中国病理生理杂志
Chinese Journal of Pathophysiology 중국병리생리잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国病理生理学会
- 影响因子： 1.06
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-4718
- 国内刊号： 44-1187/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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1-磷酸鞘氨醇受体2介导PI3K/AKT/eNOS通路抑制甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎
目的:探讨1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)对甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎的作用及机制.方法:采用甲型流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染野生C57BL/6小鼠和S1pr2-/-小鼠,建立甲型流感病毒性肺炎动物模型.病毒感染4和6 d时观察比较对照组(模型组的野生小鼠)、JTE-013(S1PR2高效拮抗剂)处理的小鼠及S1pr2-/-小鼠肺组织的病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白浓度、细胞总数及细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]的表达,Western blot法检测小鼠肺组织的AKT和eNOS的磷酸化水平.结果:与模型对照组的野生鼠比较,JTE处理组和S1pr2-/-组甲型流感病毒性肺炎更加严重;BALF中的蛋白浓度,总细胞数及炎性细胞因子表达显著增加;且PI3K下游靶点AKT和eNOS磷酸化显著增高(P<0.01).结论:S1PR2通过介导PI3K/AKT/eNOS信号转导通路,调节NO生成,抑制血管通透性和炎性细胞因子释放,从而减轻甲型流感病毒诱导的病毒性肺炎.
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Ang(1-7)减轻棕榈酸诱导的Min6细胞损伤
目的:观察血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]对棕榈酸(PA)诱导小鼠胰岛β细胞株Min6功能受损的影响,并初步探讨Ang(1-7)对Min6细胞的保护作用与自噬的关系.方法:将对数生长期的Min6细胞随机分为对照(control)组、PA组、PA+Ang(1-7)组、PA+Ang(1-7)+A779组、PA+Ang(1-7)+rapamycin组、Ang(1-7)组和A779组.干预结束后用葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测Min6细胞的分泌功能,流式细胞术检测凋亡率,活性氧簇(ROS)试剂盒检测细胞内ROS的水平,Western blot检测自噬相关蛋白LC3-I和LC3-II的表达.结果:与control组相比,PA组Min6细胞分泌功能明显受损,葡萄糖刺激后胰岛素分泌显著降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞内ROS水平和LC3-II/LC3-I比值明显增高(P<0.05);与PA组相比,PA+Ang(1-7)组细胞葡萄糖刺激后胰岛素分泌增加(P<0.05),细胞凋亡减少(P<0.05),细胞内ROS水平和LC3-II/LC3-I比值均明显下降(P<0.05).Ang(1-7)的这一保护作用可被A779和rapamycin部分阻断.结论:Ang(1-7)减轻PA诱导的Min6细胞损伤,其细胞保护机制可能与抑制细胞自噬活性有关.
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利拉鲁肽通过p38 MAPK通路改善高同型半胱氨酸血症诱导的大鼠海马氧化应激及炎症损伤
目的:探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)类似物利拉鲁肽(Lir)对高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠海马损伤的保护作用及其机制.方法:40只SD大鼠随机分为对照(Ctrl)组、模型(Hhcy)组、Lir低剂量(12.5μg·kg-1·h-1)组、Lir中剂量(25.0μg·kg-1·h-1)组和Lir高剂量(37.5μg·kg-1·h-1)组,采用Western blot法检测大鼠海马组织内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中p38、JNK和ERK1/2的蛋白表达及活性依赖的磷酸化水平,同时采用Western blot和免疫组织化学法检测内质网应激标志蛋白免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达水平;采用酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果:Hhcy可明显上调p-p38、BIP和CHOP的蛋白表达量,降低SOD和GSH的活性,升高MDA含量及IL-1β、IL-6和TNF-α水平;腹腔注射Lir可浓度依赖性地改善Hhcy引起的上述内质网应激和炎症反应,并伴有p38 MAPK通路的抑制.结论:Lir可改善Hhcy诱导的大鼠海马组织氧化应激和炎症损伤,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路的过度激活有关.
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miRNA-326调控胃癌细胞活力和凋亡的机制及其在胃癌组织中的表达及临床意义
目的:探讨微小RNA-326(miRNA-326)调控胃癌细胞活力和凋亡的机制及其在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:采用RT-qPCR检测miRNA-326在55例胃癌组织中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系.以胃癌细胞BGC-823为研究对象,RT-qPCR检测miRNA-326在细胞中的表达;将BGC-823细胞随机分为正常对照组(未转染)、mimic-NC组(转染mimic阴性对照)和miRNA-326 mimic组(转染miRNA-326 mimic),以脂质体转染法上调miRNA-326表达后,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)、p21、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl-2和cleaved caspase-3的蛋白水平,RT-qPCR检测cyclin D1的mRNA表达,双萤光素酶报告基因检测法验证CCND1(cyclin D1的基因)是否是miRNA-326的靶基因.结果:miRNA-326在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05),其表达与肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度及临床分期均有显著相关性(P<0.05),而与患者的年龄和性别无关;此外,还与患者生存率密切相关(P<0.05).miRNA-326在BGC-823细胞中的表达明显低于正常胃黏膜GES-1细胞(P<0.05).与正常对照组相比,mimic-NC组细胞中miRNA-326的表达无明显变化,而miRNA-326 mimic组细胞中miRNA-326的表达明显升高(P<0.05).与正常对照组相比,miRNA-326 mimic组细胞活力明显减弱,而细胞凋亡增强(P<0.05);此外,与正常对照组相比,miRNA-326 mimic组细胞中MMP-9、cyclin D1、Bcl-2蛋白及cyclin D1 mRNA表达下降,而p21和cleaved caspase-3的蛋白水平上升(P<0.05).然而,mimic-NC组与正常对照组相比,各检测指标的差异均无统计学显著性.与mimic-NC+miR-326 mimics组相比,转染pmiR-CCND1-WT质粒细胞的萤光素酶活性降低(P<0.05),而转染pmiR-CCND1-Mut质粒的萤光素酶活性无改变.结论:miRNA-326在胃癌组织中低表达,可能通过靶向调控CCND1表达而促进细胞活力并抑制细胞凋亡.
