中国病理生理杂志
Chinese Journal of Pathophysiology 중국병리생리잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国病理生理学会
- 影响因子： 1.06
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-4718
- 国内刊号： 44-1187/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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PDK1对肺癌A549细胞生物学行为的影响
目的:探讨3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)对肺癌细胞株A549生物学特性的影响及其潜在的作用机制.方法:采用Western blot和real-time PCR检测肺正常上皮细胞BEAS-2B和肺癌细胞(H460、SPCA1和A549)中PDK1的表达水平.利用RNA干扰技术下调肺癌A549细胞中PDK1的表达,然后分别采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力及凋亡的变化;Western blot检测增殖及周期相关蛋白的表达和Akt/FoxO1信号通路的活性.后通过Akt信号通路特异性激动剂胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1, IGF-1)进一步验证PDK1和Akt/FoxO1信号通路的相互作用.结果:相较于肺正常上皮细胞BEAS-2B,肺癌细胞中的PDK1均呈高表达(P<0.05).干扰A549细胞中PDK1的表达后,细胞活力显著降低,周期进程缓慢,而细胞凋亡显著增加.Western blot实验结果显示,干扰PDK1后,细胞中cyclin D1、CDK4、p-Rb、Bcl-2、p-Akt及胞浆中p-FoxO1的含量显著下降,P27、cleaved caspase-3及核内FoxO1的蛋白水平显著升高(P<0.05).预先给予Akt激动剂IGF-1可部分逆转干扰PDK1对Akt/FoxO1信号通路的影响,并增加A549细胞的活力(P<0.05).结论:干扰人肺癌细胞株A549的PDK1可通过抑制Akt/FoxO1信号通路而调控周期及凋亡相关因子的表达,发挥生长抑制及凋亡促进作用,提示PDK1可作为肺癌的潜在诊疗靶点.
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长链非编码RNAPVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响
目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制.方法:qPCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况.裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响.结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P<0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平高(P<0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P<0.05).结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力.
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原花青素对Aβ25-35作用下PC12细胞的保护作用
目的:探讨原花青素对Aβ25-35作用下PC12细胞的保护作用及机制.方法:25 μmol/L的Aβ25-35作用于PC12细胞48 h,预先加入25、50和100 mg/L的原花青素干预24 h.采用MTT法检测细胞存活率,DCFH-DA单染法检测细胞活性氧簇(ROS)的含量,JC-10单染法检测细胞线粒体膜电位,AnnexinⅤ/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot 检测凋亡蛋白caspase-3的蛋白水平.结果:原花青素可提高Aβ25-35作用下PC12细胞的存活率,降低胞内ROS含量,阻止线粒体膜电位下降,抑制caspase-3的活化(P<0.05或P<0.01),从而抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡.结论:原花青素对Aβ25-35作用下的PC12细胞具有明显的保护作用,其作用机制可能是通过清除Aβ25-35诱导产生的ROS而减轻对线粒体膜的损伤作用,从而抑制细胞凋亡的发生.
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吴茱萸碱抑制Huh7细胞生长并增强细胞对TRAIL的敏感性
目的:探讨吴茱萸碱对人肝癌Huh7细胞生长和凋亡的影响,阐明吴茱萸碱促进肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)抗肿瘤活性的分子机制.方法:MTT 法检测吴茱萸碱对Huh7细胞活力的影响;流式细胞术观察吴茱萸碱对细胞周期的阻滞;TUNEL染色法检测细胞凋亡的变化;Western blot实验测定细胞内细胞周期和凋亡相关蛋白的表达水平.结果:Huh7细胞经吴茱萸碱处理后,细胞活力明显下降(P<0.05);同时,细胞发生G2/M期阻滞,p27、cyclin B1、细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)和p-Cdc2的蛋白水平上调(P<0.05);吴茱萸碱能够诱导Huh7细胞发生凋亡,促进多聚ADP核糖聚合酶(PARP)和caspase-3的切割.当吴茱萸与TRAIL联用后,Huh7细胞活力明显下降,PARP和caspase-3的切割增加;另外,吴茱萸上调Huh7细胞中死亡受体5(DR5)的蛋白水平.结论:吴茱萸碱通过抑制细胞活力和阻滞细胞周期于G2/M期而抑制细胞生长,并诱导Huh7细胞发生凋亡;上调DR5的表达水平可能与吴茱萸碱增强Huh7细胞对TRAIL的敏感性相关.
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白藜芦醇缓解完全弗氏佐剂所致小鼠炎性痛的NF-κB信号通路机制
目的:探讨白藜芦醇抗小鼠炎性痛的核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路机制.方法:将60只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、炎性痛模型组、阳性对照(地塞米松,0.5 mg/kg)组及白藜芦醇(100、50和25 mg/kg)组,每组10只.通过测定小鼠机械刺激缩足反射阈值、热刺激缩足反应潜伏期及冷缩足反射次数,观察白藜芦醇是否具有缓解小鼠炎性痛的作用.采用RT-PCR和Western blot法检测炎性痛小鼠脊髓组织(L4~L6) NF-κB、NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB α,IκBα)、NF-κB抑制蛋白激酶β(inhibitor of NF-κB kinase β,IKKβ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的mRNA和蛋白表达水平的影响.结果:白藜芦醇(100和50 mg/kg)可明显升高完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)所致炎性痛小鼠机械刺激缩足反射阈值,显著延长其热刺激缩足反应潜伏期,减少其冷缩足反射次数(P<0.05或P<0.01);白藜芦醇(100 mg/kg)可明显下调CFA诱导的炎性痛小鼠脊髓组织NF-κB、IκBα、IKKβ、TNF-α及IL-1β的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01).结论:白藜芦醇对炎性痛具有较好的缓解作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.
