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电针对高脂诱导胰岛素抵抗大鼠肝脏腺苷酸活化蛋白激酶信号转导通路相关蛋白表达的影响
目的:观察电针对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、过氧化物酶体增殖物活化受体-γ(PPARγ)蛋白的影响,探讨电针治疗IR的作用机制.方法:从40只雄性SD大鼠中随机选取8只做为空白组,其余通过高脂饮食诱导IR模型,选取24只造模成功的大鼠按随机区组原则分为模型组(8只)、西药组(8只)和电针组(8只).西药组按大鼠体质量以吡格列酮10 mg·kg-1·d-1灌胃,电针组取双侧“丰隆”“三阴交”穴电针治疗,1次/d,均连续治疗2周.透射电镜观察大鼠肝组织线粒体结构,ELISA法检测大鼠血清C肽(C-P)、脂联素(ADP)、瘦素(LEP)、抵抗素(RES)含量,免疫蛋白印迹法检测肝组织AMPK、p38 MAPK、PPARγ的蛋白表达.结果:电镜观察显示模型组肝细胞线粒体形态、结构受损;而西药、电针组线粒体结构得到恢复融合.与空白组比较,模型组大鼠血清C-P、LEP、RES含量显著升高(P＜0.01),ADP含量显著降低(P＜0.01),肝组织AMPK、PPARγ蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),p38 MAPK蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).与模型组比较,电针组、西药组大鼠血清C-P、LEP、RES含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01),ADP含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),肝组织AMPK、PPARγ蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),p38 MAPK蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).电针组与西药组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针可明显改善IR大鼠的脂质代谢紊乱,其作用机制可能与电针调节肝组织AMPK/p38 MAPK/PPARγ通路相关,由此下调脂肪酸合成相关酶的活性,使肝组织内合成甘油三酯、胆固醇减少,改善肝组织IR.
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灰树花多糖对CIF模型磷酸化p38MAPK表达的影响
目的:观察灰树花多糖对化疗相关性疲劳(CIF)模型疲劳程度的改善情况,并初步探讨其可能的机制.方法:6～8周龄SPF级C57BL/6小鼠60只随机分为4组,即空白组,模型组,灰树花多糖低剂量组(5 mg·kg-1)和灰树花多糖高剂量组(10 mg·kg-1),每组15只.将除空白组以外的小鼠腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu,40 mg·kg-1),每天给药1次,连续5d,同时灰树花多糖低剂量组和灰树花多糖高剂量组给予不同剂量灰树花多糖灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,期间测量体重和抓力变化.第15天处死动物取材测血尿素氮、血乳酸和肝糖原含量及腓肠肌p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK) mRNA和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的表达情况.结果:低剂量和高剂量的灰树花多糖均能明显增强CIF小鼠的抓力(P＜0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低CIF小鼠运动后的血尿素氮值(P＜0.05);高剂量灰树花多糖可以明显降低CIF小鼠运动后的血乳酸值(P＜0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低腓肠肌p38 MAPK mRNA和p-p38 MAPK蛋白的表达水平.结论:灰树花多糖可以有效改善化疗相关性疲劳,可能与下调p38 MAPK基因与p-p38 MAPK的表达有关.
