军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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ErbB4基因miRNA干扰质粒的构建和有效性鉴定
目的 构建ErbB4基因特异性miRNA表达载体并检测其有效性.方法 设计合成大鼠ErbB4基因特异性miRNA前体寡核苷酸,构建ErbB4基因特异性的重组miRNA干扰质粒.从大鼠脑分离提取总RNA,经RT-PCR构建靶序列质粒,并将其与miRNA干扰质粒共转染HEK293T细胞,经实时定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果 与结论针对ErbB4基因的miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制其靶基因的表达.该质粒为后续ErbB4基因特异性miRNA慢病毒表达载体的构建及ErbB4的相关功能研究奠定了基础.
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环式增强型绿色荧光蛋白热稳定性及Npu DnaE内含肽高反式剪接效率研究
目的 在体内借助Npu DnaE内含肽(intein)的高效反式剪接作用获得环式增强型绿色荧光蛋白(Cyc-EGFP).方法 对构建的融合表达载体pET/Npu DnaE intein/EGFP-28a( + )进行诱导、表达,之后利用亲和纯化获得高纯度的Cyc-EGFP和增强型绿色荧光蛋白(EGFP),并对二者的荧光强度和热稳定性进行比较.结果 Npu DnaE内含肽环化效率可达98%以上,明显优于Ssp DnaE内含肽,环化后的EGFP热稳定性提高了4～5℃.结论 Cyc-EGFP这一明显优势使蛋白环化在蛋白质工程等领域具有重要的应用价值.
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肿瘤中GLI1RNA编辑的下调及其潜在功能分析
目的 检测癌相关基因GLI1编码区发生的A-to-I RNA编辑,比较编辑水平在肿瘤与正常细胞系中的差异,并分析编辑事件的潜在影响,以期揭示其与癌症发生发展的关联.方法 通过PCR、RT-PCR及测序的方法检测GLI1编码区DNA和RNA序列上的差异,以此来识别该区域上的A-to-I RNA编辑事件和比较肿瘤与正常细胞系中编辑位点的编辑水平差异.使用多种生物信息学工具分析编辑事件的潜在功能影响.结果 在人脑、乳腺、小肠组织及多种细胞系中均检测到GLI1转录本上对应染色体12∶56150891的位置发生A-to-I RNA编辑,该编辑事件导致GLI1第701位氨基酸由精氨酸转变为谷氨酸.与相应的正常细胞系相比,肝癌细胞系及乳腺癌细胞系中该位点的编辑水平明显降低.生物信息学分析表明此编辑事件能改变编码的氨基酸,并可能破坏外显子剪接增强子及影响蛋白质高级结构.结论 GLI1编码区发生的A-to-I RNA编辑在人脑、乳腺、小肠组织及多种细胞系中普遍存在.该编辑事件在肝癌和乳腺癌细胞系中的下调提示其可能与癌症的发生发展相关.
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利用groupⅡintron构建产气荚膜梭菌突变体
目的 通过插入失活α毒素基因获得产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)突变体.方法 利用Mobile groupⅡintron的自我剪切作用,对本室保藏的1株野生型C.perfringens的α基因plc插入失活.通过菌落PCR检测,以及观察突变株在哥伦比亚血琼脂培养基和脑心浸液培养基(4%卵黄)平板上的形态变化,进行阳性筛选.蛋白质免疫印迹分析α毒素蛋白活性.结果 PCR检测到α毒素突变体的plc基因中,存在Mobile groupⅡintron片段,并且观察到该菌在哥伦比亚鲜血琼脂平板培养基上的α毒素溶血环消失,在脑心浸液培养基(4%卵黄)平板上无白晕.蛋白质免疫印迹分析表明,plc突变体不表达α毒素蛋白.结论 成功构建C.perfringens α毒素突变体,为后期探索C.perfringens口服疫苗打下了重要基础.
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不同粒径的Au纳米粒子对 SPR 技术定量分析灵敏度的影响
目的 通过比较不同粒径金纳米粒子(Au NPs)对表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)系统信号放大的影响,筛选适粒径的Au NPs,从而建立一种新的SPR方法用于猕猴血清中西妥昔单抗(C225)定量分析.方法 利用柠檬酸还原HAuCl4法自行制备3种粒径Au NPs并分别与羊抗人IgG进行偶联,将偶联物引入BIAcore系统进行SPR信号采集,筛选适粒径的Au NPs,进而利用BIAcore系统建立猕猴体内C225定量分析标准曲线.结果 自行制备的Au NPs形状相对圆润,大小均一.几种粒径的Au NPs均能引起SPR信号放大,但粒径不同则SPR信号放大情况不同,其中10 nm Au NPs的SPR信号放大作用为明显.结论 将特定大小的Au NPs引入SPR定量分析系统能够显著提高SPR信号强度,从而进一步提高SPR定量分析灵敏度.
