欢迎来到360期刊网!
学术期刊
  • 学术期刊
  • 文献
  • 百科
电话
您当前的位置:

首页 > 文献资料

  • 长链非编码RNA H19对人乳腺癌细胞BT-474赫赛汀抵抗影响机制探讨

    作者:袁超;郭书坤;杨其峰

    目的 约20%人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)阳性乳腺癌患者可针对性的采用其靶向药物赫赛汀(trastuzumab,TZB)治疗,但耐药性的产生严重影响了TZB的疗效,本研究探讨长链非编码RNA H19(H19)对人乳腺癌细胞BT-474 TZB抵抗的影响及可能的相关机制.方法收集德州市第二人民医院2016-04-01-2017-03-31收治的乳腺癌患者肿瘤组织及相应癌旁组织(距癌组织>5 cm)各37例,荧光定量PCR(qPCR)技术检测组织H19及mRNA表达水平,并分析肿瘤组织H19及HER2表达的相关性.间歇浓度梯度诱导法构建BT-474 TZB抵抗细胞系(BT-474 TR),并利用慢病毒转染介导的H19小干扰RNA(siRNA)载体在BT-474 TR细胞中构建稳定干扰H19表达的细胞系及相应的空白对照细胞系(BT-474 TR-siH19及BT-474 TR-对照组),CCK-8法检测各组细胞TZB半抑制浓度(IC50)值,qPCR检测细胞H19及HER2 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测细胞HER2及上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关分子蛋白表达水平.结果乳腺癌组织中H19表达量为0.192±0.014,显著高于癌旁组织0.082±0.009,t=40.202,P<0.001;乳腺癌组织中HER2表达量为0.156±0.013,显著高于癌旁组织0.058±0.009,P<0.001,且H19与HER2的表达存呈正相关,r=0.483,P<0.05.BT-474 TR细胞、BT-474亲本细胞、BT-474 TR-siH19细胞和TZB BT-474 TR-对照细胞4组的TZB IC50测定值分别为(142.3±23.5)、(152.9±25.2)、(27.7±3.6)和(73.2±12.9)μg/mL,差异有统计学意义,F=18.15,P=0.0006;BT-474 TR与BT-474、BT-474 TR-siH19与BT-474 TR-对照组间差异有统计学意义,均P<0.05.BT-474 TR细胞H19表达水平为0.239±0.031,显著高于BT-474亲本细胞表达水平0.106±0.009,t=7.136,P<0.001;BT-474 TR细胞HER2 mRNA表达水平为0.127±0.031,显著低于BT-474亲本细胞表达水平0.309±0.035,t=6.742,P<0.001.BT-474 TR-siH19细胞H19表达水平为0.073±0.007,显著低于BT-474 TR-对照组细胞0.226±0.025,t=10.207,P<0.001;BT-474 TR-siH19细胞HER2 mRNA表达水平为0.104±0.017,也显著低于BT-474 TR-对照组细胞0.162±0.028,t=3.069,P<0.05.BT-474 TR细胞HER2蛋白表达水平为0.263±0.037,显著低于BT-474细胞0.681±0.059,t=10.395,P<0.001;BT-474 TR细胞E-cadherin蛋白表达水平为0.162±0.025,显著低于BT-474细胞0.633±0.074,t=10.447,P<0.001;BT-474 TR细胞Snail蛋白表达水平为0.207±0.083,显著高于BT-474细胞0.064±0.011,t=2.958,P=0.021;BT-474 TR细胞Vimentin蛋白表达水平为0.168±0.020,显著高于BT-474细胞0.114±0.012,t=4.011,P=0.008.BT-474 TR-siH19细胞HER2蛋白表达水平为0.082±0.007,显著低于BT-474 TR-对照组细胞0.404±0.028,t=19.324,P<0.001;BT-474 TR-siH19细胞Snail蛋白表达水平为0.078±0.003,显著低于BT-474 TR-对照组细胞0.258±0.021,t=14.697,P<0.001;BT-474 TR-siH19细胞Vimentin蛋白表达水平为0.085±0.010,显著低于BT-474 TR-对照组细胞0.141±0.025,t=3.602,P=0.011;而BT-474 TR-siH19细胞E-cadherin蛋白表达水平为0.525±0.039,显著高于BT-474 TR-对照组细胞0.194±0.034,t=11.081,P<0.001.结论H19在乳腺癌组织中高表达,且与HER2表达呈正相关,体外干扰H19可下调乳腺癌细胞HER2的表达,并可通过抑制EMT进程部分逆转乳腺癌细胞的TZB抵抗.

