天津医药杂志
Tianjin Medical Journal 천진의약
- 主管单位: 天津市卫生局
- 主办单位: 天津市医学科学技术信息研究所
- 影响因子: 1.10
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 0253-9896
- 国内刊号: 12-1116/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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儿童卵巢扭转64例诊治体会
目的:总结儿童卵巢扭转的早期正确诊断和治疗方法。方法回顾性分析我院2005年1月-2012年10月间收治的64例卵巢扭转病例,总结各个年龄段患儿的临床表现,并结合指肛、B超、CT检查的主要征象进行早期诊断,所有患儿均行腹腔镜手术探查。患儿均表现有下腹部绞痛,B超、CT检查发现在盆腔有不均质肿块,提示早期有卵巢扭转可能。指肛检查检出率达到(45/64)70.3%。结果所有患者均行腹腔镜手术探查,5例切除卵巢,其余均保守治疗,术后随访良好。结论儿童卵巢扭转极易误诊。超声、CT、指肛检查以及积极进行腹腔镜手术探查是诊断兼治疗的有效措施。
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预注射供体凋亡细胞对移植胰岛存活及外周血T淋巴细胞功能的影响
目的:研究预先注射供体来源的凋亡细胞对移植胰岛存活时间及外周血T淋巴细胞功能的影响。方法分别利用直线加速器照射及热休克(56℃水浴箱震荡摇1 h)的方法获取供体凋亡细胞和坏死细胞。利用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法将接受胰岛移植的大鼠42只诱导为糖尿病模型大鼠后,随机分为4组,分别在胰岛移植前1周注射生理盐水(9只)、正常细胞(12只)、凋亡细胞(12只)及坏死细胞(9只);在注射处理后第7天进行肾包囊下胰岛移植。通过血糖变化评估胰岛存活时间,并在胰岛移植前(注射后1周)、胰岛移植后1周、2周以及发生排斥反应后取3只大鼠采取外周血,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测外周血T淋巴细胞的增殖功能;利用多功能流式点阵仪检测外周血T淋巴细胞亚群细胞因子干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-10的水平及酶联免疫方法测定转化生长因子(TGF)-β1水平。结果凋亡细胞预处理能明显延长胰岛移植物存活时间,并抑制外周血T淋巴细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力;同时在移植后1周、2周抑制了外周血IFN-γ的分泌,而增加了IL-10、TGF-β1的分泌(均P<0.05)。结论凋亡细胞可能通过抑制外周血T淋巴细胞的增殖活化能力,改变不同T细胞亚群细胞因子的分泌调节受体的免疫反应,从而抑制排斥反应,延长移植物存活。
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氨基酸构型对多肽纳米纤维体内分布的影响
目的:比较由L构型和D构型氨基酸自组装形成的纳米纤维在体内分布的差异,为不同构型氨基酸自组装纳米多肽的体内应用提供指导。方法固相合成法合成多肽Nap-GFFYGRGD(L-肽)和Nap-GDFDFDYGRGD (D-肽),利用核磁和质谱对多肽分子进行结构表征。多肽溶液通过煮沸、冷却、自组装形成纳米纤维(L-纤维和D-纤维),透射电镜观察纳米纤维的微观形貌。125I标记多肽分子后,由其自组装形成的纳米纤维通过尾静脉注射入小鼠体内,分别在1、3、6和12 h采血并处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉、脑等主要器官,用γ计数仪测量其放射性强度。结果 L-肽和D-肽均可自组装形成纳米纤维,纤维直径约为10~20 nm,且两者微观形貌无明显差异。两种纳米纤维在体内的分布差异有统计学意义。D-纤维在注射后1 h的血液浓度为(8.17±0.32)%ID/g,但较迅速地从血液中清除;L-纤维浓度为(5.96±0.30)%ID/g,在注射后6 h基本保持不变。D-纤维主要分布于肝中而L纤维主要分布在胃中。结论氨基酸构型(D/L)对多肽纳米纤维在体内的分布影响显著,在未来的医学应用中考虑氨基酸构型对体内分布的影响有可能更好地指导多肽纳米纤维的应用。
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联合抗氧化剂对间歇低氧诱导小鼠胰腺损伤保护作用的研究