关键词： 灰树花多糖 化疗 疲劳 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
黄芪多糖干预缺血-再灌注损伤大鼠心肌黏附分子ICAM-1,VCAM-1及p38通路的研究
目的:研究黄芪多糖(APS)对大鼠缺血再灌注损伤心脏微血管内皮细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecular-1,ICAM 1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),p38 MAPK及p38 MAPK通路的影响.方法:70只Wistar大鼠随机分为7组,假手术组、缺血再灌注组、APS低、高剂量组(20,40 mg·kg-1)、p28 MAPK阻断剂SB203580组(5 mg·kg-1)、APS低剂量+ SB203580组(APS 20 mg· kg-1,SB203580 5mg·kg-1)、APS高剂量+SB203580组(APS40 mg·kg-1,SB203580 5mg·kg-1),给药30 d后,进行冠状动脉左前降支结扎1h后除去丝线恢复血流,心肌再灌注2h后处死,取心肌组织,Western blot法测定心肌中ICAM-1,VCAM-1,p38,p-p38蛋白表达.结果:缺血再灌注模型组ICAM-1和VCAM-1蛋白表达(1.367 3±0.131 9,0.8103±0.051 3)及信号通路蛋白p-p38(1.110 7 ±0.046 1),与假手术组(0.535 0±0.076 5,0.345 3±0.035 6,0.576 7±0.015 0)比较均显著增加(P＜0.01)；与缺血再灌注模型组比较,黄芪多糖高剂量与SB203580联合应用时对ICAM-1,VCAM-1,p-p38蛋白表达(0.870 2 ±0.120 7,0.474 5±0.047 2,0.807 5±0.076 2)的抑制作用,要强于单独应用黄芪多糖高剂量(1.225 1 ±0.086 5,0.657 3±0.062 1,1.056 3±0.070 3)或SB203580(1.013 1±0.073 1,0.562 3±0.045 6,0.942 3±0.035 8)的作用(P ＜0.01,P＜0.05).结论:黄芪多糖与SB203580联合应用时,可以明显抑制p38通路,下调由其介导的ICAM-1,VCAM-1在内皮细胞质膜上的表达,对抑制再灌注损伤有协同作用.
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清金化痰汤通过p38MAPK/NF-κB信号通路改善大鼠急性气道炎症的作用和机制
目的:探讨清金化痰汤治疗急性气道炎症模型大鼠气道炎症性损伤和黏液高分泌的作用和机制.方法:脂多糖(LPS)诱导建立急性气道炎症大鼠模型,随机分为空白组、模型组、地塞米松组、清金化痰汤高、中、低剂量(7.44,3.72,1.86 g·kg-1)组,各组大鼠自给药开始计时,第4,7天分批次处死.采集肺泡灌洗液(BALF),气管及肺组织,观察各组大鼠BALF中白细胞及细胞分类计数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL)-1β,IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α以及黏蛋白(MUC5AC);光镜下观察气管和肺组织病理学改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,p38MAPK),核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白(IκBα),NF-κB p65蛋白表达水平.结果:清金化痰汤能抑制BALF中白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞升高,减轻气管和肺组织的病理学炎症积分,减少细胞因子IL-1β,IL-8,TNF-α水平及黏蛋白MUC5AC的表达,下调肺组织p38MAPK,NF-κB p65蛋白表达,增加IκBα蛋白表达水平.结论:清金化痰汤具有抑制炎症细胞浸润,减少细胞因子和黏蛋白MUC5AC的表达,抑制气道炎症反应的作用;清金化痰汤通过调控肺组织p38MAPK/NF-κB信号通路,抑制气道黏蛋白分泌和细胞因子的释放,从而改善气道黏液高分泌状态及其炎症性损伤.
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基于p38MAPK通路探讨丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病模型大鼠血管病变的影响
目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路观察丹蛭降糖胶囊对实验性2型糖尿病(T2DM)模型大鼠血管内皮功能受损的影响.方法:采用高脂高糖饮食及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,将104只大鼠随机分成正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量(1.08,0.72,0.54 g·kg-1·d-1)组,吡格列酮(10 mg·kg-1 ·d-1)组,丹蛭-吡格列酮(1.08+0.01 g·kg-1·d-1)组.造模成功后分别按相应剂量ig药物,每日1次.给药8周后,所有大鼠麻醉后腹主动脉采集血液样本和处死剪取腹主动脉进行相关检测,分析其作用机制.结果:治疗8周后,与正常组相比,模型组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK),MAPK激酶3/6(MKK3/6),核转录因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1),环氧化酶-2(COX-2),细胞间黏附分子(ICAM-1)蛋白表达水平均有上调,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)蛋白表达水平下调;与模型组相比,给药组大鼠p-p38MAPK,MKK3/6,CREB1,COX-2,ICAM-1蛋白表达水平均有下调,MKP-1蛋白表达水平明显上调(P＜0.05,P＜0.01).腹主动脉免疫组化示,给药组p38MAPK蛋白表达量与模型组相比明显降低.结论:丹蛭降糖胶囊能调节T2DM模型大鼠血管p38MAPK蛋白表达水平,并可能从而改善大鼠血管内皮功能受损.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 糖尿病血管病变 丹蛭降糖胶囊 免疫组化 -