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大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中VDR、PKC及其相互作用对NaDC1表达的影响
目的:探究大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E中蛋白激酶C(PKC)、维生素D受体(VDR)及其相互作用对钠离子依赖性二羧酸协同转运蛋白1(NaDC1)表达的影响.方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E,采用PKC激动剂和PKC抑制剂干预NRE-52E细胞,并用VDR过表达载体及VDR-shRNA载体转染NRE-52E细胞,结合Western blot检测细胞中PKC、VDR和NaDC1的蛋白表达情况.结果:成功建立VDR稳定过表达和VDR稳定干扰的NRK-52E细胞株.与对照组比较,PKC激动剂组VDR和NaDC1蛋白表达量显著上调(P<0.01),VDR过表达组的PKC和NaDC1蛋白表达量显著上升(P<0.01),VDR干扰+PKC激动剂组和VDR过表达+PKC抑制剂组中PKC和NaDC1蛋白的表达水平均介于VDR干扰组与VDR过表达组之间.结论:在大鼠肾小管上皮细胞NRE-52E中PKC活性增强诱导VDR蛋白表达,PKC活性减弱抑制NaDC1蛋白表达;VDR与PKC和NaDC1的蛋白表达存在明显正相关;PKC与VDR相互作用时PKC高活性和VDR过表达是促进或维持NaDC1蛋白表达的主要因素.
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miR-1246增强宫颈癌细胞辐射敏感性的分子机制研究
目的:探讨微小RNA-1246(miR-1246)过表达增强宫颈癌细胞放疗敏感性的分子机制.方法:运用脂质体2000将miR-1246模拟物(miR-1246 mimic)转染4种宫颈癌细胞系HeLa、CaSki、C33A和SiHa,以阴性对照模拟物(NC-mimic)为阴性对照.Real-time PCR检测宫颈癌组织、正常组织、子宫内膜上皮细胞系ESC和4株宫颈癌细胞中miR-1246的表达水平;转染的细胞经电离辐射照射后运用MTT法和Transwell法分别测定细胞活力和细胞迁移能力;运用免疫荧光法检测γH2AX表达水平;Western blot检测细胞中γH2AX、ATM、p-ATM和p-p53的蛋白水平.结果:miR-1246在正常组织和ESC细胞中高表达,而在4株宫颈癌细胞和宫颈癌组织中低表达;转染miR-1246 mimic后miR-1246表达水平显著高于NC-mimic组细胞(P<0.05).相同条件下,辐照后miR-1246过表达组宫颈癌细胞活力显著低于NC-mimic组,细胞迁移率明显降低(P<0.05).免疫荧光结果显示,miR-1246过表达显著增强电离辐射诱导的γH2AX激活(P<0.05);Western blot结果显示,与NC-mimic组比较,miR-1246过表达显著促进电离辐射诱导γH2AX蛋白的表达,减低p-ATM和p-p53的蛋白水平(P<0.05).结论:miR-1246在正常组织和子宫内膜上皮细胞中高表达,而在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中低表达;miR-1246过表达抑制宫颈癌细胞活力和迁移能力,并可能通过阻断ATM通路、抑制DNA损伤修复而增强宫颈癌细胞的辐射敏感性.
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血清淀粉样蛋白A对骨肉瘤细胞侵袭、迁移能力以及MAPK信号通路的影响
目的:探讨沉默血清淀粉样蛋白A(SAA)的表达对骨肉瘤细胞活力、凋亡、转移能力以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响.方法:通过小干扰RNA(siRNA)特异性沉默SAA在骨肉瘤U2OS细胞中的表达,实验分为空白对照组、阴性对照组和实验组,阴性对照组和实验组分别转染阴性对照siRNA和SAA-siRNA,空白对照组不做任何处理.MTT法观察细胞的活力变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡率,Transwell小室法分析细胞迁移和侵袭能力的变化,Western blot检测细胞中SAA、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白水平.结果:SAA-siRNA可显著降低SAA在骨肉瘤U2OS细胞中的表达(P<0.05);与空白对照组相比,SAA-siRNA组细胞的活力显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05).SAA-siRNA组细胞中p-p38 MAPK和p-JNK的蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),而总JNK和p38蛋白表达量的差异无统计学显著性.结论:沉默SAA的表达可抑制骨肉瘤细胞活力,诱导其凋亡,降低细胞的转移能力,其作用可能与调控MAPK信号通路的活性有关.
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氟代柠檬酸抑制缺血后适应对树鼩脑缺血后海马HIF-1α/iNOS信号通路调控的脑损伤机制
目的:观察缺血后适应(PC)对树鼩脑缺血时海马HIF-1α/iNOS信号通路的调控作用,探讨抑制星形胶质细胞(AS)代谢加重脑损伤的机制.方法:光化学法建立血栓性脑缺血动物模型,氟代柠檬酸盐(FC)作为AS代谢抑制剂,于脑缺血后4 h闭/开缺血侧颈总动脉5 min,共3个循环以建立缺血PC模型.67只雄性树鼩随机分为对照组(n=9)、缺血4 h组(n=9)、缺血24 h组(n=9)、缺血PC 4 h组(n=9)、缺血PC 24 h组(n=9)、FC预处理4 h组(n=11)和FC预处理24 h组(n=11).采用TTC染色观察树鼩脑梗死体积的变化,通过HE染色观察海马神经元病理学改变,用激光多普勒监测缺血区区域性脑血流(rCBF),免疫组化及Western blot检测海马iNOS表达,用分光光度计测定海马NO产量,用ELISA分析海马HIF-1α水平的变化.结果:脑梗死体积随缺血时间延长而增大,以缺血24 h为显著(P<0.05);脑缺血后4 h和24 h皮层rCBF均下降(P<0.05);而海马HIF-1α和iNOS表达增强,NO生成显著升高(P<0.05).缺血PC可增加皮层rCBF(P<0.05),显著缩小脑梗死体积(P<0.05),下调海马iNOS表达并减少NO的生成(P<0.05).而FC预处理组rCBF显著低于缺血组(P<0.05),海马神经元损伤程度较缺血组加重,脑梗死体积随之增大(P<0.05).结论:缺血PC通过调控HIF-1α和iNOS表达而减轻缺血性脑损伤,抑制AS功能可削弱缺血PC介导的保护效应而加重脑损伤.