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空军招飞学员视力与对比敏感度关系的研究
目的 分析招飞学员群体中视力与对比敏感度(contrast sensitivity,CS)的关系,并探讨在招飞选拔体检工作中应用对比敏感度检查的可能性.方法 检查招飞学员对比敏感度函数(contrast sensitivity function,CSF)值,将符合纳入标准的98例样本按视力1.0为标准分为两组,比较4种空间频率(3、6、12、18 cpd)、3种状态(明视、暗视、暗视+眩光)的CSF值.结果 两组在不同状态、不同空间频率的CSF值差异均无统计学意义(P>0.05);在各空间频率下,明视与暗视状态下的CSF值差异有统计学意义(P＜0.05＝,暗视与暗视+眩光状态下的CSF值差异均无统计学意义(P>0.05).结论 部分招飞学员视力表检查结果正常,而CSF值出现异常,特别是在高空间频率段的明暗分辨率下降.现行招飞选拔体检标准无法筛选这些学员,可以尝试增加中高空间频率下暗视的CSF值作为招飞体检的指标.
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结核分枝杆菌抗原蛋白38×103抗原表位预测及其蛋白片段抗原性研究
目的 筛选出一种结核分枝杆菌(MTB)特异性诊断标志物.方法 对MTB重组蛋白抗原38×103的基因组序列进行生物信息学分析及抗原表位预测,原核表达38×103基因序列121～182和238～374位氨基酸蛋白片段,分别命名为T38和P38重组蛋白;采用蛋白芯片对T38和P38重组蛋白进行抗原性检测.结果 经蛋白芯片检测94例阳性和128例阴性样本,结果显示,P38重组蛋白在结核病检测中的敏感性为81.9%,特异性为80.5%,但是T38重组蛋白特异性不佳.结论 生物信息学预测38×103基因抗原表位,为寻找有价值的抗原靶点提供了参考;重组蛋白片段P38在结核病诊断中具有潜在应用价值,可作为联合诊断的备选抗原之一.
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基于Zend Framework的实验室信息管理系统的设计与实现
目的 利用Zend框架技术建立实验室信息管理系统,促进实验室的信息化管理和科研工作效率的提高.方法 通过信息系统需求分析方法确定系统的功能和性能需求,以Zend studio7.1、Oracle 10g、Apache 2.0为开发工具,应用Zend框架等技术实现系统的各项功能.结果 与结论系统实现了实验流程、实验物资和实验辅助条件管理等功能,并通过测试,在该实验室上线服务.
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甘露糖化hLYZ/eGFP融合蛋白的表达纯化及巨噬细胞定位
目的 利用毕赤酵母表达蛋白具有高甘露糖修饰的特性,在毕赤酵母中表达甘露糖化修饰的人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ);进而利用巨噬细胞(macrophage,M)表面的甘露糖受体(mannose receptor,MR)将甘露糖化的人溶菌酶内吞入胞,为研究可入巨噬细胞杀灭其胞内感染菌的人溶菌酶提供基础.方法 为使人溶菌酶可以在酵母中产生N-甘露糖化修饰,在人溶菌酶的C端设计2个N-糖基化位点;通过在其C端融合增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP),观察人溶菌酶在巨噬细胞RAW264.7中的亚细胞定位;同时在其C端引入了His标签便于融合蛋白的纯化.毕赤酵母表达的hLYZ/eGFP与RAW264.7共孵育,借助激光共聚焦显微镜观察该融合蛋白能否进入RAW264.7;通过巨噬细胞甘露糖受体(macrophage mannose receptor,MMR)的竞争性配体甘露聚糖(mannan)的阻断实验,检测甘露糖化的人溶菌酶是否通过MMR介导内吞.结果 毕赤酵母表达的hLYZ/eGFP融合蛋白是相对分子质量(Mr)为(66～97)×103的弥散条带,肽N-糖苷酶F(PNGaseF)酶切后,该融合蛋白变为Mr均一的条带,与非糖基化hLYZ/eGFP融合蛋白的理论Mr一致.该融合蛋白与RAW264.7共孵育后,可见细胞质中存在eGFP的绿色荧光,而加入甘露聚糖可以抑制这一现象发生.结论 毕赤酵母表达的hLYZ/eGFP融合蛋白为高甘露糖型糖基修饰蛋白,该蛋白可以通过MMR介导内吞进入巨噬细胞.
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特发性多发性肌炎与激素不敏感性
特发性多发性肌炎(idiopathic polymyositis,IPM)目前认为是可治性肌病,但部分病例对激素不敏感.本文阐述关于激素抵抗新认识,提高对激素不敏感性认识,激励寻找优化治疗方案.
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肺炎支原体感染检测技术的研究进展
如何正确诊断肺炎支原体(Mp)感染对临床医师一直是一种挑战.这主要是因为Mp生长缓慢(2～6周),营养要求高;血清学诊断需要急性期和恢复期双份标本;PCR法无法完全区分感染还是携带状态.近年来一些新的诊断技术和方法不断涌现,本文对此做一简要综述.