健脾益肺方对肌萎缩侧索硬化hSOD1-G93A转基因小鼠脊髓p38 MAPK蛋白及炎症因子表达的影响
目的:探讨健脾益肺方对hSOD1-G93A转基因小鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-aetivated protein kinase,p38 MAPK)蛋白及炎症因子表达的影响.方法:将24只8周龄的SPF级hSOD1-G93A转基因小鼠随机分为模型组、健脾益肺方(2.86,5.72,11.44 g·kg-1)组,每组6只.8周龄SPF级同窝出生正常野生型小鼠6只作为正常组.模型组和正常组予生理盐水灌胃,药物组予不同剂量的中药灌胃,每日1次,共120 d.用免疫荧光法(immunofluorescence)检测小鼠脊髓小胶质细胞的活化情况,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白的荧光强度核浆比,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脊髓p38MAPK,p-p38 MAPK,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及环氧化酶-2(COX-2)蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组、健脾益肺方(2.86 g·kg-1)组小胶质细胞激活数明显增多(P ＜0.05,P ＜0.01),p38 MAPK,p-p38 MAPK荧光强度核浆比显著升高(P＜0.01),与模型组比较,健脾益肺方(5.72,11.44 g·kg-1)组小胶质细胞激活数及所占总数比例显著减少(P＜0.01),p38 MAPK,p-p38 MAPK荧光强度核浆比显著下降(P＜0.01);与正常组比较,模型组、健脾益肺方(2.86 g·kg-1)组p38 MAPK,p-p38 MAPK,COX-2,TNF-α蛋白表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),与模型组相比,健脾益肺方(5.72,11.44 g·kg-1)组p38 MAPK,p-p38 MAPK,COX-2,TNF-α蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:健脾益肺方可能通过介导p38MAPK通路抑制p38 MAPK蛋白磷酸化,以浓度依赖性抑制小胶质细胞的活化,下调p38 MAPK蛋白及炎症因子的表达,从而发挥神经保护作用.
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麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织形态及p38MAPK,Caspase-3表达的影响
目的:观察兔膝骨关节炎(KOA)软骨组织形态及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的表达,探讨麝香乌龙丸治疗兔KOA的作用机制.方法:将40只成年雄性大耳白兔,随机分为正常组(A)10只,造模组30只.采用关节腔内注射1.6％木瓜蛋白酶方法建立兔KOA模型,造模成功后随机分为模型组(B)、麝香乌龙丸低、高剂量组(C,D,n=10),ig给予麝香乌龙丸0.6,1.2 g·kg-1 ·d-1,灌胃4周后处死动物切取软骨组织,观察软骨组织形态变化,免疫组化染色检测关节软骨细胞中p38MAPK,Caspase-3的表达.结果:麝香乌龙丸低、高剂量组均能减轻兔软骨的病理损害,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；麝香乌龙丸低、高剂量组均能降低软骨中p38MAPK及Caspase-3表达,与模型组比较具有显著差异(P＜0.01).结论:麝香乌龙丸能够减轻兔骨关节炎软骨病理损害；麝香乌龙丸治疗骨关节炎的机制,与其能降低p38MAPK,Caspase-3的表达,抑制软骨细胞过度凋亡有关.
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大黄酸通过MAPK信号转导通路诱导HK-2细胞凋亡
目的:研究大黄酸诱导人肾小管上皮细胞系HK-2细胞凋亡作用及其凋亡机制.方法:将密度为4×104个/mL的HK-2细胞悬液接种于96孔板,培养24 h后分别加入不同浓度大黄酸(0,25,50,100 μmol· L-1)作用12,24,48 h,MTT法检测大黄酸对HK-2细胞活性的抑制作用;利用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测大黄酸诱导HK-2细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测细胞原癌基因c-jun,活化转录调控因子2(ATF-2),半胱天冬氨酸酶3(Caspase-3)基因表达水平;Western blotting检测细胞磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),c-jun氨基末端激酶(JNK),磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和活化型半胱天冬氨酸酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白的变化,并利用JNK抑制剂SP600125,p38抑制剂SB203580进一步验证JNK和p38所介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在HK-2细胞凋亡中的作用.结果:大黄酸能够呈剂量依赖性和时间依赖性抑制HK-2细胞活性.大黄酸作用下HK-2细胞凋亡率明显增加.大黄酸作用于HK-2细胞c-jun,ATF-2及Caspase-3基因的mRNA均明显上调;p-p38,p-JNK及CleavedCaspase-3蛋白表达显著性增加,JNK和p38总蛋白表达无明显变化.JNK特异性抑制剂SP600125与p38特异性抑制剂SB203580均能显著降低大黄酸诱导的HK-2细胞的凋亡率.结论:大黄酸能够诱导HK-2细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响MAPK信号转导通路实现的.