目的:探讨抗氧化剂氮氧化物4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(TEMPOL)和还原型谷胱甘肽(GSH)对间歇低氧(IH)小鼠胰腺损伤的保护作用。方法雄性C57BL/6J小鼠50只按随机数字表法随机均分为正常对照(CON)组、IH组、IH+TEMPOL组、IH+GSH组和IH+TEMPOL+GSH组。成功制备动物模型后,测定各组小鼠胰岛素抵抗(IR)水平,胰腺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)的含量及胰腺β细胞的凋亡率。结果 IH组血糖水平高于CON组,IH+TEMPOL+GSH组血糖水平低于IH组(P<0.01)。IH组胰腺组织中MDA(μmol/g蛋白)水平高于CON组(4.48±0.25 vs 1.94±0.21),IH组的SOD(U/mg蛋白)和GR(mg/g蛋白)水平低于CON组(61.52±3.33 vs 100.05±7.26,107.81±7.54 vs 170.54±4.90,P<0.01);IH+TEMPOL+GSH组MDA水平(2.07±0.35)低于IH组,IH+TEMPOL+GSH组SOD及GR水平(96.68±5.85和166.87±5.75)高于IH组(P<0.01)。IH组较胰腺β细胞凋亡率(%)高于CON组(2.43±0.07 vs 0.54±0.06),IH+TEMPOL+GSH组凋亡率(0.56±0.06)低于IH组(P<0.01)。IH组、IH+TEM-POL组和IH+GSH组与间上述各种指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论抗氧化剂TEMPOL联合GSH对IH所致小鼠胰腺损伤具有明显的保护作用,而单独应用抗氧化剂TEMPOL或GSH对IH所致胰腺损伤无明显的保护作用。
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地塞米松对大鼠骨密度及体成分的影响
目的:探讨不同剂量地塞米松对大鼠骨密度(BMD)和体成分的影响。方法3月龄SD雌性大鼠40只,按随机数字表法分为对照组(生理盐水),地塞米松低剂量组(1 mg/kg)、中剂量组(2.5 mg/kg)和高剂量组(5 mg/kg),每组10只,每周2次肌内注射。给药前、给药4周后应用DEXA骨密度仪测定大鼠全身BMD和体成分。结果干预1~4周后不同剂量地塞米松干预组体质量均较对照组下降(P<0.01)。干预4周后,对照组总BMD、股骨BMD、总骨矿含量(BMC)及全身、躯干、腿部脂肪含量均较干预前增加(P<0.01),全身、躯干肌肉含量均较干预前下降(P<0.01);低剂量组、中剂量组大鼠股骨BMD、总BMC、腿部脂肪含量、腿部肌肉含量均低于对照组(P<0.05);低剂量组、中剂量组股骨BMD、腿部脂肪含量均低于高剂量组(P<0.05)。结论中、低剂量地塞米松对SD大鼠股骨BMD及腿部成分的影响更大。
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HIF-1α在间歇低氧合并肺气肿大鼠肝细胞凋亡中的机制研究
目的:探讨间歇低氧(IH)合并肺气肿对大鼠肝脏低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Bax、Bcl-2表达的影响及HIF-1α在肝细胞凋亡中的作用机制。方法将60只大鼠按随机数字表法均分为4组:正常对照组,正常饲养;IH组,每天9:00-17:00于低氧舱内交替通入30 s氮气和90 s空气,8 h/d;肺气肿组,每天8:00和18:00于熏箱内熏烟各30 min;IH合并肺气肿组,上述IH组和肺气肿组方法的联合。暴露14周后,处死大鼠,采用荧光实时定量(qRT)-PCR法测定肝组织中HIF-1α、Bax、Bcl-2表达水平。结果 IH合并肺气肿组HIF-1αmRNA、Bax mRNA、Bax/Bcl-2水平较正常对照组、IH组、肺气肿组升高(均P<0.05),Bcl-2 mRNA水平较正常对照组、肺气肿组降低(均P<0.05),较IH组无显著差异(P>0.05);HIF-1α与Bax、Bax/Bcl-2呈正相关(r分别为0.732、0.699),与Bcl-2呈负相关(r=-0.705)。结论 IH合并肺气肿可诱导肝细胞HIF-1αmRNA、Bax mRNA、Bax/Bcl-2表达上调,HIF-1α与Bax、Bcl-2相关,HIF-1α可能通过调控凋亡基因Bax、Bcl-2的表达来参与肝细胞的凋亡。
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肺气肿合并间歇低氧大鼠模型肝脏的氧化应激及炎症损伤
目的:探讨肺气肿合并间歇低氧对大鼠肝脏的氧化应激和炎症损伤。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分成正常组(A组)、肺气肿组(B组)、间歇低氧组(C组)和肺气肿合并间歇低氧组(D组)。A组正常饲养,不予处理;B组每天熏烟2次,每次30 min;C组以5%O2/平衡N230 s和空气90 s交替通气约8 h/d;D组为B、C组的措施联合。持续暴露8周后从各组中均随机抽取5只取股动脉血,测其血气值;采集各组剩余大鼠的肺脏,HE染色后光镜下观察并计算平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN);肝脏染色后光镜观察计算肝脏炎症损伤的病理评分,测定肝脏白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)的水平。结果 B和D组大鼠肺病理均呈明显肺气肿样改变;B、D组MLI均高于A、C组,MAN均低于A、C组(P<0.05);B、C和D组大鼠肝脏总SOD及CAT的活力值均低于A组,且D组低于B、C组(P<0.05),B、C和D组大鼠的肝脏的MDA的水平均高于A组,且D组明显高于B、C组(P<0.05)。B、C、D组肝脏IL-6、TNF-α的含量及肝脏炎症损伤病理评分均高于A组,且D组高于B、C组(P<0.05)。结论肺气肿和间歇低氧在引起肝脏的氧化应激和炎症损伤的进展过程中有协同作用。