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槲皮苷通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导胃癌SGC7901细胞凋亡
目的:探讨槲皮苷是否通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡.方法:选取SGC7901细胞作为研究对象,采用MTT法检测槲皮苷对SGC7901细胞的毒性作用并测定IC50值.实验分为对照组(不加药处理)、槲皮苷组(采用200μmol/L槲皮苷处理)、PI3K/AKT通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)组(采用100μg/L IGF-1处理)和槲皮苷+IGF-1组(采用200μmol/L槲皮苷+100μg/L IGF-1共处理).处理48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测cleaved caspase-3、p-AKT(Ser473)、AKT、p-PI3K(Tyr508)和PI3K的蛋白水平.结果:从100μmol/L开始,随着槲皮苷处理浓度的逐渐升高,SGC7901细胞活力显著降低(P<0.05),槲皮苷作用48 h的IC50值为275.40μmol/L.200μmol/L槲皮苷作用SGC7901细胞48 h后,与对照组比较,细胞凋亡率和cleaved caspase-3蛋白水平显著上升(P<0.05),p-AKT和p-PI3K蛋白水平显著降低(P<0.05),然而IGF-1与槲皮苷共同作用时,IGF-1可逆转槲皮苷对SGC7901细胞的作用效果.结论:槲皮苷能够诱导胃癌SGC7901细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关.
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DAPT阻断Notch通路对动脉粥样硬化型缺血性脑卒中大鼠的保护作用
目的:探讨DAPT阻断Notch通路对动脉粥样硬化(AS)基础上缺血性脑卒中模型大鼠的保护作用.方法:24只健康雄性SD大鼠随机分为对照(control,n=6)组和模型(n=18)组,后者建立AS模型,然后再随机分为AS假手术(AS-sham)组、AS缺血性脑卒中(AS-ischemia)组以及AS缺血性脑卒中DAPT处理(AS-ischemia-DAPT)组,每组各6只;HE染色观察大鼠颈动脉组织病理变化,全自动生化分析仪检测大鼠血液甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;酶联免疫反应检测大鼠血清炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blot检测大鼠颈动脉组织中Notch1和Hes1以及脑组织中核因子κB(NF-κB)和Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达水平.结果:Notch信号通路抑制剂DAPT能显著缓解AS大鼠动脉内膜层增厚以及血管狭窄,减少AS斑块形成.与AS-ischemia组大鼠相比,AS-is-chemia-DAPT组大鼠血脂和炎症因子水平均显著降低(P<0.05),且颈动脉组织中Notch1和Hes1以及脑组织中NF-κB和TLR4的蛋白表达也显著降低(P<0.05).结论:DAPT阻断Notch通路不仅可以改善AS缺血性脑卒中大鼠的血脂水平,还可以抑制血清炎症因子释放以及NF-κB/TLR4通路的激活,从而改善AS缺血性脑卒中的症状.
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β1-肾上腺素受体自身抗体通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡
目的:探讨内质网应激在β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)引起心肌细胞凋亡中的作用.方法:采用β1-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段主动免疫大鼠,应用SA-ELISA法检测大鼠血清中β1-AA的水平,TUNEL染色检测心肌组织的凋亡水平,Western blot法和免疫组化法检测心肌组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及caspase-12的蛋白表达.利用亲和层析法纯化的β1-AA处理H9c2心肌细胞,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡;采用内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)预处理H9c2心肌细胞,再给予β1-AA干预,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡的变化情况.结果:与对照组相比,主动免疫大鼠血清中β1-AA水平在免疫2周时显著增加,进一步增加至8周,并且主动免疫2周大鼠心肌组织凋亡率明显升高,持续升高至8周.与对照组相比,主动免疫大鼠心肌组织中GRP78、CHOP及caspase-12的蛋白表达在免疫4周和8周时均明显增加.β1-AA引起H9c2心肌细胞活力持续降低,凋亡明显增加.与β1-AA单独处理组相比,内质网应激抑制剂4-PBA预处理H9c2心肌细胞可以有效逆转β1-AA诱导的细胞凋亡增加和活力下降.结论:β1-AA可以通过激活内质网应激诱导心肌细胞凋亡.