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糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞p38MAPK、TNF-α及sVCAM-1表达的影响
目的:观察中药复方糖痹康对高糖环境下大鼠雪旺细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 MAPK)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及可溶性血管间内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)表达的影响.方法:通过雪旺细胞株,建立高糖环境下大鼠雪旺细胞的细胞模型;用不同剂量的含药血清和正常血清培养基刺激48h后,采用放免法检测细胞上清中TNF-α的含量;ELISA法检测细胞上清中sVCAM-1的含量,Western blot法检测大鼠雪旺细胞p38和磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)的表达.结果:与空白对照组比较,高糖对照组的sVCAM-1、TNF-α、p-p38 MAPK及p-p38 MAPK含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01);与高糖对照组比较,弥可保与糖痹康各剂量组上清中sVCAM-1、TNF-α、p38 MAPK及p-p38 MAPK的含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:糖痹康含药血清可下调在高糖环境下大鼠坐骨神经雪旺细胞p38 MAPK及其激活形式p-p38 MAPK蛋白表达,下调大鼠坐骨神经雪旺细胞上清中TNF-α的含量,可能是其DPN神经保护及镇痛作用靶点之一及下调大鼠坐骨神经雪旺细胞上清中sVCAM-1的含量,可能是其DPN神经保护作用靶点之一.
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左归丸通过p38 MAPK信号通路刺激MC3T3细胞核结合因子表达
目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的作用机制.方法:用含或不含p38 MAPK特异性阻滞剂(SB203580)的孵育液预处理细胞60min,加入左归丸含药血清孵育48h后,采用MTT基检测细胞活力;采用蛋白质印迹分析方法测定p38活性和Runx2蛋白表达水平;采用实时定量PCR方法测定Runx2和Col Ⅰ mRNA表达水平.结果:左归丸含药血清能够显著增加细胞活力和磷酸化p38蛋白表达水平,诱导Runx2和Col Ⅰ表达(P＜0.01).SB203580抑制了左归丸含药血清诱导的细胞活力和p38蛋白磷酸化水平,同时下调了左归丸含药血清诱导的Runx2和Col Ⅰ表达(P＜0.01).结论:左归丸含药血清可能部分通过活化p38 MAPK信号通路,上调Runx2表达,刺激Col表达,促进骨形成.
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肝豆汤改良方对TX小鼠脑组织ASM、Cer及p38MAPK mRNA和蛋白表达的影响
目的:探讨肝豆汤改良方(MGDD)对TX小鼠脑组织酸性鞘磷脂水解酶(ASM)、神经酰胺(Cer)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK) mRNA和蛋白表达的影响.方法:将140只TX小鼠随机分成1、3、5月龄模型组,3、5月龄MGDD组及3、5月龄丁苯酞组,每组20只,同时选用相同月龄60只DL小鼠分别为1、3、5月龄正常对照组,每组20只,饲养环境及喂食食物相同,均从入组时开始给药,MGDD治疗组按24.5g·kg-1·d-1灌胃,丁苯酞组给以丁苯酞混悬液0.156g·kg-1·d-1灌胃,正常对照组及模型组灌胃100mL·kg-1·d-10.9％氯化钠溶液,1次/d,收集处理标本,采用RT-PCR、免疫组织化学法及Wcstern blot技术检测脑组织内ASM、Cer及p38 MAPKmRNA及蛋白表达水平.结果:模型组小鼠脑组织ASM、Cer及p38 MAPK mRNA及蛋白表达程度伴随着月龄的增加,表达有增多趋势,MGDD治疗组较模型组可显著降低小鼠脑内ASM、Cer及p38 MAPK mRNA及蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01),且随着疗程的延长,抑制更加显著.结论:MGDD可能通过下调小鼠脑组织神经酰胺信号通路中ASM、Cer、p38 MAPK mRNA及蛋白的表达水平,改善铜负荷引起的神经元损伤.