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大鼠缺血性急性肾损伤对海马CA1区的形态学影响
目的:观察大鼠缺血性急性肾损伤对海马CA1区神经元的形态学影响。方法成功制造缺血性急性肾损伤大鼠模型后应用光镜电镜技术观察海马CA1区形态学变化,应用免疫组织化学及免疫印迹技术对海马组织中聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)和caspase-3的表达进行定位观察和定量检测分析。结果肾缺血60 min再灌注24 h后光镜下海马CA1区锥体细胞层出现了固缩性神经元,经电子显微镜观察发现细胞萎缩,基质电子密度增高,细胞核萎缩但无染色质固缩表现,内质网扩张、线粒体肿胀变性。免疫组化染色及免疫印迹结果显示缺血性急性肾损伤的海马caspase-3阴性表达,而PARP-1表达明显增强。结论大鼠缺血性急性肾损伤可引起海马CA1区锥体细胞层神经元固缩性损伤,即细胞质性死亡,推测这种损伤可能属于PARP-1介导的细胞死亡。
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双联抗血小板聚集药物致小肠损伤的动物实验研究
目的:探讨双联抗血小板聚集药物对大鼠小肠损伤的情况。方法 SD大鼠80只随机分为阴性对照组、阿司匹林组、氯吡格雷组、阿司匹林联合氯吡格雷组(双抗组),每组20只,每天分别予生理盐水、阿司匹林10.41 mg/kg、氯吡格雷7.81 mg/kg、阿司匹林10.41 mg/kg联合氯吡格雷7.81 mg/kg灌胃,共14 d。所有大鼠于末次给药后手术,观察小肠损伤情况,取空肠液行细菌培养,溴化乙锭(EB)行小肠通透性检测,按照Chiu方法进行小肠黏膜病理损伤评分。结果各实验组大鼠小肠黏膜均出现不同程度损伤,病理损伤评分均高于阴性对照组,且以双抗组高(3.450±1.356)分。与对照组[(54.012±3.513)μg/g]相比,各实验组大鼠小肠通透性均明显增高,双抗组高于阿司匹林组及氯吡格雷组(μg/g:130.533±29.631 vs 90.965±3.765 vs 66.800±4.853,P<0.001)。双抗组大鼠空肠液细菌总量较对照组明显增多(CFU/mL:61924.805±1751.159 vs 18154.280±1153.376,P<0.001),肠杆菌与肠球菌比例较对照组明显下降(0.220±0.089 vs 1.007±0.148,P<0.001)。结论常规剂量双联抗血小板聚集药物的使用较单一用药造成大鼠小肠损伤程度加重,肠道细菌数量增多,菌群失调、小肠通透性的增高都可能是小肠黏膜损伤的重要表现。
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459例女性健康体检者HPV基因型及高危因素分析
目的:研究459例女性健康体检者宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染情况、基因型别分布及其高危因素。方法采用巢式PCR和焦磷酸测序技术检测459例受检者宫颈脱落细胞中HPV分型情况,同时收集受检者一般资料、月经婚育史、生殖道疾病既往史,分析HPV感染的相关危险因素。结果 HPV阳性检出率为17.9%,共检测出7种高危基因型别,其中HPV16检出率高(9.8%),其次是HPV58(7.0%),HPV18(5.2%)。单纯感染、双重感染、多重感染的检出率分别是9.6%、4.8%、1.5%。饮酒、经济收入<3000元/月、性伴侣>1个、性生活频率>4次/月、伴有宫颈糜烂是HPV感染的危险因素(P<0.05)。结论 HPV DNA基因型别检测可为宫颈癌的早期筛查和HPV疫苗的研发使用提供重要信息,为高危人群的早预防、早诊断、早治疗提供重要依据。
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血清人附睾蛋白4检测对肺癌的诊断意义
目的:探讨血清人附睾蛋白4(HE4)对肺癌的诊断价值,分析HE4在不同病理类型及TNM分期肺癌患者血清中的表达水平。方法选取47例肺癌患者和31例健康体检者为研究对象。根据病理类型及TNM分期分组,比较不同属性分组下各组血清HE4水平;以病理诊断为金标准,绘制血清HE4、血清癌胚抗原(CEA)诊断肺癌的ROC曲线。结果肺癌患者的血清HE4水平[(253.47±170.03)pmol/L]较健康体检者的血清HE4水平[(84.09±51.03) pmol/L]升高(t=5.365)。不同病理类型[非小细胞癌组(241.34±161.81)pmol/L vs小细胞癌组(293.5±198.76)pmol/L,t=0.847;鳞癌组(304.29±287.61)pmol/L、腺癌组(224.39±122.15)pmol/L,与小细胞癌组比较F=0.969]及不同TNM分期[Ⅰ~Ⅲ期组(255.27±183.04)pmol/L vsⅣ期组(288.16±216.49)pmol/L,t=0.528]的肺癌患者血清HE4水平差异均无统计学意义。血清HE4诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.902,当HE4浓度为149.145 pmol/L时,其诊断肺癌的敏感度和特异度分别为72.3%和90.3%,检验效能高于CEA(AUC为0.765;当CEA浓度为4.685μg/L时,敏感度和特异度分别为57.4%和83.9%)。结论血清HE4对肺癌的诊断有较高的敏感度及特异度;不同病理类型及TNM分期肺癌患者血清HE4水平无明显差异;检测患者血清HE4有助于诊断肺癌。
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子宫内膜异位症盆腔痛患者血清雌二醇与TNF-α水平变化的研究
目的:探讨子宫内膜异位症(EMS)盆腔痛患者血清雌二醇(E2)及肿瘤坏死因子(TNF)-α的变化及其相关性。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定113例EMS盆腔痛患者(轻度疼痛组37例,中度疼痛组41例,重度疼痛组35例)及30例非内异症患者(正常对照组)血清E2及TNF-α水平。结果轻度疼痛组E2及TNF-α水平与正常对照组比较差异无统计学意义;而中度及重度疼痛组E2及TNF-α水平均明显高于轻度疼痛组及对照组,重度疼痛组高于中度疼痛组(均P<0.05)。轻度疼痛组E2与TNF-α水平无相关性,中度及重度疼痛组中E2与TNF-α表达水平均呈正相关(均P<0.05)。结论较高水平的E2可通过诱导巨噬细胞、释放TNF-α而在慢性盆腔痛中起作用。
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亚低温联合IABP治疗心脏外科术后低心排的效果研究
目的:探讨亚低温联合主动脉球囊反搏(IABP)治疗心脏外科术后低心排的临床效果。方法选取因心脏外科术后应用大剂量血管活性药物但未改善低心排,而采取IABP及亚低温联合治疗的患者12例。监测患者在联合治疗前后心脏指数(CI)值、混合静脉血氧饱和度(SvO2)、尿量及肌酐(Cr)的变化。结果亚低温联合IABP治疗后,患者CI较治疗前明显改善[L/(min·m2):2.4±0.5 vs 1.6±0.2)],SvO2升高(0.65±0.07 vs 0.52±0.05)。尿量明显增加[mL/(kg·h):2.9±1.9 vs 1.2±0.9],Cr明显下降(mmol/L:95±10 vs 282±25)。结论亚低温联合IABP治疗心脏外科术后低心排能有效改善循环功能,且操作简单易行。
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联合应用超声弹性成像及彩色多普勒在诊断乳腺癌及评价TNM分期中的价值
目的:联合应用超声弹性成像及多普勒技术,对乳腺肿块进行良、恶性鉴别诊断,并评价乳腺癌TNM分期。方法对58例乳腺肿块进行超声弹性成像和彩色多普勒成像检查,以术后病理结果作为金标准,使用ROC曲线比较直径变化率、大截面积比、弹性系数评分及彩色多普勒血流评分等超声成像指标诊断乳腺癌的能力。结果与长、短径变化率相比,大截面积比对鉴别诊断良、恶性乳腺肿块方面的诊断效能较高(曲线下面积为0.914),联合使用大截面积比、弹性系数评分和多普勒血流评分行鉴别诊断时诊断效能高(曲线下面积为0.981)。进展期(Ⅱ~Ⅳ期)各种弹性成像指标(长径变化率、短径变化率、大截面积比)高于早期(0~Ⅰ期)。随TNM分期增高,弹性系数评分和多普勒血流评分分值增高。结论超声弹性成像的大截面积比对鉴别诊断良、恶性乳腺肿块的诊断效能较高,其与彩色多普勒二者联合能够有助于提高乳腺癌确诊率,对评价乳腺癌的TNM分期有一定提示作用。
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冠心病患者网膜素-1与高敏C反应蛋白的相关性分析
目的:探讨网膜素-1(Omentin-1)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与冠心病的相关性。方法68例冠心病患者分为不稳定型心绞痛(UAP)组36例,稳定型心绞痛(SAP)组32例,30例冠状动脉造影结果正常者为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清Omentin-1水平,增强免疫透射比浊法测定血清hs-CRP水平。结果冠心病患者血清Omentin-1水平低于对照组,hs-CRP水平高于对照组(均P<0.05);SAP组血清hs-CRP低于UAP组(P<0.05),而Omentin-1水平差异无统计学意义。单支、双支、三支病变组患者血清Omentin-1水平均低于对照组,血清hs-CRP水平均高于对照组(均P<0.05),单支、双支与三支病变组间Omentin-1、hs-CRP水平差异无统计学意义。冠心病患者血清Omentin-1与hs-CRP的水平呈负相关(P<0.01)。结论 Omentin-1、hs-CRP与冠心病存在一定的相关性,但并不能反映冠状动脉狭窄程度及范围。