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Notch信号在脂多糖诱导的骨髓间充质干细胞中的作用
目的:探讨Notch信号对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone mar-row mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和趋化因子CXCL1分泌的影响.方法:全骨髓培养法制备BMSCs;采用qPCR与Western blot实验比较LPS对BMSCs中Notch信号通路配体、受体及靶基因表达的变化;MTT法和活细胞计数检测Notch信号对细胞增殖的影响;并以ELISA法检测Notch信号通路抑制剂DAPT对IL-6和CXCL1分泌的调节作用.结果:经10 μg/L、100 μg/L和1 mg/L的LPS刺激后,BMSCs增殖和IL-6分泌呈现上升趋势(P<0.05或P<0.01).qPCR与Western blot结果显示Notch信号通路受体和配体在BMSCs中均有表达,但LPS对其mRNA与蛋白水平并无明显影响,然而LPS可显著诱导Notch信号靶基因Hes1与Hey1的蛋白表达.Notch信号通路抑制剂DAPT可以降低LPS诱导的BMSCs活力的上升(P<0.01),同时对LPS诱导的BMSCs增殖有抑制作用.另外,LPS显著诱导BMSCs中IL-6与CXCL1的分泌,而抑制Notch信号通路可显著抑制LPS所诱导的IL-6与CXCL1的分泌(P<0.05).结论:抑制Notch信号可以抑制LPS诱导的BMSCs增殖,并抑制IL-6与CXCL1的分泌.
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硫化氢通过调节Sirt1/eNOS信号通路延缓人脐静脉内皮细胞衰老
目的:我们既往研究已证实外源性硫化氢能够延缓内皮细胞衰老,本研究拟进一步探讨沉默信息调节因子1(Sirt1)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)系统对硫化氢抗内皮细胞衰老作用的影响.方法:建立葡萄糖(33 mmol/L)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老模型,根据细胞活力、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVECs衰老;同时采用RNA干扰技术抑制Sirt1蛋白表达,检测eNOS表达及衰老相关指标.结果:HUVECs经高糖处理后,细胞活力减低,SA-β-Gal阳性细胞比例增加,PAI-1表达增高,Sirt1及eNOS表达均明显减少(P<0.05);与高糖处理组比较,100 μmol/L硫氢化钠(硫化氢供体)处理组的细胞活性增加,SA-β-Gal染色阳性细胞比例及PAI-1蛋白表达显著下降,Sirt1及eNOS蛋白表达增加,NO含量增加(P<0.05).与硫化氢处理组比较,Sirt1 siRNA处理后 eNOS表达减少,PAI-1表达增加,SA-β-Gal染色阳性细胞数目增多,NO含量减少(P<0.05或P<0.01).结论:硫化氢通过上调Sirt1、增加eNOS 表达而促进NO的合成,从而抵抗高糖诱导的HUVECs衰老.
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ClC-3氯通道过表达对小鼠甲状腺结构及功能的影响
目的:研究过表达ClC-3基因对小鼠甲状腺结构及功能的影响.方法:以3月龄FVB小鼠为实验对象,研究野生型(WT)小鼠和ClC-3转基因小鼠甲状腺结构及功能的差异.用qPCR、Westren blot和免疫荧光技术观察小鼠甲状腺ClC-3的表达与分布;对小鼠日常活动进行行为学监测;ELISA检测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)和促甲状腺激素(TSH)的浓度.结果:与WT组小鼠相比:ClC-3转基因组小鼠甲状腺ClC-3表达明显增多(P<0.05);甲状腺表现为明显的增生,滤泡明显增大;体重减轻但摄食量增加(P<0.05),毛发无光泽,行为活跃,易激惹;TT3、TT4明显增高(P<0.05),但TSH变化不明显.结论:ClC-3过表达可导致甲状腺组织增生,甲状腺激素分泌增多.本研究提示ClC-3很可能参与了甲状腺激素的合成.
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沉默PARP-1对乳腺癌细胞MCF-7顺铂耐药的影响
目的:探究沉默多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)对乳腺癌细胞MCF-7顺铂耐药的影响及可能的作用机制.方法:Western blot及real-time PCR实验检测乳腺癌细胞株MCF-7及相应耐药细胞株MCF-7/DDP中PARP-1的表达情况.采用转染PARP-1小干扰RNA(siRNA)的方法沉默乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DDP中PARP-1的表达,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PARP-1、Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、caspase-3、细胞色素C(Cyto-C)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白水平.结果:耐药细胞株MCF-7/DDP中PARP-1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于亲本细胞株(P<0.05);并且在亲本细胞株MCF-7中加入顺铂刺激后,PARP-1的蛋白表达水平明显升高(P<0.05).沉默PARP-1可诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DDP的凋亡,增强细胞对顺铂的敏感性,还可下调Bcl-2/Bax 和p-ERK的蛋白水平,同时上调cleaved caspase-3及Cyto-C的蛋白水平.而应用ERK特异性抑制剂U0126后,PARP-1沉默组的细胞活力进一步降低.结论:沉默乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DDP中PARP-1的表达可恢复细胞对顺铂的敏感性,促进细胞经线粒体途径的凋亡,其机制可能与其抑制ERK的磷酸化,进而阻断该信号通路有关.
