军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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抗芥子气防治制剂研究进展
综述了近年来在芥子气药物防治研究方面的进展,评述了目前正在研究的几种药物及其可能的防护机理,认为对芥子气的药物防治应是综合性的.谷胱甘肽、半胱氨酸及其酯类、聚(ADP-核糖)聚合酶抑制剂、精氨酸结构类似物、钙离子通道阻滞剂将在未来的研究中受到重视.
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噬菌体肽库研究进展
噬菌体肽库是将一段编码外源短肽的寡聚核苷酸整合到噬菌体基因中,以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达,从而构建成序列不同的特定长度的小肽集合.一般采用生物亲合选择系统淘选噬菌体肽库.随着此项技术的不断完善和发展,噬菌体肽库已在许多领域得到了广泛的运用.
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登革病毒感染:流行病学、临床表现、诊断和预防
由登革病毒感染引起的登革热是重要的虫媒病毒病,近年来患者数与流行区域都有扩大的趋势.为加强对登革热的诊断与防治,本文对其流行病学、临床表现、诊断与预防进行了简要综述.
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大鼠放射性皮肤溃疡组织中p53和mdm2蛋白高表达病理研究
放射性皮肤溃疡多见于临床放疗引起的并发症,其特点为顽固性反复发作、长期不愈,后可能发展为癌变[1].放射性皮肤溃疡的基因病理学改变目前尚不清楚,国内外尚少见其相关癌基因改变的病理学研究报道.mdm2(murine double minute 2)基因定位于人染色体12q13-14,其产物mdm2蛋白有结合并抑制野生型p53蛋白功能的作用[2].为了解p53和mdm2在放射性皮肤损伤中的改变及其意义,我们制备了放射性皮肤溃疡动物模型,并检测其基因表达状况.
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我国新近暴发的登革热的病原分离与鉴定
1999年8月在福建省福州等地突然暴发了大量人群原因不明的发热、关节疼痛、头痛、皮疹,个别患者出血等症状.该病起病急,传播迅速,发病人数达1 000多例.福建省卫生防疫站对此十分重视,要求对收集的患者血清标本进行鉴定.我们对所送标本进行了血清学、生物学及分子生物学检测,而且还观察了对动物的致病性.现将主要结果报告如下.
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乳酸和乙酸对重组霍乱毒素B亚单位工程菌表达的影响
霍乱毒素B亚单位(CTB)是口服霍乱疫苗的重要抗原之一.工程菌MM2是一株表达CTB的大肠杆菌,产物CTB能分泌到培养液中[1].重组质粒 pMM-CTB来源于pUC19,ctxB基因位于lac 启动子的下游.lac启动子是一个化学诱导型启动子,无诱导物IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)存在时,其下游基因则不能表达.但是我们的研究结果[2,3]表明,在不用IPTG 诱导的情况下CTB仍可得到表达,而加入IPTG对CTB的表达几乎没有影响.此外,在培养基中加入乳酸或乙酸还可促进CTB表达,这一点与多数工程菌的表达特点不同.为此,我们对乳酸和乙酸对工程菌MM2表达CTB的影响进行了研究.
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不同血清浓度培养基对HIV产量的影响
免疫印迹试验是确认HIV感染的标准.免疫印迹试剂的研制需要用天然全HIV裂解产物,这就需要培养HIV赖以生存的宿主细胞以大量生产HIV.传统体外培养细胞多用含10%~20%的动物血清的培养基[1].但异种动物血清给试剂研制末期病毒抗原的分离纯化带来困难,并增加试剂的非特异性.无血清化学培养基价格居高不下.在不降低HIV感染毒力和病毒产量的前提下,减少培养基中血清用量,既可降低成本,又可给后续工作带来方便.我们根据长期积累的经验对不同血清含量的培养基对HIV产量的影响进行了系统研究.
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重组人尿激酶原半成品的稳定性观察
尿激酶原或称尿激酶型纤溶酶原激活剂,是尿激酶的前体,它主要激活血栓部位纤维蛋白表面结合的纤溶酶原使其变成纤溶酶,后者再溶解血栓中的纤维蛋白,起到特异性的溶栓作用.
