军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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乙肝治疗性可复制型DNA疫苗pSVK-HBVA高稳定宿主菌的筛选及其基础培养基的选择
目的 为乙肝治疗性可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA筛选稳定性高,能多次传代的宿主菌,以满足中试工艺的要求,同时对该工程菌适的基础发酵培养基进行选择.方法 将质粒pSVK-HBVA分别转化几种不同的大肠杆菌感受态细胞并提取质粒,通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的形态结构,连续传代法对工程菌的稳定性进行检测;选取质粒含量高和稳定性好的工程菌作为原始种子,按照2010版<中国药典>要求建立工程菌的三级种子批,并对种子批进行鉴定.同时,从LB,TB,M9(甘油),M9(葡萄糖)4种培养基中为工程菌筛选质粒产量高的基础发酵培养基.结果 经过筛选发现,在以大肠杆菌XL10-Gold为宿主菌时,质粒pSVK-HBVA表现出了同常规质粒DNA类似的稳定性,转接传代30次也未发生重组或片段丢失,能满足后续中试工艺的要求,LB作为基础培养基能得到高的质粒容积产率为5.5 mg/L.结论 大肠杆菌XL10-Gold是一个更利于可复制型DNA疫苗质粒pSVK-HBVA扩增的宿主菌,该工程菌发酵的佳基础培养基是LB培养基.
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萘酚喹衍生物的合成及体内抗疟活性评价
目的 通过对萘酚喹进行改造,以发现活性更高的抗疟药.方法 用3-羟基丙胺、4-羟基丁胺、N-(2-氨基乙基)吗啉、3,5-二甲基哌啶、3,5-二甲基哌嗪替代萘酚喹特丁氨基,采用曼尼希反应与关键中间体7缩合,得到目标化合物,结构经1H-NMR和ESI-MS验证.采用4日抑制法对衍生物进行体内抗疟活性评价,计算ED50.结果合成的5个萘酚喹衍生物为新化合物,均未见报道.体内活性结果显示化合物8、9、11具有抗疟活性,其中化合物9 的抗疟活性较好.结论 萘酚喹的特丁氨基被不同的含氮六元环取代会影响化合物的体内抗疟活性.
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新型吲唑类血管内皮生长因子受体抑制剂的合成
目的 设计、合成一系列新型吲唑嘧啶类化合物,作为潜在的血管内皮生长因子抑制剂.方法 以邻乙基苯胺为原料,经硝化、磺化、环合、硝基还原、甲基化、取代等11步反应合成了5个吲唑嘧啶苯磺酰胺类衍生物,目标化合物和中间体经1H-NMR、MS进行结构鉴定.结果 与结论 设计合成的5个目标化合物及其中的5个中间体均未见文献报道.该合成方法简单可行,可作为一系列吲唑嘧啶类血管内皮生长因子抑制剂候选化合物的合成通法.
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人G250真核表达载体pIRES-neo-G250的构建及表达
目的 构建包含人的G250真核表达载体,并将该载体转导入293 T细胞检测其表达,为构建以G250为靶点的肾癌模型提供研究基础.方法 通过聚合酶链反应获得G250基因,将其连接至PMD18T过渡载体,然后克隆到载体pIRES-neo中.把构建后的重组质粒pIRES-neo-G250转染到293 T细胞,用流式细胞仪、免疫荧光和RT-PCR检测其表达.结果 PCR扩增出的G250基因测序正确,酶切鉴定重组质粒pIRES-neo-G250正确,说明质粒构建成功;流式细胞术、免疫荧光和RT-PCT检测结果表明,重组质粒pIRES-neo-G250在293 T细胞中得到表达.结论 该实验成功构建了重组质粒pIRES-neo-G250,并且在293T细胞中能够有效表达,为后续构建转染人G250的基因细胞株工作奠定了基础.
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穿膜肽AR-23增强聚乙烯亚胺介导的基因转染效率及其机制的初步研究
目的 研究穿膜肽AR-23[蜂毒肽相关肽,来自日本蛙(Rana tagoi)]的极性电荷区对细胞穿膜作用的影响及其在促进聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导的基因转染中的作用.方法 分别合成了穿膜肽AR-23及由疏水核心区组成的截短肽AR-20;利用圆二色谱(CD)分析二级结构;通过溶血实验比较两者的细胞膜穿透能力;利用去极化实验分析穿膜肽与细胞膜的相互作用方式;将穿膜肽与PEI按一定比例混合,以绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(luciferase)为报告基因检测基因在HeLa和RAW264.7细胞中的转染效率,用MTT法测定基因转染后细胞的毒性.结果 在以甲醇模拟的细胞膜环境中,AR-23呈现出典型的α-螺旋结构,α-螺旋率为37.6%,而AR-20未呈现出典型的α-螺旋结构峰;在偏酸性和中性条件下,AR-23均能穿透细胞膜导致红细胞溶血,而AR-20不具备溶血作用;AR-23对细胞膜具有较强的去极化作用,而AR-20去极化能力极弱;AR-23可明显增强PEI介导的基因在HeLa和RAW264.7细胞中的转染效率,并且不引起转染后细胞的S毒性,AR-20则不具备增强基因转染效率的作用.结论 AR-23的极性电荷区对于维持其α-螺旋结构和穿膜能力至关重要.AR-23能够提高PEI介导的基因转染效率而不会导致细胞毒性,是一种理想的基因转染增强剂.
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登革病毒EDⅢ特异性单抗的体内外中和活性观察
目的 鉴定1株能同时识别登革病毒Ⅰ~Ⅳ型(dengue virus serotypesⅠ-Ⅳ,DENV 1~4)的EDⅢ特异性单抗2D73的体内外中和活性.方法 采用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)对单抗2D73的特性进行鉴定,并用基于酶联免疫斑点法的微中和实验(ELISPOT-MNT)和乳鼠保护实验观察单抗2D73对DENV 1~4的体内外中和活性.结果 单抗2D73对4型DENV均具有较强的中和活性,其50%抑制浓度(IC50)分别为0.28、0.16、0.18和18.82 μg/ml.乳鼠保护实验显示,该抗体对DENV 1~4同样具有较好的体内保护效果,与对照组相比,实验组小鼠发病时间明显延迟,生存率显著提高(P<0.05).结论 获得1株同时针对DENV 1~4且具有体内外中和活性的单抗,该单抗可进一步用于DENV致病和免疫机制的研究以及抗病毒药物的研制.
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抗TNF-α骆驼化人源sdAbs库的构建及筛选
目的 探索有效的抗体稳定性改构策略,筛选制备抗肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)稳定、高亲和力人源抗体.方法 基于定点突变技术和核糖体展示技术,对人源抗体片段VH进行骆驼化稳定性改构,构建骆驼化人源单域抗体(single-domain antibodyies,sdAbs)库,以TNF-α作为筛选抗原,筛选特异骆驼化人源sdAbs.结果 以前期构建的人源VH/K基因库为模板扩增VH基因;采用定点突变方法,将VH基因FR2中的4个疏水性氨基酸突变为亲水性氨基酸构建人源骆驼化sdAbs基因库;基于核糖体抗体库技术,构建用于核糖体展示的sdAbs基因库;经体外转录翻译后,以重组TNF-α作为筛选抗原,采用亲和富集法淘选特异性抗体基因;将筛选富集mRNA的RT-PCR基因产物克隆,并在原核系统pET-22b( + )/BL21(DE3)中实现可溶性表达,表达产物经ELISA鉴定,确认具有极高ELISA值的阳性克隆12、40,其序列分析表明是全新的抗TNF-α人源sdAbs;抗原特异性结合活性实验显示两者均可以特异性识别TNF-α,而不能与狂犬病毒糖蛋白和BSA结合,表明它们是特异针对TNF-α的人源基因工程抗体,而且均有很好的抗原浓度依赖性.结论 该研究将抗体稳定性的定向改造法和进化方法相结合,筛选得到了具有较好抗原特异性和良好稳定性的人源抗体,为稳定性人源抗体的制备提供了理论依据及技术基础.
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测量分辨率对不同EIT算法影响的仿真研究
目的 探索电阻抗断层成像(electrical impedance tomography,EIT)中检测系统测量分辨率(measurement resolution,MR)对图像重建算法应用效果发挥的影响.方法 基于对EIT均匀场理想边界电压数据结构的分析,仿真模拟MR为0.1、0.01和0.001 mV的实用化EIT系统,探索其对等位线反投影(LBP),Landweber二阶迭代和Tikhonov-Noser组合正则化算法的影响,引入重建误差ER和结构相似度SSIM定量评价成像效果.结果 相同条件下Tikhonov-Noser算法以小ER和大SSIM成像质量高,LBP低.0.1 mV的MR下Landweber无法对A成像.0.01和0.001 mV的MR下,LBP和Landweber算法对单目标成像质量与目标和场域边界的距离成反比,Tikhonov-Noser对B的成像质量低.3种算法ER随目标个数增加(B、D,C、E、F两组)都呈现出增大的趋势.结论 不同MR对3种EIT算法应用效果的影响不同,各算法对不同目标成像时要求的MR也不一致.系统构建时MR应根据应用对象和算法设计.Tikhonov-Noser在0.1 mV的MR系统中可工作,0.01 mV时可获取高质量图像.Landweber算法建议根据应用目标位置选择0.01或0.001 mV的系统;LBP在0.1 mV的MR系统中可工作,MR足够时因成像质量低不建议选择.
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SQ109合成工艺改进
目的 改进SQ109的合成工艺,确立一条经济、高效的合成路线.方法 以香叶醇(1)为起始原料,经氯代得到香叶基氯(2),再经胺化得到中间体N′-香叶基-2-基-乙烷-1,2-二胺(3),中间体3与2-金刚烷酮经还原胺化得到目标化合物SQ109.结果 与结论 目标化合物经元素分析、核磁共振氢谱和质谱的确证,总收率为66.6%(以香叶醇计).该方法原料经济易得,操作简单可行,各步产率均较高.
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固相萃取-气相色谱-串联质谱法检测粮食作物中的T-2与HT-2毒素
目的 建立粮食作物中T-2与HT-2毒素的高灵敏度气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)检测方法.方法 染毒的粮食样品以柱淋洗方式用甲醇提取后,采用C18固相萃取柱净化富集,再经七氟丁酰咪唑衍生化后,在气相色谱-串联质谱仪上采用选择反应监测(SRM)模式进行检测.结果 在染毒大米、小米、糯米和玉米样品中,T-2与HT-2毒素在0.5~100 μg/kg范围内均呈现良好的线性关系.在优分析条件下,两种毒素的低检出限均在0.05~0.5 μg/kg.在2、30 、60 μg/kg 3个加标浓度下,T-2与HT-2毒素的方法回收率均在47.2% ~110.8%.结论 该方法操作简便,灵敏度高,适用于各类粮食样品中T-2与HT-2毒素的检测.
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BLAP75蛋白与DNA螺旋酶BLM以及拓扑异构酶TopoⅢα的相互作用
目的 确定BLAP75蛋白与BLM蛋白及TopoⅢα蛋白的相互作用及作用位点.方法 构建一系列携带MBP标记的不同BLAP75载体,通过体外纯化蛋白结合实验检测BLAP75与BLM、TopoⅢα的相互作用位点,并在真核细胞中通过免疫共沉淀方法进行验证;运用RNA干扰(RNAi)技术特异性抑制BLAP75的表达,并利用Western印迹法检测其对BLM和TopoⅢα蛋白表达的影响.结果 BLAP75与BLM和TopoⅢα蛋白的结合位点位于BLAP75的N端区域; BLAP75与BLM的直接相互作用需要DNA的介导;当BLAP75蛋白表达量减少时,BLM和TopoⅢα蛋白量也随之减少.结论 细胞内BLM和TopoⅢα蛋白均结合在BLAP75的氨基端部分;BLAP75对TopoⅢα和BLM的蛋白水平具有重要影响.
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军队"三防"医学救援体系建设探讨
该文结合近年来军队承担的一系列重大活动安保任务,以及反恐维稳、疾病防控等应急处突行动中所积累的实战保障经验,系统分析了军队"三防"医学救援工作面临的形势与任务特点,以及当前军队"三防"医学救援体系建设存在的主要问题,研究提出了加强组织指挥体系、救援力量体系、药材装备体系和信息化建设4个方面思考,为我军"三防"医学救援体系建设提供了理论支持.
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巴利昔单抗与抗胸腺细胞球蛋白在亲属肾移植中诱导疗效研究
军事医学科学院附属医院泌尿外科自2008年5月至2011年10月行亲属移植共39例,因目前肾源短缺,为保证移植肾存活,减少排斥反应发生率,术前均进行诱导,随机分为两组,其中20例应用巴利昔单抗(舒莱,诺华制药有限公司产品),19例应用抗胸腺细胞球蛋白(兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白,健赞公司产品),取得了较好的效果,现报道如下.
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利用细胞毒性实验检测血液中炭疽毒素致死因子的方法学研究
目的 探索利用炭疽毒素致死因子(lethal factor,LF)的细胞毒性检测血液中LF的可行性,为炭疽的临床检测、治疗及相关研究提供支持.方法 利用小鼠巨噬细胞系J774A.1对LF细胞毒性的高度敏感性,检测血液中LF的浓度,对实验条件进行优化,并利用Fischer 344大鼠模型验证该方法的可行性.结果 细胞毒性实验能够检测到血浆中的LF浓度可低至5 ng/ml,该方法操作简单,灵敏度高,并在大鼠模型中得到了验证,利用本法测定LF在大鼠血液中的半衰期为4.8~6.5 h.结论 初步建立了利用细胞毒性实验检测血液中LF的方法,该方法在灵敏性、经济性和实用性等方面具备一定优势,为炭疽相关研究及临床检测提供了新的选择.
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BslA蛋白在减毒炭疽芽孢杆菌中的表达和功能分析
目的 在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中表达BslA蛋白,并分析其生物学活性.方法 利用PCR方法从炭疽芽孢杆菌中扩增出bslA基因,克隆至穿梭质粒pDG148,采用电转化方法将表达载体转入减毒炭疽芽孢杆菌AP422后诱导表达重组BslA.并利用SDS-PAGE电泳、Western印迹、间接免疫荧光实验和流式细胞术分析目标蛋白的表达,并对其进行空间定位,后用细菌黏附实验分析其生物学功能.结果 BslA蛋白在AP422中获得成功表达,且目标蛋白主要表达于菌体表面.表达BslA蛋白的AP422(pDG-BslA)菌株具有黏附宿主细胞表面的能力,该黏附能力与阳性对照A16R菌株基本一致.结论 在减毒炭疽芽孢杆菌AP422中实现了BslA蛋白的功能性表达,为进一步研究该蛋白的功能和构建新的疫苗候选株奠定了实验基础.
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海昆肾喜胶囊治疗慢性肾功能不全疗效观察
目的 对64例慢性肾功能不全患者服用海昆肾喜胶囊后的临床资料进行分析并评价其临床效果.方法 将128例慢性肾功能不全患者随机分为两组,每组各64例,对照组仅采用常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用口服海昆肾喜胶囊,两组疗程均为3个月.对两组治疗前后的临床症状改善情况以及血肌酐(serum creatinin,SCr) 、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN) 和内生肌酐清除率(endogenous creatinine clearance rate,Ccr)的变化进行对比分析.结果 治疗3个月后,两组患者症状均有改善; 治疗前后相比,治疗组SCr (694.13±240.91) vs(285.36±100.52)μmol/L、BUN(21.39±7.99)vs(9.80±1.54)mmol/L,均明显下降(P＜0.05),Ccr(37.41±6.89)vs(52.32±5.43)ml/min,显著升高 (P＜0.05); 对照组SCr(739.38±268.74)vs(647.70±190.85)μmol/L、BUN(22.73±8.66)vs(19.37±6.65)mmol/L,有所下降(P＜0.05),Ccr(35.36±7.64 )vs(46.46±7.88)ml/min 明显升高(P＜0.05 ).观察组治疗后SCr、BUN及Ccr分别与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 海昆肾喜胶囊治疗慢性肾功能不全有着良好的治疗效果.
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EPAS1基因多态性与急性高原病关联性研究
目的 探讨中国平原汉族人群中EPAS1基因多态性同急性高原病(acute mountain sickness,AMS)易感性的关系.方法 采取病例对照研究方法,根据AMS路易斯湖评分系统(LLS)对受试者进行AMS的判定.采用聚合酶链反应-连接酶检测反应方法(PCR-LDR)测定80例AMS患者和86例健康对照组人群EPAS1基因位点rs2044456、rs4953348的基因多态性.结果 AMS组及对照组中基因位点rs2044456、rs4953348均检测出AA、AG、GG基因型,rs2044456位点基因型及等位基因频率组间差异无统计学意义;rs4953348位点AG基因型频率与GG基因型频率相比,组间差异具有统计学意义(OR=0.453,95%CI 0.226～0.908,P=0.026);AMS组A等位基因频数显著低于对照组(25.0%vs 35.5%,OR=0.607,95%CI 0.377～0.975,P=0.039).分别比较各位点不同基因型心率及血氧饱和度水平,发现该两个位点不同基因型携带者高原血氧饱和度具有统计学差异(P＜0.05).结论 位点rs4953348基因多态性与mAMS易感性相关,携带AG基因型的人群患AMS的风险性可能较携带GG基因型人群低,而A等位基因则可能是mAMS的保护性因素;各位点不同基因型均同血氧饱和度有较强关联性(P＜0.05).
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健康青年男性高原习服后进入更高海拔的心率、血压和血氧饱和度变化规律及与急性高原病的关系
目的 研究世居平原的健康青年男性在3600 m高原习服1个月后乘汽车急进至4400 m高原的心率、血压和血氧饱和度变化规律及与急性高原病之间的关系.方法 随机选择127名在3600 m高原习服1个月后乘汽车急进至4400 m高原的健康青年男性作为观察组,填写制式急性高原病流行病学调查表,进行急性高原病路易斯湖评分系统(LLS)评分,有头痛且评分≥3的诊断为急性高原病,测量心率、血压和血氧饱和度.随机选择171名平原健康青年男性作为对照组,填写制式急性高原病流行病学调查表并测量心率、血压和血氧饱和度.结果 在高原习服后进入更高海拔,症状主要表现为疲劳虚弱和活动能力下降,急性高原病的发病率为34.65%(44/127),心率、收缩压和舒张压显著高于平原对照组,血氧饱和度显著低于平原对照组(P<0.001).患病小组的血氧饱和度显著低于未患病小组(P<0.05),但两者的心率、收缩压、舒张压无显著差异(P>0.05).结论 高原习服能够降低进入更高海拔高原后的急性高原病发病率;高原低氧使血液氧饱和度下降,心率增快,血压上升;进入更高海拔高原初期应适当减少活动量以降低氧消耗和改善高原症状,并监测血氧饱和度水平;对于血氧饱和度较低且症状较重者应重点关注并适时采取适当的治疗措施.
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健康青年男性急进高原右心功能变化研究
目的 探讨急进高原初期在不同海拔及进驻时相点,健康青年男性右心结构与功能的变化.方法 随机选择62名初次进入高原的健康男性,由同一人分测在海拔400 m平原地区、进入海拔3700 m高原24 h及停留1周进入更高海拔4400 m 5 d右心系统相关参数的变化.结果 与平原比较,进入海拔3700 m高原1 d内Tei指数、肺部血管阻力(PVR)、平均肺动脉压(mPAP)明显增高(P<0.05),右房内径(RA)、右室舒张末期内径(RV)显著降低(P<0.001),肺动脉内径(PA)、E/Aratio明显降低(P<0.05);在海拔3700 m处适应1周再次进入更高海拔4400 m地区,与初次进入高原时相比,E/Aratio明显增高,RA、RV明显降低(P<0.05),PA、Tei指数、mPAP、PVR差异无显著性(P>0.05).结论 在初次进入高海拔地区后,健康青年男性右心系统结构与功能有明显改变,经过在海拔3700 m地区短期习服适应后进入更高海拔,右心室做功无明显增加,右室舒张与收缩功能恢复到平原水平.提示随着在高原低氧环境停留时间的延长,右心结构会逐渐发生改变,舒张与收缩功能会随着机体的适应和调节机制得到一定改善.
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急性高原病的研究进展
人员从平原快速进驻到高原可导致一系列与高海拔相关的疾病.急性高原病(acute mountain sickness,AMS)一般是良性和自限性的,但是部分人群会发生高原性肺水肿或高原性脑水肿,引起生命危险.该文重点综述AMS诊断、预测因素、预防及治疗方面的新研究进展.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