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基于随机聚合酶链反应的病原菌基因芯片检测技术
目的 建立一种基于随机聚合酶链反应的病原细菌基因芯片筛查检测技术.方法 用生物学软件分析7种病原菌特异性基因序列的保守性区域,利用Oligo 6.0软件设计针对靶细菌的一系列探针,制备检测用基因芯片.细菌基因组DNA在随机引物扩增中掺入氨基丙烯-dUTP,产物偶联荧光染料后与芯片上探针杂交,通过芯片扫描仪和图像分析软件对结果进行判断.选取19种病原菌基因组DNA进行芯片特异性验证和灵敏度评价,使用问号钩端螺旋体对应靶探针进行基因芯片检测方法重复性验证,并制备问号钩端螺旋体模拟水污染样本进行芯片检测.结果 在均一的杂交条件下4种靶细菌均能得到相应特异性杂交图谱,其他非目的 细菌均为阴性结果,3种靶细菌基因组DNA低检测浓度为14.43～363.4 pg/μl,芯片重复性变异系数CV值＜15%,低可检测含问号钩端螺旋体7×105条/ml模拟水污染样本.结论 初步建立的随机聚合酶链反应结合芯片技术的检测方法可用于多种病原菌筛查检测,为细菌高通量筛查与鉴定技术提供了新的思路和实验依据.
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莫达非尼R-和S-对映体的LC-MS/MS 定量检测以及在Caco-2单层细胞模型上的转运特性
目的 建立准确、灵敏、可靠的LC-MS/MS法,定量测定莫达非尼对映体,考察其在Caco-2细胞单层模型上的转运.方法 选用资生堂 C8 (50 mm×2.1 mm,3 μm)色谱柱及API4000液相色谱-质谱联用仪,用于定量分析的离子反应分别为m/z 274.4→165.1(莫达非尼)和m/z 391.2→265.1(CS55).结果 在本实验条件下,建立范围为1～1000 ng/ml的定量方法,批内、批间精密度<15%(n=5).结论 建立一种快速、准确、灵敏度高、专属性好,可用于莫达非尼对映体在Caco-2单层细胞模型转运研究的方法.
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可视化基因芯片技术检测肠道病毒方法的建立
目的 建立一种能同时检测10种肠道病毒的可视化基因芯片法.方法 根据公开发表的10种常见肠道病毒的序列,设计病毒引物和探针,制备肠道病毒检测基因芯片.利用多重不对称PCR法扩增样品中的病毒靶片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、可视化显色后进行结果分析.在优化的RT-PCR体系、杂交反应和可视化检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏度和重复性.结果 本研究共筛选出2对通用引物、3对特异性引物和1条肠道病毒属通用探针、9条特异性检测探针.该芯片具有较好的特异性和重复性,可检测出不低于102 拷贝/μl的体外转录RNA.30例临床标本的芯片检测结果与荧光PCR法一致.结论 本研究所建立的方法具有高通量、高特异性、高灵敏度等特点,因此在临床上具有潜在的应用前景,可以为肠道病毒诊断提供实验室依据.
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血清CRP水平与急性动脉粥样硬化性脑梗死患者神经功能缺损程度相关性研究
目的 探讨急性动脉粥样硬化性脑梗死(acute atherothrombotic ischemic cerebral infarction)患者中血清C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平与神经功能缺损(neurological impairment)程度及日常生活活动能力(Barthel指数)的相关性.方法 收集急性动脉粥样硬化性脑梗死患者138例,所有患者入院当天均接受神经功能缺损程度与Barthel指数评分,根据评分结果的不同进行分组,采集第2天清晨空腹血测定CRP浓度,然后进行分析比较.结果 在急性动脉粥样硬化性脑梗死患者中,中国人卒中量表(Chinese stroke scale,CSS)重型患者血清CRP水平高于CSS中型患者(P<0.05),CSS中型患者血清CRP浓度大于CSS轻型患者(P<0.05),CSS重型患者血清CRP浓度明显大于CSS轻型患者(P<0.05);Barthel指数级别为良的患者CRP浓度低于级别为差的患者(P<0.05),Barthel指数级别为良的患者CRP浓度低于级别为中的患者(P<0.05),Barthel指数级别为中的患者CRP浓度低于级别为差的患者(P<0.05),具有统计学意义.结论 在急性动脉粥样硬化性脑梗死患者中,血清CRP水平与神经功能缺损程度呈正相关,与Barthel指数呈负相关.
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论军事医学系统的技术要素
军事医学技术要素是为保障部队战斗力而逐步形成的各类手段和方法.其作用主要包括:实施卫勤保障的主要手段、决定卫生勤务的组织形态、促进军事医学科学的发展3个方面;军事医学技术要素在演化形成过程中具有与军事需求的自适应、与医学技术相互促进、依赖科学技术发展的三个主要特点;本文还从军事医学技术创新工程和价值实现的角度对军事医学技术创新进行了初步的探讨.
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论军事医学系统的科学要素
军事医学的科学要素是指军事医学系统的科学子系统,该子系统又由军事医学科学的认识要素、知识要素和社会要素构成.军事医学科学要素的主要作用是揭示军事医学的特殊规律、引领军事医学的创新发展、指导平战时卫勤保障活动.军事医学科学要素的演化既受军事的影响,也受医学和科技的影响,更是军事医学科学要素自组织的结果.
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| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
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| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