  • LIM和SH3蛋白1蛋白在肾透明细胞癌组织中的表达及其对肾透明细胞癌786-O细胞侵袭和迁移能力的影响

    作者:金波;高亮;李望;陈家存;温儒民;王军起

    目的 分析LIM和SH3蛋白1(LASP1)在肾癌组织中的表达及其与肾癌患者临床病理特征的关系,探讨沉默LASP1表达对肾透明细胞癌786-O细胞侵袭和迁移能力的影响.方法 应用免疫组织化学染色检测41例肾透明细胞癌患者肿瘤组织及其配对的癌旁组织中LASP1蛋白的表达水平,并分析LASP1蛋白表达与患者临床病理特征的关系.采用Western blot法检测10例伴或不伴淋巴结转移肾透明细胞癌组织中LASP1蛋白的表达差异.以小干扰RNA(siRNA)技术转染786-O细胞,采用Western blot法检测LASP1 siRNA对LASP1蛋白的干扰效果以及对上皮间质转化(EMT)通路中相关蛋白的表达影响.采用细胞计数盒8(CCK-8)法和Transwell实验检测下调LASP1蛋白表达对786-O细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.结果 LASP1蛋白在肾透明细胞癌组织中的阳性表达率为90.2%(37/41),明显高于其在癌旁组织中的阳性表达率(29.3%,12/41;P=0.002).LASP1在肾癌组织中的表达与肾癌的淋巴结转移和TNM分期呈正相关(均P<0.05).Western blot法检测结果显示,LASP1蛋白在癌旁正常组织、无淋巴结转移肾癌组织和有淋巴结转移肾癌组织中的相对表达量分别为0.696±0.053、1.459±0.628和2.692±0.186,差异有统计学意义(P=0.001).沉默786-O细胞中LASP1蛋白的表达后,786-O细胞的增殖、侵袭和迁移能力均明显降低.LASP1 siRNA转染786-O细胞48 h后,siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组786-O细胞中上皮表型标志物E-cadherin蛋白的相对表达量分别为0.848±0.020、0.671±0.018和0.691±0.037,siRNA转染组E-cadherin蛋白的表达明显增高(P<0.05);siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组786-O细胞中间质表型标志物N-cadherin蛋白的相对表达量分别为0.449±0.047、0.613±0.018和0.633±0.045,siRNA转染组N-cadherin蛋白的表达明显降低(P<0.05);siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组786-O细胞中间质表型标志物Vimentin蛋白的相对表达量分别为0.477±0.029、0.598±0.069和0.633±0.045,siRNA转染组Vimentin蛋白的表达明显降低(P<0.05).结论 LASP1蛋白在肾透明细胞癌中高表达,其高表达可能与肾癌的发生发展有关,并可能通过EMT调节肾癌细胞的侵袭和迁移能力,促进肿瘤的淋巴结转移.

  • 辐射诱导树突状细胞促进Treg分化及肺上皮间充质转化

    作者:孙泽文;梁鑫;郗停停;贺琦多;杨陟华;王易龙;顾永清;潘秀颉;朱茂祥

    目的 探讨树突状细胞经60 Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例.通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达.结果 免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90%,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg;Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高.结论 树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT.

  • 花青素对晶状体上皮细胞氧化应激损伤和上皮间充质转化的抑制作用

    作者:周婉祎;赵一秀;安娜;白云龙;张妍;杨宝峰

    花青素(anthocyanin)是广泛存在于植物中的一种水溶性黄酮类色素.研究表明花青素对视力具有一定的保护作用,但其对于白内障是否具有治疗作用及机制尚不明确.本研究分别采用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)及转化生长因子-ββ2 (transforming growth factor ββ2,TGF-β2)处理人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs),诱导氧化应激损伤及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),以构建年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)及后囊膜浑浊型白内障(posterior capsule opacification,PCO)细胞模型,并检测花青素对HLECs氧化应激损伤及EMT标志物的影响.结果表明,花青素有较好的抗氧化应激损伤作用,能明显保护细胞活力,增加细胞内SOD、GSSG、GSH-Px及α-晶状体蛋白水平,降低细胞内MDA、ROS及Ca2+水平;同时,花青素显著抑制后囊膜浑浊型白内障发生发展的病理进程,能明显抑制TGF-β2诱导的HLECs增殖、迁移,降低EMT标志物COL1A1、COL1A2、COL3、COL4、Fn、α-SMA的mRNA表达水平.综上,花青素能保护HLECs细胞对抗H2O2诱导的自由基损伤及由TGF-β2诱导的EMT,对ARC及PCO具有一定的预防和治疗作用.

  • 滴滴涕对人大肠癌DLD1细胞上皮间充质转化的影响

    作者:董宁宁;宋莉;李卓玉;肖虹

    目的 探究滴滴涕(DDT)对人结直肠腺癌上皮细胞(DLD1)上皮间充质转化的影响及机制.方法DLD1细胞用DDT 0.01,0.1,1.0,10.0和100.0 nmol·L-1处理48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR法检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA表达.Western蛋白质印迹法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路主要蛋白STAT3和p-STAT3的蛋白水平.用STAT3抑制剂WP1066(5μmol·L-1)处理,通过Western印迹法和实时荧光定量PCR法检测其对DDT诱导的STAT3/Snail1信号通路中p-STAT3、STAT3的蛋白水平和上皮间充质转化关键因子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA水平的影响.结果 与正常对照组相比,DLD1细胞在DDT处理48 h后,细胞形态由卵圆形逐渐变为长梭形,E-钙黏着蛋白mRNA相对表达显著降低(P<0.01),为正常对照组的(42.4±2.8)%.N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA相对表达显著提高(P<0.01),为正常对照组的1.91±0.1倍和(1.5±0.2)倍.STAT3信号通路蛋白STAT3和p-STAT3蛋白表达均升高(P<0.01),为正常对照组的2.1和1.8倍.锌指转录因子Snail1的mRNA相对表达显著升高(P<0.01),是正常对照组的(1.5±0.1)倍.STAT3抑制剂WP10665μmol·L-1处理后,锌指转录因子Snail1 mRNA的表达明显下调(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L-1处理组的(56.3±0.9)%,同时抑制DDT诱导的E-钙黏着蛋白mRNA表达升高(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L-1处理组的2.5±0.1倍,N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA表达降低(P<0.01),分别为DDT 1.0 nmol·L-1处理组的(50.2±2.9)%和(61.6±6.1)%.结论 DDT可能通过STAT3/Snail1信号通路改变上皮间充质转化子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达,进而促进大肠癌细胞上皮间充质转化.

  • miR-125b通过靶向结合ETV6调控Hs578T的侵袭转移

    作者:洪理泉;潘峰;姜慧芬;张腊红;刘玉华;蔡成松;华春珍;罗贤;孙晋华;陈兆军

    目的 研究miR-125b在乳腺癌中的表达,尤其是其对乳腺癌迁移侵袭的作用以及该过程所涉及的分子机制.方法 ①用实时荧光定量PCR检测23对临床组织样本中miR-125b及靶基因ETV6的表达水平;②用实时荧光定量PCR、双荧光报告验证靶基因;③在细胞中瞬时转染miR-125b mimics,并用划痕、transwell迁移、侵袭及Western blot检测体外乳腺癌细胞的迁移侵袭能力及上皮间质转化的变化;④用靶基因敲减实验进一步验证靶基因的准确性.结果 ①与正常组织相比,乳腺癌组织中miR-125b的表达显著降低(P <0.001),ETV6的表达显著增高(P<0.05);②ETV6为miR-125b的靶基因;③与对照相比,上调的miR-125b可显著抑制Hs578T的迁移和侵袭(P<0.001),并抑制EMT的发生;④敲减ETV6对Hs578T的作用与miR-125b过表达一致.结论 miR-125b在乳腺癌中低表达,miR-125b通过靶向结合ETV6 3'UTR抑制该基因的表达,从而抑制Hs578T的迁移、侵袭及上皮间质转化的发生.因此,miR-125b可作为抑癌基因发挥作用.

  • 肿瘤干细胞的放化疗抵抗相关机制

    作者:陈媚;潘玉琼;王瑞华

    肿瘤干细胞是潜伏在肿瘤细胞中的特殊亚群细胞,具有持续自我更新、多向分化潜能等干细胞特征.肿瘤干细胞是许多恶性肿瘤产生放化疗抵抗的重要原因,使肿瘤的临床治疗面临重大挑战.肿瘤干细胞可通过ATP酶结合盒转运蛋白、DNA损伤修复、细胞周期阻滞、细胞内减毒物质、凋亡抑制、上皮间充质转化、乏氧效应等分子机制逃避或衰减放射线、化疗药的杀伤效应,终导致肿瘤的复发、侵袭及远处转移.目前肿瘤被认为是一种干细胞疾病,深入了解肿瘤干细胞放化疗抵抗的相关机制,将为未来肿瘤的治疗开阔新思路.

  • 羟磷灰石在乳腺癌中形成机制的研究进展

    作者:俞柯杰;蔡振刚

    乳腺微钙化灶通常被认为是早期乳腺癌的常见影像学表现之一,若在乳腺浸润性癌中发现微钙化,则是预后不良的征象.从矿化物的组成上来看,目前认为羟磷灰石是这种非触及型乳腺癌微钙化的主要成分,但是其具体的矿化形成机制目前还尚不明确.近年来对羟磷灰石形成机制的相关研究表明,上皮间充质转化以及成骨样细胞与乳腺癌微钙化的形成密切相关.乳腺癌细胞经过上皮间充质转化获得间质特征,进一步分化为成骨样细胞,促进羟磷灰石的形成,从而形成乳腺癌微钙化灶.

  • Axl及Slug在胆管癌中的表达及临床意义

    作者:王子伟;吴娟;冯浩

    目的 研究Axl与锌指转录因子Slug在胆管癌中的表达及与临床参数的关系.方法 收集2010年9月至2015年7月定州市人民医院手术切除的病理证实为胆管癌石蜡标本70例,并收集其中病理证实为非癌组织的癌旁胆管蜡块标本20例,采用免疫组织化学(S-P)法进行检测,分析其临床意义.结果 不同年龄、肿瘤大小、肿瘤分级的Axl与Slug蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),有淋巴结转移、动静脉受侵的Axl与Slug蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移和动静脉受侵组(P<0.05).在胆管癌中Axl与Slug的表达呈正相关(r=0.658,P<0.001).结论 Axl与Slug表达可能与胆管癌的发生、发展有关,在胆管癌细胞增殖、侵袭及转移中起重要作用.

  • 氯化钴诱导上皮间充质转化并增加胶质瘤T98G细胞侵袭能力的研究

    作者:邓瑾;叶家才;黄赖机;廖志伟

    目的 研究氯化钴对胶质瘤T98G细胞上皮间充质转化(EMT)和侵袭能力的影响.方法 用氯化钴处理胶质瘤T98G细胞,未处理组作为对照,Western blot检测各组细胞上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和间充质细胞波形蛋白(Vimentin)的表达,采用Transwell及Boyden方法检测各组迁移细胞数.结果 氯化钴处理胶质瘤T98G细胞后发生了典型的EMT:E-cadherin表达明显降低(P< 0.05或P<0.01),Vimentin表达明显升高(P<0.01);Transwell迁移实验显示迁移能力明显增强:穿过Transwell小室滤膜的细胞数由(29±5)个增加至(53±4)个(P=0.0397);Boyden结果显示:穿过小室细胞数由(26±3)个增加至(36±2)个(P=0.0402).结论 氯化钴能促进胶质瘤T98G细胞发生EMT,增强胶质瘤T98G细胞迁移能力.

  • 上皮间充质转化在上皮性卵巢肿瘤侵袭和转移中的作用

    作者:郭融

    卵巢恶性肿瘤是常见的女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,大多数起源于卵巢表面上皮.其中上皮性卵巢癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)是死亡率高的妇科恶性肿瘤.上皮间充质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)是胚胎发育过程中的基本现象.近年研究发现,EMT不仅参与胚胎形成、组织的再生和修复,而且与上皮细胞性肿瘤的恶性进展也存在重要的联系.EMT的形成机制和进展的相关研究对于上皮性肿瘤的防治有重要意义,因此关于EMT在上皮性肿瘤形成和侵袭过程中的机制研究受到越来越多的关注.综述上皮性卵巢癌中EMT形成机制及其与卵巢上皮性肿瘤微环境和上皮性卵巢肿瘤相关信号通路的关系.

  • 基质金属蛋白酶与乳腺癌上皮间充质转化关系的研究进展

    作者:张伟然;张斌

    基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是基质降解代谢的主要酶类,能够促进上皮细胞与周围组织分离,乳腺癌细胞及其周围的基质细胞均具有较强分泌MMPs的能力.多项研究表明,MMPs与乳腺癌细胞发生上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)关系密切.随着研究的深入,发现多种黏附分子、生长因子及转录因子可与MMPs发生协同作用,以调控MMPs诱导的EMT.鉴于MMPs在乳腺癌EMT过程中的重要作用,MMPs已成为抗肿瘤治疗的新靶点.目前,临床上对MMPs抑制剂的研究较为广泛,但其疗效却未得到充分肯定,特异性低、副作用大成为此类药物临床推广的一大障碍.深入研究MMPs与乳腺癌EMT的关系及相关机制,将有望为乳腺癌防治提供新思路.

  • 小鼠三阴性乳腺癌干样细胞对EMT发生及其生物学行为的影响

    作者:刘加蒙;孙保存;孙慧誌;张丹芳;林贤;李岩磊;古强;董学易;刘芳

    目的:探讨TA2小鼠三阴性乳腺癌中乙醛脱氢酶1+(ALDH1+)和CD133+表型的乳腺癌干样细胞在上皮间充质转化(EMT)发生中的作用,及对其生物学行为的影响。方法:使用流式细胞术分析TA2小鼠三阴性乳腺癌组织中ALDH1及CD133的表达量并分选出具有ALDH1+、ALDH1-、CD133+、CD133-表型的乳腺癌细胞,将其分别接种于TA2小鼠,根据细胞表型不同设置为AL?DH1+、ALDH1-,CD133+、CD133-组,观察肿瘤生长情况,并制成组织切片,行三阴性乳腺癌中乳腺癌干细胞表面标记物ALDH1、CD133与EMT相关蛋白Twist1、E-cadherin和VE-cadherin的免疫组织化学检测,分析其表达差异。结果:乳腺癌干细胞标记物ALDH1及CD133在TA2小鼠三阴性乳腺癌中表达率分别为31.2%和6.5%。ALDH1+、CD133+组肿瘤生成能力明显强于ALDH1-、CD133-组。免疫组织化学结果显示ALDH1、Twist1、VE-cadherin在ALDH1+组的表达明显高于ALDH1-组(均P<0.05),E-cadherin在ALDH1+组的表达低于ALDH1-组(P<0.05)。CD133、Twist1、VE-cadherin在CD133+组的表达明显高于CD133-组(均P<0.05),E-cadherin在CD133+组的表达低于CD133-组(P<0.05)。结论:TA2小鼠三阴性乳腺癌中ALDH1+和CD133+表型的乳腺癌干样细胞可影响EMT相关蛋白的表达,并促进三阴性乳腺癌的形成。

  • Amotl2促进肝细胞肝癌血管生成拟态及EMT形成

    作者:袁华尊;孙保存;赵秀兰;张丹芳;刘铁菊;赵楠;董学易;刘芳

    目的:研究Amotl2对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响及其在诱导肝癌上皮间充质转化(EMT)及血管生成中的作用.方法:将Amotl2过表达质粒和干扰质粒分别转染至肝癌细胞系HepG2和Bel7402中,Western blot检测转染前、后HepG2和Bel7402中Amotl2、EMT相关蛋白(E-cadherin、Vimentin)表达变化情况;划痕、侵袭实验检测Amotl2对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响;三维培养检测Amotl2对HCC细胞形成血管样结构的影响.结果:促进Amotl2表达后HepG2表现出EMT样改变,E-cadherin表达下降、Vimentin表达上升、细胞迁移侵袭和三维成管的能力增强.抑制Amotl2表达后Bel7402由间质样表型转变为上皮样表型,E-cadherin表达上升、Vimentin表达下降、细胞迁移侵袭和三维成管的能力减弱.结论:Amotl2可能通过诱导EMT促进原发性肝癌的迁移侵袭能力和血管生成拟态的形成.

  • 肉叶芸香碱对黑色素瘤A375细胞上皮间充质转化的影响

    作者:赵庆芳;霍焱;姜战胜;刘东颖

    目的 探讨肉叶芸香碱对黑色素瘤A375细胞的抑制作用及影响机制.方法 (1)体外培养的黑色素瘤A375细胞,分别给予0(对照)、0.5、1、2、5、10、20、50和100 mg/L浓度的肉叶芸香碱处理48 h,CCK-8法检测各浓度组细胞存活率,确定实验浓度.(2)细胞经0、1、2 mg/L肉叶芸香碱处理后,分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测上皮间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin),Snail和p53的表达水平.(3)细胞设对照组(仅转染空载体)、空载体组(经2 mg/L肉叶芸香碱处理24h后,转染空载体)、Snail转染组(经2 mg/L肉叶芸香碱处理24 h后,转染Snail cDNA),转染后检测各组细胞迁移和侵袭能力.结果 (1)肉叶芸香碱浓度≥2 mg/L时,随着处理浓度的升高,A375细胞存活率较对照组明显降低(P<0.05),后续实验选取0、1、2 mg/L肉叶芸香碱进行处理.(2)随着肉叶芸香碱处理浓度的升高,各组划痕区细胞数和穿膜细胞数均明显下降,细胞的迁移和侵袭能力逐渐减弱;同时EMT相关蛋白E-cadherin、p53表达升高,N-cadherin、Snail表达降低.(3)细胞转染实验结果显示,转染Snail后,细胞的迁移和侵袭能力较空载体组有所提高.结论 肉叶芸香碱可抑制A375细胞的增殖,降低其转移和侵袭能力.这可能是通过激活p53后降低Snail表达,进而升高E-cadherin,下调N-cadherin来抑制EMT过程而实现的.

  • 盐霉素对乳腺癌MCF-7球囊细胞增殖与上皮间质转化作用的研究

    作者:马赫遥;付婴子;何苗;颜媛媛;江茜;孙也之;魏敏杰

    目的:探讨盐霉素(Salinomycin)对MCF-7球囊(MCF-7 MS)细胞的增殖与上皮间充质转化(EMT)的作用。方法通过乳腺癌MCF-7细胞无血清悬浮培养富集乳腺癌干细胞(BCSCs)得到MCF-7 MS;CCK-8 assay检测0、10、30、100、300、1000、3000及10000 nmol/L浓度的盐霉素处理24 h对MCF-7 MS细胞存活率的影响,并计算半抑制浓度(IC50)值。Western blot检测30、60 nmol/L终浓度的盐霉素对MCF-7 MS细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质化标志物Snail表达的影响,以等体积DMSO处理的MCF-7 MS细胞作为对照组。BALB/c裸鼠皮下接种MCF-7 MS细胞制备荷瘤鼠模型并分为对照组(等体积生理盐水处理)和盐霉素给药组(5 mg/kg盐霉素处理),免疫组织化学染色检测瘤组织E-cadherin和Snail的表达。结果随着浓度的增加,MCF-7 MS细胞存活率逐渐下降(P<0.05),24 h的IC50值为989 nmol/L。与对照组比较,30和60 nmol/L的盐霉素均可增加E-cadherin的表达,而降低Snail的表达,且后者作用更明显(P<0.05)。与对照组相比,盐霉素给药组荷瘤鼠瘤组织内E-cadherin的表达升高,而Snail的表达下调(P<0.01)。结论盐霉素能够抑制具有BCSCs特性的MCF-7 MS细胞的增殖,且可抑制MCF-7 MS细胞的EMT,是靶向肿瘤干细胞的潜在药物。

  • 缺氧及缺氧相关miR-210调节胃癌细胞MGC803的上皮间充质转化

    作者:王赜煜;张静;李倩;白露;张志广;江勇;李熳

    目的 探讨缺氧微环境及缺氧相关微小RNA-210(miR-210)对胃癌细胞MGC803的上皮间充质转化(EMT)过程的影响.方法 不同浓度CoCl2溶液(100、200、300 μmol/L)诱导胃癌细胞缺氧后,qRT-PCR检测缺氧组中EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和Twist1的mRNA相对表达量,并与常氧组(0μmol/L)进行比较;细胞增殖实验观察不同缺氧程度下胃癌细胞的增殖情况;通过向胃癌细胞转染miR-210 mimics提高miR-210的表达后,qRT-PCR检测转染组与对照组(未转染mimics) E-cadherin及Twist1的mRNA相对表达量.结果 随着CoCl2溶液浓度的增高,miR-210相对表达量、胃癌细胞的增殖率均呈先增后减的趋势(P<0.05);缺氧组E-cadherin mRNA相对表达量均低于常氧组,Twist1 mRNA相对表达量均高于常氧组;200、300 μmol/L CoCl2组E-cadherin mRNA相对表达量均高于100 μmol/L CoCl2组(P<0.05),3组Twist1 mRNA相对表达量差异无统计学意义.转染组Twist1 mRNA相对表达量高于对照组,E-cadherin mRNA相对表达量低于对照组(P<0.05).结论 缺氧可促进胃癌细胞的增殖及EMT过程,miR-210的上调可促进EMT过程,miR-210可能是缺氧诱导EMT过程的中间环节之一.

  • 肾小管上皮间充质转化细胞模型中WT1和Pax2重新表达的研究

    作者:黄彬;姜傥;皮蕾;滕军旗

    目的:探讨肾小管上皮间充质转化(EMT)细胞模型中胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达及其规律,并研究上调表达外源性WT1对肾小管上皮细胞株(NRK52E)的影响.方法:采用10 ng/ml IL-1α刺激体外培养的NRK52E细胞,建立EMT细胞模型.采用脂质体转染技术,将pRc/CMV-D-WT1质粒瞬时转染NEK52E细胞.分别提取EMT细胞模型和质粒转染组不同时间点细胞的RNA和蛋白质,采用RT-PCR和Western blot检测NEK52E细胞WT1、Pax2、上皮细胞标志E-cadherin和间充质标志α-SMA的表达,研究基因表达的时效性变化规律,并观察细胞的形态.结果:成功建立EMT细胞模型,该模型中E-cadherin的表达显著减少,α-SMA的表达显著增多,细胞发生明显的成纤维化样改变.在EMT细胞模型中,出生后关闭的WT1和Pax2获得重新表达,且Pax2的表达早于α-SMA和WT1.在NEK52E细胞中上调表达WT1,细胞表达α-SMA,不表达Pax2,同时E-cadherin的表达显著减少,细胞出现成纤维化样改变.结论:Pax2和WT1基因是EMT中的关键基因,在EMT发生时呈序列启动,Pax2在EMT中处于WT1上游.胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达可能是EMT的重要机制.

  • 胆道闭锁肝脏组织中SHH信号与上皮间充质转化关系的研究

    作者:张志波;胡婷嫣;何峰;高红

    目的 观察胆道闭锁(BA)肝纤维化发生过程中SHH信号与上皮间充质转化(EMT)过程的关系,探讨胆道闭锁肝纤维化过程中SHH信号在EMT过程中的作用.方法 取经手术证实为BA的患儿(年龄1~3个月)肝脏组织10例,无消化道疾病新生儿(年龄1~3个月)尸检肝脏组织5例做正常对照,应用real time RT-PCR及Western blot等方法检测SHH及反映EMT的指标E-cadhetin、vimentin的表达水平.结果 与正常对照组相比,BA患者肝脏组织中SHH表达水平明显升高,E-cadherin表达无明显变化,而vimentin表达水平明显增高.结论 EMT在胆道闭锁肝纤维化中起重要作用,而SHH表达上调可能促进了这一过程,从而导致肝脏组织持续纤维化.

  • 子宫腺肌病发病机制研究进展

    作者:张瑶;张茹;崔乐乐;宋杰

    子宫腺肌病是一种常见的雌激素依赖性妇科疾病,可引起盆腔疼痛、子宫异常出血和不孕.但其发病机制和病因尚不明确,本研究就子宫腺肌病的起因及疾病的演变和进展的机制进行综述.1雌激素过多类固醇激素在子宫腺肌病的病因中起着核心作用.子宫腺肌病患者的异位或者在位子宫内膜的分泌活动,导致了超生理的雌激素水平,可能会导致疾病的发生.与外周血水平相比,子宫腺肌病患者月经血中E2水平升高,支持了这一观点[1].

75 条记录 1/4 页 « 1234 »

360期刊网

专注医学期刊服务15年

  • 您好:请问您咨询什么等级的期刊?专注医学类期刊发表15年口碑企业,为您提供以下服务:

  • 1.医学核心期刊发表-全流程服务
    2.医学SCI期刊-全流程服务
    3.论文投稿服务-快速报价
    4.期刊推荐直至录用,不成功不收费

  • 客服正在输入...

x
立即咨询