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干扰Yes相关蛋白表达调控Wnt/β-catenin信号通路影响膀胱癌细胞凋亡
目的:探讨干扰Yes相关蛋白(YAP)的表达对膀胱癌细胞凋亡的影响及机制.方法:以膀胱癌细胞T-24为研究对象,分为正常对照(control)组、siRNA阴性对照(siRNA-NC)组和YAP siRNA组.分别以real-time PCR和Western blot实验检测转染后各组细胞中YAP的mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)和c-Myc表达水平.用Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535处理YAP siRNA组细胞,并用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡.结果:YAP siRNA组YAP的mRNA和蛋白水平均明显低于control组(P<0.05).YAP siRNA组的细胞活力及c-Myc和β-catenin水平均明显低于control组(P<0.05),而细胞凋亡率明显高于control组(P<0.05).与未经FH535处理的YAP siRNA组细胞相比,YAP siRNA组的细胞经FH535处理后细胞活力明显下降,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:干扰YAP表达能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活而抑制膀胱癌细胞活力,并促进膀胱癌细胞凋亡.
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姜黄素对肺炎链球菌诱导BEAS-2B细胞SLPI、TNF-α和IL-1β表达的影响
目的:探讨姜黄素(Cur)及其衍生物Y20和6B对肺炎链球菌(SP)诱导的BEAS-2B细胞分泌型白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)表达的调节及可能机制.方法:建立体外SP感染模型,采用qPCR检测对照组、感染组以及Cur、Y20和6B处理组在感染1、3、6和9 h SLPI及感染3、6和9 h TNF-α和IL-1β的mRNA水平,ELISA法检测TNF-α和IL-1β的蛋白分泌水平,Western blot实验检测各时点Toll样受体2(TLR2)和磷酸化核因子κB(NF-κB)p65的蛋白水平.结果:qPCR结果显示,Cur、Y20和6B药物处理组SLPI的mRNA表达较SP感染组增加(P<0.05),TNF-α和IL-1β的mRNA表达较SP感染组明显下降(P<0.05);ELISA结果显示,感染不同时点的TNF-α和IL-1β含量在药物处理组中均下降(P<0.05);Western blot结果显示,SP感染3、6和9 h在药物处理组中TLR2和p-NF-κB p65的蛋白水平较感染组下降(P<0.05).结论:在不同感染时间,Cur、Y20和6B促进SP感染的BEAS-2B细胞SLPI表达,减少TNF-α和IL-1β分泌,其机制可能与抑制TLR2表达、下调NF-κB转录活性有关.
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STAT3通过上调GLUT2的表达促进转化的肝卵圆细胞WB-F344的Warburg效应
目的:探讨信号转导与转录活化因子3(STAT3)对恶性转化的肝卵圆细胞WB-F344的作用及其机制.方法:用N-甲基-N'-亚硝基胍(MNNG)和过氧化氢(H2O2)制备WB-F344肝卵圆细胞恶性转化模型,通过流式细胞术检测非整倍体细胞数量、Western blot检测甲胎蛋白(AFP)表达水平和软琼脂集落形成实验测定克隆形成率评价细胞的恶性转化,用葡萄糖氧化酶法检测细胞葡萄糖水平,用比色法检测细胞乳酸水平,用Western blot实验检测STAT3、p-STAT3和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的蛋白水平,并通过WST-1法、活细胞计数法、流式细胞术测定细胞周期的S期细胞比例和增殖指数,以及Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平来评价细胞增殖能力.结果:与对照组比较,转化的肝卵圆细胞克隆形成率增加(P<0.05),非整倍体细胞增多(P<0.01),AFP表达增强(P<0.05);葡萄糖消耗增多(P<0.05),乳酸产生增多(P<0.01); GLUT2表达上调(P<0.01),STAT3的活化增强(P<0.01);细胞活力增强(P<0.01),S期细胞比例增多(P<0.01),细胞增殖指数增加(P<0.01), PCNA表达上调(P<0.01).与模型组比较,STAT3的抑制剂stattic明显抑制恶性转化的肝卵圆细胞的克隆形成(P<0.01),促使非整倍体细胞显著减少(P<0.01)和AFP表达降低(P<0.05);减少葡萄糖消耗(P<0.05)和乳酸的产生(P<0.01);降低GLUT2(P<0.01)的表达水平;抑制恶性转化的肝卵圆细胞活力(P<0.05),降低S期细胞比例(P<0.01)、细胞增殖指数(P<0.01)和PCNA表达水平(P<0.05).结论:STAT3可能通过上调GLUT2表达而加快葡萄糖摄取、增强Warburg效应并促进细胞增殖,从而促进肝卵圆细胞的恶性转化.
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CHK1抑制剂SCH900776抑制胶质瘤细胞U251的增殖及迁移
目的:本研究以胶质瘤细胞U251为实验用细胞株,探讨细胞周期检测点激酶1(CHK1)抑制剂SCH900776对其增殖及迁移的影响.方法:MTT法和细胞集落形成实验观察SCH900776对细胞增殖的影响;流式细胞术分析SCH900776对细胞周期分布的影响;划痕实验观察SCH900776对细胞迁移的影响;Western blot实验检测相关蛋白的表达水平.结果:SCH900776能够明显抑制U251细胞的增殖,诱导细胞发生S期或G2/M期阻滞,同时下调细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)和p-Cdc2的水平;SCH900776对细胞迁移表现出明显的抑制作用;Western blot结果表明,SCH900776可升高p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平,同时抑制蛋白激酶B(Akt)的磷酸化激活.结论:CHK1抑制剂SCH900776能够抑制胶质瘤细胞U251的增殖与迁移,其机制可能与其激活p38 MAPK和抑制Akt活性相关.
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丙泊酚对结直肠癌细胞生物学行为的影响
目的:研究丙泊酚对结直肠癌细胞活力、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法:10、25、50和100 μmol/L的丙泊酚处理LoVo细胞72 h,或以100 μmol/L的丙泊酚处理细胞12、24、48和72 h,CCK-8实验检测细胞活力;Transwell小室检测经100 μmol/L丙泊酚处理72 h的细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率;Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、Notch1和发状分裂相关增强子1(Hes1)的蛋白表达.结果:丙泊酚可抑制结直肠癌细胞活力;丙泊酚组细胞侵袭能力、S期细胞及MMP-2、MMP-9、Notch1和Hes1蛋白表达均显著低于对照组,而细胞凋亡率、G0/G1期细胞及cleaved caspase-3的蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01).结论:丙泊酚可抑制结直肠癌LoVo细胞生长及侵袭能力,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡,其机制与下调Notch1信号通路有关.
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TTP减轻大鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤
目的:分析tristetraprolin(TTP)在大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后的相对表达水平,以及TTP对SAH后早期脑损伤(early brain injury,EBI)的作用及其可能机制.方法:将56只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(sham组)和SAH组,采用血管内穿刺法建立SAH模型,SAH组分别于出血后0、12、24、48、72 h和1周取脑组织,Western blot法检测TTP在不同组别中的表达;另取60只成年雄性SD大鼠,随机分成sham组、SAH组、SAH+对照质粒(vector)组和SAH+TTP组,SAH造模48 h后检测神经功能损伤和脑组织含水率;检测脑组织内伊文思蓝(Evans blue,EB)含量以评估血脑屏障通透性;TUNEL法检测大脑皮层细胞凋亡;ELISA法检测脑组织中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;Western blot法检测脑组织中TTP、Bax、Bcl-2和cleaved caspase-3的水平.结果:与sham组比较,TTP在SAH后12 h开始表达下调,在48 h时表达低,随后呈上升趋势;SAH组大鼠Garcia神经功能评分较sham组明显降低,脑组织含水率和EB含量较sham组均明显升高(P<0.01),脑组织中IL-6和TNF-α的表达上调(P<0.05);SAH组大鼠脑出血后细胞凋亡率显著上升(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达升高(P<0.01),而Bcl-2的表达下调(P<0.01);与SAH+vector组比较,SAH+TTP组大鼠Garcia神经功能评分明显升高,脑组织含水率和EB含量均明显降低(P<0.05),IL-6和TNF-α在脑组织中的表达下调(P<0.05),细胞凋亡率显著下调(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达下调(P<0.01),而Bcl-2的表达上调(P<0.01).结论:大鼠SAH后早期TTP表达下调,并通过其促凋亡机制参与EBI发生;上调TTP可显著减轻大鼠SAH后EBI.
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吸烟COPD模型大鼠肺组织内质网相关凋亡蛋白CHOP的表达
目的:研究吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达的情况.方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组及戒烟组.采用单纯被动吸烟法复制大鼠COPD模型,测各组大鼠0.3秒用力呼气容积与用力肺活量比(FEV0.3/FVC)和高峰值流速(PEF);采用TUNEL法检测肺结构细胞凋亡情况;采用原位杂交和RT-PCR检测肺组织CHOP的mRNA表达水平;免疫组化和Western blot检测其蛋白质水平;同时采用Western blot检测蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、p-PERK、真核生物起始因子(eIF)2α和p-eIF2α的蛋白水平.结果:大鼠吸烟2个月后,肺功能较对照组明显下降(P<0.05),肺结构细胞凋亡明显增加,凋亡细胞主要是肺泡上皮细胞、血管内皮细胞和支气管上皮细胞,肺结构出现破坏;吸烟4个月后,FEV0.3/FVC显著下降(P<0.05),肺结构凋亡细胞进一步增加,肺结构破坏明显;戒烟组肺功能较4个月组稍好转,肺结构破坏仍明显.与对照组相比,p-PERK、p-eIF2α和CHOP表达在吸烟2个月大鼠中升高(P<0.05),在吸烟4个月大鼠中进一步升高(P<0.05);戒烟组大鼠CHOP较吸烟4个月大鼠稍下降但差异无统计学意义;PERK和eIF2α在各组大鼠中表达的差异无统计学显著性.肺结构细胞凋亡与CHOP表达呈正相关;结论:吸烟可通过PERK/eIF2α/CHOP信号通路促进CHOP表达,从而促进COPD的发生与发展.
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复方贞术调脂胶囊对兔腹主动脉再狭窄模型血脂及炎症因子的影响
目的:通过建立兔腹主动脉粥样硬化球囊成形术后再狭窄模型,探讨复方贞术调脂胶囊(FTZ)对球囊成形术后再狭窄模型动物血脂及炎症因子的影响.方法:将新西兰白兔30只分成5组,除空白对照组外,其余各组均制作腹主动脉内皮剥脱血管狭窄模型.高脂喂养4周后再狭窄模型组及各用药组在血管狭窄部位行经皮球囊扩张成形术制作再狭窄模型.用二维定量冠脉造影工作站对造影结果进行血管狭窄分析,血管造影抽血测定血脂浓度及细胞因子质量浓度,以免疫组化法观察血管中核因子κB(NF-κB)表达情况.结果:血管造影证实,各用药组与再狭窄模型组相比,血管面积狭窄率及直径狭窄率均明显下降(P<0.01).与再狭窄模型组相比,各用药组血脂浓度及细胞因子质量浓度均显著下降(P<0.05).免疫组化显示再狭窄模型组中NF-κB表达显著高于空白对照组(P<0.05),各用药组NF-κB均显著减弱(P<0.05).结论:FTZ可显著降低兔腹主动脉成形术后再狭窄模型的血脂及炎症因子,进而抑制再狭窄,且其抗炎作用可能与调节NF-κB通路、抑制各种炎症因子的产生有关.
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硫氢化钠对慢性心力衰竭大鼠心脏功能和肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性的影响
目的:探讨硫氢化钠(NaHS)对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)大鼠心脏功能和肾素(re-nin)-血管紧张素(Ang)-醛固酮(ALD)系统(RAAS)活性的影响.方法:本研究通过腹主动脉缩窄术构建CHF大鼠模型,将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NaHS低剂量组和NaHS高剂量组,每组6只.采用超声心动图检测每组大鼠治疗前及治疗结束后的左心室舒张末内径(LVEDD)、左心室收缩末内径(LVESD)和左心室射血分数(LVEF).治疗结束后,采用ELISA试剂盒检测各组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD的浓度.采用qPCR和Western blot实验分别检测各组大鼠心肌组织中血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的mRNA和蛋白表达.结果:经NaHS治疗后,与模型组和治疗前相比,NaHS低剂量组和NaHS高剂量组的LVEDD和LVESD均明显降低,而LVEF明显升高(P<0.05);与NaHS低剂量组相比,NaHS高剂量组的LVEDD和LVESD降低,而LVEF升高(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠血浆中renin、AngⅡ和ALD浓度显著升高(P<0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.05);与模型组相比,NaHS低剂量组和NaHS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度显著降低(P<0.05),心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05);NaHS高剂量组大鼠血浆renin、AngⅡ和ALD浓度及心肌组织中ACE和AT1R的mRNA和蛋白表达显著低于NaHS低剂量组(P<0.05).结论:NaHS可通过抑制RAAS的活性改善CHF大鼠的心功能,且高剂量组的改善效果优于低剂量组.
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CCL3促进人骨髓间充质干细胞增殖并抑制其外泌体的分泌
目的:探讨趋化因子CCL3对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBMSCs)外泌体分泌的调控作用.方法:采用CCK-8法和活细胞计数检测hBMSCs的增殖活性;采用电镜观察、流式细胞术和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)对外泌体进行定性和定量分析.结果:CCK-8检测显示,CCL3组细胞的存活率大于对照组(P<0.05);活细胞计数结果显示,CCL3组细胞数明显多于对照组(P<0.05),呈浓度依赖性;流式细胞术分析结果显示,hBMSCs表达CCR1、CCR5和CCR93种CCL3特异性受体;CCL3作用hBMSCs后,CCR9荧光强度明显增强,CCR5和CCR1荧光强度无显著差异.NTA结果显示,与对照组相比, CCL3组外泌体分泌量明显减小(P<0.05),同时微囊泡(粒径大于100 nm)数明显增多(P<0.05);外泌体流式细胞术分析结果提示,与对照组相比,CCL3组的CD9 +外泌体阳性率显著下降(P<0.01).结论:CCL3促进hBMSCs增殖并抑制其外泌体的分泌,同时影响hBMSCs外泌体的粒径分布,无效的微囊泡增多.
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苦豆碱对缺血再灌注引起的H9c2心肌细胞损伤和炎症应答的作用
目的:明确苦豆碱对缺血再灌注(I/R)引起的大鼠心肌H9c2细胞损伤和炎症应答的作用及其机制.方法:采用缺氧/复氧的方法体外模拟缺血再灌注(SI/R)心肌损伤,用不同浓度苦豆碱处理,MTT实验分析苦豆碱对H9c2细胞存活率的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的水平及caspase-3的活性;ELISA分析多种炎性因子水平;同时用Western blot法分析苦豆碱对PI3K/AKT信号通路的影响.结果:苦豆碱可对抗SI/R抑制的H9c2细胞存活率,同时明显降低SI/R引起的LDH及MDA浓度的增加(P<0.05).此外,苦豆碱能够显著抑制SI/R触发的细胞凋亡(P<0.05),同时降低SI/R处理后引起的caspase-3活性的增加,并上调Bcl-2/Bax比值(P<0.05).与SI/R组相比,苦豆碱处理可显著性降低H9c2心肌细胞炎性因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的浓度(P<0.05).此外,与SI/R组相比,苦豆碱处理后可显著增加p-PI3K和p-AKT的蛋白水平(P<0.05);当用LY294002抑制PI3K/AKT通路后,苦豆碱促心肌细胞存活、抗凋亡及抗炎症的作用明显减弱(P<0.05).结论:苦豆碱可通过激活PI3K/AKT信号通路对抗心肌细胞缺血再灌注引起的损伤及炎症应答,提示其对心肌缺血再灌注损伤的防治具有潜在应用价值.
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性别对L-精氨酸诱发的昆明小鼠慢性胰腺炎的影响
目的:通过比较雌雄小鼠L-精氨酸诱发的慢性胰腺炎(CP)程度的差异,探讨性别对CP模型形成的影响.方法:健康昆明小鼠雌雄各42只,分为雌性对照组、雌性CP组、雄性对照组和雄性CP组(对照组n=18,每时点6只;CP组n=24,每时点8只).CP模型组小鼠腹腔注射20% L-精氨酸(3 g/kg,每周1次,每次2轮,间隔1 h)诱发CP.分别于造模后第2、4、6周处死动物,取小鼠胰腺组织,HE及Masson染色检测各组小鼠胰腺形态学改变及纤维化程度;免疫组织化学观察胰腺组织F4/80的阳性染色率;real-time PCR检测胰腺组织白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的mRNA表达;Western blot检测胰腺组织α-SMA及FN蛋白的表达.结果:20%L-精氨酸腹腔注射后的第2、4和6周,HE及Masson染色显示雌雄CP组胰腺组织均可见病理损伤,但是同一时点雌雄小鼠胰腺损伤程度存在明显差异,雄性小鼠胰腺病变程度明显较重;胰腺F4/80染色显示雄性小鼠胰腺F4/80的表达水平在造模后各时点均明显高于同一时点的雌性小鼠;造模后第2和4周胰腺IL-6的mRNA表达在雌雄CP组均有所升高,但是雄性组表达水平明显高于雌性组(P<0.05).造模后α-SMA和FN在mRNA水平和蛋白质水平均可见高表达,但雄性小鼠表达时点更早,水平更高(P<0.05).结论:采用腹腔注射20%L-精氨酸可成功复制小鼠CP模型,但复制的模型在雌雄小鼠存在病变程度差异.L-精氨酸诱导的CP模型在雄性小鼠成模更早、纤维化程度更明显,其原因可能与雄性小鼠对L-精氨酸更敏感,引发的炎症反应程度更明显有关.雄性小鼠更适合于复制CP动物模型.
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和肽素水平对大鼠心肾综合征的早期预测价值
目的:研究和肽素(CPP)水平对部分肾切除术(SNX)合并心肌梗死(MI)大鼠心肾综合征(CRS)的预测价值.方法:60只雄性SD大鼠采用SNX+MI建立CRS模型,随机分成空白对照(Con)组、SNX组、MI组和CRS组,造模后1~5周检测大鼠血清与尿液中CPP浓度的变化及血液动力学、血压与肾功能的水平.采用受试者工作特征(ROC)曲线评价CPP对大鼠发生CRS的预测价值.结果:与Con组比,CRS组大鼠在造模后9 d的左心室收缩压(LVSP)显著降低(P<0.05),左心室舒张末压(LVEDP)显著升高(P<0.05),而血压在各时点的差异无统计学显著性;CRS组大鼠的血尿素氮(BUN)和尿肌酐(UCr)在1周和3周均显著升高(P<0.05).与Con组比, CRS组在造模后1、3和5周血清中的CPP显著升高(P<0.05),造模后3周尿液中的CPP显著升高(P<0.05);在造模后1和3周血清中脑钠肽(BNP)显著升高(P<0.05),造模后5周尿液中BNP显著升高(P<0.05);CRS组在造模后1周血清和尿液中CPP与BNP和BUN无相关性.ROC曲线分析显示,血清CPP在1周时预测CRS的曲线下面积(AUC)为0.908(95% CI 为0.789 ~1.028),以56.59 ng/L为阈值,其诊断敏感度为87.5%,特异性为80.0%.结论:SNX+MI合并术式能建立心肾共损的CRS大鼠模型,血清CPP可以作为CRS早期预测较为敏感和特异的生物标志物.
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短链酰基辅酶A脱氢酶在高血压血管重构中的作用
目的:研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase,SCAD)在高血压血管重构中的变化,探讨SCAD与高血压血管重构之间的关系.方法:采用游泳耐力训练方式训练16周龄的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和健康Wistar大鼠8周,分别以24周龄的SHR和Wistar大鼠作为实验对照,定期测量鼠尾收缩压,测定各组大鼠胸主动脉血管腔内径和血管壁中层厚度、SCAD的mRNA和蛋白表达水平、SCAD酶活性的变化、ATP和ROS水平及血清和胸主动脉游离脂肪酸含量.结果:与Wistar组比较,SHR组大鼠血压升高,血管腔内径减小,血管壁中层厚度增大,血管壁中层厚度与血管腔内径比值增大;与SHR组相比,SHR游泳组血压下降,血管腔内径增大,血管壁中层厚度减小,血管壁中层厚度与血管腔内径比值减小(P<0.05).与Wistar组比较,SHR组大鼠主动脉SCAD的mRNA和蛋白表达水平显著下调,主动脉中SCAD酶活性下降,ATP含量降低,血清和主动脉游离脂肪酸含量明显增加,ROS含量增加;分别与Wistar组和SHR组比较,Wistar游泳组和SHR游泳组主动脉SCAD的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,主动脉中SCAD的酶活性增高,ATP含量增加,血清和主动脉的游离脂肪酸含量明显减少,ROS含量减少.结论:主动脉SCAD的表达下调可能与高血压血管重构密切相关.游泳运动可能通过上调SCAD表达,从而逆转高血压血管重构.
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槲皮素通过抑制c-Jun的表达水平增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞凋亡的诱导活性
目的:探讨槲皮素是否能增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞凋亡的诱导活性并研究其机制.方法:MTT法检测5-氟尿嘧啶在槲皮素辅助治疗下对胃癌细胞系BGC-823的杀伤活性和半抑制浓度(IC50).免疫共沉淀和Western blot实验检测5-氟尿嘧啶和槲皮素对BGC-823细胞c-Jun和Bcl-xL的表达水平、c-Jun磷酸化水平、caspase-9和caspase-3活化水平以及细胞色素C释放的影响.流式细胞术检测5-氟尿嘧啶在槲皮素辅助下对BGC-823细胞凋亡的影响.结果:槲皮素能明显提高5-氟尿嘧啶对BGC-823细胞的杀伤活性,降低5-氟尿嘧啶对BGC-823细胞的IC50.槲皮素处理明显抑制BGC-823细胞c-Jun的表达,并抑制BGC-823细胞中5-氟尿嘧啶诱导的c-Jun磷酸化及其与ATF2蛋白的相互作用,进而抑制5-氟尿嘧啶诱导的Bcl-xL蛋白上调.转染c-Jun过表达质粒后,槲皮素联合5-氟尿嘧啶对BGC-823细胞的杀伤活性受到显著抑制.同时,槲皮素能显著增强BGC-823细胞中5-氟尿嘧啶诱导的细胞色素C从线粒体中释放和caspase依赖的凋亡.结论:槲皮素可通过c-Jun/ATF2/Bcl-xL途径增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞线粒体途径凋亡的诱导活性.
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全氟辛酸暴露对哮喘小鼠炎症介质IL-4和IFN-γ及糖皮质激素受体的影响
目的:研究全氟辛酸(PFOA)对哮喘小鼠气道炎症、外周血炎症介质白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)以及肺组织糖皮质激素受体(GR)表达的影响及其可能机制.方法:30只BALB/c小鼠随机分为正常对照(C)组、哮喘模型(A)组、哮喘+PFOA低剂量(AP10)组、哮喘+PFOA中剂量(AP50)组和哮喘+PFOA高剂量(AP100)组,根据不同分组分别制作哮喘模型及PFOA暴露模型.留取肺组织标本后进行HE染色,透射电镜标本制作,ELISA法检测外周血IL-4及IFN-γ水平,并以Western blot及免疫组织化学染色法检测肺组织GR的蛋白表达.结果:肺组织病理切片HE染色结果显示,与正常小鼠相比,哮喘小鼠气道及血管周围可见明显的炎症细胞浸润及黏液分泌,AP各组表现更为明显.透射电镜结果显示,哮喘小鼠肺组织超微结构破坏明显.ELISA检测血清炎症因子结果表明,与C组相比,A组及AP各组外周血炎症因子IL-4升高,IFN-γ明显降低(P<0.05);与A组相比,AP10组及AP50组无明显差异,而AP100组外周血炎症因子IL-4升高,IFN-γ明显降低(P<0.05).Western blot结果显示哮喘小鼠肺组织GR表达较正常小鼠降低(P<0.05),而A组与AP各组之间无显著差异.免疫组化结果提示GR蛋白主要表达于小鼠肺组织支气管柱状上皮细胞、气道平滑肌细胞及血管平滑肌细胞胞浆.结论:哮喘小鼠气道PFOA急性暴露可通过诱导Th2型免疫反应加剧肺部炎症,促进气道及血管周围的炎症细胞浸润并破坏肺组织超微结构,且与剂量相关.
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白藜芦醇对TNF-α诱导的离体大鼠肺动脉内皮细胞损伤及MCP-1表达的影响
目的:探讨中药单体白藜芦醇(resveratrol,Res)对肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的离体大鼠肺动脉内皮细胞(rat pulmonary artery endothelial cells,RPAECs)中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的作用.方法:采用组织贴块法培养RPAECs,随机分为空白对照组(control组)、溶剂对照组(solvent组)、TNF-α(10 μmol/L)组和Res(50 μmol/L)+TNF-α组(Res组),每组又分成1、4和8 h三个时点(n=6),在8 h增加TNF-α+C1142(MCP-1特异性中和抗体)组(C1142组).采用Western blot 方法检测RPAECs中MCP-1蛋白表达,real-time PCR方法检测MCP-1 mRNA表达.结果:C1142可显著减少TNF-α诱导的RPAECs凋亡(P<0.05).相同时点solvent 组的MCP-1蛋白和control组比较差异无统计学显著性;TNF-α组的MCP-1蛋白及mRNA较control组增高(P<0.05);Res组的MCP-1蛋白及mRNA表达较TNF-α组降低(P<0.05).结论:MCP-1参与TNF-α诱导的RPAECs损伤;Res可降低TNF-α诱导的RPAECs中MCP-1表达,从而减少内皮细胞损伤.
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细胞外囊泡在慢性肝病中作用的研究进展
In recent years, extracellular vesicles are found as an important medium for intercellular signal communication in prokaryotic and higher eukaryotic cells for regulating a variety of biological processes.Extracellular vesi-cles include exosomes,microvesicles and apoptotic bodies,and can be released into extracellular media by almost all types of cells in vivo and in vitro.Extracellular vesicles are released under physiological and pathological conditions, including liver diseases,and have a wide range of effects on the target cells.This review summarizes the progress in understanding the role of extracellular vesicles in chronic liver diseases.Specifically, how extracellular vesicles regulate non-alcoholic steatohepatitis,alcoholic liver disease, viral hepatitis, liver fibrosis and hepatocellular carcinoma is discussed in detail highlighting extracellular vesicles as a promising therapeutic target for chronic liver diseases.
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雌激素减轻失血性休克器官损伤的作用与机制
Estrogen has many biological activities and extensive clinical applications.Hemorrhagic shock-in-duced major organ dysfunction and injury,which are related to sex differences,play a triggering role in irreversible shock. The present article reviews the role of estrogen in alleviating hemorrhagic shock-induced organ injury by analyzing and sum-marizing the recent studies,thus expanding the clinical application of estrogen and providing a novel approach for treatment of severe hemorrhagic shock.
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肝再生磷酸酶3在恶性血液病中的研究进展
In recent years,accumulating evidence shows that phosphatase of regenerating liver-3(PRL-3)is closely implicated in tumor progression,especially in the stages of invasion and metastasis of various solid tumors, inclu-ding colorectal cancer,gastric cancer and breast cancer.However,the study of PRL-3 in hematological malignancies is rel-atively lagged,but there are some advances in leukemia and myeloma,in which PRL-3 up-regulation is tightly associated with poor prognosis,while the underlying mechanism of signal transduction is gradually explored.In this review,we sum-marized the recent advances of PRL-3 in hematological malignancies such as acute myeloid leukemia,multiple myeloma and chronic myeloid leukemia,as well as the molecular mechanism of PRL-3 in pathogenesis.
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胰岛β细胞退分化在β细胞功能衰竭中的作用
β-cells may turn into other pancreatic islet cells through dedifferentiation.The dedifferentiation cells lose the ability of insulin secretion.Islet β-cell dedifferentiation is the important cause of β-cell dysfunction, which then leads to the occurrence of type 2 diabetes.Rescent research shows that many transcription factors play an important role in β-cell dedifferentiation,including forkhead box protein O1,NKX2.2,NKX6.1,MAFA and MAFB.In this paper, the influence factors of β-cell dedifferentiation and its mechanism were reviewed briefly.The discovery of β-cell dedifferen-tiation provides new thoughts and targets for prevention and treatment of type 2 diabetes.
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人卵丘颗粒细胞和壁层颗粒细胞体外培养方法比较
目的:建立有效分离、提纯及培养人卵丘颗粒细胞的方法,并与人壁层颗粒细胞的体外培养相比较.方法:收集卵胞浆内单精子显微注射取卵时的卵泡液和直接机械分离卵母细胞所得的卵丘颗粒细胞复合物,直接将卵丘颗粒细胞复合物接种于培养皿中培养.用密度梯度离心法分离卵泡液中的人壁层颗粒细胞.用免疫荧光法检测卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)的表达;用CCK-8法检测细胞生长曲线;用ELISA检测这2种颗粒细胞分泌雌激素的能力.结果:直接法所得人卵丘颗粒细胞培养24 h后可贴壁,体外培养生长状态与人壁层颗粒细胞相似;免疫荧光检测显示两者均表达FSHR;CCK-8实验结果表明,两者体外培养生长曲线相似;ELISA结果显示两者分泌雌激素能力相当.结论:利用机械切割获得人卵子周围卵丘颗粒细胞复合物直接培养的方法操作简单,获得的人卵丘颗粒细胞具有与人壁层颗粒细胞相似的生长状态、生长曲线以及雌激素分泌能力,可作为人颗粒细胞亚群体外培养方法的补充.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1985 | 01 02 03 04 z1 |