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加味四君子汤对阿霉素肾病大鼠FAK/p38MAPK途径的影响
目的:探讨加味四君子汤对阿霉素肾病大鼠的治疗作用及对FAK/p38途径的影响.方法:建立阿霉素肾病综合征大鼠模型,以随机数字表随机分为正常组、模型组、激素组、中药组(加味四君子汤)、中药+激素组,每组10只.测大鼠24h尿蛋白;电镜下进行肾脏超微病理观察,实时荧光定量PCR检测肾组织FAK、p38mRNA表达,Western Blot检测肾皮质FAK、p38蛋白及磷酸化.结果:①第21天,激素组、中药组、中药+激素组尿蛋白均较模型组降低(P＜0.05,P＜0.01).第35天,与模型组比较,3组尿蛋白均显著性降低(P＜0.01).第35天与第21天相比,模型组显著性升高、激素组和中药+激素组显著性降低(P＜0.05).②模型组足细胞肿胀,足突增宽、部分或弥漫性融合;各治疗组肾小球病变明显减轻,仅见部分足突融合.③与模型组比较,各药物干预组FAK mRNA、p38 mRNA表达显著性减少(P＜0.01).④模型组FAK总蛋白及FAK、p38磷酸化蛋白显著性增高(P＜0.01),与模型组比,各药物干预组FAK总蛋白及FAK、p38磷酸化蛋白显著性降低(P＜0.05).结论:阿霉素可通过FAK/p38途径导致阿霉素肾病的形成;肾组织FAK磷酸化,可诱导下游p38通路激活,介导肾脏损伤;加味四君子汤、激素能抑制FAK/p38通路,降低阿霉素肾病大鼠蛋白尿.
关键词： 加味四君子汤 阿霉素肾病 黏着斑激酶 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
电针对帕金森病模型大鼠中脑黑质p38丝裂原活化蛋白激酶的影响
目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路介导的炎性反应在电针防治帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠中的作用.方法:健康雄性SD大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,每组8只.模型组与电针组大鼠采用颈背部皮下注射鱼藤酮(2 mg/kg,溶解于葵花油,浓度2 mg/mL)制备PD模型；假手术组,在与模型组大鼠相同部位注射等量的不含鱼藤酮的葵花油乳化液；正常组不作处理.电针组取“风府”“太冲”行电针治疗(连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min),1次/d,连续14d.其他组不予干预治疗.采用免疫组化法检测各组大鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达变化.结果:模型组大鼠出现典型的PD行为学改变,中脑黑质区TH阳性神经元计数较正常组、假手术组显著降低,p-p38 MAPK、COX-2阳性神经元计数较正常组、假手术组显著升高,经统计学分析,差异均具有统计学意义(均P＜0.01)；电针组TH阳性神经元计数较模型组明显升高,p-p38 MAPK、COX-2则较模型组表达下降,经统计学分析,差异均具有统计学意义(均P-＜0.01).结论:电针治疗可明显降低PD大鼠炎性介质COX-2的表达,抑制p38 MAPK磷酸化,减轻PD大鼠多巴胺能神经元的损伤,这一作用可能与其影响p38 MAPK信号通路有关.
关键词： 帕金森病 鱼藤酮 电针 p38丝裂原活化蛋白激酶 环氧合酶 -
柴胡疏肝散对肝纤维化大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的作用及相关性研究
目的:观察柴胡疏肝散对TGF-β1/p38MAPK信号通路的影响,探索其抗肝纤维化的作用机制.方法:50只Wister大鼠按随机数字表法分为正常对照组、病理模型组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组5组.除正常组外,其余各组均用腹腔注射CCl4制备肝纤维化模型.各治疗组于第6周给药至第10周结束.免疫组化S-P法检测肝组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶MMP-9和金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1蛋白的表达.结果:与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组TGF-β1蛋白、p-p38MAPK和α-SMA蛋白表达显著减弱,MMP-9蛋白表达显著增强,TIMP-1蛋白表达显著减弱.结论:柴胡疏肝散有明显的抗肝纤维化作用.其机制可能与柴胡疏肝散经TGF-β/p38 MAPK信号传导通路抑制肝星状细胞(HSC)活化,使HSC低表达TIMP-1、高表达MMP-9从而促进基质降解有关.
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香砂六君子汤对菌致慢性萎缩性胃炎TLR信号通路的影响
为研究香砂六君子汤对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)大鼠的疗效及其对Toll样受体(Toll likereceptors,TLR)信号通路的影响.将60只清洁级的SD大鼠随机分为6组:正常对照组,模型组,香砂六君子汤组(低、中、高剂量3组)以及抑制剂(SB203580)组.通过采用幽门螺杆菌(HP)灌胃构建慢性萎缩性胃炎模型.组织病理检测胃黏膜组织的病变情况;ELISA检测TNF-α,IL-6含量以及iNOS的活性;硝酸还原酶法测定NO的含量;QPCR,Western-blot检测胃黏膜组织TLR2,TLR4,P38MAPK,NF-κB基因的表达情况.结果显示,大鼠模型组与正常对照组相比,胃黏膜组织TLR2,TLR4,p-P38MAPK蛋白以及细胞核内NF-κB蛋白表达均增加(P＜0.01);与模型组相比,香砂六君子汤组大鼠胃黏膜TLR2,TLR4,p-P38MAPK蛋白以及细胞核内NF-κB蛋白表达逐渐降低,以高剂量组降低为明显(P＜0.01),且HP根除率逐渐提高、慢性萎缩性胃炎的病理变化逐渐减轻.结果表明,在大鼠模型中,HP通过激活TLR2,TLR4/MAPK/NF-κB/iNOS/NO信号通路诱发慢性萎缩性胃炎的病理改变,香砂六君子汤能根除HP,可减轻HP引起的慢性萎缩性胃炎的黏膜炎症反应.该中药方剂治疗HP所致的慢性萎缩性胃炎既安全又有效.
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慢性肾脏病肾组织炎症信号通路p38MAPK的调节机制及中药的干预作用
肾组织的炎症反应及其相关的组织损伤(如肾小球硬化和肾间质纤维化)是导致慢性肾脏病( chronic kidney disease,CKD)进展至终未期肾病的重要因素.其中,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路能够调控多种核转录因子的表达和生物活性,还可以影响下游炎症介质的合成,并参与炎症细胞的活化,在肾脏疾病炎症损伤中发挥着重要的作用.某些单味中药及其提取物(如大黄素、黄连素)以及一些中药复方(如益肾活血汤)可以通过调节p38MAPK信号通路而影响肾组织内炎症反应,从而,减轻肾小球、肾间质炎症损伤.
关键词： 慢性肾脏病 中药 p38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 -
糖尿病肾病肾组织炎症信号通路p38MAPK的调节机制及中药的干预作用
在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的发展过程中,炎症相关信号通路——p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路与肾组织损伤密切相关.一方面,高血糖、血流动力学异常、氧化应激以及前炎症因子等多种因素在上游激活p38MAPK信号通路；另一方面,活化的p38MAPK信号通路进一步诱导下游炎症细胞活化,促进炎症介质表达,增加炎症因子产生,终,导致肾组织炎症性损伤.中药对p38MAPK信号通路的干预作用是通过多途径实现的,主要包括抑制炎症因子表达、调节磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)表达、减少致纤维化因子表达等.
关键词： 糖尿病肾病 中药 p38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 -
冠脉通片对脑缺血再灌注大鼠TLR2通路ERK与p38蛋白表达的影响
目的 探讨脑缺血再灌注后炎症级联反应中Toll样受体2(TLR2)通路的作用机理和冠脉通片对脑组织损伤保护作用的分子机制.方法 采用栓线法阻断/放开大脑中动脉法制备脑缺血再灌注损伤模型.灌胃给药,分为冠脉通片高剂量组(1 200 mg/kg)、中剂量组(600 mg/kg)和低剂量组(300 mg/kg),阳性对照药用达纳康(20 mg/kg).各组取右侧大脑组织,10％中性甲醛固定,免疫荧光染色法检测TLR2的表达;另取右侧大脑组织超声破碎提取总蛋白,用Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phospho-extracellular regulated protein kinases,p-ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶[p38-mitogen activated protein kinases,p38-MAPKs(p38)]、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶[phospho-p38-mitogen activated protein kinases,p-p38-MAPKs (p-p38)]的表达;腹主动脉取血,用ELISA法检测白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1 β(interleukin-1β,IL-1β)在脑组织和血清中的含量.结果 与假手术组比较,模型组TLR2的表达增高,ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白表达上调(P ＜0.05,P＜0.01),脑组织和血清中IL-6和IL-1β的含量均增加(P＜0.01);冠脉通片中、高剂量组均下调了TLR2、ERK、p-ERK、p38、p-p38的表达(P ＜0.05,P＜0.01);降低了脑组织和血清中IL-6和IL-1β的含量(P ＜0.05,P＜0.01).结论 TLR2通路参与了脑缺血再灌注损伤,冠脉通片通过下调TLR2通路ERK、p-ERK、p38、p-p38蛋白及细胞因子IL-1β和IL-6含量实现了对神经元的保护作用.
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P38MAPK在大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成早期对GFAP、vimentin表达的调控作用
目的 探讨在大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质瘢痕形成早期,p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)对神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及波形蛋白(vimentin)表达的影响.方法将大鼠随机分为假手术组(sham group)、模型组(modelgroup)、P38 MAPK特异性激动剂anisomycin组(anisomycin group)和P38 MAPK特异性抑制剂SB203580组(SB203580group).脊髓夹伤模型制作成功后即分别在损伤区硬脊膜下注射0.9％氯化钠溶液、anisomycin和SB203580各10 μL,假手术组只打开椎板暴露脊髓,不做其他处理.于术后第1、3、7及14天利用BBB评分评定大鼠后肢运动功能,用Western blot和免疫荧光标记技术检测GFAP和vimentin表达.结果术后第14天,模型组BBB评分显著低于假手术组(P＜0.01);SB203580组大鼠BBB评分显著高于模型组(P＜0.05)但仍低于假手术组(P＜0.01),而anisomycin组则显著低于模型组(P＜0.05).术后第7和14天,模型组GFAP、vimentin的表达显著高于假手术组(P＜0.01);SB203580组GFAP、vimentin的表达均显著低于模型组(P＜0.05)但仍高于假手术组(P＜0.05),而anisomycin组GFAP、vimentin的表达均显著高于模型组(P＜0.05).结论SCI后胶质瘢痕形成早期P38 MAPK可调控GFAP、vimentin的表达,抑制P38 MAPK可降低GFAP、vimentin的表达,减轻大鼠SCI后胶质瘢痕形成,促进神经功能的恢复.
关键词： 脊髓损伤 p38丝裂原活化蛋白激酶 GFAP 波形蛋白 -
缬沙坦抑制高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质及CTGF的表达
目的 探讨高糖状态下体外培养的肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子(CTGF)的表达以及缬沙坦的影响.方法 体外培养大鼠系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western blot枪测CTGF、P38幺幺裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)及各自磷酸化蛋白的表达,RT-PCR榆测CTGF mRNA和纤维黏连蛋白(FN)mRNA的表达.放免法测定细胞上清液中层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原的含量.结果与低糖组相比,高糖组系膜细胞cTGF、P-P38 MAPK、P-CREB1表达明显上调,CTGF mRNA和FN mRNA表达增加,细胞上清中LN和Ⅳ型胶原含黾增加.缬沙坦组CTGF、p-P38 MAPK、P-CREBI的表达明显下调,CTGF mRNA和FN mRNA表达降低,LN和Ⅳ型胶原的含节减少.结论 缬沙坦抑制高糖状态系膜细胞CTGF表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响P38 MAPK及其下游核因子CREB1的激活而实现.