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葛根素对脑缺血再灌注大鼠神经功能与大脑皮质突触形态结构及参数的影响
目的:观察缺血再灌注(IR)大脑皮质突触形态结构及参数的变化,探讨葛根素(Pue)干预的神经保护作用.方法:将69只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(IR组)、Pue组和尼莫地平(NIM)阳性对照组(NIM组),sham组15只,后3组每组18只.采用线栓法制作局灶性大脑中动脉IR模型,缺血2 h再灌注24 h后,Pue组和NIM组分别注射Pue 8 mg·kg-1·d-1和NIM 1 mg·kg-1·d-1,sham组和IR组给予等体积生理盐水.于用药后3、7和14 d进行改良神经功能缺损评分,而后取缺血侧大脑皮质,电镜观察突触超微结构变化,测量分析突触界面曲率、突触间隙宽度、突触后致密物厚度等参数.结果:与IR组相比,相应时点Pue组和NIM组神经功能缺损评分均降低(P<0.05),这2组的差异无统计学意义.电镜下观察IR组突触前后膜和突触间隙模糊,突触前成分内突触囊泡减少,突触后致密带密度降低;Pue组和NIM组较IR组突触密集,凹形突触增加,常见2个活性点,突触后致密物增厚,间隙清晰,患侧皮质半暗带突触界面曲率增加,突触后致密物增厚,突触间隙减小(P<0.05);7 d组和14 d组的突触各形态结构参数均优于3 d组(P<0.05),两者之间的差异无统计学显著性.结论:Pue有可能通过修复突触结构,促进脑IR大鼠神经功能恢复.
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益母草碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化和miR-1表达的影响
目的:探讨益母草碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌纤维化和微小RNA-1(miR-1)表达的影响.方法:取10只SD大鼠作正常对照组;取另80只SD大鼠作为实验鼠,连续2周腹腔注射ISO诱导心肌纤维化动物模型.造模成功后将实验鼠随机分为5组:模型组,益母草碱低(7.5 mg·kg-1·d-1)、中(15 mg·kg-1·d-1)和高(30 mg·kg-1·d-1)剂量组,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂(0.3 mg·kg-1·d-1)组.连续给予相应药物腹腔注射2周后,以透射电镜观察左心室肌组织超微结构;Masson染色观察心肌纤维化程度;免疫组织化学法观察I型胶原和III型胶原的表达;酶联免疫吸附法检测左心室肌组织内皮素1(ET-1)和血管紧张素II(Ang II)含量;real-time PCR法检测左心室肌miR-1和ET-1 mRNA的表达水平;Western blot法检测p38 MAPK、β-肌球蛋白重链(β-MHC)及α-肌球蛋白重链(α-MHC)蛋白表达水平.结果:与模型组比较,高剂量益母草碱能明显改善左心室肌超微结构,降低心肌胶原容积分数(CVF)及I型胶原和III型胶原蛋白表达(P<0.05),减少左心室肌ET-1和Ang II含量(P<0.05),上调miR-1和α-MHC的蛋白表达水平(P<0.05),下调ET-1 mRNA及p38 MAPK和β-MHC蛋白表达水平(P<0.05).结论:益母草碱可抑制ISO诱导的大鼠心肌纤维化,其机制可能与影响miR-1的表达,抑制ET-1/p38 MAPK信号通路有关.
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Cx43沉默对机械应力作用下调控的软骨细胞自噬介导软骨基质合成的影响
目的:探究机械应力作用下通过沉默缝隙连接蛋白43(Cx43)调控软骨细胞自噬对软骨细胞的基质代谢的影响.方法:对小鼠成软骨细胞系ATDC5加载机械应力,采用qPCR和Western blot法检测ATDC5细胞中Cx43的mRNA和蛋白表达.将细胞分为空白对照组、机械应力组、Cx43 siRNA转染组、scramble siRNA转染组、机械应力+scramble siRNA转染组、机械应力+Cx43 siRNA转染组和机械应力+Cx43 siRNA转染+3-MA组,CCK-8法检测细胞活力,qPCR检测软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA的表达,1,9-二甲基亚甲蓝(DMMB)染色法检测细胞糖胺多糖(GAG)含量,Western blot法检测自噬相关蛋白beclin 1和LC3的表达.结果:机械应力刺激下,ATDC5细胞Cx43表达上调,细胞活性显著降低,II型胶原mRNA表达降低,GAG含量减少,beclin 1和LC3-II/LC3-I蛋白表达降低(P<0.05).转染Cx43 siRNA可下调Cx43的mRNA和蛋白的表达.机械应力作用下,Cx43沉默显著增强软骨细胞活力,提高II型胶原的mRNA表达和GAG含量,上调beclin 1和LC3-II/LC3-I的蛋白表达(P<0.05).此外,自噬抑制剂3-MA处理后,Cx43沉默对机械应力下软骨细胞的保护作用受到抑制.结论:Cx43沉默通过促进机械应力作用下小鼠软骨细胞自噬,从而促进软骨细胞的合成代谢,减轻软骨细胞在机械应力下的损伤.
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联合靶向阻断miR-29b/92b/106b抑制胃癌细胞生长及迁移
目的:本研究旨在寻找胃癌转移相关微小RNA(microRNA,miRNA,miR),揭示其对胃癌细胞生物学功能的影响,并探讨联合阻断候选miRNA在胃癌治疗中的临床应用价值.方法:收集发生淋巴结转移及无转移患者的胃癌标本各3例,采用miRNA表达芯片筛选转移相关的候选miRNA;将锁核酸修饰的候选miRNA的反义寡核苷酸转染BGC-823胃癌细胞株,运用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验及Transwell迁移实验分析候选miRNA抑制前后胃癌细胞生物学功能的变化;构建多西环素诱导多重靶向候选miRNA的裸鼠移植瘤模型,观察联合靶向阻断候选miRNA后,肿瘤细胞体内生长情况.结果:miRNA表达芯片发现miR-29b、miR-92b及miR-106b在发生淋巴结转移患者的胃癌组织高,并将它们确定为胃癌转移相关候选miRNA;分别在BGC-823细胞中抑制上述miRNA,可导致细胞活力减弱,凋亡诱导增加,迁移能力显著下降(P<0.05);同时,体内联合阻断miR-29b/92b/106b,裸鼠移植瘤的形成较对照组显著减少.结论:miR-29b、miR-92b及miR-106b与胃癌细胞的迁移有关,联合阻断上述miRNA可明显抑制胃癌细胞体内外生长.这3个miRNA可能作为潜在的治疗靶点.
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MicroRNA-146在糖尿病心肌病中的调控作用
目的:探讨微小RNA-146(miR-146)在糖尿病心肌病(DCM)发病机制中的作用,观察miR-146及其下游靶基因表达水平的变化.方法:60只雄性C57BL/6小鼠随机分为实验(DCM)组和对照(control)组,每组30只,实验组采用低剂量(50 mg/kg链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导建立糖尿病心肌病模型,对照组给予等量枸橼酸钠缓冲液腹腔注射,建模12周后取心脏做HE和Masson染色观察心脏病理改变,RT-qPCR检测miR-146 a和miR-146b及其下游靶基因白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)和TNF受体相关因子6(TRAF6)的mRNA表达,Western blot检测IRAK1和TRAF6的蛋白表达.结果:12周末HE染色显示,DCM组心肌肥大,结构紊乱;Masson染色显示,DCM组心肌内胶原纤维增多;RT-qPCR检测结果显示,DCM组中miR-146a及miR-146b较control组表达明显减少(P<0.01),IRAK1的mRNA水平明显增高(P<0.01),而TRAF6的mRNA水平下降(P<0.01);West-ern blot检测结果显示DCM组的IRAK1蛋白表达增加,TRAF6的蛋白表达降低(P<0.01).结论:miR-146可能通过调节IRAK1介导的炎症反应参与糖尿病心肌损伤的发生发展.
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脐带间充质干细胞移植治疗子宫切口瘢痕缺陷大鼠的疗效观察
目的:将脐带华通胶间充质干细胞(WJMSCs)移植到子宫切口瘢痕缺陷(PCSD)模型大鼠体内,探讨其治疗效果.方法:取雌性SD大鼠50只、将其随机分为3组:正常手术组(N-O组)10只、模型对照组(M-C组)20只和模型治疗组(M-T组)20只.孕第19天N-O组剖宫取胎后连续缝合子宫切口;M-C组与M-T组剖宫产术后子宫肌壁注射脂多糖(LPS)联合电凝(功率为10 W)子宫切缘,间断缝合切口.M-T组分A、B亚组(各10只),A组静脉注射0.5 mL+阴道灌注0.5 mL(1×109/L)WJMSCs,B组阴道灌注1 mL同浓度WJMSCs,每周1次,共3次;M-C亦分A、B亚组(各10只),与M-T组同样方法处理,仅将生理盐水替代WJMSCs.各组治疗后第1和4周,分别处死6和4只,留双侧子宫进行HE染色、Masson染色、肌动蛋白(actin)和细胞角蛋白免疫组化染色,通过体视学分析,检测子宫肌层和内膜的修复情况.结果:WJMSCs治疗后第1和4周,M-C组子宫肌层厚度和actin体积密度(Vv)均显著低于N-O组,肌层胶原纤维Vv和内膜缺陷率高于N-O组(P<0.05);WJMSCs治疗后第1和4周,M-T的A和B组的肌层厚度和actin Vv均显著高于M-C组,肌层胶原纤维Vv低于M-C组;M-C组内膜缺陷率高于其它组(P<0.05).结论:WJMSCs可促进PCSD大鼠子宫肌层结构和功能的修复.静脉+局部联合治疗和单纯阴道治疗效果无明显差别.
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黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响
目的:探讨黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响.方法:选取清洁级雄性SD大鼠70只随机分为假手术组、脑缺血/再灌注组、溶剂对照组、黄芪甲苷组、黄芪甲苷+自噬抑制剂组、自噬抑制剂组和自噬激活剂组.采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型.观察大鼠神经缺损症状,根据Zea Longa评分标准挑选模型成功的大鼠;采用TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;尼氏染色观察大鼠神经细胞形态学变化;透射电子显微镜观察细胞自噬现象;Western blot检测beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达量的变化.结果:假手术组无神经缺损症状,未出现脑梗死灶,尼氏体丰富、染色均匀.与假手术组相比,脑缺血/再灌注组出现明显的脑梗死灶,神经细胞坏死增多,尼氏体数量减少、着色较浅,透射电镜下可见典型的自噬体,自噬标志蛋白beclin-1和LC3-Ⅱ表达增加(P<0.05).与脑缺血/再灌注组相比,黄芪甲苷组和自噬激活剂组可明显减小脑梗死体积,神经细胞有不同程度的恢复,尼氏体稍增多,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量均增加(P<0.05);自噬抑制剂组脑梗死体积增大,神经细胞坏死严重,尼氏体减少,着色变浅,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量均减少(P<0.05);溶剂对照组无明显变化.与黄芪甲苷组比较,黄芪甲苷+自噬抑制剂组和自噬抑制剂组脑梗死体积增加,神经细胞坏死增多,尼氏体数量减少,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量降低(P<0.05).结论:黄芪甲苷可通过激活自噬而减轻脑缺血/再灌注损伤,从而发挥神经保护作用.
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lncRNA PCAT1表达下调抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、生长、侵袭、迁移及上皮-间充质转化
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)PCAT1对口腔鳞状细胞癌(oral squa-mous cell carcinoma,OSCC)细胞的增殖、生长、侵袭及迁移的影响,并探讨其可能机制.方法:采用Lipofectamine 200将PCAT1 siRNA转染入OSCC细胞分别利用RT-qPCR和Western blot检测相关基因的mRNA及蛋白表达;分别利用CCK-8实验和集落形成实验检测OSCC细胞的增殖及生长能力;利用细胞侵袭实验和细胞迁移实验检测OSCC细胞的侵袭及迁移能力.结果:PCAT1在OSCC组织和细胞中的表达与癌旁正常组织和正常口腔细胞黏膜角质细胞相比显著上调(P<0.05).转染PCAT1 siRNA可以显著降低PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的表达(P<0.05).PCAT1的低表达可以显著抑制Tca8133和TSCCa细胞的增殖、生长、侵袭及迁移(P<0.05).PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的低表达可以抑制ZEB1、N-cadherin和vimentin的mRNA及蛋白表达,同时增加E-cadher-in的mRNA及蛋白表达(P<0.05).结论:沉默PCAT1能够抑制OSCC细胞的增殖、生长及转移,该作用可能与调控上皮-间充质转化有关.