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宫颈病变中hTERT基因扩增与高危型HPV感染的关系
目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因扩增和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染在宫颈病变中的关系。方法获取34例正常人,31例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级,33例CINⅡ级,34例CINⅢ级,20例宫颈癌患者的宫颈脱落细胞标本,应用聚合酶链反应(PCR)-反向杂交芯片法检测HPV DNA阳性情况,应用荧光原位杂交技术(FISH)检测hTERT基因扩增情况。结果共检出20种HR-HPV:HPV16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,67,68,69,73,82。CINⅡ级(72.73%)、CINⅢ级(85.29%)、宫颈癌组(90.00%)的HR-HPV DNA阳性比例高于对照组(20.59%),对照组与CINⅠ级(54.84%)组比较差异无统计学意义。宫颈癌组(80.00%)hTERT基因扩增的阳性率高于对照组(0)、CINⅠ级(3.22%)、CINⅡ级(18.18%),宫颈癌与CINⅢ级组(41.18%)比较差异无统计学意义。hTERT基因扩增与HR-HPV感染呈正相关(r=0.238,P<0.05)。结论宫颈病变中hTERT基因扩增与HR-HPV感染呈正相关,HR-HPV感染可能是hTERT基因异常扩增的早期事件,hTERT基因检测可能作为宫颈癌前病变监测的辅助指标,应用于临床早期宫颈病变的诊断中。
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ING4和CDX2在结直肠癌中的表达及其与预后的关系
目的:探讨生长抑制因子4(ING4)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)在结直肠癌中的表达及与预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测99例结直肠癌组织和30例远端正常组织中ING4、CDX2的表达,结合术后随访资料,分析其表达与临床病理特征及预后的关系。结果 ING4、CDX2在癌组织中表达的阳性率分别为68.8%和72.7%,分别低于远端正常组织的93.3%和96.7%(均P<0.05)。且二者在不同组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分期结直肠癌患者组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。ING4阴性者5年生存率(35.5%)明显低于ING4阳性者(77.9%),CDX2阴性者5年生存率(48.1%)明显低于CDX2阳性者(70.8%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结直肠癌组织中ING4、CDX2表达呈正相关。结论 ING4和CDX2的表达与结直肠癌发生、发展及患者生存率关系密切,联合检测两者的表达对于结直肠癌的临床诊断及预后判断有重要意义。
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小干扰RNA沉默p65基因对人脐静脉内皮细胞再灌注后促炎因子表达的影响
目的:通过小干扰RNA(siRNA)研究沉默p65对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)再灌注损伤后肿瘤坏死因子(TNF)-α和细胞间黏附分子(ICAM)-1水平的影响。方法实验分正常+siRNA阴性转染组、模拟缺血再灌注+siRNA阴性转染组、正常+p65 siRNA转染组和模拟缺血再灌注+p65 siRNA转染组4组。采用逆转录-聚合酶链式反应和酶联免疫吸附法分别检测p65 siRNA对TNF-α、ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平的影响。结果模拟缺血再灌注+siRNA阴性转染组的TNF-α和ICAM-1的mRNA表达水平(分别是4.96±0.16、3.33±0.30)均高于其他3组,模拟缺血再灌注+p65 siRNA转染组的ICAM-1 mRNA表达水平(1.87±0.21)高于正常+siRNA阴性转染组(1.58±0.15)和正常+p65 siRNA转染组(1.69±0.21,均P<0.05)。模拟缺血再灌注+siRNA阴性转染组TNF-α、ICAM-1的蛋白表达水平[分别是(329.98±12.18)μg/L、(654.74±64.79)μg/L]均高于其他3组,模拟缺血再灌注+p65 siRNA转染组TNF-α、ICAM-1的蛋白表达水平[分别是(129.65±22.42)μg/L、(185.76±11.27)μg/L]均低于正常+siRNA阴性转染组[分别是(183.50±11.77)μg/L、(280.43±13.76)μg/L,均P<0.05]。结论 p65 siRNA通过沉默p65抑制模拟缺血再灌注诱导的TNF-α和ICAM-1表达水平。
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靶向血管平滑肌细胞TLR4基因小干扰RNA载体构建及效果评价
目的:设计合成有效的靶向Toll样受体4(TLR4)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并筛选出TLR4基因稳定沉默的血管平滑肌细胞(SMC)。方法依据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,以TLR4基因为靶基因,合成3对小发夹RNA(shRNA)寡核苷酸链,经退火、与线性化pSilence 2.1-U6 neo质粒连接,酶切及测序进行鉴定。脂质体法转染血管SMC,新霉素(G418)加压筛选并收集稳定表达质粒的SMC。RT-PCR及Western blot法检测收集的SMC中TLR4 mRNA和蛋白表达,以确定siRNA对TLR4的抑制效率。结果测序鉴定插入的发夹样序列正确,成功构建了TLR4基因siRNA表达载体;并获得了稳定沉默TLR4的血管SMC。RT-PCR及Western blot证实RNA干扰TLR4基因后,SMC中TLR4 mRNA和蛋白表达均明显减低,其中pSilence2.1-siTLR4-1的抑制作用强。结论成功构建了靶向TLR4基因的siRNA表达载体,并有效抑制血管SMC中TLR4表达。
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天津汉族胎儿D18S53、D18S59和D18S4883个STR基因座遗传多态性研究
目的:利用定量荧光PCR(QF-PCR)技术研究天津汉族胎儿18号染色体上D18S53、D18S59和D18S4883个短串联重复序列(STR)基因座遗传多态性,为18-三体综合征(ES)的产前基因诊断提供实验依据。方法收集天津地区64例绒毛和374例羊水样本,利用QF-PCR扩增STR基因座,4%聚丙烯酰胺凝胶电泳,ABI PRISM 377自动测序仪扫描电泳图,GeneScan软件分析荧光信号定量。根据3个STR基因座的基因型分布进行H-W平衡检验。计算3个STR基因座基因型频率、观察杂合度(Ho)、多态信息量(PIC)、个体识别率(DP)、非父排除率(PE)等群体遗传学数据。结果 D18S53、D18S59和D18S4883个STR基因座分别检出15、13、15个等位基因,基因型分布均符合H-W平衡定律。3个基因座的Ho分别为0.797、0.847和0.792;PIC分别为0.81、0.75和0.73;DP分别为0.944、0.901和0.881;PE分别为0.593、0.689和0.585。结论 D18S53、D18S59和D18S4883个STR基因座是18号染色体良好的遗传标记,对ES的产前基因诊断有指导意义。
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细胞分裂周期蛋白2启动子报告基因载体的构建与鉴定
目的:构建细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter,并检测其转录活性。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的Cdc2启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组DNA中的Cdc2启动子。用限制性内切酶SacⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和Cdc2启动子后,将Cdc2基因启动子插入到pGL3-Basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-Cdc2-promoter。将其与内参质粒pRL-SV40瞬时共转染骨肉瘤细胞U2OS,检测双荧光素酶活性。结果成功构建Cdc2基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Cdc2-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-Cdc2-promoter/pRL-SV40组荧光素酶活性为1.5915±0.1998,高于转染pGL3-Basic/pRL-SV40组的荧光素酶活性值0.0499±0.0104。结论 pGL3-Cdc2-promot-er在骨髓瘤细胞U2OS细胞中能被转录激活,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。
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RIP3基因重组质粒构建及其表达对MCF7细胞死亡方式的影响
目的:建立稳定过表达RIP3基因的乳腺癌细胞株,并证实融合蛋白在细胞内的表达、定位及对MCF7细胞死亡方式的影响。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测4种乳腺癌细胞及正常乳腺上皮细胞中RIP3 mRNA的表达。以正常乳腺上皮细胞MCF10A cDNA为模板,PCR扩增RIP3基因cDNA全长,将合成的RIP3编码区序列,克隆入mCherry载体的N末端,构建重组质粒mCherry-RIP3,对重组质粒进行酶切鉴定及DNA测序。钙法转染293T细胞,收集病毒感染MCF7细胞,杀稻瘟菌素(4 mg/L)维持筛选,构建稳定表达细胞株。Western blot、荧光显微镜等检测目的基因表达效率及蛋白定位。显微镜下观察肿瘤坏死因子(TNF)-α及Caspase抑制剂Z-VAD-FMK处理下mCherry-RIP3-MCF7细胞的死亡形态及比例。结果 RIP3 mRNA在乳腺癌细胞中普遍低表达。RIP3基因成功克隆入载体。过表达mCherry-RIP3基因的MCF7细胞可见红色荧光蛋白表达,定位于胞质。目的基因RIP3在转染细胞中为过表达。mCherry-RIP3转染后增强MCF7细胞对TNF-α联合Z-VAD-FMK诱导的细胞坏死的敏感性。结论成功构建RIP3基因过表达重组质粒,获得外源性RIP3稳定过表达的乳腺癌MCF7细胞株,mCherry-RIP3定位于胞质,并在TNF-α介导的程序性坏死中起作用。
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代谢综合征与精神性疾病共病的研究进展
代谢综合征和精神性疾病相继或伴随发生的现象已日益普遍,临床上称之为共病。流行病学调查显示,精神分裂症和心境障碍是常见的与代谢综合征共同存在的精神性疾病。精神性疾病与代谢综合征共病的发病机制与下丘脑-垂体轴功能紊乱、不良生活方式和抗精神病药物的应用有关,精神分裂症与代谢综合征伴发的一个重要原因是遗传,而心境障碍和代谢综合征联系的关键因素之一则是炎症。在精神性疾病与代谢综合征共病的诊疗方案中,生活方式干预、心理疏导和合理的药物选择缺一不可。对精神性疾病患者代谢指标的监测和代谢综合征患者心理状况的关注应贯穿于这两大类疾病诊治的全过程之中。
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男性肝硬化代偿期患者拉米夫定治疗后性激素的变化
目的:探讨拉米夫定治疗男性代偿期乙肝肝硬化患者过程中性激素的变化及其意义。方法选择代偿期乙肝肝硬化男性患者46例为研究对象,给以拉米夫定抗病毒治疗24周,比较治疗前后的性激素水平差异。根据24周的应答情况,分为两组(完全应答组和非完全应答组),比较两组患者治疗后的性激素水平差异。结果(1)拉米夫定抗病毒治疗后男性代偿期乙肝肝硬化泌乳素较治疗前明显下降,睾酮、雌二醇水平明显升高。(2)治疗后完全应答组和非完全应答组泌乳素、睾酮、雌二醇水平差异有统计学意义。结论(1)拉米夫定抗病毒治疗可以改善男性代偿期乙肝肝硬化的性激素功能紊乱。(2)性激素功能紊乱的改善与否与24周时的应答情况有一定关系。
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微骨瓣额中回入路治疗重型脑室出血
目的:探讨微骨瓣额中回入路在重型脑室出血中的应用价值。方法回顾性分析21例微骨瓣额中回入路治疗重型脑室出血的临床资料。结果术后脑室内外血肿清除满意,改善了GCS评分、脑室积血Graeb评分。主要并发症:弥漫性脑肿胀1例,脑血管痉挛3例,颅内感染1例,肺部感染7例。随访1~6个月,按ADL分级恢复良好5例,中度残疾9例,重度残疾3例,植物生存1例,死亡3例。结论微骨瓣经额中回入路可有效清除脑室内外血肿,及时解除梗阻性脑积水,减轻继发性脑损害,改善患者的预后。
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后路减压联合椎间融合治疗腰椎退变性侧凸的临床疗效
目的:评估后路减压联合椎间融合治疗腰椎退变性侧凸的临床疗效,探讨腰椎退变性侧凸的手术策略。方法回顾性分析手术治疗腰椎退变性侧凸患者98例,男35例,女63例;平均年龄(56±9)岁;平均侧凸Cobb角为(26±9)°;平均腰椎前凸为(19±11)°。采用后正中入路,行责任节段减压联合椎间融合内固定治疗。采用JOA29分标准进行临床疗效评定以及Cobb角和腰椎前凸角变化来评价手术疗效。结果平均随访时间(3.7±2.4)年。术前JOA评分为(10±2)分,提高到末次随访时的(26±3)分;优良率为89.7%。无患者术后症状加重,所有患者均感觉较术前症状明显减轻。平均椎间达骨性融合时间为(5.7±1.4)个月。末次随访时X线片示平均腰椎侧凸Cobb角为(6±2)°,平均矫正度数为(17±4)°,矫正率为59.2%;平均腰椎前凸矫正度数为(12±3)°。无内固定断裂和松动;钛合金cage轻度后侧移位2例,无不适症状,未做处理。结论对于有临床症状的退变性腰椎侧凸,且保守治疗无效的患者,采用后路减压联合椎间融合治疗可以取得满意的临床疗效。但责任节段的确定、减压充分和恢复腰椎稳定性是长期疗效的保证。
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浦东新区妊娠期高血压疾病的相关高危因素分析
目的:探讨浦东新区妊娠期高血压疾病的发病状况及相关危险因素。方法通过对2009-2012年4056例本地区常住产妇资料的回顾性分析,研究本地区妊娠期高血压疾病的患病情况,并通过多因素非条件Logis-tic回归分析影响本地区妊娠期高血压疾病发病的高危因素。结果妊娠期高血压疾病的发生率5.18%,其中妊娠期高血压的发生率2.49%,子前期-轻度发生率0.64%,子前期-重度发生率1.85%,子发生率0.05%,妊娠合并慢性高血压的发生率0.15%。多因素分析显示年龄大(OR=7.610,95%CI:2.322~24.936)、孕前体质量指数高(OR=120.715,95%CI:61.867~235.540)、孕期体质量增加量大(OR=16.219,95%CI:6.219~42.316)均为妊娠期高血压疾病的高危因素。结论年龄大、孕前体质量指数高、孕期体质量增加量大为妊娠期高血压疾病的高危因素,而与怀孕次数无关。
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侵袭性双肺多发炎性假瘤一例
1病例报告患者女,48岁。主因胸背部疼痛3个月余,于2012年1月30日入院。患者入院前3个月余无明显诱因出现胸背部疼痛,未经诊治,疼痛逐渐加重。自发病以来无咳嗽咳痰、咯血、胸闷憋气、发热纳差等异常症状,精神睡眠如常,饮食及二便如常,体质量未见异常变化。既往体健,无吸烟饮酒史,否认心脏病、糖尿病史及高血压病史。否认结核、肝炎等传染病史,否认手术外伤史,无药物食物过敏史。入院查体:双肺呼吸音粗,左上肺可闻及细小湿啰音,体表淋巴结未及肿大。实验室检查:血红蛋白(Hb)88 g/L,白蛋白(ALB)32 g/L,球蛋白(GLO)43 g/L。查胸部强化CT示:左上叶舌段支气管狭窄,闭塞,左上叶可见不规则形软组织肿块影,大小约4.5 cm×4.0 cm×3.5 cm,周围可见条索、小结节样影及磨玻璃密度影,临近胸膜增厚并可见胸膜凹陷症,增强检查后病变呈明显不均匀强化(延迟30、120 s CT值分别约为47、67 HU);左肺及右上叶、右下叶可见多发大小不等的结节样影,较大者位于右肺底,直径约19 mm;右中叶可见实变不张、磨玻璃密度及索条影;两肺间质纹理增多,小叶间隔增厚;纵隔内及左肺门多发增大淋巴结;双侧胸膜增厚、不光滑,见图1。气管镜未见明显异常,头颅、上腹强化CT及放射性核素骨扫描(ECT)未见明显异常,于2012年2月9日行开胸探查,左肺上叶切除,术中可见左肺上叶近肺门处以大小约7 cm×6 cm×5 cm肿物,侵及脏层胸膜,并包绕左肺上叶部分肺动脉分支,纵隔淋巴结第5、7、9、10、11组肿大,融合成团,其中第5组直径约3~4 cm,第7组直径约2 cm,术后病理示:左肺上叶肿物急慢性炎性反应,炎性假瘤,见图2。送检淋巴结表现为反应性增生。患者好转出院,随诊7个月,后2012年9月24日外院复查胸CT,提示双肺多发结节,较前增多,患者再次入我科住院治疗,入院时查体:双肺呼吸音粗,未及明显干湿啰音,胸壁无压痛。实验室检查:Hb 95 g/L,丙氨酸转氨酶(ALT)42 U/L,谷酰转肽酶(GGT)60 U/L。复查头、上腹强化CT、ECT骨扫描及气管镜检查均未见明显异常。胸平扫CT+三维重建提示:双肺多发结节较前增多,增大,转移性病变不除外,见图3。患者于2012年9月28日全麻下行胸腔镜下右肺下叶及上叶结节楔形切除。术中可见右肺上叶结节2个,右肺下叶结节一枚质硬,未侵及脏层胸膜,楔形切除3个结节,术中冰冻病理提示炎性病变。病理提示送检肿物性质相同,均为胶原纤维增生结节,其中可见灶性浆细胞浸润和多核巨噬细胞反应,并可见少许淀粉样物质沉积,刚果红染色灶性阳性,甲基紫阴性,见图4。患者术后好转出院,目前继续于呼吸科治疗随诊复查。
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利伐沙班预防骨科大手术术后深静脉血栓形成的有效性及安全性评价
目的:评估骨科大手术术后使用利伐沙班(rivaroxaban)或依诺肝素预防深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)的有效性及安全性。方法自2009年9月-2012年5月共278例接受骨科大手术患者,其中140例(平均年龄72.7岁,42.8%为男性)患者口服利伐沙班,每日10 mg,138例(平均年龄69.9岁,39.1%为男性)患者皮下注射依诺肝素,每日40 mg,将2组对比研究终点事件,包括静脉血栓形成(DVT和PE),出现伤口并发症,再度入院,需要输血,主要的和次要的非手术相关出血事件及死亡。结果利伐沙班组和伊诺肝素组2组间VTE的发病率、输血和再入院率差异无统计学意义,次要出血事件的发生率分别为2.1%和5.8%,伤口并发症发生率分别为2.9%和5.7%,2组均无肺动脉栓塞、严重出血或死亡患者。结论利伐沙班和依诺肝素在VTE或严重出血事件的发生率无明显差异。利伐沙班组在次要出血事件和伤口并发症发生率略低,更为安全。
年 | 期数 |
2019 | 01 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |