岛地区多种抗幽门螺杆菌抗生素的耐药情况.方法:采用琼脂稀释法检测临床分离幽门螺杆菌菌株对阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、头孢氨苄、呋喃唑酮的耐药性.结果:MIC范围:阿莫西林0.43～6.5 mg/L,甲硝唑 15.0～120.0 mg/L,克拉霉素0.012～1.42 mg/L;左氧氟沙星0.5～8.0 mg/L,头孢氨苄0.35～5.6 mg/L,呋喃唑酮1.48～46.5 mg/L;耐药情况:甲硝唑65.79%,左氧氟沙星39.47%,阿莫西林23.68%,克拉霉素5.26%,头孢氨苄5.26%,呋喃唑酮7.89%.结论:青岛地区幽门螺杆菌对甲硝唑、左氧氟沙星、阿莫西林耐药率较高,对克拉霉素、呋喃唑酮、头孢氨苄耐药率较低.
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纤连蛋白的分段表达及与乙肝表面抗原相互作用研究
目的:克隆纤连蛋白(fibronectin)各功能区域基因,在大肠杆菌中表达以筛选与HBsAg相互作用的区域.方法:将纤连蛋白分成7个片段,设计引物,利用RT-PCR从HepG2.2.15中扩增出相应的PCR产物,连接到表达载体pGEX4T-1中,用IPTG诱导目的蛋白在E.coli中表达,通过Western印迹分析对表达产物进行鉴定.融合蛋白纯化后制备蛋白芯片,与HBsAg杂交,筛选纤连蛋白中与HBsAg相互作用的区域.结果:经RT-PCR从HepG2.2.15中扩增到各结构域片段的cDNA,序列分析均正确;SDS-PAGE分析表明,各结构域片段的可溶性表达产物均占细菌可溶性蛋白的10%以上;Western印迹分析提示,诱导表达产物可与GST单抗发生特异性反应.经制备蛋白芯片并杂交,发现片段FN1、FN2信号强.结论:成功地表达了纤连蛋白各片段,蛋白芯片杂交结果显示纤连蛋白可能是通过Ⅱ型肝素结合区及其羰基端(c端)与HBsAg相互作用.
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细胞外基质磷酸糖蛋白功能研究进展
细胞外基质磷酸糖蛋白 (matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是在瘤源性骨软化病 (tumor-induced osteomalacia,TIO)中发现的高表达蛋白.本文从结构特点、相关同源蛋白以及生物学功能等方面对MEPE蛋白进行了论述,着重介绍了MEPE功能的相关研究进展,包括对磷酸盐代谢调节、骨骼和牙本质发育形成以及对细胞辐射敏感性的影响等.通过这些阐述展现了MEPE蛋白功能的多重性与复杂性,以及对MEPE蛋白全面认识的必要性.
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控制多种细胞在同一表面有序黏附的研究进展
体外进行多种细胞共培养体系的建立,为不同种类细胞间相互作用的研究提供了有效的途径.在细胞培养的基底表面运用化学修饰,改变其对蛋白质和细胞的吸附特性,可以良好地控制不同细胞的共培养.结合微流控技术,在同一基底上也可以达到多种细胞的共培养.本文综述这一领域近期的研究进展.
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SARS-CoV细胞受体的研究进展
严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)是由SARS冠状病毒(SARS coronavirus,SARS-CoV)感染引起的一种新发严重急性呼吸系统传染病.SARS-CoV受体的阐明对于了解病毒的宿主与组织嗜性具有重要意义,同时也有助于了解病毒的致病机制以及研发阻止病毒结合受体的抗病毒药物.目前的研究发现SARS-CoV的受体包括血管紧张素转换酶2(ACE2)和CD209L,二者在SARS-CoV的感染致病过程中均发挥重要作用.本文综述了在SARS-CoV细胞受体结构与功能方面的研究进展.
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西尼罗病毒的生物学特性及实验室检测
西尼罗病毒可引起人和马的西尼罗病毒性脑炎,是近年来全球性公共卫生的新威胁.本文仅简要综述西尼罗病毒生物学特性及实验室诊断的研究进展,以期为我国开展西尼罗病毒的研究与检测提供参考.
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虫媒黄病毒基因组复制的分子机制研究进展
虫媒黄病毒包括多种重要的可导致人类疾病的病原体.对其基因组复制的分子机制的研究一直是此类病毒致病机制研究的重点.本文着重介绍病毒基因组末端与其复制相关的调控元件、病毒非结构蛋白及宿主蛋白在虫媒黄病毒基因组复制中的作用.
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EYA基因家族的研究进展
EYA(eyes absent)是一个进化上保守的基因家族,其C端为编码271个氨基酸的EYA结构域.EYA蛋白作为重要的转录调控因子,直接参与胚胎发育过程中的细胞增殖、组织分化和器官发育.EYA基因发生突变或表达异常将导致鳃-耳-肾综合征、鳃裂-耳综合征等遗传病和一些恶性肿瘤(如卵巢癌、结肠癌、食管癌)的发生.本文就EYA基因的结构、生物学功能、组织分布及其与重大疾病的关系作一综述.
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改良法体外培养大鼠成肌细胞的实验研究
目的:探索一种新型体外分离培养新生大鼠骨骼肌成肌细胞的途径.方法:取新生Wistar大鼠的四肢骨骼肌适量,采用混合酶一步消化分离获取成肌细胞,将差速贴壁法和胰酶消化法相结合进行纯化,观察分离纯化成肌细胞的形态学特点、生长状况,绘制细胞生长曲线,利用扫描电镜观察成肌细胞表面结构并进行结蛋白免疫细胞化学特异性鉴定.结果:采用改良方法分离成肌细胞产量高、耗时短;在培养过程中双重纯化获取的细胞生长状态良好,接种后3～5 d增殖达高峰;在扫描电镜下可观察到成肌细胞膜表面有微绒毛突起;体外培养的成肌细胞中94%的细胞胞质呈结蛋白抗体染色强阳性.结论:改良方法分离纯化大鼠骨骼肌成肌细胞效果理想,是成肌细胞体外培养的有效途径之一.
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基于置信区间宽度的样本含量估计
目的:介绍基于置信区间宽度的样本含量估计方法.方法:根据基于置信区间宽度的样本含量估计的原理,在分析基于该原理的样本含量估计值的近似算法的基础上提出新的算法,并对不同算法的计算结果进行比较.结果:指出了在求取基于置信区间宽度的样本含量估计值时,用近似法会低估样本含量,导致对总体均数的估计精度降低,而采用常规迭代法却不能确保样本标准差s与置信区间宽度L的比值s/L很小的情况下前后两次求得的n趋向稳定的数值,从而提出了基于置信区间宽度的样本含量估计值的一种改进算法--基于近似值的定向微调尝试法,并在近似法和基于近似值的定向微调尝试法的基础上提出了求取基于置信区间宽度的样本含量估计值的另一种改进算法--近似值校正法.在置信区间的覆盖率保持不变的情况下,按改进算法计算得到的样本含量抽样对总体均数的估计精度要比按近似法计算得到的样本含量抽样对总体均数的估计精度高.结论:建立了两种满足对总体均数估计精度要求的求取基于置信区间宽度的样本含量估计值的改进算法,即基于近似值的定向微调尝试法和近似值校正法.
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未来反恐中核武器损伤的护理
反恐怖军事行动,对于我军来说是一个崭新的课题.后勤保障除了应具有过硬的传统作战后勤保障能力之外,还必须具有良好的特种保障能力,特别是要具有重大恐怖事件的危急救援能力和参加消除遭受核、生化制剂恐怖袭击的能力[1].
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右侧肺动脉缺如1例
1 临床资料患者为女性,30岁,主因间断咯血4个月余于2005年5月24日入院.患者4个月余前无明显诱因出现双眼花、右耳及右面部麻木感,右侧肢体无力伴胸闷,随后出现咯鲜血40～60 ml,伴意识障碍.
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血液净化技术救治急性口服防冻液中毒
汽车防冻液的主要成分为乙二醇、甲醇,是汽车发动机冷却系统用的循环介质,并有专门的容器来盛放,但有些驾驶员为了方便喜欢使用饮料瓶来盛放防冻液.由于防冻液大多为无色、无味的透明液体,有人将其作为饮料误服,结果造成中毒甚至死亡.我院自2003年以来通过血液净化技术救治了3例急性口服防冻液中毒患者,现报道如下.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