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左卡尼汀对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护机制研究
目的:探讨左卡尼汀(L-carnitine,LC)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病肾病(dia-betic nephropathy,DN)大鼠肾脏保护的分子机制.方法:对雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射STZ(65 mg/kg)建立糖尿病模型,造模成功大鼠给予LC(50 mg·kg-1·d-1或200 mg·kg-1·d-1)12周治疗,检测各组大鼠的肾功能、24 h尿蛋白排泄率和肾小球硬化程度;免疫组化和Western blot法分别检测炎性因子、致纤因子、核因子κB和细胞凋亡调控基因的表达.结果:LC治疗可明显减轻糖尿病大鼠肾小球硬化,保持足细胞数量,这些改变伴随着尿蛋白排泄率的减少和肾功能的改善.在分子水平上,LC可下调炎性介质和致纤因子的表达,调节细胞凋亡调控基因的表达,此作用可能与干预核因子κB信号通路有关.结论:LC对STZ诱导的DN大鼠具有抗炎、抗肾小球硬化的肾脏保护作用.
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大鼠急性心肌梗死后NLRP3炎性体-IL-1β信号轴激活与End-MT的关系
目的:研究在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)引发的心肌纤维化过程中,NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)是否存在同一性.方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)与AMI组(n=15),术后28 d采用Masson染色检测心肌纤维化水平;Western blot检测NLRP3炎性体(NLRP3、ASC、pro-caspase-1和caspase-1)、内皮细胞标志物(CD31和VE-cad-herin)及间充质细胞标志物(α-SMA和FSP1)的表达;酶联免疫吸附法检测NLRP3炎性体下游因子IL-1β的表达.结果:与假手术组相比,冠脉结扎组AMI大鼠心肌纤维化水平、End-MT进展程度、NLRP3炎性体活性及caspase-1和IL-1β的表达均显著增加(P<0.05).结论:NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与End-MT进程具有显著同一性,提示NLRP3炎性体-IL-1β作为激活End-MT的潜在靶点将为研究AMI后心肌纤维化及心力衰竭提供新的理论依据.
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PTEN对缺氧复氧心肌H9c2细胞凋亡、氧化损伤及免疫炎症因子水平的影响
目的:研究第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)对缺氧复氧条件下心肌H9c2细胞凋亡、氧化损伤及免疫炎症因子水平的影响.方法:用H9c2细胞构建缺氧复氧模型.细胞转染PTEN小干扰RNA(siRNA)和阴性对照siRNA,缺氧复氧处理后,RT-PCR和Western blot分别测定细胞中PTEN的mRNA和蛋白水平.MTT法测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡,用黄嘌呤氧化法测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,用二硝基苯肼法测定培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA测定培养液上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot法测定细胞中cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平.结果:缺氧复氧处理后H9c2细胞中PTEN的mRNA和蛋白水平均明显升高(P<0.05).转染PTEN siRNA后的细胞中PTEN的mRNA和蛋白水平明显下降(P<0.05).缺氧复氧处理后H9c2细胞活力下降,凋亡率升高,细胞中cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平升高,MDA水平也升高,SOD活性下降,培养液上清中LDH、TNF-α、IL-1β和IL-6的水平升高(P<0.05),而下调PTEN可以部分拮抗缺氧复氧对H9c2细胞活力、凋亡率、MDA水平、SOD水平及培养液上清中LDH、TNF-α、IL-1β和IL-6水平的影响.结论:下调PTEN可以减轻缺氧复氧诱导的心肌H9c2细胞氧化损伤,减少H9c2细胞凋亡,降低TNF-α、IL-1β和IL-6的水平.
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干扰维生素D3上调蛋白1通过调控Shh影响高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡
目的:探讨维生素D3上调蛋白1(VDUP-1)对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及机制.方法:人近端肾小管上皮HK-2细胞用高糖处理后,real-time PCR和Western blot检测细胞中VDUP-1的水平.HK-2细胞转染VDUP-1小干扰RNA,real-time PCR和Western blot检测抑制效果.高糖条件培养VDUP-1表达下调的HK-2细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中caspase-3和caspase-9的活性,ELISA法测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western blot检测细胞中音猬因子(Shh)信号通路关键蛋白Patched 1(Ptch1)、Smoothened(Smo)、锌指蛋白Gli2和Shh的水平.用外源性Shh处理HK-2细胞,Western blot检测Ptch1、Smo和Gli2的水平.用外源性Shh处理VDUP-1表达下调的HK-2细胞,高糖处理后,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中caspase-3和caspase-9的活性,ELISA法测定培养液上清中TNF-α含量.结果:高糖处理后,HK-2细胞中VDUP-1的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05).转染VDUP-1小干扰RNA后,HK-2细胞中VDUP-1的mRNA和蛋白水平下降(P<0.05).与正常培养的细胞相比,高糖处理后HK-2细胞凋亡率显著升高,细胞中caspase-3和caspase-9活性明显升高,TNF-α含量亦明显升高(P<0.05);下调VDUP-1表达后的HK-2细胞经高糖处理后细胞凋亡率显著降低,细胞中caspase-3和caspase-9活性也明显降低(P<0.05).高糖培养后细胞中Ptch1、Smo、Gli2和Shh的蛋白水平下降,而下调VDUP-1表达部分拮抗高糖对HK-2细胞中Ptch1、Smo、Gli2和Shh表达的影响.外源性Shh可以促进细胞中Ptch1、Smo和Gli2的表达,抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡和分泌TNF-α,与下调VDUP-1共同抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡.结论:干扰VDUP-1表达可能通过激活Shh信号通路抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和分泌TNF-α.
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高压氧预处理通过HIF-1α/VEGF通路减轻大脑缺血再灌注损伤
目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路在高压氧(HO)预处理减轻缺血再灌注(IR)模型大鼠大脑损伤过程中的作用.方法:选择SPF级健康雄性成年SD大鼠32只,使用随机数字软件将其分为对照组(control组)、IR组、HO-IR组和HO-IR-HIF-1α抑制剂组(HO-IR-I组).IR模型通过大脑中动脉栓塞法制作,对照组仅分离暴露相应血管.HO-IR组和HO-IR-I组大鼠均在制模前在动物高压舱内进行HO治疗4周(每天1次);HO-IR-I组每天在HO预处理前,经腹腔注射4 mg/kg的HIF-1α抑制剂YC-1[3-(5''-hydroxy-methyl-2''-furyl)-1-benzylindazol].在制作模型第1天和第7天行神经行为学评估,第7天观察结束后麻醉处死大鼠,取脑组织测量梗死体积,Western blot检测HIF-1α/VEGF通路相关蛋白及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的水平,TUNEL法检测凋亡细胞数.结果:与control组比较,IR组、HO-IR组和HO-IR-I组大鼠的神经功能评分降低,脑梗死体积比例及HIF-1α、VEGF、Bax和Bcl-2的蛋白表达均增加,凋亡细胞数量亦增加(P<0.05);与IR组比较;HO-IR组和HO-IR-I组的神经功能评分升高,HIF-1α、VEGF和抑凋亡蛋白Bcl-2表达上调,脑梗死体积比例降低,促凋亡蛋白Bax表达下调,凋亡细胞数量减少(P<0.05);与HO-IR组比较,HO-IR-I组的神经功能评分降低,HIF-1α、VEGF和抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调,脑梗死体积比例升高,促凋亡蛋白Bax表达上调,凋亡细胞数量增加(P<0.05).结论:HO预处理减轻大脑IR损伤的机制可能与通过诱导HIF-1α/VEGF通路调节凋亡进程有关.
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RXR介导的自噬通路在大鼠肺缺血/再灌注损伤中的调控作用
目的:探讨维甲酸X受体(RXR)介导的细胞自噬通路对大鼠肺缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及机制.方法:以雄性SPF级SD大鼠为研究对象,随机分成7组(n=10):正常对照(C)组、假手术(S)组、S+RXR激动剂9-顺式维甲酸(SRA)组、S+RXR抑制剂HX531(SH)组、I/R组、I/R+9-顺式维甲酸(RA)组和I/R+HX531(HX531)组.采用大鼠在体左侧肺门夹闭30 min、再灌注180 min的方法制备肺缺血/再灌注模型.C组不做任何处理;S组只开胸,不夹闭肺门,机械通气210 min;I/R组行左侧肺门夹闭30 min,再恢复灌注180 min;SRA组、SH组、RA组与HX531组在术前90 min腹腔注射9-顺式维甲酸(5 mg/kg);SH组和HX531组在术前30 min腹腔注射HX531(5 mg/kg).再灌注结束后取左肺组织,行肺组织损伤评估(IQA);采用HE染色法观察肺组织病理学形态;免疫荧光标记法观察各组肺组织RXRα的表达情况;采用RT-PCR和Western blot分别检测各组大鼠自噬相关分子LC3、beclin 1和mTOR的mRNA和蛋白水平.结果:与C组、S组、SRA组和SH组相比,I/R组、RA组和HX531组肺IQA、LC3和beclin 1 mRNA及LC3-II和beclin 1蛋白均有明显升高,mTOR的mRNA及p-mTOR的蛋白水平明显降低,组织形态学结构亦有损伤性变化;与I/R组相比,RA组肺IQA、LC3和beclin 1 mRNA水平及LC3-II和beclin 1蛋白水平均有明显下降,RXRα和mTOR的mRNA及p-mTOR的蛋白水平明显增高,肺组织结构损伤性的变化亦有明显减轻,而HX531组与I/R组比较无显著差异;与RA组相比,HX531组的肺IQA、LC3和beclin 1 mRNA水平及LC3-II和beclin 1蛋白水平均有明显升高,RXRα和mTOR的mRNA及p-mTOR蛋白水平明显降低,肺组织形态学结构的损伤性变化加重.结论:激活RXR可有效减轻大鼠肺缺血/再灌注损伤,对肺组织有一定的保护作用,具体机制可能与其抑制细胞自噬通路有关.
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KSHV RTA通过上调宿主细胞survivin表达促进病毒子代产生
目的:研究卡波西肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)复制及转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)上调宿主细胞存活蛋白(survivin)表达的生物学意义.方法:构建RNA干扰慢病毒载体,筛选稳定感染的JSC细胞,用Western blot证实survivin抑制的KSHV阳性细胞成功构建.Survivin抑制的JSC细胞经TPA诱导48 h后,用PCR检测病毒子DNA;在TPA诱导24、48和72 h后分别用real-time PCR和PI染色流式细胞术检测病毒裂解基因ORF57和TK表达及细胞凋亡率.结果:TPA诱导的JSC-shSur细胞与对照组细胞相比,病毒子代产生减少,病毒裂解基因表达下调,细胞凋亡率增加(P<0.05).结论:KSHV RTA能够利用survivin信号通路延缓裂解性感染宿主细胞的凋亡,并促进病毒子代产生.
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表达BG4蛋白对人胃癌AGS细胞凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响
目的:构建G-四链体抗体BG4基因的真核表达载体pEGFP-N1-BG4,探讨转染该真核表达载体致BG4蛋白过表达对人胃癌细胞株AGS凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响.方法:以BG4基因原核表达载体pSANG10-BG4为模板,PCR扩增出含有BG4基因的目的片段,经TA克隆与pMD18-T载体连接,测序正确后,经Sac I和Pst I双酶切,与真核表达载体pEGFP-N1连接后转化感受态大肠杆菌DH5α,并进行酶切分析和序列测定,Western blot鉴定BG4蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;DAPI法及HE染色检测各组细胞凋亡;qPCR和West-ern blot检测空白对照组、pEGFP-N1组和pEGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白表达的变化.结果:酶切分析显示,目的基因条带与预期结果相符,DNA测序表明克隆的BG4基因序列正确,Western blot结果表明转染pEGFP-N1-BG4质粒可以成功表达BG4蛋白.转染pEGFP-N1-BG4质粒可抑制细胞进入S期.DAPI法及HE染色显示,pEGFP-N1-BG4组出现明显的新月形核和核固缩的细胞凋亡现象.qPCR和Western blot结果表明,pEGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶表达受到抑制.结论:用pEGFP-N1-BG4真核表达载体转染胃癌细胞株AGS可以抑制该细胞端粒酶逆转录酶表达,诱导细胞凋亡.
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乳腺癌中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达及意义
目的:本研究旨在探讨乳腺癌组织和细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt-1和β-catenin的表达及意义.方法:选取我院于2015年1月～2017年1月间收治的150例乳腺癌患者作为研究对象.150例乳腺癌的肿瘤组织样本(实验组)来源于手术切除的、临床病理资料保存完整的乳腺癌石蜡切块;相应的临近非肿瘤组织样本(对照组)取自距离肿瘤组织0.5～1 cm的上述乳腺癌患者相应癌旁组织.采用real-tme PCR和Western blot法检测Wnt-1和β-catenin的表达情况.将乳腺癌细胞MCF-7分为3组:阴性对照组(MCF-7细胞)、激动剂组[MCF-7细胞+Wnt3a(1 mg/L)]和拮抗剂组[MCF-7细胞+DKK1(16μmol/L)].采用real-time和Western blot检测Wnt-1和β-catenin表达情况.结果:与对照组相比,实验组患者Wnt-1和β-catenin的mRNA和蛋白表达量均升高(P<0.05).实验组患者肿瘤组织的Wnt-1表达阳性率和β-catenin表达阳性率均高于对照组(P<0.05).Wnt-1表达与乳腺癌患者肿瘤转移(x2=5.352,P=0.021)、肿瘤分期(x2=9.412,P=0.002)及肿瘤直径(x2=9.412,P=0.002)密切相关(P<0.05).β-catenin表达与乳腺癌患者肿瘤转移(x2=9.851,P=0.002)、肿瘤分期(x2=5.661,P=0.017)密切相关(P<0.05).与对照组相比,激动剂组Wnt-1和β-catenin mRNA和蛋白表达量升高(P<0.05);与对照组相比,拮抗剂组Wnt-1和β-catenin mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05).结论:乳腺癌中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt-1和β-catenin表达上调,且其表达与肿瘤恶性状态密切相关.
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9型腺相关病毒介导RNA干扰抑制p65基因表达对血管紧张素Ⅱ诱导H9c2细胞凋亡的影响
目的:以9型腺相关病毒(AAV9)介导的RNA干扰抑制大鼠心室肌H9c2细胞中p65基因表达,研究其在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下对H9c2细胞凋亡的影响,并阐明其可能机制.方法:分别将rAAV9-eGFP及rAAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA按转染复数(MOI)=4×106 vg/cell转染至H9c2细胞,在荧光倒置显微镜下观察eGFP的阳性表达情况,采用流式细胞术检测其转染效率,并用Western blot法分析p65的表达情况.CCK-8法检测病毒对H9c2细胞活力的影响.流式细胞术分析各组细胞的凋亡情况.结果:病毒转染48 h后eGFP开始有表达,并且表达强度随着时间延长而增加,第5天达高值,此时流式细胞术检测转染率为(52.7±1.9)％.与空白组相比,转染病毒后H9c2细胞的活力无明显变化.静息状态下H9c2细胞的NF-κB p65有一定活性,给予Ang II刺激后NF-κB p65的活性明显增高,而转染rAAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA可有效抑制NF-κB p65的活性.流式细胞术检测发现Ang II刺激组的凋亡程度明显高于空白组,而rAAV9-eGFP-NF-κB p65-siRNA组的细胞凋亡明显受到抑制.结论:通过rAAV9介导的RNA干扰能有效抑制H9c2细胞NF-κB p65基因的表达;抑制p65基因表达对H9c2细胞活力无明显抑制,但能减少Ang II诱导下的细胞凋亡.
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糖尿病皮肤溃疡干细胞治疗及作用机制的研究进展
在我国,糖尿病患者的数量逐年增多,过去20年里,我国糖尿病患病人数呈爆炸式增长. 据估计,截止到2017年全球患病人数约为4.25 亿,预计到2045年将达到6.29亿. 我国是全球糖尿病人数多的国家, 2017 年糖尿病人数为1.14 亿,预计到2045年将达到 1.5 亿左右. 糖尿病皮肤溃疡( dia-betic cutaneous ulcers ,DCU)是指糖尿病患者由于长期血糖控制不良,进而引起神经病变及不同程度的各种末梢血管病变而导致下肢感染、溃疡形成和/或深部组织的破坏. 调查显示,大约60％的非创伤性小腿截肢是由糖尿病引起的, DCU是糖尿病患者致死致残的严重并发症之一,严重影响患者的生活质量. 传统的药物治疗、血管搭桥术、经皮内血管形成手术和支架置入术等方法都有其局限性[1].
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1985 | 01 02 03 04 z1 |
