军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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裂变中子诱导小鼠胸腺细胞凋亡的时间效应及其分子机制初探
目的:以60Co γ射线为参比射线,研究裂变中子诱导小鼠胸腺细胞凋亡的时间效应,并初步探讨其分子机制.方法:用形态学观察、DNA电泳、流式细胞仪(FCM)分析及二苯胺(DPA)法检测细胞凋亡;用斑点杂交方法检测p53与bcl-2的基因表达.结果:小鼠经裂变中子2.5 Gy照射后2～24 h,在各时间点上均检测到胸腺细胞DNA梯状条带,利用光镜与电镜观察到具有典型凋亡特征的胸腺细胞;以DPA法、FCM分析与形态观察计数测定的结果,绘制时间效应曲线,发现胸腺细胞凋亡比例随着照射时间的延长而增加,在6 h前上升较快,8～10 h达到峰值,12 h后开始下降,24 h较4～12 h明显降低(P<0.05),但略高于正常水平.γ射线5.0 Gy照射后,胸腺细胞凋亡比例随时间的变化规律与之相似,但在6 h之前增加较缓;此外,在照后24 h检测不到DNA梯状条带.裂变中子2.5 Gy照射后,小鼠胸腺细胞p53基因表达水平在2、4、12、24 h均比未照射组有显著增加(P<0.05 或 P<0.01);bcl-2基因表达水平均比未照射组明显降低(P<0.01).结论:裂变中子2.5 Gy照射小鼠可诱导其胸腺细胞凋亡,且与γ射线5.0 Gy照射有类似的时相性,但裂变中子诱导的胸腺细胞凋亡比γ射线增加快、持续时间长,表明裂变中子对小鼠免疫系统损伤较重,损伤修复较慢.斑点杂交结果初步表明,裂变中子诱导的小鼠胸腺细胞凋亡亦受p53与bcl-2基因的调控.
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重组人IL-11对照射小鼠造血系统的影响
目的:观察重组人白细胞介素-11(recombinant human IL-11,rhIL-11)对照射小鼠造血恢复的影响.方法:给5.5 Gy 60 Co γ射线照射小鼠连续10 d皮下注射rhIL-11 200,400 μg/(kg.d)或溶剂,观察体重、外周血象和骨髓造血祖细胞的变化.结果:各给药组小鼠体重明显增加(P<0.01).照后第11天rhIL-11 200 μg/(kg.d)组血小板计数检查值明显高于照射对照组(P<0.05),各给药组第20天检查值已高于照前值(105%～112%),而照射对照组为照前值的81%.骨髓有核细胞培养结果表明,各给药组的各系造血祖细胞集落数均明显高于照射对照组.结论:rhIL-11可明显促进γ射线照射小鼠骨髓有核细胞形成CFU-MK和CFU-Mix,升高外周血小板数.
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Lewis Y拟糖脂脂质体探针的制备及免疫活性检测
目的:自行合成Lewis Y拟糖脂并寻找一种合适的标记拟糖脂的方法.方法:应用Lewis Y四糖合成了Lewis Y拟糖脂,以此制备了含3H-胆固醇标记和Lewis Y 拟糖脂的脂质体,利用Lewis Y糖特异性的抗体鉴定了糖脂的免疫学活性,并检测了Lewis Y 拟糖脂-脂质体与该抗体的结合能力.结果:在适宜条件下,Lewis Y 四糖拟糖脂的合成率为40%,合成的特异性糖脂高效薄层层析为单一条带;制备的Lewis Y 拟糖脂-脂质体与Lewis寡糖抗体具有特异结合能力.结论:以3H-胆固醇标记的Lewis Y拟糖脂-脂质体是一种效果良好的间接标记的拟糖脂探针.
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人血小板生成素在大肠杆菌中的高效表达
目的:人血小板生成素(TPO)在大肠杆菌中的高效表达.方法:利用PCR技术,扩增出了(1～174个氨基酸的)人血小板生成素cDNA,并将其克隆到pGEX-1λT 载体中,构建了融合蛋白表达质粒.重组子用限制性内切酶酶切鉴定,表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE).结果:限制性内切酶酶切鉴定表明重组子含有正确的(1～174氨基酸)TPO cDNA片段;表达产物经SDS-PAGE相对分子质量约为43 000,与预期的相符合,表达占可溶性菌体总蛋白的44.56%.结论:表达产物具有明显的刺激Mo7e细胞增殖与CFU-Meg生成的功能.
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t-PA突变体乳腺表达载体的构建及其在乳腺中的瞬时表达
目的:探索建立乳腺瞬时性表达系统,用于快速检测所构建的乳腺表达载体的有效性,为进行转基因动物实验奠定基础.方法:DNA常规操作;孕小鼠乳腺注射;纤维蛋白琼脂糖平板法检测Mut-PA.结果:构建了含有Mut-PA基因的乳腺表达载体pB3mt-PA,将此载体直接注射到孕小鼠乳腺中进行暂时性表达,产仔后第4天采乳汁,用纤维蛋白琼脂糖平板法检测t-PA的活性,表达活性可达20～40 U/ml,其活性能被天然的t-PA多克隆抗体所中和,表达持续期8 d.结论:所克隆的牛BLG基因-705 bp的5′端调控序列包含了必需的调控元件,并具有调控外源基因的表达的功能,克隆的3′端序列是适合的.构建的表达载体可用于制备转基因动物.
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新型粘膜免疫佐剂候选株LTAˉB+的构建
目的:产肠毒素大肠杆菌产生的不耐热肠毒素(LT)不仅是很强的口服免疫原,而且其粘膜免疫佐剂作用显著.LT的毒性限制了它的直接使用,希望通过体外定点诱变技术,获得具有粘膜免疫佐剂作用的LT减毒株.方法:以人源LT基因为研究对象,首先构建了重组质粒pUC19-LT,然后用单引物PCR法和重叠延伸PCR法分别构建了LT Q7和K63基因突变体.结果:CHO细胞体外试验和家兔肠结扎体内试验毒性测定的结果表明,LT突变体K63的毒性明显降低.结论:K63有希望成为候选的高效粘膜免疫佐剂.
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74例乳癌高频声像图及彩色多普勒超声诊断分析
目的:揭示超声在乳癌诊断中的价值,提高诊断水平.方法:分析1997年1月至2000年4月间74例经手术病理或穿刺活检证实为乳癌患者的高频声像图和彩色多普勒特征.结果与结论:常见恶性乳腺肿块的高频声像图特征:形态不规则,边界不清,回声不均,多为低回声,部分伴有钙化灶,后方衰减,中、晚期病例可见周边小病灶和同侧腋窝甚至锁骨上淋巴结转移.在应用彩色多普勒观察时,可见肿瘤内的血管明显增多,且肿瘤越大血流信号越丰富.对个别超声印象不典型的病例或为便于制定手术方案,缩短患者手术时间,可实施超声引导下穿刺活检.
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1999年福建省暴发不明热病毒病原的分离与鉴定
目的:对1999年8月福建省福州市暴发的不明热的病毒病原进行分离与鉴定.方法:首先采用传代蚊细胞的微量培养方法进行病毒分离,并通过脑内接种途径观察对乳小鼠的致病性.然后经间接免疫荧光法和RT-PCR技术对毒株进行型别鉴定. 结果:患者恢复期血清标本中存在登革2型病毒特异抗体.从急性期血清标本中分离出11株病毒,在传代蚊细胞中可产生稳定的细胞病变并对乳小鼠致病.其基因组为登革2型病毒特异的RNA分子.结论:福建省福州市流行的不明热疾病是由登革2型病毒感染所致.
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幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆及高效分泌表达
目的:从幽门螺杆菌(Hp)分离热休克蛋白A基因,并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达.方法:提取Hp染色体DNA, 用PCR方法扩增hspA基因.经克隆、测序后,构建融合分泌表达载体pMAL-HspA,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达.结果:分离得到了高度保守的354 bp的hspA基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达.在37℃诱导表达3 h后,其融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的66.6%.该表达带可被抗Hp的特异抗体所识别.结论:幽门螺杆菌hspA基因的克隆与表达为Hp疫苗的研制打下了基础.
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重组人干细胞因子理化性质和生物活性分析
干细胞因子(stem cell factor,SCF)是一种对造血细胞有重要作用的因子,在自体外周血造血前体细胞移植、肿瘤放化疗的辅助治疗、贫血和其他血液病的治疗方面有良好的应用前景.目的:分析本所制备的rhSCF的理化性质和生物活性.方法:用反相高效液相色谱、质谱、凝胶高效液相色谱等方法分别测定了制品的纯度、分子量、氨基酸组成、紫外光谱等,并用TF-1细胞测定了制品的生物活性.结论:制品分子量为18 558,与天然hSCF的差异小于0.2%,产物以非共价二聚体形式存在.氨基酸组成与天然hSCF相同,紫外光谱为典型的蛋白光谱,在277 nm有特征吸收,比活为0.95×106 U/mg,与国外参考品相似.上述结果初步说明制备的rhSCF理化性质与天然hSCF一致,生物活性良好,有望进一步开发用于临床.
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重组人IL-2激活外周血干细胞移植物的抗白血病细胞毒作用
目的:观察重组人IL-2体外激活G-CSF动员的健康供者外周血干细胞(peripheral blood stem cell,PBSC)移植物的抗白血病细胞毒作用,以及rhIL-2处理对PBSC移植物造血功能的影响.方法:细胞培养条件下,PBSC移植物与不同浓度rhIL-2(1 000,500和250 U/ml)共培养24及72 h,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定激活的PBSC移植物细胞毒作用,并应用流式细胞术分析细胞表型变化;采用集落形成试验测定PBSC移植物形成CFU-GM、BFU-E的能力.结果:经rhIL-2体外处理的PBSC移植物,其细胞毒作用显著增强,不同rhIL-2浓度之间无显著差异,培养24及72 h则有显著差异.rhIL-2体外处理对PBSC移植物形成CFU-GM、BFU-E能力无抑制作用,且有一定的促进.结论:提示在临床异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)前,体外以rhIL-2处理移植物,可显著增强其抗白血病细胞毒作用;有可能在输入体内后诱导和(或)增强移植物抗白血病和移植物抗肿瘤效应.
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西藏环状病毒细胞生物学特性研究
目的:了解从西藏血蜱标本中分离的环状病毒(Ti3010)的细胞生物学特性和敏感细胞范围,与国内其他地区环状病毒进行比较,为全面认识西藏地区环状病毒的特点和进一步确切分类提供依据.方法:将病毒平行接种BHK13、Vero、C6/36、HeLa 4种细胞,逐日观察病毒的致细胞病变效应(CPE),特异荧光发生部位和细胞数量,超薄切片电镜观察病毒的形态发生以及进行TCID50滴定.结果与结论:Ti3010环状病毒接种BHK13细胞后第3天产生CPE,32%～35%的细胞有病毒增殖,胞浆内检出特异荧光;电镜观察到胞浆内的病毒颗粒呈聚集状态,多呈晶格状排列,并具有病毒包涵体.TCID50滴定在BHK13细胞为7.1,Vero为5.8,C6/36和HeLa为0.结果显示Ti3010病毒与从鸟、鼠等标本中分离的Ti2066和Ti2076病毒一样,对BHK细胞敏感,产生CPE;Vero细胞次之,对C6/36和HeLa细胞不敏感,在BHK13细胞中上述3株病毒具有相同的复制特点.结合其RNA基因组特点,该病毒同国内其他地区分离的环状病毒有较大差异,该差异显示了西藏地区特殊生态环境下环状病毒的独有性状.
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我国三株登革2型病毒基因组全序列的测定及系统发生树分析
目的:测定我国3株登革2型病毒(dengue 2 virus,DEN2)流行株的全序列并确定其基因型.方法:运用RT-PCR和5′,3′ RACE法测定我国3株登革病毒的全序列,采用邻结法绘制系统发生树.结果:DEN2-04、43、44株的核苷酸及氨基酸差异分布于整个序列之中,DEN2-04与DEN2-43、44共有21个氨基酸位点的差异引起极性或电荷变化.DEN2-04株与JAM株、越南分离株和泰国分离株同为Ⅲ基因型,DEN2-43、44株与台湾、菲律宾和新几内亚株分在Ⅱ基因型.结论:我国不同地区存在同一基因型的DEN2传播,同一地区存在不同基因型的DEN2传播.
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梭曼及其代谢产物的分析方法及应用
综述了梭曼及其代谢产物分析方法以及它们在梭曼的毒理学、毒代动力学及毒检中的应用.其中,手性毛细管柱气相色谱法或气质联用仪是实现梭曼四个异构体分离测定的较好手段;对梭曼酸性代谢产物的分析测定可以作为监测梭曼中毒的有力工具.
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与神经生长相关的神经系统特异性蛋白质
与神经突起生长相关的神经系统特异性蛋白质是指神经系统特有的在发育或再生中能够促进神经突起生长,或能够决定和诱导神经突起沿正确方向生长的蛋白质因子.该文对已知的该类蛋白质进行了综述.
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基因突变的分子生物学方法检测及其在新药临床前遗传毒性评价中的应用前景
对基因突变检测的常用分子生物学方法,包括单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism, SSCP)检测、异源双链核酸分子分析(heteroduplex analysis, HDA)、蛋白截短试验(protein truncation test, PTT)和错配化学裂解法(chemical cleavage of mismatch, CCM)等进行了综述;详尽介绍了一种新的基因突变检测方法--转换限制性酶切位点突变分析法(inverse restriction site mutation, iRSM),并预测了上述突变检测方法在新药临床前遗传毒性检测中的应用前景.
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生物组织细胞连续切片三维重建的研究进展
综述了生物组织细胞三维重建技术的方法,重点讨论了连续超薄切片的三维重建技术及其在生物医学研究中的应用前景.
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疟原虫抗药性的遗传学研究进展
疟原虫产生抗药性是疟疾防治中遇到的主要难题之一.抗叶酸类抗疟药的抗药性机制已基本搞清,与其作用靶酶二氢叶酸还原酶或二氢蝶酸合成酶基因点突变相关.喹啉类药物抗性影响因子尚不完全清楚.恶性疟原虫5号染色体上的多药耐药基因1及7号染色体上的cg2基因可能是抗性相关基因,但二者都不能完全解释抗性,尚待深入研究.
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随机RNA文库的构建
综述了有关研究报道中随机RNA文库的特点,重点讨论了随机RNA文库构建中的理论问题和应遵循的原则.
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开颅术后非手术部位的脑内多发性血肿--附1例报告
颅内血肿是神经外科开颅术后常见的并发症,一般位于手术操作部位及其邻近区,以脑膜瘤术后多见,而术后非手术部位的血肿特别是脑内多发性血肿则很少见[1],文献偶有报道,但死亡率、致残率很高.我科曾遇一例,现报告如下.
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免疫荧光法快速检验伯氏柯克斯体的研究
伯氏柯克斯体(Coxiella burnetii)习惯上称为Q热立克次体,它所引起的Q热是一种人兽共患病.Q热临床表现多以发热、头痛、肌肉酸痛为主, 与其他热性疾病难以鉴别,极易造成误诊.因此,快速检验并鉴定Q热立克次体,是防治Q热的重要环节.通常,实验室对送检的可疑标本做吉姆萨染色,但该法是非特异性的染色方法,难以即时作出判断.为此,本实验室建立了免疫荧光直接检测病原体的方法,并尝试用微波促抗原抗体反应进行快速染色的方法,可以在15 min之内得出初步诊断报告.本方法为研制鉴定Q热立克次体的标准化免疫诊断试剂盒奠定了基础.
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人骨形态发生蛋白-7在昆虫细胞中的表达
骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)又称成骨蛋白-1(osteogenic protein-1,OP-1)是骨形态发生蛋白家族的成员,具有广泛的生理功能,尤其在诱导骨组织和肾组织形成方面起重要作用.至今已有大量报道证实BMP-7有助于骨及软骨组织缺损的修复,显示了良好的临床应用前景.此外,BMP-7能减轻大鼠急性缺血性肾衰竭的严重程度,将来有可能用于肾衰的治疗.人BMP-7全长cDNA编码431个氨基酸,分为信号肽段、前体肽段和成熟肽段.成熟肽具7个Cys,形成三个链内二硫键,两成熟肽单体通过一个链间二硫键形成二聚体.成熟肽单体有一个位点被糖基化.信号肽段、前体肽段参与BMP-7表达的胞内翻译后加工过程,这些加工过程只在真核细胞发生.在原核系统表达BMP-7很难得到活性产物,国内外文献尚未见到成功报道.文献已报道了人BMP-7蛋白在CHO细胞中的表达.我们在获得人BMP-7全长cDNA的基础上,采用BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达重组人BMP-7蛋白.
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细胞间粘附分子重组蛋白的表达与单克隆抗体的制备
细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)是属于免疫球蛋白超家族的一类粘附分子,其配体是β2整合素的两个成员:LFA-1(CD11a/CD18)和Mac-1(CD11b/CD18).ICAM-1与其配体的结合具有重要的免疫学功能:首先它介导了T细胞和NK细胞对靶细胞的杀伤作用;其次它还是T细胞激活的共刺激信号之一,在白细胞与血管内皮细胞的粘附中起重要作用;另外ICAM-1是鼻病毒的受体,还参与肿瘤细胞的转移.ICAM-1已成为抗炎症治疗的重要靶标.本文报道了重组ICAM-1的表达及单克隆抗体的制备及鉴定.
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HCV特异性IgM抗体与HCV RNA及其与肝病活动的相关性研究
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus)克隆的成功,使HCV感染的实验室诊断得以迅速发展,临床多检测抗HCV-IgG,并将其作为献血员筛选的一个指标,但由于抗HCV-IgG为非中和性抗体,它的存在仅反映有过HCV的感染,与病毒复制及有无病毒血症无关,也不能反映肝病是否处于活动期.而IgM抗体在慢性病毒感染中常持续阳性,并提示病毒存在且继续复制[1].为探讨HCV-IgM抗体存在的意义,我们研究了抗HCV-IgM抗体与HCV存在及肝病活动的关系.
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可见光光谱法评价胶体金粒径及分布
目的:利用可见光光谱法,建立便于实验室使用的评价胶体金粒径及分布的方法.方法:制备不同颗粒直径的胶体金.利用紫外分光光度计对胶体金进行扫描,得到大吸收峰波长及峰宽;通过透射电镜观察其颗粒直径及分布,再将二者结果进行比较,求出回归方程.结果:在所研究范围内, 胶体金大吸收峰波长与粒径(10～70 nm)呈线性相关;峰宽越小粒子分布越均匀.结论:使用可见光光谱法评价胶体金的粒径及分布, 操作简便快捷,便于实验室使用.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