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IGF1R高表达细胞株的构建及其促糖代谢作用研究
胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1, IGF1)和胰岛素高度同源,它们可以通过自己的受体,即IGF1受体(IGF1R)和胰岛素受体(IR)发挥生物学效应.IR和IGF1R都是α2β2跨膜糖蛋白,在β亚单位都有酪氨酸蛋白激酶区.通常人们认为,IGF1的促生长作用主要通过IGF1R,而代谢调控功能则通过IR起作用.但是在有些情况下, 如胰岛素抵抗的代谢状态,可以通过IGF1作用于它本身受体加以纠正[1].NIH3T3细胞是小鼠成纤维细胞,其表面IGF1R较少,我们选择它为模型,研究IGF1R在介导IGF1R促细胞糖代谢过程中的作用.
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特种坑道鼠害防制方法
目的和方法:在对鼠患坑道深入调查的基础上, 开展鼠药剂型和建筑防鼠现场试验, 探讨特种阵地的鼠害防制方法. 结果: (1)以高浓度抗凝血鼠药与普通润滑油混合制成的胶泥舔剂, 适合坑道灭鼠使用.(2)建筑防鼠取得良好效果, 不同类型坑道试验, 鼠患都得到有效控制. 结论: 控制特种坑道鼠患必须强调综合防治,重点是防鼠建筑.
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基孔肯亚病毒中和单克隆抗体的筛选与鉴定
目的:建立抗基孔肯亚病毒单克隆抗体细胞株,筛选具有中和活性的特异性单克隆抗体.方法:利用细胞融合技术建立抗基孔肯亚病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,用细胞培养中和试验初筛具有中和活性的单克隆抗体,用固定单克隆抗体稀释病毒方法进行乳鼠中和试验,进一步验证单克隆抗体的保护作用;用中和交叉试验鉴定中和单克隆抗体反应的特异性.结果:用免疫荧光法检测建立了9株能稳定分泌抗基孔肯亚病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,初筛出4株具有中和活性的单克隆抗体,其中1F1单克隆抗体稀释200倍时可保护50%细胞不产生细胞病变;乳鼠中和试验1F1单克隆抗体中和指数为103.3,对试验小鼠有较强的保护作用.中和交叉试验表明,1F1单克隆抗体只中和基孔肯亚病毒,与其他病毒无交叉反应,特异性较高.结论:制备了9株抗基孔肯亚病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,筛选得到了1F1具有较强中和活性的特异性单克隆抗体,可望为基孔肯亚病毒病的诊断、紧急预防与治疗提供良好试剂.
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16S rRNA全基因序列分析鉴定我国南方蜱中单核细胞埃立克体
目的:测定蜱中单核细胞埃立克体的16S rRNA全基因序列,鉴定病原菌.方法:应用从16S rRNA基因构建的特异和通用引物进行PCR,从越原蜱标本中分段扩增查菲埃立克体DNA,进行克隆和序列测定;将其连成完整序列与埃立克体族中其他微生物进行同源性比较,并以相等数量定位碱基的核苷酸序列进行遗传发育分析.结果:测定序列全长1 463 bp,与美国查菲埃立克体分离株的16S rRNA基因序列相差6个核苷酸,同源性为99.6%,遗传发育分析两者无明显差异;与犬埃立克体、尤氏埃立克体、小鼠埃立克体的同源性为97.5%~98.0%,属于同一个基因群;与其他埃立克体种的同源性为83.0%~92.9%.结论:首次报道了我国南方蜱中埃立克体的16S rRNA全序列,确定了其分类位置,为进一步开展疫源地调查奠定了基础.
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人源汉坦病毒H8205株M基因序列分析及其分类地位的研究
目的:测定汉坦病毒H8205株M基因全序列并对其分类地位进行探讨.方法:从感染H8205株病毒的鼠脑中提取RNA, 经RT-PCR扩增M基因全序列,克隆到pGEM-T Easy载体中测序,与汉坦病毒属的各型标准株进行同源比较,构建系统进化树, 并与汉滩型中已知的7株病毒进一步比较,确定H8205株的分类地位.结果:H8205株M基因由3 615个核苷酸组成,编码1 135个氨基酸;同源性分析显示该株病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属中的汉滩型(HTN),但与同型中其他毒株的亲缘关系较远.结论:H8205株是不同于已知汉滩型毒株的一个新亚型,表明我国的汉滩型病毒存在不同亚型.
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c-CBL是连接BCR/ABL与磷脂酰肌醇-3激酶的桥梁
目的:探讨原癌基因产物c-CBL在P210BCR/ABL激发的异常信号转导中的作用.方法:以慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞为研究对象,用反义技术、免疫沉降和蛋白免疫印迹分析,研究c-CBL、BCR/ABL和磷脂酰肌醇-3激酶( phosphatidylinositol-3 kinase, PI3K)三者之间的相互关系.结果:在K562细胞内,c-CBL、BCR/ABL与PI3K可能形成一种三分子复合物,c-cbl反义RNA转染细胞后BCR/ABL免疫沉降物中PI3K含量减少59%左右,而BCR/ABL自身酪氨酸磷酸化水平无明显改变.结论:原癌基因产物c-CBL对BCR/ABL酪氨酸激酶活性无反向调节作用,它是连接BCR/ABL与PI3K之间的重要桥梁分子.
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5 L生物反应器中长期灌流培养CHO工程细胞生产rt-PA
目的:利用5 L反应器培养CHO工程细胞生产重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator, rt-PA).方法:在5 L搅拌式生物反应器中采用Cytopore1多孔微载体和无血清培基DF5S连续灌流培养CHO工程细胞株4B3.结果:持续培养达103 d,活细胞密度和rt-PA生产水平分别达到6.52×106个细胞/ml和17 161 U/ml.细胞培养上清经Streamline SP离子交换层析和Lysine-Sepharose 4B亲和层析两步纯化,获得纯度达到98%的rt-PA.SDS-PAGE分析表明,整个培养过程所生产的rt-PA具有较好的质量一致性.产品热原检测合格.结论:实现高密度长期培养4B3细胞,确定5 L培养工艺,为进一步扩大生产规模奠定了基础.
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大鼠放射复合伤口愈合特点的病理研究
目的:研究辐射对伤口愈合影响的规律和机制.方法:采用宏观、光镜、电镜及免疫组化(显示Ⅲ型胶原)和原位杂交(检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA)等方法,动态观察了大鼠放射复合伤口愈合的病理变化过程.结果与结论:结果显示,伤后即刻予以15 Gy局部照射对伤口愈合有明显的延迟作用,具体表现为:①伤口愈合早期炎症反应明显受到抑制,特别是单核细胞和中性粒细胞渗出减少,坏死组织增多,出血广泛;②肉芽组织生长成熟缓慢,成纤维细胞受到严重损害,出现畸形的"放射性成纤维细胞",胶原蛋白合成和分泌受到抑制;③上皮覆盖过程滞后,伤口愈合过程延迟.
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两例钴源事故受照者和体外照射正常人外周血的红细胞GPA变异频率分析
目的:检测上海"6.25"事故两例中度骨髓放射病病人8年后血型糖蛋白A(GPA)变异频率和估算物理剂量的相关性;同时测定正常人外周血在体外用γ线照射后红细胞GPA的变化.方法:取正常人和事故患者外周血,分离红细胞并固定,在和荧光素标记的单抗结合后用流式细胞仪进行GPA分析,计算GPA变异频率;以两组正常人血样分批体外照射1,2,5,10 Gy,在照射后放置1,4,6 d后进行检测.结果:与正常人相比,两事故病例的GPA变异频率较高,其中变异频率较高者其估算受照剂量较高;体外照射外周血红细胞达10 Gy也未见GPA变化.结论:放射病病例变异红细胞频率与估算剂量间成正相关;外周血直接受照中度剂量不能导致GPA变化,提示GPA突变反映造血干细胞损伤,GPA分析法适合放射病远后效应跟踪研究.
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电镜X射线微区工作中生物薄样品定量分析方法的研究
目的:对生物薄样品定量分析技术方法进行研究.方法:应用Hall理论在定性分析、扣除背底、重叠峰剥离、外源辐射、谱峰失真等方面进行研究.结果:实现了可靠的定性分析和较准确的定量分析结果.结论:在电镜X射线微区分析工作中,该技术方法可以用于生物医学的研究工作.
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重组人肝细胞生成素的理化性质研究
目的:研究重组人肝细胞生成素(hepatopoietin,HPO)的理化性质.方法:在大肠杆菌中表达的人HPO,经凝胶过滤和离子交换柱层析进行纯化;通过还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、非还原型SDS-PAGE及基质辅助激光解析飞行时间质谱(MAIDI-TOF-MS)等方法分别测定了人HPO的相对分子质量;采用等电聚焦电泳测定了人HPO的等电点;采用内源荧光光谱和圆二色光谱法研究了人HPO的稳定性.结果与结论:复性后的重组人HPO主要以双体形式存在,其相对分子质量为30 000,等电点在5.2~6.0之间.在70℃以下、pH 2.6以上,人HPO分子内部构象基本不变.
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用IRES及dhfr构建哺乳动物细胞双表达载体
目的:构建同时表达抗体的重链和轻链的哺乳动物细胞双表达载体.方法:将微小RNA病毒内部核糖体进入位点(IRES),亚克隆到质粒载体pCdhfr1多克隆位点,构建了哺乳动物细胞双表达载体pCdhfr5.结果:pCdhfr5具有两处多克隆位点, 由IRES相连.能同时表达两个外源基因.把绿色荧光蛋白基因和新霉素磷酸转移酶基因分别亚克隆到pCdhfr5的上下游多克隆位点MCS1和MCS2构建了表达质粒pFN, 经脂质体法转染CHO细胞,筛选到同时表达新霉素磷酸转移酶和绿色荧光蛋白的表达株.结论:双表达载体的构建成功为进一步研究表达抗体全分子的CHO细胞株奠定了基础.
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白介素-15突变体在大肠杆菌中的克隆表达及鉴定
目的:构建两株IL-15末端缺失突变体以研究其N、C端对其功能的影响.方法:以pBV220为载体,在大肠杆菌中进行表达.表达产物以包涵体形式存在,经过SDS-PAGE纯化,复性,以CTLL-2增殖实验检测野生型及突变体的生物活性.结果:N端缺失突变体失去了增殖活性,而C端缺失突变体保持了对CTLL-2的生长刺激活性.
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干细胞因子对红白血病细胞系TF-1凋亡的抑制作用
目的:探讨干细胞因子(stem cell factor, SCF)阻止红白血病细胞系TF-1进入凋亡程序的作用.方法:进行3H-TdR掺入实验、细胞存活实验、细胞基因组DNA电泳分析和流式细胞术分析.结果:发现TF-1细胞对SCF的反应存在量-半高效关系, 在SCF存在时细胞存活率明显提高,TF-1细胞系在SCF饥饿24 h时出现DNA 梯型条带;流式细胞术检测显示,在SCF饥饿36 h后,在G1峰前出现凋亡特有的AP峰.结论:SCF有阻滞或抑制红白血病细胞系TF-1凋亡的作用.
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红景天挥发油的化学成分研究
目的:对云南红景天挥发油的化学成分进行了研究.方法:采用水蒸气蒸馏法提取红景天挥发油,以气相色谱-质谱-计算机(GC-MS-DS)联用技术,对挥发油的化学成分进行了分析鉴定.结果:分离出约90个峰,鉴定了其中的44个化合物,占挥发油色谱峰总面积的87.93 %.结论:云南红景天主要成分为正辛醇(28.25%)、袰牛儿醇(21.92%)、里哪醇(8.34%)、桃金娘醇(4.66%)、正葵醇(4.09%)及橙花醇乙酸酯(3.52%)等.
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用pProEXHT载体进行人FLT3配体基因的表达与产物的亲和层析纯化
目的:探讨寡聚组氨酸多肽与目标蛋白融合基因的表达及其产物的金属离子螯合亲和层析纯化方法.方法:将人FLT3配体(FL)胞外段cDNA连入pProEXHT载体,转入大肠杆菌实现表达.分离包涵体并进行复性处理后,通过Ni2+离子螯合亲和层析纯化融合蛋白表达产物.结果和结论:6×组氨酸-FL融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的15%,用Ni2+离子螯合亲和层析纯化表达产物,一次过柱的纯度可达90%以上,操作程序简便省时,是日后FL基因工程产品大规模制备的可行途径.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |